肾移植排斥反应中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的作用

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.05.013

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (5): 730-735.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.05.013

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肾移植排斥反应中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的作用

陈昌庆¹，石炳毅²，蔡明²，赵豫波²，金伯泉³，王春艳³，韩永²，肖漓²，周文强²，李州利²

¹解放军医学院，北京市 100853;²解放军第309医院全军器官移植研究所，北京市 100091；³解放军第四军医大学免疫教研室，陕西省西安市 710032

修回日期:2013-11-17 出版日期:2014-01-29 发布日期:2014-01-29
通讯作者: 李州利，主任医师，硕士生导师，解放军第309医院全军器官移植研究所泌尿一科，北京市 100091
作者简介:陈昌庆，男，1988年生，安徽省安庆市人，汉族，解放军医学院在读硕士，主要从事器官移植与移植免疫研究。
基金资助:
国家科技支撑计划(2008BAI60B04)

Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 in acute rejection after renal transplantation

Chen Chang-qing¹, Shi Bing-yi², Cai Ming², Zhao Yu-bo², Jin Bo-quan³, Wang Chun-yan³, Han Yong², Xiao Li², Zhou Wen-qiang², Li Zhou-li²

¹Chinese PLA Medical School, Beijing 100853, China; ²Organ Transplantation Institute of PLA, the 309th Hospital of PLA, Beijing 100091, China; ³Department of Immunology, the Fourth Military Medical University of PLA, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China

Revised:2013-11-17 Online:2014-01-29 Published:2014-01-29
Contact: Li Zhou-li, Chief physician, Master’s supervisor, Organ Transplantation Institute of PLA, the 309th Hospital of PLA, Beijing 100091, China
About author:Chen Chang-qing, Studying for master’s degree, Chinese PLA Medical School, Beijing 100853, China
Supported by:
National Key Technology Research and Development Program of China, No. 2008BAI60B04

摘要/Abstract

摘要：

背景：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4是新近发现的共刺激分子，在肿瘤及自身免疫性疾病中研究较多，在肾移植领域缺少研究。

目的：探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植排斥反应中的作用。

方法：纳入肾移植患者50例，根据移植后肾功能分为2组，急性排斥组20例，移植肾功能稳定组30例。同时选择30例健康查体者作为健康对照组。分别抽取外周静脉血，采用ELISA法及流式细胞术检测观察对象血清及外周血淋巴细胞中的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4水平。

结果与结论：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植后急性排斥组、肾功能稳定组及健康对照组血清中的表达水平差异有显著性意义(F=70.008 1，P=0.000 0)。肾功能稳定组显著低于健康对照组(P=0.000 0)，急性排斥组显著低于健康对照组(P=0.000 0)，急性排斥组显著低于肾功能稳定组(P=0.000 0)。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植后急性排斥组、肾功能稳定组及健康对照组淋巴细胞中的表达水平差异无显著性意义(F=1.865 6，P=0.161 7)。提示细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植患者发生排斥反应时血清中表达减低，具有一定的相关性，可能参与了排斥反应的发生。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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关键词: 实验动物, 组织构建, 肾移植, 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4, 急性排斥反应, 尿毒症, 共刺激分子, 免疫抑制剂

Abstract:

BACKGROUND: Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 is a newly discovered costimulatory molecule. It has been studied more in tumor and autoimmune diseases, less in the field of kidney transplantation.

OBJECTIVE: To explore the role of cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 in acute rejection after renal transplantation.

METHODS: Fifty patients undergoing renal transplantation were divided into acute rejection group (20 cases) and stable graft function group (30 cases). Another 30 healthy persons served as control group. Blood samples were extracted from the peripheral blood. Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 was detected by enzyme linked immunosorbent assay and flow cytometry.

