急性力竭运动导致大鼠跟腱微损伤的超微结构变化及机制

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2990

中国组织工程研究 ›› 2021, Vol. 25 ›› Issue (8): 1190-1195.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2990

• 肌肉肌腱韧带组织构建 tissue construction of the muscle, tendon and ligament • 上一篇下一篇

急性力竭运动导致大鼠跟腱微损伤的超微结构变化及机制

申晋波1, 2，张林2

1运城学院体育系，山西省运城市 044000；2苏州大学体育学院，江苏省苏州市 215021

收稿日期:2020-03-04 修回日期:2020-03-11 接受日期:2020-04-15 出版日期:2021-03-18 发布日期:2020-12-11
通讯作者: 张林，博士，博士生导师，教授，苏州大学体育学院，江苏省苏州市 215021
作者简介:申晋波，男，1985年生，山西省人，汉族， 2019年苏州大学体育学院毕业，博士。
基金资助:
山西省青年科技研究基金(201801D221443);运城学院体育学科基金

Micro-injury of the Achilles tendon caused by acute exhaustive exercise in rats: ultrastructural changes and mechanism

Shen Jinbo1, 2, Zhang Lin2

1Department of Physical Education, Yuncheng University, Yuncheng 044000, Shanxi Province, China; 2School of Physical Education, Soochow University, Suzhou 215021, Jiangsu Province, China

Received:2020-03-04 Revised:2020-03-11 Accepted:2020-04-15 Online:2021-03-18 Published:2020-12-11
Contact: Zhang Lin, PhD, Doctoral supervisor, Professor, School of Physical Education, Soochow University, Suzhou 215021, Jiangsu Province, China
About author:Shen Jinbo, PhD, Department of Physical Education, Yuncheng University, Yuncheng 044000, Shanxi Province, China; School of Physical Education, Soochow University, Suzhou 215021, Jiangsu Province, China
Supported by:
Shanxi Provincial Youth Science and Technology Research Fund, No. 201801D221443 (to SJB); Sports Science Foundation of Yuncheng University (to SJB [project participant])

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
转化生长因子β1：是转化生长因子β的一种亚型，是常见的生长因子，几乎存在于所有细胞中，在调节细胞增殖与分化、细胞外基质合成及损伤愈合修复等方面发挥作用。由多基因家族编码的多肽因子，有特异的氨基端序列，以前多肽形式存在，在酸性环境中或经蛋白溶解酶水解后被激活。
基质金属蛋白酶：水解细胞外基质的蛋白裂解酶，作用过程需要钙、锌等离子作为辅助离子参与而得名，包括基质中的各种胶原酶和弹性蛋白酶等，是参与降解全身各种组织细胞外基质的蛋白酶家族。

背景：有研究表明末端病大鼠跟腱所形成的损伤和瘢痕修复难以痊愈，而力竭运动所致大鼠跟腱微损伤的早期治疗有避免损伤累积和预防末端病发生的作用，因而有必要探索急性力竭运动引发跟腱微损伤的机制。
目的：通过对比急性力竭运动前后大鼠跟腱的超微结构、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶抑制剂1基因与蛋白表达变化，探讨急性力竭运动引起跟腱微损伤的机制。
方法：将大鼠随机分为2组，对照组不运动为空白对照，力竭运动组进行急性力竭跑台运动，力竭运动后即刻麻醉处死对照组和力竭运动组大鼠，对大鼠跟腱进行苏木精-伊红染色光学显微镜及透射电镜观察，通过反转录聚合酶链式反应技术和双抗体夹心ABC-ELISA法测定两组大鼠跟腱组织转化生长因子β1、Ⅰ型胶原蛋白，Ⅲ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶抑制剂1的基因表达和蛋白含量。
结果与结论：与对照组相比，力竭运动组大鼠跟腱胶原纤维排列紊乱，腱细胞局部结构被破坏，转化生长因子β、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1基因表达和蛋白含量显著升高(P < 0.05)，Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白基因表达和蛋白含量显著下降(P < 0.05)。上述数据说明，急性力竭运动过程中大鼠跟腱发生微损伤并逐步累积导致转化生长因子β1过高表达；大鼠跟腱胶原合成下降，降解加速，跟腱功能受损、微损伤持续；基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1变化趋势相同，表明尚未发生不可逆损伤；提示急性力竭运动后跟腱发生的微损伤应及时治疗和修复，以避免形成过度损伤和瘢痕修复。
https://orcid.org/0000-0003-1346-4739(申晋波)；https://orcid.org/0000-0001-9901-0118(张林)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 运动, 力竭, 跟腱, 胶原, 蛋白, 因子, 软组织, 鼠

