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高浓度骨桥蛋白诱导双足直立雌性小鼠脊柱侧凸模型

唐峰，谢宁，吴涛，刘军，王彬彬，王洋，徐立璋

中国组织工程研究 2016, 20 (49): 7301-7306. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.49.001

摘要（406）

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文题释义：
青少年特发性脊柱侧凸病因：迄今为止，可能参与其发生发展的病因学研究涉及多个方面：神经系统、代谢系统、骨生长因素、生物力学因素及环境等因素，但其具体发病机制至今未能探明。自从2001年开始研究热点集中于基因、前庭、姿势、本体感觉和生物力学等方面。目前的观点认为，青少年特发性脊柱侧凸是一类多因素共同参与的疾病，涉及多个系统的脊柱生长发育畸形，其病情的进展受到骨骼生长及生物力学等方面的多重影响从而导致侧弯。
骨桥蛋白的作用：骨桥蛋白是一类分泌型多功能糖蛋白，总体呈酸性，其基因在人类定位于人类染色体4。骨桥蛋白基因编码含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列，经表达修饰后可与特异的αvβ5细胞表面整合素蛋白结合，促进细胞间的黏附以及介导细胞增殖、迁移等多种功能。骨桥蛋白还能与CD44、羟基磷灰石等特异性结合，在不同组织发挥重要作用。骨桥蛋白主要富集于骨组织，参与许多骨代谢异常疾病的病理生理过程。

摘要
背景：近年来相关研究证实骨桥蛋白水平增高可能导致特发性脊柱侧凸发生发展。建立合适的青少年特发性脊柱侧凸动物模型对于此类疾病的研究与治疗具有重大意义。
目的：观察高浓度骨桥蛋白诱导双足直立雌性小鼠脊柱侧凸的发生情况，为建立理想的青少年特发性脊柱侧凸药物模型提供依据。
方法：选取同周龄C3H/HeJ小鼠，随机分为高浓度骨桥蛋白雌性小鼠及雄性小鼠各20只，并设立对照雄性小鼠组及对照雌性小鼠组各20只。4组小鼠均于3周龄施行上肢截肢合并鼠尾切除术建立双足直立小鼠模型，术后放置特殊鼠笼诱导直立状态。高浓度骨桥蛋白雌性小鼠组及高浓度骨桥蛋白雄性小鼠组每日腹腔注射高浓度(40 μg/kg)骨桥蛋白，对照组腹腔注射生理盐水，诱导3个月后，行小动物脊柱X射线检查，测量Cobb角大于10°定为侧凸诱导成功，评估侧凸发生率及严重程度。
结果与结论：①高浓度骨桥蛋白雌性小鼠组18只发生脊柱侧凸，Cobb角16°-38°，平均(25.8±6.7)°，高浓度骨桥蛋白雄性小鼠组16只发生脊柱侧凸，Cobb角11°-34°，平均(20.9±6.8)°；对照雄性小鼠组8 只发生脊柱侧凸，Cobb角12°-21°，平均(15.6±3.1)°；对照雌性小鼠组9 只发生脊柱侧凸，Cobb角11°-24°，平均(17.1±4.5)°；②高浓度骨桥蛋白雌性、雄性小鼠组脊柱侧凸发生率均明显高于对照雌性、雄性小鼠组(P < 0.05)，而脊柱侧凸发生率在高浓度骨桥蛋白雌性组与雄性组间差异无显著性意义(P > 0.05)，但其侧凸角度高浓度骨桥蛋白雌性组较高浓度骨桥蛋白雄性组明显加重(P < 0.05)；③结果表明，高浓度骨桥蛋白水平诱导的雌性双足直立小鼠其侧凸发生率更高，侧凸严重程度更重，其更贴近于人类特发性脊柱侧凸女性高发的实际情况。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0002-2742-0633(谢宁)

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犬脊柱化脓性感染模型的建立

陈维华，吕国华，周彬，康意军

中国组织工程研究 2016, 20 (40): 6014-6020. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.40.013

摘要（392）

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文题释义：

脊柱化脓性感染：脊柱化脓性感染是区别于脊柱结核等疾病的脊柱非特异性感染。最常受累的部位是腰椎，其他部位依次是胸椎和颈椎，而骶椎则很少受累。男性比女性更容易赘患这种疾病，脊柱感染的诱因通常是泌尿生殖系统或身体其他部位的感染以及尿道的手术操作。

金黄色葡萄球菌：金黄色葡萄球菌隶属于葡萄球菌属，是一种革兰阳性菌。在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到，是一种常见致病菌。大量文献表明金黄色葡萄球菌是脊柱化脓性感染的最常见致病菌，其所占比例可高达48%。

