黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.28.012

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (28): 4498-4503.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.28.012

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黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

王葳，姜燕，王巍巍，张金元

解放军第四五五医院肾脏科，南京军区肾脏病研究所，上海市 200052

出版日期:2014-07-02 发布日期:2014-07-02
通讯作者: 王巍巍，博士，副主任医师，解放军第四五五医院肾脏科，上海市 200052
作者简介:王葳，女，1986年生，河北省邯郸市人，汉族，2013年上海中医药大学毕业，硕士，主要从事干细胞在急性肾损伤中的基础研究。
基金资助:
国家自然科学基金(81100493)；上海市基础研究重大项目子课题(12DJ1400203)；上海市优秀青年医学人才培养计划(XYQ2011012)；南京军区医学科技创新项目重点课题(10Z008)

Effects of adipose-derived stem cells cultured with astragaloside on cisplatin-induced apoptosis of renal tubular epithelial cells

Wang Wei, Jiang Yan, Wang Wei-wei, Zhang Jin-yuan

Department of Nephrology, the 455 Hospital of Chinese PLA, Nephrology Center of Nanjing Military Area Command of Chinese PLA, Shanghai 200052, China

Online:2014-07-02 Published:2014-07-02
Contact: Wang Wei-wei, M.D., Associate chief physician, Department of Nephrology, the 455 Hospital of Chinese PLA, Nephrology Center of Nanjing Military Area Command of Chinese PLA, Shanghai 200052, China
About author:Wang Wei, Master, Department of Nephrology, the 455 Hospital of Chinese PLA, Nephrology Center of Nanjing Military Area Command of Chinese PLA, Shanghai 200052, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81100493; the Shanghai Basic Research Major Project (Sub-topic), No. 12DJ1400203; the Shanghai Outstanding Young Medical Personnel Training Program, No. XYQ2011012; the Key Topic in Medical Technology Innovation Project of Nanjing Military Area Command of Chinese PLA, No. 10Z008

摘要/Abstract

摘要：

背景：干细胞移植用于治疗急性肾损伤的有效性已经被多个研究证实，但其对肾小管上皮细胞损伤的修复机制尚不明确。
目的：观察黄芪甲苷孵育后的脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制。
方法：实验分为4组。2.5 μmol/L顺铂诱导肾小管上皮细胞 24 h，建立肾小管细胞损伤模型(顺铂损伤组)；将脂肪源性干细胞与损伤肾小管上皮细胞共培养(脂肪源性干细胞+损伤肾小管上皮细胞组)；利用Transwell小室将20 mg/L黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞48 h后与损伤肾小管上皮细胞共培养(黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞+损伤肾小管上皮细胞组)；以正常肾小管上皮细胞做对照(正常对照组)。
结果与结论：与肾小管上皮细胞损伤组相比，AV/PI和TUNEL结果均显示脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组和20 mg/L 黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组肾小管上皮细胞发生凋亡的比例和数量明显减少；ELISA结果表明20 mg/L黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组胰岛素样生长因子1分泌显著提高(P < 0.05)；Western blot进一步显示20 mg/L 黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组caspase-3蛋白水平明显下降，而Bcl-2的表达量明显增加(P < 0.05)。表明黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡具有抑制作用，从而有利于肾小管损伤的早期恢复，其保护机制可能与增加胰岛素样生长因子1分泌，抑制caspase-3表达、上调Bcl-2水平有关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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关键词: 干细胞, 脂肪干细胞, 黄芪甲苷, 人脂肪源性干细胞, 急性肾损伤, 肾小管上皮细胞, 顺铂, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: The validity of stem cell transplantation for acute kidney injury has been verified by many studies. However, the mechanism of repair of tubular epithelial cell injury remains unclear.
OBJECTIVE: To investigate protective effects and mechanisms of adipose-derived stem cells cultured with astragaloside on the apoptosis of renal tubular epithelial cells induced by cisplatin.
METHODS: There were four groups. Renal tubular epithelial cells were induced by 2.5 μmol/L cisplatin for 24 hours. Models of renal tubular cell injury were established in the cisplatin group. Adipose-derived stem cells were cocultured with renal tubular epithelial cells of injured kidney in the adipose-derived stem cells + renal tubular epithelial cells group. Using Transwell chamber, adipose-derived stem cells were incubated with 20 mg/L astragaloside for 48 hours, and then cocultured with renal tubular epithelial cells in the astragaloside-incubated adipose-derived stem cells + renal tubular epithelial cells group. Normal renal tubular epithelial cells served as controls (normal control group).
RESULTS AND CONCLUSION: Compared with renal tubular epithelial cell injury group, AV/PI and TUNEL results demonstrated that the apoptotic rate and number of renal tubular epithelial cells were apparently reduced in the adipose-derived stem cells + renal tubular epithelial cells group and 20 mg/L astragaloside-incubated adipose-derived stem cells + renal tubular epithelial cells group. ELISA results displayed that insulin-like growth factor-1 levels were significantly elevated in the 20 mg/L astragaloside-incubated adipose-derived stem cells + renal tubular epithelial cells group (P < 0.05). Western blot assay results exhibited that caspase-3 protein levels were noticeably diminished, but Bcl-2 expression was significantly increased in the 20 mg/L astragaloside-incubated adipose-derived stem cells + renal tubular epithelial cells group (P < 0.05). Results suggested that astragaloside-incubated human adipose-derived stem cells suppressed the apoptosis of renal tubular epithelial cells induced by cisplatin, which contributes to the early recovery of injured renal tubule. Its protective mechanism was probably associated with the secretion of insulin-like growth factor-1, inhibition of caspase-3 expression and upregulation of Bcl-2 levels.