Abstract: BACKGROUND: Studies have shown that injury and scar of the Achilles tendon in rats with terminal disease are difficult to heal, and the early treatment of Achilles tendon micro-injury caused by exhaustive exercise can avoid the accumulation of injury and prevent the occurrence of terminal disease. Therefore, it is necessary to explore the mechanism of Achilles tendon micro-injury caused by acute exhaustive exercise.
OBJECTIVE: Through the comparison of the changes of ultra-structure, transforming growth factor-β1 (TGF-β1), Collagen-I, Collagen-III, matrix metalloproteinases-1 (MMP-1) and tissue inhibitors of metalloproteinase-1 (TIMP-1) mRNA and protein expression in the Achilles tendon before and after exhaustive exercise, to discuss the mechanism of Achilles tendon micro-injury caused by acute exhaustive exercise in rats.
METHODS: Wistar rats were randomly divided into a control group and an exhaustive exercise group. No intervention was performed in the control group. In the exhaustive exercise group, rats were subjected to treadmill running. After exhaustive exercise, the two groups of rats were immediately killed under anesthesia. Through the observation using hematoxylin-eosin staining and transmission electronic microscopy, Achilles tendons were measured by reverse transcription-polymerase chain reaction and double antibody sandwich ABC-ELISA to show the genetic expression and protein expression of TGF-β1, Collagen-I, III, MMP-1 and TIMP-1.
RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the control group, the acute exhaustive exercise group showed the disordered arrangement of collagen fibers in Achilles tendon and the partially damaged structure of tendon cells. The mRNA and protein expressions of TGF-β1, MMP-1 and TIMP-1 were significantly higher in the exhaustive exercise group than the control group (P < 0.05), whereas the mRNA and protein expressions of Collagen-I and Collagen-III were significantly decreased (P < 0.05). These findings indicate that the over-expression of TGF-β1 results from the gradual accumulation of Achilles tendon micro-injuries caused by acute exhaustive exercise. Collagen synthesis decreases while the degradation accelerates; the tendon function is impaired as the micro-injuries continue. There is a similar variation tendency of MMP-1 and TIPM-1, which reminds an irreversible damage do not occur. Micro-injuries of the Achilles tendon caused by acute exhaustive exercise should be treated and repaired in time, avoiding excessive damage and scar repair.

Key words: exercise, exhaustion, tendon, collagen, protein, factor, soft tissue, rat

中图分类号:

申晋波, 张林. 急性力竭运动导致大鼠跟腱微损伤的超微结构变化及机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1190-1195.

Shen Jinbo, Zhang Lin. Micro-injury of the Achilles tendon caused by acute exhaustive exercise in rats: ultrastructural changes and mechanism[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2021, 25(8): 1190-1195.

