有氧耐力训练高脂诱导肥胖模型小鼠白色脂肪组织和血浆PPARγ的水平变化

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.1251

摘要/Abstract

摘要：

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文题释义：
过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors，PPARγ)：是重要的指标分子。PPARγ于1990年被发现，属于核内激素受体超家族，其表达范围较广，在脂肪细胞、巨噬细胞、心肌细胞和内皮细胞均有表达，PPARγ在脂肪细胞的生成分化、糖脂代谢等方面发挥着重要的生理作用，并且研究发现PPARγ是脂肪分化调控的关键因子，其他转录调控因子必须在PPARγ存在的条件下才能进行脂肪细胞的分化过程。
白色脂肪(white adipose)：是人体内脂肪组织的一种，和褐色脂肪相对应，主要功能就是把多余的脂肪存储在体内，最新研究表明受基因控制，可以抑制白色脂肪的形成，从而治疗肥胖症。

摘要
背景：研究表明过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators activated receptor γ，PPARγ)是调节脂肪细胞分化的关键基因。耐力运动训练是一种非常有效的减肥手段，但是耐力运动对营养性肥胖小鼠血浆中PPARγ水平及脂肪组织中PPARγ蛋白表达情况的影响尚无确切定论。
目的：探索高脂诱导的肥胖小鼠经中等强度耐力跑台运动训练后，白色脂肪组织中PPARγ蛋白表达的变化及血浆中PPARγ水平的变化。
方法：40只4周龄雄性C57BL/6J小鼠，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。小鼠经过1周适应性饲养后，随机分为对照组(10只)和高脂诱导组(30只)，高脂诱导组小鼠经过8周高脂食物喂养后，取体质量较大的20只小鼠按照S型分组分为肥胖模型组(10只)和耐力运动组(10只)。对照组小鼠普通饲料喂养，不运动，肥胖模型组和耐力运动组小鼠高脂饲料喂养，肥胖模型组小鼠不运动，耐力运动组小鼠先进行1周适应性运动后进行8周中等强度耐力跑台运动训练，每周5次，每次运动60 min。实验结束后，称量小鼠体质量，获取小鼠血浆并检测PPARγ水平，获取肾周和附睾白色脂肪组织并称质量，部分脂肪组织进行苏木精-伊红染色，其余通过蛋白免疫印迹检测PPARγ蛋白表达量。
结果与结论：①高脂诱导能明显增加小鼠体质量，引起体内脂肪组织质量增加及脂肪细胞增大；②高脂诱导能够明显减少血浆中PPARγ水平及脂肪组织PPARγ蛋白表达；③中等强度耐力运动训练可以明显减轻高脂诱导的肥胖小鼠的体质量，明显减轻体内脂肪组织质量，明显减小脂肪细胞体积；④中等强度耐力运动训练可以明显增加血浆中PPARγ水平，明显增加脂肪组织PPARγ蛋白表达。表明中等强度耐力运动训练可能是通过增加小鼠血浆中PPARγ水平及脂肪组织中PPARγ蛋白的表达水平达到减轻体质量的目的。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0001-6630-3598(任志超)

关键词: PPARγ, 蛋白, 耐力运动训练, 中等强度, 跑台, 高脂诱导, 肥胖小鼠模型, 白色脂肪组织

Abstract:

BACKGROUND: Peroxisome proliferators activated receptor γ has been shown to be a key gene regulating adipocyte differentiation. Endurance exercise training is a very effective means of weight loss, but the effect of endurance exercise on the plasma peroxisome proliferators activated receptor γ content and the expression of peroxisome proliferators activated receptor γ protein in adipose tissue of nutritional obese mice remains to be determined.
OBJECTIVE: To explore the changes of peroxisome proliferators activated receptor γ protein expression in white adipose tissue and plasma peroxisome proliferators activated receptor γ content in high fat-induced obese mice after moderate-intensity endurance exercise training.
METHODS: Forty male C57BL/6J mice of 4 weeks old were provided by Beijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology Co., Ltd. and were randomly divided into control group (n=10) and high fat induction group (n=30) after 1 week of adaptive feeding. After high-fat-induced mice were fed with high-fat diet for 8 weeks, 20 mice with larger body weight were divided into obese model group (n=10) and endurance exercise group (n=10) according to S-type grouping. Control group mice were fed with normal diet, no exercise. Mice in the obese model and endurance exercise groups were fed with high fat diet. Mice in the obese model group did not exercise. Mice in the endurance exercise group were subjected to 1 week of adaptive exercise, and then for 8 weeks of moderate-intensity endurance exercise training, 5 times weekly, 60 min/time. At the end of the experiment, the body weight of the mice was weighed, and the plasma level of peroxisome proliferators activated receptor γ was detected. The peripheral and epididymal adipose tissue was obtained and weighed. Part of the adipose tissue was taken for hematoxylin-eosin staining, and the remaining adipose tissue was detected by western blotting for peroxisome proliferators activated receptor γ protein expression.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) High fat induction could significantly increase the body weight of mice, causing the increase of adipose tissue weight and fat cells in the body. (2) High fat induction could significantly reduce plasma peroxisome proliferators activated receptor γ content and adipose tissue peroxisome proliferators activated receptor γ protein expression. (3) Moderate-intensity endurance exercise training could significantly reduce the body weight of obese mice induced by high fat, significantly reduce the weight of adipose tissue, and significantly reduce the volume of fat cells. (4) Moderate-intensity endurance exercise training can significantly increase the content of peroxisome proliferators activated receptor γ in plasma and significantly increase the expression of peroxisome proliferators activated receptor γ protein in adipose tissue. It is indicated that moderate-intensity endurance exercise training may achieve the purpose of reducing body weight by increasing the content of peroxisome proliferators activated receptor γ in mouse plasma and the expression level of peroxisome proliferators activated receptor γ protein in adipose tissue.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

Key words: peroxisome proliferators activated receptor γ, protein, endurance training, moderate-intensity, treadmill, high-fat induction, obese mouse model, white adipose tissue

中图分类号:

任志超. 有氧耐力训练高脂诱导肥胖模型小鼠白色脂肪组织和血浆PPARγ的水平变化[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(19): 3056-3061.

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图/表（结果） 4

2.1 实验动物数量分析实验初期选取40只4周龄雄性C57BL/6J小鼠，其中10只为对照组，在实验过程中无脱失，全部进入结果分析；剩余30只作为肥胖模型组，在高脂饲料诱导肥胖小鼠模型时舍弃体质量较小的10只，剩余20只体质量较大的进入后续实验，分为肥胖模型组和耐力运动组，每组10只，在实验过程中无脱失，全部进入结果分析。

2.2 耐力运动训练对肥胖小鼠体质量和肾周及附睾脂肪质量的影响表1结果显示，肥胖模型组体质量明显大于对照组(P < 0.01)，表明肥胖小鼠造模成功，耐力运动组体质量明显小于肥胖模型组(P < 0.01)，表明耐力运动训练明显减轻了肥胖小鼠的体质量；肥胖模型组肾周脂肪和附睾脂肪质量明显大于对照组(P < 0.01)，耐力运动组肾周脂肪质量小于肥胖模型组(P < 0.05)、附睾脂肪质量明显小于肥胖模型组(P < 0.01)。

2.3 各组小鼠肾周和附睾脂肪组织形态学比较及平均细胞横截面面积比较小鼠脂肪细胞苏木精-伊红染色结果显示见图1，肾周脂肪大小相对均一，细胞间间质较少，对照组细胞较小，肥胖模型组细胞最大，耐力运动组介于对照组和肥胖模型组之间；附睾脂肪大小不均一，对照组和耐力运动组细胞间间质较多，肥胖模型组间质较少，同样对照组细胞较小，肥胖模型组细胞最大，耐力运动组介于对照组和肥胖模型组之间。

表2结果显示，肥胖模型组肾周脂肪平均细胞横截面面积明显大于对照组(P < 0.01)，耐力运动组肾周脂肪平均细胞横截面面积明显小于肥胖模型组(P < 0.01)；肥胖模型组附睾脂肪平均细胞横截面面积明显大于对照组(P < 0.01)，耐力运动组附睾脂肪平均细胞横截面面积小于肥胖模型组(P < 0.05)。

2.4 各组小鼠血浆PPARγ质量浓度比较肥胖模型组血浆PPARγ质量浓度明显低于对照组[(568.88±75.99)，(685.24±77.62) ng/L，P < 0.01)]，耐力运动组血浆PPARγ质量浓度(634.28±81.07)ng/L明显高于肥胖模型组(P < 0.05)。