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Key words: stem cells, kidney tubules, epithelial cells, apoptosis

中图分类号:

R394.2

王葳，姜燕，王巍巍，张金元. 黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(28): 4498-4503.

Wang Wei, Jiang Yan, Wang Wei-wei, Zhang Jin-yuan. Effects of adipose-derived stem cells cultured with astragaloside on cisplatin-induced apoptosis of renal tubular epithelial cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(28): 4498-4503.

图/表（结果） 4

2.1 流式细胞仪AV/PI法检测肾小管上皮细胞凋亡结果正常对照组仅有少量肾小管上皮细胞发生细胞凋亡，顺铂损伤组凋亡数量、比例明显增加。与顺铂损伤组相比，干细胞+损伤肾小管上皮细胞组肾小管上皮细胞发生凋亡的比例减少，20 mg/L黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组减少更为明显。见图2。

2.2 TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡以细胞核被染成棕褐色为阳性表达，与正常对照组相比，顺铂损伤组核染色阳性细胞所占比例明显增多。与顺铂损伤组相比，干细胞+损伤肾小管上皮细胞组的损伤减轻，阳性表达减少，20 mg/L黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组修复作用更为明显。见图3。

2.3 胰岛素样生长因子1细胞因子水平检测结果 2.5 μmol/L顺铂诱导剂量下，与顺铂损伤组相比，共培养后胰岛素样生长因子1水平上调(P < 0.05)，且20 mg/L黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组较干细胞+损伤肾小管上皮细胞组上调更为明显(P < 0.05，图4)。

2.4 caspase-3表达水平检测结果顺铂损伤组较正常对照组caspase-3活性片段的蛋白表达水平明显增加，与顺铂损伤组相比，干细胞+损伤肾小管上皮细胞组共培养后caspase-3表达减少，20mg/L 黄芪甲苷孵育干细胞+肾小管上皮细胞组与之相比差异有显著性意义(P < 0.05，图5A)。

2.5 Bax表达水平检测结果正常对照组表达少量Bax蛋白，顺铂损伤组较正常对照组Bax活性片段的蛋白表达水平明显增加，与顺铂损伤组相比，干细胞+损伤肾小管上皮细胞组与20 mg/L黄芪甲苷孵育干细胞+肾小管上皮细胞组中Bax蛋白表达未见明显变化(图5B)。

2.6 Bcl-2表达水平检测结果正常对照组表达少量Bcl-2蛋白。与正常对照组相比，顺铂损伤组细胞内Bcl-2的蛋白表达水平略有降低。与顺铂损伤组相比，干细胞+损伤肾小管上皮细胞组与20 mg/L黄芪甲苷孵育干细胞+肾小管上皮细胞组细胞内Bcl-2蛋白的表达量明显增加(P < 0.05)；与干细胞+损伤肾小管上皮细胞组相比，20 mg/L黄芪甲苷孵育人脂肪源性干细胞后变化更为明显(P < 0.05)，见图5C。