摘要

背景：脊柱感染模型在文献中鲜有报道，对脊柱感染动物模型的影像学及组织学观察报道就更少。

目的：建立一种新型的犬脊柱化脓性感染模型。

方法：取中国杂种家犬12只。动物取右侧卧位，手术入路选择腹膜后入路，手术暴露动物脊柱T₁₂/L₁椎间隙，将暴露椎间隙的椎间盘部分切除，用刮匙破坏椎间隙相邻的上下节段椎体终板，然后将含有不同浓度的金黄色葡萄球菌的悬浮液和硬化剂鱼肝油酸钠注射入犬的脊柱椎间隙。切除部分椎间盘并破坏椎体终板的目的是使椎体骨组织更好的与细菌相接触。对动物脊柱L_5/6间隙完成同样操作。动物在术后14 d处死，感染的椎间盘及其相邻椎体取出，对取出标本的细菌含量进行定量测定。处死时取部分肝脏组织和抽血进行细菌培养，观测是否有全身系统性感染的发生。

结果与结论：①成功的应用金黄色葡萄球菌浓度为10² CFU/mL的细菌悬浮液在90%(9/10)的接种部位中诱导出脊柱感染。肝脏组织及血液培养结果均呈阴性，排除了全身系统性感染的可能；②接种细菌浓度高于10³ CFU/mL的4只动物中有2只在术后3 d内死亡；③结果提示，成功建立了一种新型犬脊柱化脓性感染模型，这种模型可以广泛地应用于验证不同抗感染治疗方法的疗效。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

ORCID: 0000-0002-8586-7118(陈维华)

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基于三维有限元建模方法分析维医沙疗对兔股骨力学性能的影响

李艳娜，居来提•买提肉孜，尼加提•外力，黄少君，迪丽娜•马合木提，木合塔尔•克力木，张锐

中国组织工程研究 2016, 20 (27): 3957-3962. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.27.001

摘要（336）

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文题释义：
有限元法：是一种高效能、常用的数值计算方法。科学计算领域常常需要求解各类微分方程，而许多微分方程的解析解一般很难得到，使用有限元法将微分方程离散化后，可以编制程序，使用计算机辅助求解。
维医沙疗：新疆维吾尔医学埋沙治疗简称维医沙疗。是一种自然疗法，利用吐鲁番地区特定气候，强烈日光照射下，依靠沙体在灼热细沙的传热，将人体患病部位埋入热沙中，通过生物传热、改善血液循环、促进代谢，对风湿病有特殊的疗效。

摘要
背景：以现代设计方法与数值仿真为基础的研究方法来探究维医埋沙疗法的作用机制成为了可能。
目的：探究一种基于CT值的非均匀各向同性的骨生物有限元建模方法，并观察维医沙疗对兔股骨力学性能的影响。
方法：利用木瓜蛋白酶建立8只新西兰成年大白兔右后股骨的骨性关节炎模型，并将其分为沙疗组和对照组。沙疗组进行维医埋沙治疗后，利用CT扫描所有兔股骨模型，将断层影像数据导入MIMICS软件，生成股骨3D模型，对其进行体网格划分，并赋予材料属性，然后在Ansys中进行三点弯曲模拟并求解；同时，对所有兔股骨模型进行体外三点弯曲试验，得到相应的挠度与最大应力值。最后，将基于三维有限元建模方法所得的结果与实验所得的结果进行对比分析。
结果与结论：①利用兔股骨三维有限元模型进行三点弯曲模拟分析所得到的挠度、最大应力跟试验中所得到的数据都有较好的相关性。②结果说明有限元建模方法比较符合骨的结构与材料属性，可用于进行骨骼受力和变形分析。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0001-5409-3626(李艳娜)

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不同运动强度干预2型糖尿病模型大鼠的骨密度变化

江洪

中国组织工程研究 2016, 20 (27): 3963-3969. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.27.002

摘要（302）

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文题释义：
糖尿病引起的钙质流失和骨代谢异常：糖尿病的典型症状是多饮、多尿，而大量的钙、磷矿物质就会随着尿液排除体外，如果此时缺乏必要的钙剂补充，就会造成患者的“钙负平衡”，继而引发一系列的激素水平变化，促使溶骨作用增强，最终导致骨质脱钙、骨质疏松。此外，糖尿病患者体内的活性维生素D水平往往偏低，这会影响钙、磷等矿物质在肠道的吸收。2型糖尿病所特有的胰岛素敏感性下降对于骨骼的破坏更是雪上加霜，它会影响蛋白质的正常代谢，使骨基质合成减少。所有这些因素综合在一起，最终导致糖尿病患者骨基质减少，骨小梁破坏，骨密度降低，成为骨质疏松症发作的高危人群。
骨密度：是骨质量的一个重要标志，反映骨质疏松程度，预测骨折危险性的重要依据。由于测量方法的日益改进和先进软件的开发，使该方法可用于不同部位，测量精度显著提高。除可诊断骨质疏松症之外，尚可用于临床药效观察和流行病学调查，在预测骨质疏松性骨折方面有显著的优越性。