2.5 各组小鼠肾周和附睾脂肪组织PPARγ蛋白水平比较图2A和2B结果显示，肥胖模型组肾周和附睾脂肪PPARγ蛋白的表达均低于对照组，耐力运动组均高于肥胖模型组。

图2C是对图2A和2B(n=3)结果的统计分析，结果显示，肥胖模型组肾周和附睾脂肪的PPARγ蛋白表达含量均明显低于对照组(P < 0.01)；耐力运动组肾周脂肪PPARγ蛋白表达高于肥胖模型组(P < 0.05)，附睾脂肪明显高于肥胖模型组(P < 0.01)。

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引言

随着社会物质条件的日趋丰富，人们的生活方式发生了很大的变化，高糖、高脂和高热量饮食的长期持续摄入导致超重和肥胖人群数量不断扩大^[1-2]。而肥胖常与高血脂、高血糖和高血压等“三高”疾病、2型糖尿病、肾脏疾病、关节炎、胰岛素抵抗等疾病密切相关，甚至和肿瘤的发生也有一定的相关性，因此肥胖已经被列为一种疾病^[3-7]。如何能够在不影响机体健康的同时有效减轻体质量，缓解肥胖状态成为健康研究的重要内容。减肥的方法有很多，包括控制饮食减少热量摄入、药物减肥、运动减肥，甚至针对重症肥胖患者也可以采用切除过量脂肪的手术疗法^[8]。其中运动减肥作为一种较为简单但是非常有效的方法而备受关注^[9]，研究发现，肥胖的实验动物或人经过长时间中高强度的耐力跑步训练后，体质量明显减轻、内脏脂肪含量明显减少^[10-11]，也有研究发现运动不仅能够减轻体质量和体内脂肪含量，同时也明显改善了实验动物的胰岛素抵抗状态和脂肪肝炎症等疾病^[12]，因此运动被认为是一种有效并且健康的减肥手段^[13]。

在脂肪代谢的研究中，过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors，PPARγ)是重要的指标分子。PPARγ于1990年被发现，属于核内激素受体超家族，其表达范围较广，在脂肪细胞、巨噬细胞、心肌细胞和内皮细胞均有表达^[14-15]，PPARγ在脂肪细胞的生成分化、糖脂代谢等方面发挥着重要的生理作用^[16-19]，并且研究发现PPARγ是脂肪分化调控的关键因子，其他转录调控因子必须在PPARγ存在的条件下才能进行脂肪细胞的分化过程^[20-23]。研究表明，肥胖和肥胖相关疾病与PPARγ信号传导途径的失调有关^[24-25]。通过基因敲除的方法将小鼠的PPARγ基因全部缺失以后，发现小鼠出现了脂肪组织萎缩的现象，同时发现小鼠具有胰岛素抵抗和脂肪肝等疾病^[26-27]。这些研究证明PPARγ在机体的脂肪代谢中起到了至关重要的作用，同时有研究发现，肥胖人群体内PPARγ蛋白的表达量和血浆中的PPARγ水平均明显低于正常体质量人群^[28-29]，因此，研究机体PPARγ的表达含量及其与肥胖之间的相关性是十分有必要的。

研究通过高脂食物饲喂C57BL/6J小鼠8周，诱导建立肥胖小鼠模型以模拟机体营养性肥胖状态，而后采用中等强度的跑台耐力运动训练8周^[30]，研究小鼠脂肪组织PPARγ蛋白表达的变化及血浆中PPARγ水平的变化，为进一步了解耐力运动对肥胖小鼠PPARγ的影响提供实验依据。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计分组对照动物实验。

1.2 时间及地点实验于2017年4月至2018年6月在河南师范大学运动人体科学学院骨骼肌实验室完成。

1.3 材料

1.3.1 实验动物 40只4周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠，体质量13-15 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SYXK(京)2012-0036。购买后饲养于SPF环境，室温(25±1)℃，相对湿度(50±5)%，12 h日光灯照射与12 h熄灯交替以模拟自然环境，自由取食饮水。

1.3.2 饲料普通饲料及高脂饲料均购自北京华阜康生物科技股份有限公司，普通饲料配方：100 g含粗蛋白23.8 g、粗脂肪5.4 g、粗纤维3.5 g、钙1.05 g、磷0.95 g；高脂饲料配方：100 g含粗蛋白23.8 g、粗脂肪5.4 g、粗纤维3.5 g、钙1.05 g、磷0.95 g、酪蛋白5.0 g、猪油21.0 g。