图/表（结果） 4

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引言

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。
1.2 时间及地点于2016年6月至2016年10月在苏州大学医学部动物实验中心完成。
1.3 材料健康1月龄雄性Wistar清洁级大鼠20只，平均体质量(109.0±7.2) g，于苏州大学医学部动物实验中心购买并饲养，许可证号：SYXK(苏)2016-0050，自由进食及饮水，采用国家标准啮齿类动物饲料进行喂养，充足自然光照，室温18-24 ℃，湿度45%-55%。
1.4 实验方法
1.4.1 建模及干预大鼠20只适应性喂养1周后进行随机分组：对照组(n=10)，力竭运动组(n=10)。对照组不进行运动，力竭运动组采用根据Bedford方法修改的递增负荷力竭跑台运动方案[3-4]：大鼠在力竭跑台运动前，先有3次适应性训练，运动速度10 m/min，每次运动时间5 min，跑台角度为-16°；力竭运动负荷共分3级：Ⅰ 级速度10 m/min，时间15 min；Ⅱ级速度15 m/min，时间15 min；Ⅲ级速度20 m/min，运动至力竭为止，大鼠跑台采用中国杭州段式跑台(BCPT-98型号)。
力竭判定标准：大鼠跑台姿式由蹬地式变为伏地式，滞留于跑道末端不能继续跑动，且声波和光刺激均不能驱使大鼠继续维持跑动状态。
1.4.2 取材急性力竭运动结束后即刻麻醉处死所有大鼠：注射体积分数10%水合氯醛溶液进入大鼠腹腔进行麻醉 (0.3 mL/g)，取大鼠后肢跟腱，迅速去除腱围及相连肌肉，得到跟腱样品，迅速将样品放入冷冻管中，然后置于-80 ℃冰箱储存。
1.4.3 苏木精-伊红染色将标记为右后肢跟腱样品迅速放于体积分数10%的甲醛溶液中固定，固定后进行梯度乙醇脱水，二甲苯透明，用Leica-EG1160型全自动石蜡包埋机进行包埋，后用Leica-RM2145型石蜡切片机将蜡块进行横纵连续切片,进行二甲苯脱蜡，梯度乙醇脱水，水洗后进行苏木精-伊红染色，再经乙醇脱水，二甲苯透明后，中性树胶封固。苏木精-伊红染色组织切片置于OLYMPUS-BX51型光学显微镜下，首先在10×10倍下观察标本，确定观察位置，然后在40×10倍下观察跟腱中的胶原纤维状态及腱细胞有无炎性变化。

1.4.4 透射电镜观察取约1 mm3标记为左后肢跟腱组织，先将跟腱组织在体积分数2.5%戊二醛固定液中固定1 h，然后0.18 mol/L蔗糖溶液中浸泡2 h然后冲洗，再用体积分数1%锇酸溶液固定2 h，从锇酸溶液中取出后依次进入梯度丙酮脱水(体积分数50%，70%，90%丙酮中各1次，每次10 min；100%丙酮3次，每次10 min)，然后浸脂(纯包埋剂与100%丙酮按1∶1调配)、包埋，放入37 ℃温箱过夜，移入60 ℃温箱48 h。使用超薄切片机连续切片。醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色。采用HITACHIH-600透射电镜观察制备好的切片，首先在低倍下初步观察，然后在较高的放大倍数下进行细致的观察，主要观察内容为：胶原纤维排列、腱细胞、细胞核及细胞器的变化。
1.4.5 反转录聚合酶链式反应技术(reverse transcription-pcrolymerase chain reaction，RT-PCR)测定用Trizol提取跟腱样品总RNA，测纯度后进行反转录，cDNA的荧光定量PCR引物序列根据Primer 5.0软件进行设计，由上海生工合成，所用引物序列为：GADPH 为内参照物，其序列见表1。用Rotor -Gene Real-Time Analysis Software 6.1(Build 71)软件对所得结果进行分析，结果采用2 -∆∆Ct法[5]。最终得到的值为样品实验组目的基因相对于对照组目的基因的含量。
1.4.6 双抗体夹心ABC-ELISA法测定用抗大鼠转化生长因子β1、Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白、MMP-1、TIMP-1及蛋白多糖单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的转化生长因子β1、Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白、MMP-1、TIMP-1及蛋白多糖与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠转化生长因子β1、Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白、MMP-1、TIMP-1及蛋白多糖，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸，在紫外线波长 450 nm处测吸光度值，转化生长因子β1、Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白、MMP-1、TIMP-1及蛋白多糖浓度与吸光度值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中转化生长因子β1、Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白、MMP-1、TIMP-1及蛋白多糖浓度[6]。选用上海西唐生物科技有限公司试剂盒并检测。
1.5 主要观察指标两组大鼠跟腱组织苏木精-伊红染色、透射电镜以及转化生长因子β1、Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白、MMP-1和TIMP-1基因表达及蛋白含量。
1.6 统计学分析检测数据用x±s表示，用SPSS 17.0统计软件包进行数据分析，采用独立样本t检验分析组间差异，检验水准α= 0.05。