RESULTS AND CONCLUSION: The expression of cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 in the serum showed significant differences in the acute rejection group, stable graft function group and healthy control group (F=70.008 1, P=0.000 0), but showed no difference in peripheral blood lymphocytes of three groups (F=1.865 6, P=0.161 7). Compared with the healthy control group, the expression levels of cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 in peripheral blood lymphocytes of acute rejection group and stable graft function group were significantly decreased (P=0.000 0). In addition, the acute rejection group had a lower cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 expression than the stable graft function group (P=0.000 0). In renal transplant rejection, the expression of cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 in serum was reduced, showing some correlation with acute rejection after renal transplnatation. Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 might be involved in the rejection.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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Key words: transplantation, kidney transplantation, graft rejection, uremia, immunosuppressive agents, flow cytometry

中图分类号:

R318

陈昌庆，石炳毅，蔡明，赵豫波，金伯泉，王春艳，韩永，肖漓，周文强，李州利. 肾移植排斥反应中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的作用[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(5): 730-735.

Chen Chang-qing, Shi Bing-yi, Cai Ming, Zhao Yu-bo, Jin Bo-quan, Wang Chun-yan, Han Yong, Xiao Li, Zhou Wen-qiang, Li Zhou-li. Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 in acute rejection after renal transplantation[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(5): 730-735.

图/表（结果） 3

参考文献

[1] Moreso F, Hernández D.Has the survival of the graft improved after renal transplantation in the era of modern immunosuppression? Nefrologia. 2013;33(1):14-26

[2] 陈江华,韩飞.移植肾急性排斥反应新认识[J].中华移植杂志: 电子版,2010,4(3):41-44.

[3] Wadia PP, Tambur AR. Yin and Yan of cytokine regulation in solid organ graft rejection and tolerance. Clin Lab Med. 2008; 28(3):469-479.

[4] Joffre O, Santolaria T, Calise D, et al. Prevention of acute and chronic allograft rejection with CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T lymphocytes. Nat Med. 2008;14(1): 88-92.

[5] Li J, Lai X, Liao W, et al. The dynamic changes of Th17/Treg cytokines in rat liver transplant rejection and tolerance. Int Immunopharmacol.2011;11(8): 962-967.

[6] 刘文宇,张雷,朱有华.T淋巴细胞在肾移植排斥反应中的作用[J]. 中华器官移植杂志,2011,32(12):765-767.

[7] 彭勇,龚建平.共刺激分子与移植免疫耐受[J].中国普外基础与临床杂志,2010,17(6):552-556.

[8] Graca L, Honey K, Adams E, et al. Cutting edge:anti-CD154 therapeutic antibodies induce infectious transplantation tolerance. J Immunol. 2000;165(9): 4783-4786.

[9] Shimizu K, Schnbeck U, Mach F, et al. Host CD40 ligand deficiency induces long-term allograft survival and donor-special tolerance in mouse cardiac transplantation but does not prevent graft arteriosclerosis. J Immunol. 2000; 165(6):3506-3518.

[10] Liu SM, Sutherland AP, Zhang Z, et al.Overexpression of the CTLA-4 isoform lacking exons 2 and 3 causes autoimmunity. Immunol.2012;188(1):155-162.

[11] Walunas TL, Lenschow DJ, Bakker CY, et al.CTLA-4 can function as a negative regulator of T cell activation. Immunity. 1994;1:405-413.

[12] Tosti G, Cocorocchio E, Pennacchioli E.Anti-cytotoxic T lymphocyte antigen-4 antibodies in melanoma. Clin Cosmet Investig Dermatol. 2013;6:245-256.

[13] Antczak A, Pastuszak-Lewandoska D, Górski P,et al.Ctla-4 expression and polymorphisms in lung tissue of patients with diagnosed non-small-cell lung cancer. Biomed Res Int. 2013; 2013:576486.

[14] Lesterhuis WJ, Salmons J, Nowak AK,et al. Synergistic effect of CTLA-4 blockade and cancer chemotherapy in the induction of anti-tumor immunity. PLoS One. 2013;8(4): e61895.

[15] Kow NY, Mak A. Costimulatory pathways: physiology and potential therapeutic manipulation in systemic lupus erythematosus. Clin Dev Immunol. 2013;2013:245928.