摘要
背景：超过50%的糖尿病患者伴随骨质疏松。运动是治疗糖尿病的主要方法，其是否也对糖尿病骨质疏松的发生产生影响目前尚不明确。
目的：分析不同运动强度与2型糖尿病大鼠模型骨密度变化。
方法：将40只大鼠随机等分为模型组和低、中、高强度运动组，所有大鼠均采用一次性腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。低、中、高强度运动组分别进行10，20，30 m/min的跑台训练，1 h/d，6 d为一个周期，每周期训练结束后休息1 d，连续运动8个周期。而模型组不进行运动训练。
结果与结论：与模型组相比，低、中、高强度运动组大鼠体质量减轻，血糖水平下降，骨钙素、血钙水平以及股骨生物力学指标增加，血磷和碱性磷酸酶降低，且中、高强度运动组大鼠骨密度增加。提示不同运动强度都对2型糖尿病大鼠模型骨密度和骨代谢具有一定的影响。采用运动方法治疗时采取适当的体育运动能提高血清骨钙素含量，改善骨代谢状况，更好的预防糖尿病骨质疏松症，具有较高的临床应用价值。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0002-8091-0914(江洪)

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利塞膦酸钠干预骨质疏松模型大鼠髁突软骨Bcl-2、Bax及Caspase3的表达

周琦，魏立，江莉婷，李宁，高益鸣

中国组织工程研究 2016, 20 (27): 3970-3976. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.27.003

摘要（391）

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文题释义：
骨质疏松：是多种原因引起的一组骨病，以单位体积内骨组织量减少为特点的代谢性骨病变。在多数骨质疏松中，骨组织的减少主要由于骨质吸收增多所致，以骨骼疼痛、易于骨折为特征。
二膦酸盐：是一类传统的骨吸收抑制剂，被广泛用于骨质疏松等骨代谢性疾病，在治疗骨质疏松时，二膦酸盐可减少高骨转换，对破骨细胞活性有直接抑制作用，引起这些细胞凋亡。

摘要
背景：二膦酸盐是一类传统的抗骨吸收药物，影响软骨组织的生长发育，目前大多数研究集中在其对长骨关节软骨的影响，而其对髁突软骨效应如何尚未完全清楚。
目的：观察第3代二膦酸盐类药物利塞膦酸钠对骨质疏松模型大鼠髁突软骨抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、促凋亡蛋白Caspase3表达的影响。
方法：将30只雌性SD大鼠随机分为3组，假手术组术中暴露卵巢但不切除；模型组切除双侧卵巢，制备骨质疏松模型，并于造模前3 d皮下注射生理盐水2.4 μg/kg，1次/d，以后每隔3 d注射1次；治疗组切除双侧卵巢，制备骨质疏松模型，并于造模前3 d皮下注射利塞膦酸钠2.4 μg/kg，以后每隔3 d注射1次。造模后3个月取髁突软骨，观察细胞凋亡、Bcl-2、Bax及Caspase3的表达。
结果与结论：①髁突软骨细胞凋亡：假手术组<治疗组<模型组(P均< 0.05)。②Bcl-2表达：模型组较假手术组略降低，但差异无显著性意义，治疗组高于模型组(P < 0.05)。③Bax及Caspase3表达：模型组Bax及Caspase3表达高于假手术组(P均< 0.05)，治疗组Bax及Caspase3表达低于模型组(P均< 0.05)。结果表明利塞膦酸钠可通过改变骨质疏松大鼠髁突软骨内Bcl-2、Bax及Caspase3表达调控髁突软骨细胞的凋亡。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0002-5502-3248(高益鸣)

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酒精性股骨头缺血坏死大鼠模型的制备

杨云，范海燕，黄健，马忠平，张志峰

中国组织工程研究 2016, 20 (27): 3977-3983. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.27.004

摘要（330）

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文题释义：
酒精性股骨头坏死动物模型：Solomon等以随意饮酒模式让大鼠饮酒40周，出现骨质疏松、股骨头坏死表现；王义生等采用灌胃法给予家兔烈性酒(含体积分数45%乙醇)10 mL/(kg•d)共6个月；齐振熙等采用高乙醇度白酒(含乙醇56%)给成年大鼠灌胃，剂量分别为8 mL/(kg•d)和6 mL/(kg•d)；范猛等通过局部注射无水乙醇成功建立鸸鹋股骨头坏死模型。局部注射无水乙醇短期内即可制作股骨头坏死模型，且部分研究造模4周股骨头坏死周围出现修复反应，但这种方法与人类股骨头坏死发病过程大相径庭。
股骨头坏死标准：病理切片下股骨头骨小梁坏死紊乱和骨小梁中空骨陷窝百分百增高。