讨论

实验选取肌腱细胞外基质胶原代谢的相关因子(转化生长因子β1)、胶原类型(Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白)、酶类(MMP-1、TIMP-1)及蛋白多糖作为测试指标。主要依据胶原的合成与降解会影响细胞外基质稳态，Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白与肌腱损伤修复关系密切[7]，细胞外基质由胶原纤维、弹性蛋白、非胶原糖蛋白和蛋白多糖等构成，其中胶原为最主要的细胞外基质，正常健康跟腱富含的胶原纤维主要是Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白，Ⅰ型胶原蛋白约占细胞干质量的60%，占总胶原量的95%[8]，具有很好的抗牵拉性能，而Ⅲ型胶原蛋白含量较少[9]，被认为是不成熟的胶原或重建型胶原，在肌腱修复早期Ⅲ型胶原蛋白快速合成，随着修复的进行逐步被Ⅰ型胶原蛋白替代[10-11]。
转化生长因子β1是一种常见的生长因子，其分布广泛，遍布机体各类细胞，具有多种生物效应，参与细胞的增殖、分化、凋亡及生理病理等调节过程，其在肌腱修复中表现出既参与肌腱粘连和瘢痕的形成又能促进肌腱愈合的多重生物学效应[12]，但已有研究证实在肌腱修复过程中转化生长因子β1的表达升高能刺激Ⅰ型胶原基因和蛋白表达的升高，同时能增加Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型胶原蛋白含量提高[13-14]，细胞外基质主要由成纤维细胞合成的Ⅰ型胶原蛋白构成，蛋白多糖可调节Ⅰ型胶原蛋白的形成与最终形状，其对于肌腱的修复作用主要通过转化生长因子β1的调节和抑制来实现[11]，而胶原可以被特异性的胶原酶降解，MMP-1是Ⅰ型胶原蛋白的特异性胶原酶，调节其代谢。有研究表明，当肌腱受损或断裂时，会出现MMP-1蛋白表达的增加[15]，MMP-1还参与肌腱重塑，调节肌腱代谢[16]。TIMP-1作为MMP-1的天然抑制剂具有抑制胶原降解、保持跟腱中胶原相对稳定的功能[17]。
3.1 力竭大鼠跟腱超微结构变化光学显微镜下苏木精-伊红染色切片观察结果显示力竭运动组相比对照组大鼠跟腱周围组织充血，水肿，细胞质染色不均匀，局部排列紊乱，且胶原纤维间隔增多。透射电镜切片观察结果显示力竭运动组相比对照组大鼠跟腱胶原纤维纵向间隔增大，排列紊乱，周期性横纹不明显，且局部出现胶原纤维结构破坏，腱细胞肿胀，空泡减少，粗面内质网增多且内有颗粒状分泌物。这与高尚等[18]研究不同强度跑台对大鼠跟腱微损伤形态学观察结果一致，各组均出现微损伤且程度相似，具有可比性。相比李敏等[19]研究一次性跑台运动大鼠跟腱组织学观察结果，实验中胶原纤维排列紊乱局部结构破坏明显，可能是由于急性力竭运动持续时间更长、运动量更大，导致大鼠跟腱超微结构变化更为明显，但腱细胞仍清晰可见，表明力竭运动导致跟腱微损伤的形成，但尚未达到胡亚哲等[20]报道的末端病大鼠跟腱细胞凋亡明显，很难在切片中找到腱细胞的情况，提示力竭运动跟腱微损伤累积与末端病形成存在一定关系。3.2 力竭大鼠跟腱转化生长因子β1变化实验中对照组跟腱组织中就有转化生长因子β1产生，当跟腱受到刺激时转化生长因子β1会发生变化，力竭运动组大鼠跟腱转化生长因子β1 mRNA和蛋白表达均有显著性上升，长时间的运动致使大鼠跟腱应激反应持续，腱细胞内与细胞外基质的代谢变化逐步进行，出现大鼠跟腱在力竭运动中代谢异常逐步累积的结果，而转化生长因子β1作为调节腱细胞及胶原代谢的重要因子[21]，可以使腱细胞增殖，同时能调节细胞外基质，促进胶原和蛋白多糖的合成与分泌。实验通过急性力竭运动刺激大鼠跟腱将其激活，在力竭运动后参与了腱细胞代谢的恢复和细胞外基质的调节过程。但也有研究发现转化生长因子β1在跟腱组织修复过程中有两种调节机制，既能使腱细胞增殖、刺激胶原合成并调节细胞外基质，又能加速跟腱纤维化，产生瘢痕修复[22]。这与实验结果中转化生长因子β1 mRNA表达50倍和转化生长因子β1蛋白表达近10倍的增长相吻合，即急性力竭运动刺激大鼠跟腱使得转化生长因子β1过高表达，既表现出力竭运动后大鼠跟腱细胞外基质代谢紊乱，其多重生物效应还可能会影响大鼠跟腱修复过程中纤维化及瘢痕的形成，为日后运动中产生更严重的跟腱损伤带来隐患。