[16] Stumpf M, Zhou X, Bluestone JA. The B7-independent isoform of CTLA-4 functions to regulate autoimmune diabetes. J Immunol. 2013;190(3):961-969.

[17] Watanabe N, Nakajima H.Coinhibitory molecules in autoimmune diseases. Clin Dev Immunol. 2012;2012:269756.

[18] Pieper J, Herrath J, Raghavan S,et al. CTLA4-Ig (abatacept) therapy modulates T cell effector functions in autoantibody-positive rheumatoid arthritis patients. BMC Immunol. 2013;14:34.

[19] Ruocco MG, Pilones KA, Kawashima N, et al. Suppressing T cell motility induced by anti-CTLA-4 monotherapy improves antitumor effects. Clin Invest. 2012;122(10): 3718-3730.

[20] Lin H, Rathmell JC, Gray GS, et al. Cytotoxic T lymphocyte antigen 4(CTLA4) blockade accelerates the acute rejection of cardiac allografts in CD28-deficient mice: CTLA4 can function independently of CD28.J Exp Med. 1998;188(1):199-204.

[21] Zhou P, Szot GL, Guo Z, et al. Roles of STAT4 and STAT6 signaling in allograft rejection and CTLA4-Ig-mediated tolerance. J Immunol. 2000;165 (10):5580-5587.

[22] Kwek SS, Dao V, Roy R,et al. Diversity of antigen-specific responses induced in vivo with CTLA-4 blockade in prostate cancer atients. Immunol. 2012;189(7):3759-3766.

[23] Kroczek R, Hamelmann E. T cell costimulatory molecules: optimal targets for the treatment of allergic airway disease with monoclonal antibodies. J Allegry Clin Immunol. 2005; 116(4):906-909.

[24] Grosso JF, Jure-Kunkel MN. CTLA-4 blockade in tumor models: an overview of preclinical and translational research. Cancer Immun. 2013;13: 5.

[25] Teft WA, Kirchhof MG, Madrenas J. A molecular perspective of CTLA-4 function. Ann Rev Immunol. 2006;24:65-97.

[26] Walunus TL, Lenschow DJ, Bakker CY, et al. CTLA-4 can function as a negative regulator of T cell activation. Immunity. 1994;1(15):405-413.

[27] Auchincloss H, Turka LA. CTLA-4: not all costimulation is stimulatory. J Immunol. 2011;187: 3457-3458.

[28] 蔡雷,于善谦,朱乃硕.抗人CTLA-4单克隆抗体的制备及其生物学活性研究[J].上海免疫学杂志,2002,22(3):168-172.

[29] Krummel MF, Allison JP.CD28 and CTLA-4 have opposing effects on the response of T cells to stimulation. J Exp Med. 1995;182(2):459-465.

[30] McGrath MM, Najafian N.The role of coinhibitory signaling pathways in transplantation and tolerance. Front Immunol. 2012;3:47.

[31] Brunet JF, Denizot F, Luciani MF,et al. A new member of the immunoglobulin super- family--CTLA-4. Nature. 1987;328 (6127):267-270.

[32] Schreiber RD, Old LJ, Smyth MJ. Cancer immunoediting: integrating immunity's roles in cancer suppression and promotion. Science. 2011;331:1565-1570.

[33] Pentcheva-Hoang T, Corse E, Allison JP. Negative regulators of T cell activation: potential targets for therapeutic intervention in cancer, autoimmune disease, and persistent infections. Immunol Rev. 2009;229:67-87.

[34] Yokosuka T, Kobayashi W, Takamatsu M, et al. Spatiotemporal basis of CTLA-4 costimulatory molecule-mediated negative regulation of T cell activation. Immunity. 2010;33:326-339.

[35] Liu MF, Wang CR, Chen PC, et al. Increased expression of soluble cytotoxic T-lymphocyte -associated antigen-4 molecule in patients with systemic lupus erythematosus. Scand J Immunol. 2003;57(6): 568-572.