摘要
背景：长期大量饮酒与股骨头坏死的关系早已明确，但乙醇引起股骨头坏死的病理机制目前并未完全阐明。
目的：制作酒精性股骨头缺血坏死大鼠模型，探讨其发病机制。
方法：将80只Wistar大鼠随机分为实验组与对照组，每组40只，实验组灌胃给予烈性白酒10 mL/kg，1次/d，连续6个月；对照组灌胃给予生理盐水10 mL/kg，1次/d，连续6个月。每个月随机取6只大鼠双侧股骨头，进行组织形态学观察。
结果与结论：①骨坏死：实验组3个月时骨小梁变细，排列紊乱，空骨陷窝数开始增加，6个月时出现典型的骨坏死，空缺骨陷窝明显增加；对照组骨小梁完整，排列整齐，骨陷窝中骨细胞清晰可见，细胞形态正常；②血管损伤：实验组3个月时微动脉内膜增生，部分血管内皮下弹力纤维减少，弹性纤维及中层平滑肌断裂、增生，6个月时上述表现更加明显；对照组微动脉膜未见增厚，血管壁正常；③微血栓形成：实验组3个月时微血栓数量明显增加，6个月时变化更加显著；对照组微血栓数量无明显变化。④结果表明：长期摄入乙醇可导致大鼠股骨头内微血管内皮损伤，局部微循环供血异常，诱发股骨头缺血性坏死，且坏死程度与乙醇累积摄入量相关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0003-3593-1836(黄健)

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转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化抑制骨肉瘤模型鼠的肿瘤生长

段飞，李书忠，朱万平，康学华，张恒甲，代胜杰，田艳朋

中国组织工程研究 2016, 20 (27): 3984-3991. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.27.005

摘要（375）

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文题释义：
DNA甲基化：是一种重要的遗传修饰，广泛存在于肿瘤的发生过程。甲基化可导致抑癌基因的转录失活，参与肿瘤的发生发展，多种肿瘤临床病理学分析也发现其中存在高甲基化改变。
WIF-1：是一种抑癌基因，WIF-1基因甲基化后WIF-1蛋白表达下调，失去对Wnt蛋白的拮抗作用，致使Wnt信号通路异常激活，胞质内β-catenin避免了被磷酸化而降解，导致细胞凋亡受到抑制，诱导肿瘤的发生。WIF-1由于启动子过度甲基化后在组织中的表达下调，致使对照组瘤体较用药组增长迅速。
鼠骨肉瘤模型：基因组分析资料表明，小鼠的基因与人类相似达95%，说明小鼠模型在模拟人类疾病时具有得天独厚的优势。因此实验选用SPF级小鼠建立骨肉瘤模型，移植细胞株按其来源可分为鼠源性和人源性，人源性细胞株可以用来研究基因突变是如何导致肿瘤发生和转移的，从而为临床治疗提供帮助。人源性细胞株包括MG-63，POS-1、U2-OS、HOS-58及SAOS-2等，其中MG-63、POS-1等建立的动物模型肿瘤可以自行发生肺部转移，与人类肿瘤表现类似，也常用于研究抗癌药物的有效性，是较好的研究模型。因此实验选用MG-63作为移植细胞株进行造模。

摘要
背景：WIF-1是一种抑癌基因，由于启动子过度甲基化从而导致其在大多数肿瘤中的表达下调，而DNA甲基化抑制剂可使一些基因发生去甲基化从而恢复其表达。
目的：在骨肉瘤动物模型中转入WIF-1或使用5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化处理后，观察瘤体的病理学差异及WIF-1 mRNA和蛋白的表达变化。
方法：建立鼠骨肉瘤模型，分为3组，对照组：不做任何处理；5-氮杂-2’-脱氧胞苷组：每只每日注射适量5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化剂；WIF-1组：每只每日注射适量Wnt/β-catenin信号转导通路抑制剂WIF-1。用药后第7天开始每7 d称裸鼠体质量，测量肿瘤短径(a)和长径(b)，分别计算各组肿瘤的相对体积，计算用药后第7，14，21，28，56天的肿瘤相对增长率。分别于用药后第7，14，21，28，56天5个时间点脱颈处死每组各4只裸鼠，剥取肿瘤组织称瘤质量，对瘤体做病理分析，检测用药第56天3组骨肉瘤组织中WIF-1蛋白、WIF-1 mRNA的表达情况。
结果与结论：①用药组与对照组相比，第7，14，21，28，56天的裸鼠体质量有所增加，但用药组与对照组之间差异无显著性意义。②用药组的肿瘤体积较对照组明显减小，用药组WIF-1 mRNA、WIF-1蛋白表达较对照组均出现不同程度的升高。③结果表明WIF-1的启动子区基因甲基化是骨肉瘤发生发展的机制之一，在骨肉瘤动物模型中转入WIF-1或采用5-氮杂-2'-脱氧胞苷去甲基化处理可抑制肿瘤生长。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0002-4900-3187(段飞)

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培哚普利对维甲酸所致骨质疏松模型大鼠骨代谢的影响

钟奕，薛青，周奕，陈亮华，张礼超

中国组织工程研究 2016, 20 (18): 2589-2595. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.18.001