3.3 力竭大鼠跟腱胶原与蛋白多糖变化实验胶原及蛋白多糖结果显示急性力竭运动后大鼠跟腱胶原代谢异常，跟腱功能下降，提示跟腱出现微损伤且未进入修复期。胶原纤维和蛋白多糖之间存在复杂的编织排列可能就是肌腱的功能、结构基础，蛋白多糖在维持肌腱的结构与功能中起着至关重要的作用。华卫平[23]的研究中发现运动会使Ⅰ型胶原蛋白增加及形成，并能改变胶原蛋白纤维面积及纤维密度，强化跟腱组织及机械特性。张前法等[24]的研究中发现，成纤维细胞能合成Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白，跟腱细胞仅能够合成Ⅰ型胶原蛋白。Ⅰ型胶原蛋白是跟腱最主要的细胞外基质，由紧密排列的粗胶原纤维构成、强度高弹性低，呈束状排列，胶原蛋白Ⅲ跟腱中含量不足10%，由疏松的细胶原纤维构成，弹性高强度低，呈网状结构[25]。实验结果中Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白的mRNA及蛋白表达均呈下降趋势，急性力竭运动过程中胶原的合成被抑制，暂时的胶原的清除能力的增加，是导致Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白的mRNA及蛋白含量下降的原因，腱细胞在急性力竭运动过程中过量负荷下局部循环发生障碍有关，加之急性力竭运动时间长，跟腱腱周有液体渗出，这也是胶原表达下降的原因。实验蛋白多糖呈显著下降结果以及透射电镜观察结果，胶原纤维和蛋白多糖的结合及排列异常，进一步说明了急性力竭运动导致大鼠跟腱胶原合成代谢以及形状排列紊乱的原因。实验急性力竭运动前后Ⅲ型胶原蛋白 mRNA变化与李敏等[26]对一次性跑台研究结果不同，这可能由于调节胶原代谢的酶类在力竭运动状态下对重建型胶原Ⅲ型胶原蛋白的调节结果，提示急性力竭运动后跟腱尚未进入重建或修复阶段，跟腱功能下降、微损伤处于持续状态或可能在力竭运动后继续加重，在此阶段应通过调整与休息注意跟腱代谢异常的恢复，以避免微损伤累积，同时也是介入治疗与修复手段的关键时期。
3.4 力竭大鼠跟腱MMP-1与TIMP-1变化实验中MMP-1与TIMP-1基因表达和蛋白含量相同的变化趋势一方面说明力竭运动导致大鼠跟腱胶原清除加速出现微损伤，另一方面MMP-1与TIMP-1正常比值范围，说明胶原降解处于代偿状态并未出现失代偿的净降解。MMP作为降解跟腱细胞外基质的主要酶类，被称为胶原酶，具有分解纤维类胶原的能力[27]，MMP-1功能除了参与细胞外胶原纤维的降解外，还能参与跟腱重塑[28]。TIMP-1作为MMP-1的天然抑制剂[29]，主要作用是通过负反馈控制系统抑制MMP-1对胶原的降解作用，使跟腱组织中的胶原能够维持相对稳定。实验力竭运动组大鼠跟腱MMP-1、TIMP-1 mRNA的表达和MMP-1、TIMP-1蛋白含量均出现协同显著上升趋势，表明了急性力竭运动模型运动持续时间长，导致MMP-1、TIMP-1作为调节胶原降解的酶类表达升高，有利于胶原纤维的清除加速，便于细胞外基质的进一步重塑，同时说明了力竭运动引起大鼠跟腱出现了微损伤。这与李敏[30]对一次性跑台大鼠跟腱的结果不一致：MMP-1，TIMP-1 mRNA表达在运动后持续上升，但运动后即刻没有显著性差异，运动12 h MMP-1 mRNA才出现显著性差异，运动24 h TIMP-1 mRNA才出现显著性差异。这实验结果又不同于史晓伟等[17]研究末端病大鼠MMP-1与TIMP-1蛋白表达比值失调，胶原降解发生不可逆式净降解，胶原代谢失衡。实验中MMP-1，TIMP-1 mRNA表达和蛋白含量变化趋势相同，提示急性力竭运动大鼠跟腱发生的微损伤尚未达到不可逆式净降解，即尚未形成末端病，若此时进行治疗和修复仍有可能完全恢复。
3.5 结论急性力竭运动导致大鼠跟腱腱细胞肿胀甚至破裂，细胞外胶原纤维排列混乱；转化生长因子β1的过高表达是急性力竭运动中大鼠跟腱发生微损伤的逐步累积出现应激反应的结果；急性力竭运动过程中大鼠跟腱胶原合成受到抑制，其降解和清除暂时加速，导致跟腱功能受损、微损伤持续；力竭运动后大鼠跟腱MMP-1与TIMP-1变化趋势相同，微损伤的累积尚未发生不可逆损伤，提示急性力竭运动后跟腱发生的微损伤应及时治疗和修复，以避免形成过度损伤累积和瘢痕修复，防止跟腱末端病的发生。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