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引言

急性肾损伤是临床上常见的急危重症，尽管近年来肾脏替代治疗技术和危重病救治水平得到显著提高，但病死率仍高达30%-50%^[1]。急性肾损伤的主要病理表现和病变机制是肾小管上皮细胞的损伤^[2]，可表现为细胞的凋亡、坏死、转分化，而随后肾功能的恢复也主要取决于肾小管上皮细胞的再生。目前急性肾损伤的治疗仍然以支持疗法为主^[3]，尚无特异性治疗方法阻止疾病的进展。随着干细胞技术的快速发展，干细胞移植为急性肾损伤的治疗研究提供了一个新的途径^[4]。近年来，干细胞移植用于改善急性肾小管损伤已被多数研究证实，其修复机制主要是旁分泌作用，如分泌抗凋亡因子、抗炎因子等^[5-8]，从而通过抑制细胞凋亡、改善损伤局部的微环境^[9-11]。种子细胞的选择是细胞移植治疗的基础和关键。尽管不同组织来源的干细胞具有相同的特点，但是在增殖分化能力、取材难易程度以及细胞表面标记物的表达等方面却存在着明显的差异。脂肪源性间充质干细胞已在脂肪组织中被分离出来，在适宜的培养环境中，脂肪源性干细胞可诱导分化为心肌样细胞、肝细胞、血管内皮细胞、成骨细胞、软骨细胞等^[12-15]。

由于干细胞本身以及其分化的子代细胞的存活、生长需要合适的微环境，干细胞或培养干细胞植入损伤的组织后，由于周围组织缺血缺氧，环境恶劣，移植的大部分干细胞并不能够存活，这—问题显著降低了干细胞在组织损伤修复中的效果。因此，抑制干细胞凋亡、维持或促进其增殖分化能力是干细胞用于修复治疗的一个关键。那么选择有效的能抑制干细胞凋亡促进其增殖的药物对干细胞进行干预，可能也是提高细胞的移植存活率和治疗效果的—条有效途径。目前，人们采取了多种方法试图提高干细胞移植的生存率从而有效治疗急性肾损伤，如：N-乙酰-5-甲氧基色胺预处理^[16]，胰岛素样生长因子1，肝细胞生长因子，血管内皮生长因子基因修饰等等。

黄芪甲苷来源于豆科植物膜荚黄芪，绵毛黄芪，其药理作用主要有：①增强机体免疫力、提高机体的抗病能力。②抗病毒作用。③抗应激功效。④作为促生长剂。⑤改善心肺功能。

作者的前期研究已表明，黄芪甲苷可促进脂肪源性干细胞增殖，且并不影响人脂肪源性干细胞的分化能力^[17]。本实验体外培养人肾小管上皮细胞，通过顺铂诱导细胞凋亡制作急性肾损伤的体外模型；并通过Transwell建立人脂肪源性干细胞与肾小管上皮细胞的共培养系统，观察黄芪甲苷孵育后的人脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响并进行相关机制的探讨。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
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材料方法

设计：分组对照细胞学体外实验。

时间及地点：2012年12月至2013年7月在解放军第四五五医院肾内科实验室完成。

材料：

黄芪甲苷：分子式为C₄₁H₆₈O₁₄；化学结构式见图1。

实验方法：

细胞培养及共培养体系建立：肾小管上皮细胞和脂肪源性干细胞常规复苏后分别用含体积分数5%胎牛血清的DMEM/F12完全培养基和体积分数为10%的脂肪干细胞完全培养基，置于37 ℃、体积分数5% CO₂温箱中培养。将脂肪源性干细胞和肾小管上皮细胞按4×10⁵/4×10⁵比例接种于Transwell共培养板的上下室，建立上下双层细胞共培养体系。肾小管上皮细胞贴壁后经一定浓度顺铂诱导24 h后与人脂肪源性干细胞共培养，48 h后检测肾小管上皮细胞凋亡情况。

实验分组：实验分为4组：①正常对照组。②顺铂损伤组：用2.5 µmol/L的顺铂诱导肾小管上皮细胞24 h。③脂肪源性干细胞与损伤肾小管上皮细胞共培养组(干细胞+损伤肾小管上皮细胞组)：用Transwell小室将脂肪源性干细胞与损伤的肾小管上皮细胞间接共培养。④黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞 48 h后与损伤肾小管上皮细胞共培养组(黄芪甲苷孵育干细胞+肾小管上皮细胞组)：先予20 mg/L黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞，再应用Transwell小室与损伤的肾小管上皮细胞共培养。