摘要（864）

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文题释义：

骨代谢：是一个由骨形成和骨吸收构成的动态平衡过程，一旦这种平衡被打破，破骨作用大于成骨作用，就会导致骨质疏松。骨代谢生化指标可及时反映骨转换状态，灵敏度高、特异性强，在骨质疏松发病机制、骨质疏松药物的研究及流行病学研究方面具有重要临床意义。

维甲酸：具有广泛的生物学活性，但具有致骨质疏松的不良反应，用药过程中多引发骨痛，有文献报道，维甲酸可促进成骨细胞的增殖和分化，又可增加破骨细胞的骨吸收，造成高转化型的骨质疏松。维甲酸法诱导的雌性大鼠骨质疏松模型在发病症状、组织形态学以及对雌激素的骨反应与人类有较大相似性，由于操作简单、时间短、成功率高等优势，被许多研究者选为制造动物骨质疏松模型的常用方法。

背景：骨组织中存在肾素-血管紧张素-醛固酮系统组分，近年来对抗高血压药物的研究，发现血管紧张素转换酶抑制剂类降压药对骨质疏松可能也有效，培哚普利是常用的此类降压药之一，其对骨代谢有什么影响及能否用于抗骨质疏松，未见文献报道。

目的：观察培哚普利对维甲酸溶液致骨质疏松模型大鼠骨代谢的影响。

方法：将50只SD大鼠随机分5组，每组10只。模型组及各培哚普利剂量组大鼠予维甲酸溶液80 mg/(kg•d)灌胃，造模成功后培哚普利2，4，8 mg/(kg•d)组分别给予相应剂量培哚普利灌胃干预，1次/d，连续42 d；正常对照组及模型组均灌予等容积蒸馏水。检测各组大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶以及骨质量、骨密度，并分别测定骨组织中骨特异性碱性磷酸酶及抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA的表达量。

结果与结论：与模型组比较，经培哚普利治疗后，维甲酸所致骨质疏松大鼠血清钙、磷水平升高，碱性磷酸酶活性显著降低，骨质量和骨密度显著升高。培哚普利8 mg/(kg•d)组骨特异性碱性磷酸酶mRNA相对表达量要高于培哚普利2，4 mg/(kg•d)组及模型组；培哚普利8 mg/(kg•d)组抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA相对表达量高于模型组。提示培哚普利能改善骨质疏松大鼠部分骨代谢生化指标，并通过上调骨特异性碱性磷酸酶mRNA的表达促进骨形成，对维甲酸所致的骨质疏松有一定的防治作用。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0001-5626-648X(钟奕)

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低强度脉冲超声干预膝关节炎模型兔软骨细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13的表达

吴建萍，王志刚，王黎明

中国组织工程研究 2016, 20 (18): 2596-2602. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.18.002

摘要（536）

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文题释义：

低强度脉冲超声：是指利用输出强度小于0.1 W/cm²的脉冲超声作用于人体病变部位，影响细胞的物质代谢过程，加速代谢产物的排出，改善细胞缺血、缺氧状态，改善组织的营养，提高细胞组织的再生能力，从而达到治疗疾病的目的。

膝关节炎：是一种以退行性病理改变为基础的疾患。多患于中老年人群，其症状多表现为膝盖红肿痛、上下楼梯痛、坐起立行时膝部酸痛不适等。也会有患者表现肿胀、弹响、积液等，如不及时治疗，则会引起关节畸形，残废。在膝关节部位还常患有膝关节滑膜炎、韧带损伤、半月板损伤、膝关节游离体、腘窝囊肿、髌骨软化、鹅足滑囊炎、膝内/外翻等关节疾病。

背景：低强度脉冲超声安全无创、穿透性强，近年来，越来越多的研究表明，低强度脉冲超声在促进损伤关节软骨修复方面具有重要的作用。

目的：观察低强度脉冲超声对膝关节炎模型兔软骨细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13表达的影响。

方法：纳入20只新西兰白兔，均建立膝关节炎模型，建模后随机分为对照组和实验组，每组10只。实验组动物右侧膝关节利用超声波骨折愈合仪进行低强度脉冲超声治疗，对照组动物予以右侧膝关节假低强度脉冲超声治疗。干预后8 周，取胫骨内侧端以及膝关节股骨内侧端软骨组织，经常规处理后，进行甲苯胺蓝染色，并置于显微镜下进行病理学观察，利用 qRT-PCR法软骨细胞基质金属蛋白酶13 和Ⅱ型胶原表达量检测。观察实验动物一般情况和关节软骨病理形态，以及基质金属蛋白酶13、Ⅱ型胶原的 qRT-PCR检测结果。