急性力竭运动导致大鼠跟腱微损伤的超微结构变化及机制

Micro-injury of the Achilles tendon caused by acute exhaustive exercise in rats: ultrastructural changes and mechanism

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[1]	林清凡, 解一新, 陈婉清, 叶振忠, 陈幼芳. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 4970-4975.
[2]	顾霞, 赵敏, 王平义, 李一梅, 李文华. 低氧诱导因子1α与低氧相关疾病信号通路的关系[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1284-1289.
[3]	姬志祥, 蓝常贡. 尿酸盐转运蛋白在痛风中的多态性和治疗相关性[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1290-1298.
[4]	王永生, 吴旸, 李燕春. 急性大强度运动对成年人食欲激素影响的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1305-1312.
[5]	吴训, 孟娟红, 张建运, 王亮. 浓缩生长因子修复兔髁突全层软骨损伤[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1166-1171.
[6]	李静, 谢建山, 崔慧林, 曹锡梅, 杨艳萍, 李海荣. 不同毛色小鼠背部皮肤中甘油二酯激酶ζ和蛋白激酶CβⅡ的表达和定位[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1196-1200.
[7]	曾祯, 胡经纬, 李璇, 唐琳梅, 黄志强, 李明星. 超声造影定量分析重度失血性休克再灌注模型大鼠复苏期的肾血流灌注[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1201-1206.
[8]	唐辉, 姚志浩, 罗道文, 彭双麟, 杨双林, 王浪, 肖金刚. 高脂高糖饮食结合链脲佐菌素建立2型糖尿病性骨质疏松症大鼠模型[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1207-1211.
[9]	柴乐, 吕建兰, 胡劲涛, 胡华辉, 许庆军, 余进伟, 全仁夫. 诱导急性脊髓损伤模型大鼠炎症反应信号通路的变化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1218-1223.
[10]	陈继铭, 吴晓静, 刘田丰, 陈海聪, 黄成硕. 水飞蓟素对四氯化碳致小鼠肝损伤和骨代谢的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1224-1228.
[11]	刘翔翔, 黄云梅, 陈文列, 林如辉, 卢小冬, 李钻芳, 许亚晔, 黄美雅, 李西海. 早期骨关节炎模型大鼠半月板白区细胞的超微结构变化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1237-1242.
[12]	谭婧玉, 刘海文. 成骨细胞特异因子2基因家族的全基因组鉴定、分类及进化分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1243-1248.
[13]	王梦婷, 古艳萍, 任文博, 覃倩, 白冰怡, 廖远朋. 运动干预功能障碍人群血流限制训练的文献热点可视化分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1264-1269.
[14]	刘聪, 刘肃. miR-17-5p调控低氧诱导因子1α介导脂肪细胞分化及血管生成的分子机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1069-1074.
[15]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.