流式细胞检测肾小管上皮细胞凋亡：通过AV/PI法检测顺铂对肾小管上皮细胞损伤情况。肾小管上皮细胞以5×10⁵接种于6孔板，贴壁后加相应浓度的顺铂于对应组中，诱导24 h后在六孔板上方放入0.4 μm的Transwell小室，分别与脂肪源性干细胞和20 mg/L 黄芪甲苷孵育的脂肪源性干细胞共培养48 h后收集各组细胞，将每组细胞重悬于100 μL试剂盒缓冲液中，并加入相应的AV、PI荧光染液，室温放置15 min后加入400 μL缓冲液上机检测。

TUNEL检测：肾小管上皮细胞接种于6孔板(预先放置无菌细胞爬片)，24 h后除对照组外，加入2.5 μmol/L顺铂诱导24 h，后吸去旧培养液各组均加入DMEM/F12培养液，共培养组则在肾小管上皮细胞上放置孔径0.4 μm的Transwell小室分别与脂肪源性干细胞和20 mg/L黄芪甲苷的脂肪源性干细胞共培养，48 h后用40 g/L多聚甲醛固定，通过抗地高辛标记，结合链酶亲和素-过氧化物酶，DAB显色，镜下观察细胞核中有棕黄色颗粒者为阳性细胞，即凋亡的细胞。

ELISA检测胰岛素样生长因子1细胞因子表达：共培养48 h后，收集各组下室细胞培养液上清，按照ELISA检测试剂盒操作程序操作，酶标仪上根据说明书于波长450 nm处测定各孔吸光度(A)值，以标准品A值为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线；根据样品A值在标准曲线上分别查找对应的含量。

Western blot检测肾小管上皮细胞caspase-3、Bax、Bcl-2的表达：将肾小管上皮细胞消化收集后，加入蛋白裂解液充分裂解，提取蛋白并检测含量，取等体积蛋白样品，进行SDS-PAGE凝胶电泳，转膜、封闭，依次加入一抗(抗caspase-3抗体、抗Bax抗体、抗Bcl-2抗体)及HRP标记IgG。胶片分析仪对蛋白条带进行处理分析。

主要观察指标：通过顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡制作急性肾损伤的体外模型，观察肾小管上皮细胞凋亡、胰岛素样生长因子1细胞因子的分泌水平以及肾小管细胞凋亡信号途径中的相关蛋白表达情况。

统计学分析：采用SPSS 16.0统计分析软件，计量资料用x(_)±s形式表示，采用方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。P < 0.05认为差异有显著性意义。

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讨论

近年来，以修复重建受损组织与器官的再生医学蓬勃发展，并成为一个多学科交叉、融合而迅速发展的领域，其中干细胞移植治疗是各学科研究的热点。但由于干细胞移植时，靶目标内移植的细胞数量有限且部分干细胞并不能够存活，如何提高移植后干细胞的存活率是当前干细胞移植治疗丞待解决的问题。将中药有效成分应用于干细胞的研究日益受到人们的关注。急性肾损伤的主要病理表现和病变机制是肾小管上皮细胞的损伤，可表现为细胞的凋亡、坏死、转分化，并分泌多种细胞因子，而随后肾功能的恢复也主要取决于肾小管上皮细胞的再生。与细胞坏死的不可逆性相比，细胞凋亡(尤其早期)更易通过干预得到逆转。本实验以2.5 μmol/L顺铂干预肾小管上皮细胞，建立体外的急性肾损伤细胞模型。应用AV/PI和TUNEL法检测共培养后肾小管上皮细胞的凋亡状况，结果显示，与正常对照组相比，顺铂损伤组凋亡的细胞增多，脂肪源性干细胞共培养后，修复作用明显增加，经20 mg/L黄芪甲苷共孵育的脂肪源性干细胞修复作用进一步加强。

脂肪源性干细胞有强大的分泌和调控多种细胞因子水平的功能。胰岛素样生长因子1是胰岛素样生长因子家族中的一种，通过与胰岛素样生长因子1受体相结合产生生物学效应。近些年来，研究发现胰岛素样生长因子1不仅具有胰岛素类似的功能以及介导生长激素的作用，还是多种类型细胞凋亡的一个重要抑制因子^[18-19]。更有研究报道在葡萄糖和氧化剂诱导的人和鼠肾小球膜细胞凋亡中，胰岛素样生长因子1依赖PI3K/Akt 和MAPK两大途径，降低Bax/Bcl-2的比值，增加Bad磷酸化，最终抑制细胞凋亡^[20]。本实验人脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组与20 mg/L 黄芪甲苷人脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组胰岛素样生长因子1分泌显著增多，表明黄芪甲苷孵育的脂肪源性干细胞可以增加胰岛素样生长因子1的分泌，从而抑制肾小管上皮细胞凋亡，这与大多数的文献报道相一致。