[36] Tsai MK, Ho HN, Chien HF, et al. The role of B7 ligands (CD80 and CD86) in CD152-mediated allograft tolerance: a crosscheck hypothesis. Transplantation. 2004;77:48-54.

[37] Wang X, Hao J, Metzger DL,et al. Blockade of both B7-H4 and CTLA-4 co-signaling pathways enhances mouse islet allograft survival. Islets. 2012;4(4):284-295.

[38] Li J, Zhu H, Wang S, et al. Blockade of NKG2D synergized with CTLA4-Ig in promoting long-term graft survival in murine models of cardiac transplantation. Transplantation. 2012; 93(4):356-363.

[39] Minguela A, Marín L, Torío A, et al. CD28/CTLA-4 and CD80/CD86 costimulatory molecules are mainly involved in acceptance or rejection of human liver transplant. Hum Immunol. 2000;61(7): 658-669.

[40] Demirkiran A, Kok A, Kwekkeboom J, et al. Low circulating regulatory T-cell levels after acute rejection in liver transplantation. Liver Transpl. 2006;12(2): 277-284.

引言

肾移植已成为尿毒症患者最有效的治疗手段。目前免疫抑制剂抗排斥效果强，超急性排斥反应基本已很罕见。但在肾移植后早期，尤其是移植后1周到3个月，虽然急性排斥反应的发生概率明显减少，但还是时有发生^[1]。这不仅加重了患者的经济负担，也对移植肾的功能产生了一定损害。且急性排斥反应是导致慢性移植肾功能丧失的一个主要原因，影响移植患者预后^[2]。因此很多临床医生及实验研究人员对此进行了长时间的研究探索和分析。早期积极预防和治疗急性排斥反应，无疑是提高移植肾长期存活率的一个重要因素，且可提高患者的生活质量。目前的研究认为，急性排斥反应大部分是由细胞免疫反应引起，尤其与活化的T淋巴细胞的关系非常紧密^[3-6]，而T淋巴细胞的活化，需要第一信号及第二信号的共同刺激。而第二信号为共刺激信号，由可溶性共刺激分子或抗原递呈细胞表面的分子配体提供。若缺乏共刺激信号，很多基因不能发生转录激活，进而导致T细胞无能或凋亡。很多实验研究证明，通过选择性阻断或激活共刺激信号通路可抑制淋巴细胞的增殖活化，诱导移植物的免疫耐受^[7-9]。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4是一种近年来新发现的共刺激分子，相对分子质量为34 000，属于免疫球蛋白超家族，是B7/CD28家族的成员^[10]，与B7构成了抑制性淋巴细胞通路。其表达于激活的CD4⁺和CD8⁺T细胞以及激活的B细胞和抗原递呈细胞表面^[11]。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肿瘤及自身免疫性疾病研究中较多^[12-17]，Pieper等^[18]应用细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4抗体治疗类风湿性关节炎时研究调节性T细胞减少，关节液中细胞因子减少。Ruocco等^[19]研究发现抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4抗体可增强T淋巴细胞的抗肿瘤效应。目前对细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在器官移植领域的研究相对较少，Lin等^[20]应用细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4抗体可减少小鼠心脏移植急性排斥反应的发生。而阻断细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4通路时，可使移植鼠产生免疫耐受^[21]。鉴于细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的特性及其在临床疾病中的重要作用，且细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾脏移植排斥反应中尚未见报道，因此研究细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植排斥反应中的作用具有重要的临床意义。实验通过检测肾移植患者血清及淋巴细胞中的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4水平，探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植排斥反应中的作用。

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材料方法

设计：病例-对照试验。

时间及地点：所有病例均选自2009年10月至2012年10月解放军第309医院全军器官移植研究所泌尿外科。

对象：纳入解放军第309医院全军器官移植研究所泌尿外科接受肾移植的患者50例，根据患者移植后肾功能分为2组：急性排斥组20例，移植肾功能稳定组30例。同时选择30例健康查体者作为健康对照组。