1.3.3 试剂及设备 PPARγ抗体(Abcam公司)，β-Actin抗体(Abcam公司)，小鼠PPARγ ELISA试剂盒(上海江莱生物科技有限公司)。小鼠跑台(安徽正华生物仪器设备有限公司，型号ZH-PT)。

1.4 实验方法

1.4.1 肥胖小鼠模型制备及实验分组小鼠以普通饲料适应性喂养1周后随机分为2组，对照组10只继续喂养普通饲料；高脂诱导组30只进行高脂饲料喂养以诱导肥胖小鼠，8周后，称量小鼠体质量，高脂诱导小鼠体质量 ≥ 对照组小鼠体质量×120%的小鼠被认为是造模成功的肥胖小鼠^[31]，选取其中体质量较大的前20只小鼠按照S型分组分为肥胖模型组和耐力运动训练组并继续喂养高脂饲料。

1.4.2 小鼠耐力运动训练方案仅对耐力运动组进行耐力运动干预，对照组和肥胖模型组不运动。耐力运动组小鼠先进行1周适应性跑台运动后再进行8周中等强度的跑台运动训练，运动方案以Bedford方案进行改进^[32]，适应性训练强度：跑台坡度为0°，速度15 m/min，运动60 min/次，3次/周；中等强度跑台运动强度：跑台坡度为0°，速度15 m/min运动10 min，18 m/min运动50 min，5次/周，周六周日停训。

1.4.3 实验动物取材实验结束后，称量小鼠体质量，禁食4 h后腹腔注射2%戊巴比妥钠(2.5 mL/kg)麻醉，摘眼球取血，抗凝后4 ℃离心取血浆冻存于-80 ℃冰箱备用，处死小鼠后取肾周及附睾白色脂肪组织并称量湿质量，取部分脂肪进行组织学切片处理，其余冻存于-80℃冰箱备用。

1.4.4 血浆PPARγ水平测定按照小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)ELISA试剂盒方式测定各组小鼠血浆中PPARγ质量浓度。

1.4.5 小鼠脂肪组织学切片、形态观察及脂肪细胞横截面面积计算取小鼠部分肾周和附睾脂肪组织，石蜡包埋后切片(厚度6 μm)，进行苏木精-伊红染色。倒置显微镜观察脂肪细胞并拍照，使用图像分析软件NIS-Elements扫描脂肪细胞并计算平均脂肪细胞横截面面积。石蜡切片机：上海名元实业有限公司，型号SYD-2010；倒置显微镜及照相系统：Olympus公司，型号CKX53。

1.4.6 Western Blot检测小鼠附睾脂肪和肾周脂肪PPARγ蛋白表达含量取小鼠附睾脂肪和肾周脂肪组织，按照脂肪质量等比例加入4 ℃预冷的组织裂解液后在冰上用玻璃研磨器匀浆研磨，匀浆液4 ℃离心后取中间层细胞浆用BCA法测定蛋白含量并调整蛋白浓度一致，取20 μg蛋白加等体积2×上样缓冲液混匀后95 ℃变性处理5 min，高速离心后取上清用浓度10%的十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离蛋白后将蛋白电转到硝酸纤维素膜上，根据蛋白Marker位置将膜裁剪后(取包含PPARγ蛋白和β-Actin蛋白的位置)用封闭液(含5%封闭奶粉的TBST)室温封闭1 h后孵育一抗(PPARγ，Abcam公司，1∶2 000稀释；β-Actin，Abcam公司，1∶4 000稀释，4 ℃孵育过夜)，TBST洗膜3次，每次10 min，孵育辣根过氧化物酶标记的二抗(中杉金侨公司，1∶5 000稀释，室温孵育2 h)后TBST洗膜3次，每次10 min。用Super ECL Plus超敏发光液(北京普利莱基因技术有限公司)发光，在暗室使用柯达X射线胶片进行条带的曝光及显影定影。胶片晾干后扫描仪扫描图片并用IPP 6.0软件对目的条带的光密度进行定量。