nbsp;caspase-3、Bax、Bcl-2均为肾小管细胞凋亡信号途径中的相关蛋白，caspase-3蛋白的表达直接反映了细胞损伤的严重程度，而Bax、Bcl-2分别作为促凋亡蛋白和抑制凋亡蛋白而平衡存在。Western blot实验结果表明，人脂肪源性干细胞与顺铂诱导过的肾小管上皮细胞共孵育后，可减少caspase-3的活性表达抑制肾小管上皮细胞凋亡，对于Bax的表达虽没有观察到明显的抑制作用，但可以通过增强Bcl-2的表达抑制凋亡最终达到减少肾小管上皮细胞损伤的目的，其中20 mg/L黄芪甲苷孵育过的人脂肪源性干细胞与肾小管上皮细胞共培养后调控凋亡相关蛋白的作用更为明显。

总之，研究结果证实20 mg/L黄芪甲苷孵育后可增强其旁分泌效应，促使胰岛素样生长因子1水平升高，并调控肾小管细胞凋亡相关蛋白caspase-3和Bcl-2的表达。因此，推测黄芪甲苷可通过促进人脂肪源性干细胞的增殖^[21-29]、增加其旁分泌效益、调控肾小管细胞的某些凋亡信号途径对人脂肪源性干细胞体内移植治疗急性肾损伤产生有利的影响。当然，这一推论还有待于在动物实验及临床研究中进一步证实。

文章快阅

延伸阅读

姜燕等2014年建立顺铂诱导的急性肾损伤小鼠模型,尾静脉输注人脂肪源性干细胞及黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞(黄芪甲苷-人脂肪源性干细胞),探讨其对急性肾损伤小鼠肾损伤的修复作用。应用PKH26标记人脂肪源性干细胞及黄芪甲苷-人脂肪源性干细胞;雄性BALB/C裸鼠随机分为4组(正常组、模型组、人脂肪源性干细胞及黄芪甲苷-人脂肪源性干细胞干预组),干预组及模型组腹腔注射顺铂建立急性肾损伤模型,于建模后24 h尾静脉输注100 μL 人脂肪源性干细胞及黄芪甲苷-人脂肪源性干细胞悬液,模型组给予等量生理盐水.分别留取建模后24 h及静脉输注后1 ，3，7，14 d小鼠血清及肾组织标本,检测血肌酐、尿素氮水平,苏木精-伊红染色观察肾组织病理变化,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,激光共聚焦观察人脂肪源性干细胞及黄芪甲苷-人脂肪源性干细胞在小鼠肾组织的分布.结果:模型组小鼠肌酐、尿素氮、肾组织病理改变及细胞凋亡区域均显著高于正常组及细胞干预组,其中肌酐、尿素氮分别在第3天、第7天达到最高值,肾小管损伤严重;相同时间点黄芪甲苷-人脂肪源性干细胞组肾组织病理改变及细胞凋亡区域较人脂肪源性干细胞组明显降低,至14 d可基本恢复至正常水平;激光共聚焦显示PKH26标记的人脂肪源性干细胞及黄芪甲苷-人脂肪源性干细胞于14 d在小鼠肾组织有少量表达,其中少量红色荧光与肾小管上皮细胞呈融合状态.结论: 人脂肪源性干细胞移植可减轻急性肾损伤小鼠肾脏结构和功能的损伤;经黄芪甲苷孵育后,可在一定程度上提高人脂肪源性干细胞对受损肾组织的修复作用。

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黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

Effects of adipose-derived stem cells cultured with astragaloside on cisplatin-induced apoptosis of renal tubular epithelial cells

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[1]	林清凡, 解一新, 陈婉清, 叶振忠, 陈幼芳. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 4970-4975.
[2]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[3]	张秀梅, 翟运开, 赵杰, 赵萌. 类器官模型国内外数据库近10年文献研究热点分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1249-1255.
[4]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.
[5]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[6]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[7]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[8]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[9]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
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[11]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
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[13]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.
[14]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.
[15]	史洋洋, 秦英飞, 吴福玲, 何潇, 张雪静. 胎盘间充质干细胞预处理预防小鼠毛细支气管炎[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 991-995.