急性排斥组20例，男13例，女7例，年龄22-48岁，平均(35.35±7.31)岁。移植肾功能稳定组30例，男17例，女13例，年龄23-50岁，平均(37.23±7.50)岁。健康查体者30例，男女各15例，年龄25-50岁，平均(34.20±5.58)岁。

纳入标准：①移植肾功能稳定组：肾移植后肾功能正常稳定，无发热等感染和排斥的相关表现，无其他并发症。②急性排斥组：肾移植后出现移植肾区胀痛、发热、尿量减少，血肌酐升高>20%、蛋白尿等临床表现，彩超提示移植肾体积增大，血流减少，肾动脉阻力指数>0.80经激素冲击等抗排斥治疗有效；活检证实提示急性排斥。③健康对照组：健康查体者，肝肾功能正常，无肿瘤并存。④观察对象对治疗及试验方案知情同意，且得到医院伦理委员会批准。

排除标准：①在抽取血标本前已使用大剂量激素或单克隆抗体等可能影响T细胞计数的药物者。②合并肿瘤患者。③同时存在感染和排斥、诊断不明确、临床资料不全者。

免疫用药方案：移植肾功能稳定组患者18例口服环孢素A软胶囊+吗替麦考酚酯胶囊+醋酸泼尼松，12例口服他克莫司胶囊+吗替麦考酚酯胶囊+醋酸泼尼松；急性排斥组9例口服环孢素A软胶囊+吗替麦考酚酯胶囊+醋酸泼尼松，11例口服他克莫司胶囊+吗替麦考酚酯胶囊+醋酸泼尼松。

材料：

其他设备及耗材：-80 ℃冰箱、离心机、分光光度计、离心管、无菌吸管、滴管、血球计数器。

方法：

外周血单个核细胞的分离：①加入淋巴细胞分离液于试管中。②肝素钠抗凝血与RPMI1640液(或生理盐水、Hank’s液、PBS)充分混匀(血液∶淋巴细胞分离液∶RPMI1640液=1∶1∶1)。③将②缓慢沿管壁叠加于淋巴细胞分离液面上，注意保持清楚的界面。④水平离心2 000 r/min ×20 min。⑤离心后分3层，上层为血浆和RPMI1640；中层为淋巴细胞分离液；下层为红细胞和粒细胞；在上层和中层之间有一以外周血单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带(含有血小板)。⑥用弯头滴管将云雾层吸到另一试管中，加入5倍以上体积的RPMI1640液洗涤，1 500 r/min×10 min，2次。⑦末次离心后，弃上清，加入含有体积分数10%胎牛血清的RPMI1640液重悬细胞，取一滴细胞液与一滴0.2%的锥虫蓝染液混合，计数和细胞活力检测(死的细胞可被染成蓝色，活细胞不着色)。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的ELISA法检测：用配好的Wash Buffer洗板2次，每孔约300 μL。标准孔每孔内加入Sample Diluent 100 μL，再将稀释好的标准品加入100 μL，从此孔内取出100 μL加入下一孔，依次重复6次倍比稀释，标准曲线7个孔。空白孔加入Sample Diluent 100 μL。样本孔每孔加入Sample Diluent 90 μL及血清标本10 μL。每孔(包含空白孔)加入稀释好的生物素50 μL。盖板，室温(18-25 ℃)孵育2 h，置于万向摇床以100 r/min振动。洗板6次，每孔(包含空白孔)加入稀释好的亲和素100 μL。盖板，室温(18-25 ℃)孵育1 h，置于万向摇床以100 r/min振动。洗板6次，每孔加入TMB Substrate Solution 100 μL。室温(18-25 ℃)孵育10 min，避光。快速向每孔内加入终止液100 μL，充分混匀。加入后立即读数(波长450 nm)。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的流式细胞术检测：①向分离出的淋巴细胞中加入PBS 500 μL，摇匀后向5支试管中各加入100 μL淋巴细胞悬液。分别做标记：空白对照，CD152同型对照，CD152标本。②除空白对照管外，其余每管加入胎牛血清10 μL，室温下孵育15 min，以封闭可能与同型对照进行非特异结合的Fc受体。③将相应抗体及同型对照抗体加入相应试管(CD152单抗及其同型对照为0.062 5 μg/T)，避光室温下孵育20 min。④各管加入PBS 500 μL，1 700 r/min离心5 min，洗涤后弃上清后上机检测或加入固定液500 μL/管避光保存于0-4 ℃，在24 h内上机检测。