结果与结论：①甲苯胺蓝染色和病理学观察：治疗 8 周后，对照组关节软骨出现明显的裂隙，并从表面延伸至深层，且存在严重的染色缺失现象；实验组可观察到关节软骨表面形成裂隙，存在中度染色缺失现象；②qRT-PCR检测：软骨细胞培养5，10 d后，实验组和对照组相同时间点基质金属蛋白酶13和Ⅱ型胶原基因表达差异均有显著性意义(P < 0.05)；③结果证实：低强度脉冲超声可调节膝关节炎模型兔软骨细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13基因的表达。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0002-5647-1173(吴建萍)

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石膏铁丝固定法建立兔膝痹模型

摆雪，张洪平，刘俊昌，王新军，孙芸，周冬冬

中国组织工程研究 2016, 20 (18): 2603-2608. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.18.003

摘要（573）

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膝痹：乃西医所讲的骨性关节炎，是骨科常见病，又称增生性关节炎、老年性关节炎，是一种慢性关节疾病，它的主要改变是关节软骨面的退行性变和继发性的骨质增生，主要表现是关节疼痛和活动不灵活，X射线表现关节间隙变窄，软骨下骨质致密，骨小梁断裂，有硬化和囊性变，关节边缘有唇样增生，后期骨端变形，关节面凹凸不平，关节内软骨剥落，骨质碎裂进入关节，形成关节内游离体。

背景：目前国内外均有采用石膏固定法复制膝痹动物模型，但存在实验动物选择不佳、石膏选取不合适、单纯石膏固定不稳定等问题，影响后续实验结果。

目的：采用石膏铁丝固定法建立兔膝痹模型。

方法：将20只新西兰大白兔随机均分为2组，模型组在应用树脂石膏屈曲位固定的基础上外层缠绕铁丝以保护石膏，建立右侧膝痹模型；对照组为正常对照。固定后8周，进行右膝关节大体观察与病理组织学观察。
结果与结论：对照组膝关节半透明，光滑，有光泽，无软骨缺损，软骨弹性及硬度好，软骨细胞排列正常，关节囊内未见炎细胞浸润；模型组膝关节无光泽，不透明，关节软骨变薄，弹性较差，关节软骨退变，关节面变粗糙，部分有缺损，关节内仅有少量关节液或无关节液，软骨细胞萎缩或消失，数量减少，软骨变性、坏死，软骨下骨组织骨质硬化，骨小梁增生，软骨细胞紊乱无序，玻璃样变，滑膜绒毛肥大，细胞成簇现象，可见大量淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞浸润，呈现典型的膝痹病理改变。表明采用石膏铁丝固定法能成功建立兔膝痹模型，具有简单易行、固定牢固、无创伤等优点。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程|
ORCID: 0000-0003-2249-8324(摆雪)

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长针透刺膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平的变化

李石胜，吴耀持，张峻峰

中国组织工程研究 2016, 20 (18): 2609-2614. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.18.004

摘要（548）

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文题释义：

长针透刺：用0.3 mm×125.0 mm规格的毫针透刺大鼠内外膝眼穴，取穴位置参考人体犊鼻穴及膝眼穴位置。由外膝眼进针，进针时先垂直进针，透过皮肤后改变针刺方向，向内膝眼方向进行透刺，当针尖抵达内膝眼皮下时停止进针，然后施以捻转补泻手法，以手下有沉紧感及看到大鼠下肢微微抽动为度，每次20 min，每隔2 d针刺1次，留针期间行捻转平补平泻。
滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1：当发生膝骨关节炎时，滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1和基质金属蛋白酶3失衡，基质金属蛋白酶抑制剂1活性降低，基质金属蛋白酶3活性增高，表现出裂解软骨细胞的活性，从而导致关节软骨及滑膜组织等退变和破坏。

背景：基质金属蛋白酶抑制剂1在抑制关节退变、破坏方面有重要作用。

目的：观察长针透刺治疗大鼠膝骨关节炎后，大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平变化。

方法：将40只SD大鼠随机分成正常组、长针透刺组、药物组及模型组，每组10只，通过向SD大鼠膝关节腔内注射1.6%木瓜蛋白酶溶液并驱赶大鼠活动造模，2周后建立膝骨关节炎模型。正常组与模型组不干预，长针透刺组用0.3 mm×125.0 mm的毫针透刺大鼠内外膝眼穴，药物组将透明质酸钠向关节腔内注射。

结果与结论：①ELISA法检测：治疗4周后，正常组大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平高于模型组(P < 0.05)，长针透刺组及药物组大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平高于模型组(P < 0.05)。②结果证实，长针透刺能有效提高膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织中基质金属蛋白酶抑制剂1水平。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程
ORCID: 0000-0001-5784-1909(吴耀持)

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构建双足类大型鸟类鸸鹋股骨头坏死模型

曲春涛

中国组织工程研究 2016, 20 (5): 611-615. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.05.001

摘要（346）

PDF （480KB）（348）

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文题释义：

鸸鹋：学名Dromaius novaehollandia，是鸟纲鸸鹋科唯一的物种，以擅长奔跑而著名，是澳洲地区的特产，世界上第二大的鸟类，体型仅次于非洲鸵鸟，因此也被称作澳洲鸵鸟，尤加利鸟，翅膀比非洲鸵鸟和美洲鸵鸟更加退化，足为3趾，是世界上最古老的鸟种之一。