以目的条带对应的内参蛋白β-Actin的光密度值作为参照，目的条带相对表达量=目的条带光密度值/β-Actin条带光密度值。

1.5 主要观察指标观察各组小鼠体质量、白色脂肪质量及脂肪细胞大小差别，血浆中PPARγ质量浓度的差别，以及脂肪组织中PPARγ蛋白表达的差别。

1.6 统计学分析数据统计学分析均采用商业SPSS 15.0软件进行。实验结果数据值以x(_)±s形式表示。对照组、肥胖模型组、耐力运动组之间的比较采用t 检验进行分析，P < 0.05表示差异有性显著意义；P < 0.01时差异有非常显著性意义。

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讨论

3.1 高脂饲料喂养诱导肥胖小鼠模型的建立在此次研究中，为了模拟人体长期高脂高热量饮食引起的肥胖，实验选取4周龄雄性C57BL/6J小鼠作为研究对象，通过高脂饲料喂养8周来获得营养性肥胖小鼠模型。从结果来看，8周高脂饲料喂养，可以使小鼠的体质量超过普通饲料喂养的小鼠体质量20%以上，达到肥胖小鼠的标准^[31]。在诱导肥胖小鼠的过程中，采取了“多诱导，慎选择”的办法，诱导30只小鼠，只挑选体质量较大的前20只作为实验材料，排除个别生病或者对饮食诱导肥胖产生抵抗的小鼠进入实验，以免影响研究结果^[33]。

3.2 耐力运动训练对肥胖小鼠体质量、脂肪含量及脂肪细胞体积的影响运动是一种有效的减轻体质量的手段，有研究发现，高脂食物诱导的肥胖C57BL/6小鼠通过8周高强度的跑台耐力运动训练后，体质量和脂肪明显减少，肥胖小鼠本身出现的胰岛素抵抗和脂肪肝炎症也得到了减轻^[12]；也有研究认为8周规律的跑台耐力训练能够有效减轻高脂诱导的C57BL/6肥胖小鼠体质量和脂肪含量^[10]。

此次实验研究发现，小鼠经高脂饲料喂养后，体质量和脂肪(肾周和附睾)含量明显高于普通饲料喂养的小鼠，根据脂肪组织苏木精-伊红染色和平均细胞横截面面积结果发现脂肪细胞要明显大于正常小鼠，说明高脂饲料诱导的肥胖模型是成功的。肥胖小鼠经过8周中等强度跑台耐力训练后，体质量和脂肪含量要明显低于没有训练的肥胖小鼠，脂肪组织苏木精-伊红染色和平均细胞横截面面积结果发现脂肪细胞要小于肥胖小鼠，说明耐力运动训练有效降低了肥胖小鼠的体质量、减轻了小鼠的内脏脂肪含量和脂肪细胞体积^[34]，这与之前运动影响高脂诱导肥胖小鼠体质量和脂肪的研究结果是相符的^[10^，^12]，表明耐力运动确实是一种有效减轻体质量的方式。

3.3 耐力运动训练对肥胖小鼠血浆PPARγ水平和脂肪组织PPARγ蛋白水平的影响 PPARγ主要表达于脂肪组织，在肌肉、肝脏等组织中也有表达，是调节脂肪分化最关键的核转录细胞因子，其他脂肪调控因子在PPARγ存在的条件下参与脂肪细胞的分化过程。因此在研究运动对体质量和脂肪含量的影响时，对PPARγ的表达情况进行研究是十分有必要的。

以往的研究中，运动对脂肪组织中PPARγ水平影响的结果并不完全一致。有研究发现，高脂饮食诱导的C57BL/6J肥胖小鼠附睾脂肪PPARγ蛋白水平降低而腹股沟脂肪PPARγ蛋白水平增加，经过跑台运动训练以后，肥胖小鼠附睾脂肪PPARγ蛋白水平升高而腹股沟脂肪PPARγ蛋白水平降低，运动有效恢复了肥胖引起的PPARγ蛋白表达变化^[35]；果糖诱导的高血压大鼠附睾脂肪中PPARγ蛋白水平较正常大鼠没有差异，但是经过运动训练后，附睾脂肪的PPARγ蛋白水平出现了明显升高^[36]。国内期刊也有关于运动对脂肪组织中PPARγ和血液中PPARγ水平影响的论文发表，夏书宇^[30]的研究发现，不同强度跑台运动训练对高脂饮食肥胖大鼠脂肪组织PPARγ的mRNA水平均有升高的作用，同时对血浆中PPARγ水平也有提高的作用，并且发现并非越高强度的跑台运动训练对PPARγ产生的影响越大，而是中等强度影响最大，这也是此次研究选取中等强度耐力运动训练的参考之一。杨星雅等^[37]的研究发现，不同的运动方式对大鼠脂肪组织中PPARγ的mRNA水平影响不同，有氧运动比抗阻运动更能够提高腹股沟脂肪中PPARγ的mRNA水平，抗阻运动基本没有提高的效果，但是附睾脂肪中，抗阻运动比有氧运动更能够提高PPARγ的mRNA水平；李萌等^[38]的研究发现，低、中、高强度的运动都可以增加青春期肥胖大鼠血浆中PPARγ水平和脂肪组织(附睾及肾周)中PPARγ的mRNA表达，同时通过免疫组织化学发现脂肪组织中PPARγ蛋白的表达和mRNA的水平一致。