主要观察指标：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在血清中的表达以及在外周血单个核细胞中的百分比。

统计学分析：由第一作者进行统计学处理及分析，临床数据采用SPSS 13.0数据软件，数据以x(_)±s表示，计量资料正态比较采用t 或F 检验，计数资料采用卡方检验，以 P < 0.05为差异有显著性意义。

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讨论

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4是一种新发现的抑制性受体^[22-23]，是T淋巴细胞活化的主要负向调节因子^[24-27]。与CD28具有高度同源性，其与CD28竞争结合B7分子，从而阻断T淋巴细胞的活化^[28-29]。其属于免疫球蛋白超家族成员^[30]，最早由Brunet等^[31]发现。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4可分为膜型和分泌型2种。膜型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4表达于T淋巴细胞表面，通过与抗原递呈细胞表面的B7分子结合，阻止共刺激信号向T淋巴细胞内传导，使细胞周期停滞在G₀/G₁期，无法进入S期，从而抑制T淋巴细胞的增殖活化和功能^[32-34]。分泌型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4由膜型转化而来，功能是可以阻断抗原递呈细胞表面的B7分子与T淋巴细胞表面的膜型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的结合，从而阻断抑制信号向T细胞的传导，从而增强免疫反应。因此可以说，膜型和分泌型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在细胞的增殖活化过程中，处于动态平衡及相互调控中。膜型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4具有抑制功能，而分泌型则具有增强功能。有研究认为，血清中的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的mRNA表达于未刺激的T细胞，其表达在T细胞活化后下降^[35]，这可能是机体的一种保护作用。Tsai等^[36]研究认为细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4可增强调节性T细胞的抑制功能，诱导移植物的耐受。Wang等^[37]通过阻断细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4信号通路可增强小鼠胰岛移植的存活。Li等^[38]研究发现应用细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白可以延长小鼠心脏移植的长期存活。还有研究发现在原位肝移植术后未发生急性排斥的，细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的表达保持在基础水平，而在急排组中表达才上调^[39]。甚至还有发现肝移植后外周血中CD4、CD25、CD45RO、CD152均为阳性的细胞明显减少^[40]。由于细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在器官移植中具有重要作用，以及在人的肾脏移植方面国内外还未见有研究报道，因此为了解血清及外周血淋巴细胞中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的表达与肾移植排斥的相关性，作者设计了此实验，通过检测血清及淋巴细胞中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的含量，来探讨其与肾移植排斥反应的关系。

本实验结果表明，移植肾功能稳定组、急性排斥组及健康查体组这3组患者在性别、年龄上差异值均大于0.05，差异无显著性意义。移植肾功能稳定组、急性排斥组这两组患者的免疫抗排斥治疗方案均无明显差异，细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植患者血清中的表达均低于健康查体对照组，肾移植排斥患者的血清中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的含量低于移植肾功能稳定组，且差异均有显著性意义。在机体发生移植肾排斥反应时，T淋巴细胞大量增殖活化，机体为了防止移植肾进一步损伤，增强T细胞增殖的细胞因子会分泌减少，而细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在血清中可增强T细胞的增殖活化，且在活化的T细胞中表达减少，因此在排斥反应时表达减低。而在移植肾功能正常组，由于免疫抑制剂的应用，患者的免疫功能受到一定的抑制，未活化的T淋巴细胞相较于正常人也减少，因此血清中的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4含量低于正常人。与移植肾功能稳定组和健康查体组相比，膜型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在急性排斥反应外周血淋巴细胞中表达比例增高，但差异无显著性意义。且移植肾功能稳定组的膜型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4表达较健康查体组低，与分泌型细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4不具有一一对应关系，这可能与实验过程中的误差及样本例数较少有关。