股骨头坏死动物模型：理想的动物模型所制造的股骨头骨坏死区域应位于与人类股骨头相同的位置，接近软骨面、与周围的活骨相连续，而且要保证股骨头的修复过程中承载正常应力；其次理想的动物模型应该能够模拟人股骨头坏死的整个病理进程，即从早期组织学改变到晚期股骨头塌陷。

背景：虽然对股骨头坏死动物模型的建立已经进行了许多研究，然而到目前为止仍难以模拟出理想的股骨头坏死的动物模型，尤其是股骨头塌陷模型。

目的：建立双足类大型鸟类动物鸸鹋股骨头坏死模型，用于更好模拟人类股骨头坏死的治疗研究。

方法：成年鸸鹋30只，建立液氮冷冻并射频加热交替损伤股骨头坏死模型。冷冻3个循环，采用局部液氮冷冻和射频加热交替的方法，进行闭合回路的液氮冷冻损伤和射频加热交替的损伤，造模后第6，12，16周进行大体观察、X射线、组织学检查和MRI检查，评价鸸鹋股骨头缺血坏死模型建模效果。

结果与结论：经过液氮冷热交替法进行造模的鸸鹋于12-18周逐步出现股骨头坏死征象和影像学表现，通过X射线，组织学检查和MRI检查可见其股骨头坏死过程符合人类股骨头坏死病变的病理过程，且模型具有良好的可重复性。结果提示，采用液氮冷热交替法成功建立了鸸鹋塌陷性股骨头骨坏死模型，具有较好的塌陷率，可以用于骨坏死的机制研究和治疗评价。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

ORCID: 0000-0002-6133-9409(曲春涛)

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丹参接骨胶囊对闭合性股骨骨折模型大鼠骨折愈合的影响

王希强，孙仁光，孙仕润，孙军，王咏梅，刘太建，杜辉君，潘峰

中国组织工程研究 2016, 20 (5): 622-627. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.05.003

摘要（546）

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文题释义：

骨折愈合：是指骨折断端间的组织修复反应，这种反应表现为愈合反应，最终是恢复骨的正常结构与正常功能。骨折愈合是一个极其复杂的生物学过程，受诸多因素的影响，最新流行病学调查数据显示约有10%的骨折因各类原因导致骨折愈合延缓甚至无法愈合。

闭合性骨折：闭合性骨折常常伴有软组织损伤。软组织对钝器伤的反应包括微血管反应和炎症性过程，可分为炎症期，增殖期和修复期。闭合性骨折的软组织损伤常采用 Tscherne 分类法，该分类法可被分为C0，CⅠ，CⅡ，CⅢ共4个等级。

背景：丹参接骨胶囊是因有显著活血化瘀、消肿止痛的功效而成为治疗骨折的常用中药制剂之一。

目的：观察丹参接骨胶囊对闭合性股骨模型大鼠骨折愈合的影响。

方法：将大鼠随机分为丹参接骨胶囊组、生理盐水组及正常组，丹参接骨胶囊组和生理盐水组制备闭合性股骨骨折模型大鼠，骨折后分别给予生理盐水、丹参接骨胶囊2粒灌胃；正常组正常饲养。观察骨折后7，14，28 d丹参接骨胶囊组及生理盐水组苏木精-伊红染色情况、血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达、骨痂转化生长因子β1蛋白/mRNA的表达。

结果与结论：①苏木精-伊红染色显示，骨折后7 d，丹参接骨胶囊组、生理盐水组骨折组织病理变化无显著差异，骨折后14，28 d丹参接骨胶囊组股骨骨折病理修复较生理盐水组明显。②骨折后3，7 d丹参接骨胶囊组、生理盐水组大鼠血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达均明显升高(P < 0.05)，两组表达趋势一致，其中丹参接骨胶囊表达量始终较生理盐水组高，且骨折后14，28 d表达量差异有显著性意义(P < 0.01)。③骨痂转化生长因子β1表达在丹参接骨胶囊组、生理盐水组骨折后第3天出现1个峰值，随后浓度逐渐下降，直至骨折后第14天丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达又再度升高，出现第2个峰值，至骨折后第28天丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达浓度再次出现下降。此过程丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达趋势一致，在7，14，28 d愈合时期，丹参接骨胶囊组大鼠转化生长因子β1表达均高于生理盐水组。④结果证实，丹参接骨胶囊能够促进骨折的愈合，其机制可能与促进血清骨钙素、Ⅰ型胶原及转化生长因子β1的表达有关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

ORCID: 0000-0003-0974-6397(王希强)

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发育性髋关节发育不良兔模型Ⅱ型胶原的表达变化

张向鑫，陈广祥，成亮，徐人杰，邹天明

中国组织工程研究 2015, 19 (49): 7879-7884. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.49.002