这些研究中出现不一致结果的原因，有可能是由于诱导实验动物肥胖的材料不同(高脂食物或果糖)或者运动的方式不同(有氧耐力运动或抗阻运动)造成的。Chen等^[35]的研究中，附睾和腹股沟脂肪同样是白色脂肪，但是却出现了不同的PPARγ蛋白表达变化，分析可能是腹股沟脂肪和其他肠系膜脂肪更多承担了“脂肪库”的作用，而附睾和肾周则在运动过程中更容易被动员使用；Kawamura 等^[36]的研究中诱导小鼠使用的是果糖而不是常用的高脂食物，果糖是可以直接利用的能量，不像高脂食物一样需要经过胃肠道的消化过程，跟脂肪代谢的关系并不十分密切(除肝脏脂肪代谢^[39])，因此出现PPARγ蛋白表达变化无差异的结果；Chen等^[35]的研究发现有氧耐力运动造成腹股沟脂肪PPARγ蛋白表达降低，而杨星雅等^[37]的研究发现耐力运动后腹股沟脂肪PPARγ的mRNA水平升高，两者出现不一致的结果，原因可能是由于mRNA到蛋白还需要翻译过程，会出现mRNA水平高而蛋白表达低的情况，因此这个结果还需进一步验证；杨星雅等^[37]的研究中，抗阻运动仅对附睾脂肪PPARγ的mRNA水平产生了升高的作用，而对腹股沟脂肪几乎没有影响，同时抗阻运动对其他脂肪代谢相关蛋白的mRNA水平也几乎没有影响，这个结果作者也未能合理解释，可能的原因是抗阻运动更注重力量训练而有氧运动更多涉及脂肪代谢^[40]。

此次研究发现，高脂饲料诱导的C57BL/6J肥胖小鼠经过8周中等强度耐力跑台运动训练后，血浆中PPARγ水平较不运动的肥胖小鼠明显升高，肾周和附睾脂肪PPARγ蛋白表达水平也较肥胖小鼠明显升高，其中附睾脂肪的升高更加明显，该结果与Chen等^[35]和李萌等^[38]的结果较为一致。推测出现这样结果的原因，可能是中等强度的耐力跑台运动训练作为一种有氧运动，消耗的能量来源之一是机体动员的脂肪，在脂肪消耗分解的过程中释放游离脂肪酸，游离脂肪酸中的多不饱和脂肪酸是PPARγ的天然配体，多不饱和脂肪酸较长时间作用于PPARγ，可能激活了PPARγ基因的表达水平，从而造成PPARγ蛋白含量增加^[41-42]。因此，中等强度的耐力运动是一种有效的减脂方式，在减脂的过程中涉及PPARγ蛋白的表达变化。

结论：经研究发现，营养性C57BL/6J肥胖小鼠体质量及脂肪组织质量明显增加，脂肪细胞体积增大，血浆中PPARγ明显减少，白色脂肪组织(肾周和附睾) PPARγ蛋白的表达明显减少。肥胖小鼠经中等强度耐力运动后，以上由于肥胖造成的指标变化发生了明显的逆转，表明中等强度耐力运动训练可能通过增加小鼠血浆中PPARγ水平及脂肪组织中PPARγ蛋白表达达到减轻体质量的目的。

不足：实验设计中仅对脂肪组织中PPARγ的蛋白表达进行了检测，未涉及mRNA水平检测；仅检测肥胖小鼠经耐力运动训练后体质量、脂肪质量等指标变化，未检测肥胖小鼠运动能力是否提升。在后续研究中需逐步改善。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程