综上所述，实验初步探索了细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4与肾移植排斥患者的相关性，细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4作为一种抑制性受体，在移植免疫调节过程中发挥着重要的作用，可能参与了肾脏移植急性排斥反应的发生，与急性排斥具有一定的相关性，可为将来早期诊断急性排斥提供一个新的临床思路。但由于病例不多，研究还不够深入，且为单中心的研究，故将来需要大样本、多中心的更进一步深入地研究探索。

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本文评价

[1]	蒋欣, 乔良伟, 孙东, 李明, 房军, 曲青山. 肾移植患者血清中长链非编码RNA PGM5-AS1表达及调控人肾小球内皮细胞的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 741-745.
[2]	王晓勃, 王长安, 韩健乐, 杨青彦, 杨帅平, 杨俊伟. 环孢素转换为他克莫司对稳定期肾移植受者糖代谢和心血管风险的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(14): 2236-2240.
[3]	刘君昌, 高小林, 姜泰茂. CYP3A5基因多态性与肾移植受者他克莫司浓度/剂量的关系及个体化用药[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(11): 1740-1744.
[4]	许国峰, 李学斌, 唐一钒, 赵寅, 周盛源, 陈雄生, 贾连顺. 人黄韧带细胞骨化发生过程中的自噬[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(8): 1174-1181.
[5]	周玉, 龙小安, 李宁, 王纯. 有限元法分析髌腱炎状态时的生物力学变化[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(8): 1280-1286.
[6]	郭娟, 郑珊, 谢辉, 胡亚会. 肾移植受者422例病原菌感染分析[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(32): 5198-5202.
[7]	陈盛, 刘建航, 刘本涛, 张兆剑, 李本澈, 张帆, 李东飞. 脊髓型颈椎病动物模型制作的关注热点[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(24): 3890-3896.
[8]	宋旭东, 何云武, 李勇霖, 陈静, 胡君兰. 超声引导下椎旁神经阻滞治疗带状疱疹相关疼痛的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(11): 1797-1804.
[9]	庞巨涛，张新虎，孙建华，周连军，刘斌，李凤国，李文哲. 经皮球囊扩张椎体后凸成形后椎体再骨折的危险：回顾性多因素分析[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(8): 1182-1187.
[10]	曹曦，崔伟，陈跃平，冯洋，路通. 尼尔样1型生长因子促进修复骨再生和治疗骨质疏松的应用潜力[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(8): 1235-1240.
[11]	高坤，朱文秀，李亨，刘伟东，李全，余伟吉，王立新，曹亚飞 . 去卵巢大鼠血清来源外泌体促进原代成骨细胞的增殖[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(7): 958-989.
[12]	宋超，田鑫，刘琳，徐雅雯，孟圆，李晓丽，彭萌，李华东，王志涛，戈莎. 骨密度测试联合老年人运动功能量表-25评估筛查老年人基础运动障碍及跌倒风险：天津市6个社区1 458例调查[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(7): 990-995.
[13]	艾力麦尔旦•艾尼瓦尔，李鹏，刁兆峰，木合塔尔•霍加. 幼兔颅盖骨成骨细胞的分离培养及鉴定[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(7): 996-1000.
[14]	武敏1，李雪1，高洁1，杨帅1，蔡毅志2，王明国1 . 下颌持续前导对成年及幼年期大鼠髁突软骨血管内皮生长因子表达和Micro-CT下髁突骨质变化的差异[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(7): 1001-1006.
[15]	王灿莉，焦志立，孙勇，孙嵩. 两种富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞增殖活性影响的比较[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(7): 1007-1012.