摘要（403）

PDF （440KB）（566）

背景：轻度髋关节发育不良是导致成人骨性关节炎发病的主要原因，而髋臼软骨中胶原和蛋白多糖的变化可能是导致骨关节炎发生的直接原因。
目的：观察早期髋关节发育不良兔模型髋臼软骨Ⅱ型胶原的表达变化。
方法：将新西兰白兔左下肢作为实验侧，以膝关节伸直位、长腿管形石膏固定方法建立髋关节发育不良模型，右下肢为对照侧。
结果与结论：兔实验侧髋臼软骨中可见局部软骨细胞簇集，细胞外基质甲苯胺蓝染色有失染现象，且Ⅱ型胶原阳性细胞数量与表达水平高于对照侧。提示Ⅱ型胶原表达可能与软骨退行性变有关。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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兔股骨慢性骨髓炎模型的制作

陈金水，廖肇山，林松庆，卢桥平，王本海，黄文祺，林永炀，张慧浩

中国组织工程研究 2015, 19 (49): 7885-7889. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.49.003

摘要（493）

PDF （534KB）（445）

背景：建立有效稳定的慢性骨髓炎动物模型是治疗慢性骨髓炎实验研究的基础。以往慢性骨髓炎模型常常建模成功率低，模型不稳定。
目的：探讨运用金黄色葡萄球菌制备兔股骨慢性骨髓炎动物模型的实验方法。
方法：健康成年新西兰兔40只，麻醉成功后在股骨大转子下2 cm剥离局部骨膜后用3.5 mm钻头的电钻，在该处钻2个纵向相连、部分重叠的骨洞，直达髓腔，孔洞用无菌骨蜡密封，实验组(20只)向髓腔内注射0.1 mL的5%鱼肝油酸钠，再向髓腔内注射0.5 mL的金黄色葡萄球菌液(1×106 cfu)；对照组(20只)则向髓腔内注射0.1 mL的5%鱼肝油酸钠，再向髓腔内注射0.5 mL的生理盐水。4周后观察，兔感染部位大体观察、体质量、体温、X射线放射检查、细菌培养及改良Norden骨髓炎评价动物模型的制备情况。
结果与结论：实验组20只兔接种细菌1周后开始出现体温升高、食欲减退、跛行等症状，接种局部红肿；2周以后13只兔伤口局部出现渗液、流脓；4周后19只兔均有局部红肿、流脓和体温身高等症状；比对照组兔体温明显升高，体质量明显减轻；改良Norden骨髓炎评分也高于对照组；14只兔分泌物细菌培养试验阳性，结果显示均为金黄色葡萄球菌感染。造模成功率为95%。提示使用金黄色葡萄球菌和鱼肝油酸钠骨髓腔注入的方法，可稳定可靠地制备出兔股骨慢性骨髓炎动物模型，是慢性骨髓炎模型制作的可靠方法。

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采用组织块移植法快速建立裸鼠原位骨肉瘤模型

周斌

中国组织工程研究 DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.49.004

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高龄小鼠沉默信息调节因子1基因敲除后膝骨关节炎模型的建立

于斐，雷鸣，曾晖，李明华，肖德明

中国组织工程研究 2015, 19 (49): 7895-7901. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.49.005

摘要（739）

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背景：国内外学者对骨关节炎的发病机制和治疗方法进行了大量的研究，近期发现沉默信息调节因子1(SIRT1)基因在骨关节炎的发病中有着重要的意义，但对其研究尚少，用于该基因研究的骨关节炎模型也鲜有报道。
目的：建立特异性的高龄SIRT1基因敲除小鼠膝骨关节炎模型，以期为骨关节炎的研究提供便利条件。
方法：采用随机对照分组的方法，将小鼠分为4组，即SIRT1+/+小鼠假手术组(A组)、SIRT1+/+小鼠骨关节炎模型组(B组)、SIRT1-/-小鼠假手术组(C组)及SIRT1-/-小鼠骨关节炎模型组(D组)，每组6只。行单侧膝关节前交叉韧带横断加内侧半月板切除建立骨关节炎模型，荧光定量聚合酶链反应检测SIRT1基因敲除情况；苏木精-伊红染色、番红O-固绿双染色观察膝关节软骨形态结构改变，Mankin评分评价膝骨关节炎程度。
结果与结论：SIRT1-/-小鼠SIRT1 mRNA表达量明显低于SIRT1+/+小鼠(P < 0.01)，说明SIRT1基因敲除成功。染色结果显示，B、D两组膝关节软骨破坏明显，Mankin评分明显高于A、C两组(P < 0.01)，并且SIRT1基因敲除后Mankin评分升高更明显(P < 0.05)。提示软骨组织特异性SIRT1基因敲除膝骨关节炎小鼠动物模型建立成功。

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骨及关节损伤动物模型 Animal models of bone and joint injuries 栏目所有文章列表