丝素蛋白在小口径人工血管中的应用

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.16.019

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (16): 2576-2581.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.16.019

• 生物材料综述 biomaterial review • 上一篇下一篇

丝素蛋白在小口径人工血管中的应用

孙浩¹，闫玉生²，陈群清²，李少彬²

¹南方医科大学珠江医院，广东省广州市 510280；²南方医科大学珠江医院心胸外科，广东省广州市 510280

修回日期:2014-03-09 出版日期:2014-04-16 发布日期:2014-04-16
通讯作者: 李少彬，主治医师，南方医科大学珠江医院心胸外科，广东省广州市 510280
作者简介:孙浩，男，1988年生，河北省沧州市人，汉族，南方医科大学珠江医院在读硕士。
基金资助:
2009年广东省科技计划项目(93025)

Fibroin in small-caliber vascular prostheses

Sun Hao¹, Yan Yu-sheng², Chen Qun-qing², Li Shao-bin²

¹Zhujiang Hospital of Southern Medical University, Guangzhou 510280, Guangdong Province, China; ²Deparment of Cardiothoracic Surgery, Zhujiang Hospital of Southern Medical University, Guangzhou 510280, Guangdong Province, China

Revised:2014-03-09 Online:2014-04-16 Published:2014-04-16
Contact: Li Shao-bin, Attending physician, Deparment of Cardiothoracic Surgery, Zhujiang Hospital of Southern Medical University, Guangzhou 510280, Guangdong Province, China
About author:Sun Hao, Studying for master’s degree, Zhujiang Hospital of Southern Medical University, Guangzhou 510280, Guangdong Province, China
Supported by:
the Science and Technology Plan of Guangdong Province in 2009, No. 93025

摘要/Abstract

摘要：

背景：国内外众多学者将丝素蛋白应用到小口径人工血管中，得到的人工血管拥有较好的抗血栓性及优秀的机械强度，动物实验也取得了满意的远期通畅率。

目的：概述丝素蛋白的生物化学性质，目前在血管中常用的改性手段，以及国内外小口径人工血管中丝素蛋白的具体应用。

方法：应用计算机检索中国知网、Medline数据库及ScienceDirect数据库1980年1月至2013年12月有关小口径人造血管血液相容性方面的文献，中文检索词为“人工血管，丝素蛋白”，英文检索词为“Vascular grafts，silk fibroin”。

结果与结论：丝素蛋白拥有可控的机械性能，可通过醇化等处理获得不同的顺应性。同时，丝素蛋白拥有良好的生物相容性，分解产物已知、无毒，满足生物医药材料的安全需求。此外，丝素蛋白易于整合抗凝集团，效果明显可靠，且易于内皮细胞定植生长，而短期内能否形成稳定牢固的内皮层是保证血管假体拥有理想远期通畅率的关键，因此丝素蛋白是制备小口径人工血管的理想材料。但是由于制作工艺等问题，中国早期应用丝素蛋白制作的人工血管并未得到长远的发展。近年来，随着纳米材料、仿生技术、组织工程类血管、静电纺丝等技术的研究发展，以及众多学者为应对小口径血管中复杂血流动力学环境对多层血管的研究尝试，为丝素蛋白在人工血管中的应用开辟了新的空间领域。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

全文链接：

关键词: 生物材料, 材料相容性, 丝素蛋白, 人工血管, 小口径, 组织工程, 综述

Abstract:

BACKGROUND: Many scholars have successfully applied silk fibroin into small-caliber vascular prostheses to achieve better anti-thrombotic role and excellent mechanical strength. In the animal experiments, an ideal long-term patency has been achieved.

OBJECTIVE: To summarize the biochemical properties of silk fibroin, the currently used methods for the vessel modification, as well as specific applications of silk fibroin in small-caliber vascular prostheses.

Methods: A computer-based search of CNKI, Medline database and ScienceDirect databases from January 1980 to December 2013 was performed for articles relevant to small-caliber vascular prostheses with the key words of “vascular grafts, silk fibroin” in Chinese and English.

RESULTS AND CONCLUSION: Silk fibroin has controllable mechanical properties and good biocompatibility. Its decomposition products is well known and non-toxic. In addition, silk fibroin is easy to be integrated by anticoagulant group, and the effect is obvious, reliable, and easy for colonization and growth of endothelial cells, which can bring a satisfactory long-term patency. So, silk fibroin is an ideal material for the small-caliber vascular prostheses. However, due to the production process and other issues, the application of silk fibroin in previous studies has no long-term development. Recently, the development of nano-materials, bionic technology, vascular tissue engineering, and electrospinning technology brings new chances for the application of silk fibroin in artificial vessels.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

全文链接：

Key words: biocompatible materials, silk, blood vessel prosthesis, tissue engineering, review

中图分类号:

R318

孙浩，闫玉生，陈群清，李少彬. 丝素蛋白在小口径人工血管中的应用[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(16): 2576-2581.

Sun Hao, Yan Yu-sheng, Chen Qun-qing, Li Shao-bin. Fibroin in small-caliber vascular prostheses[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(16): 2576-2581.

图/表（结果） 1

丝素蛋白是理想的人工血管应用材料，静电纺丝技术制作的纳米级丝素蛋白纺丝构成的多层血管将从全方位提升血管的远期通畅率。

2.1 丝素蛋白的性质特点

2.1.1 丝素蛋白的化学结构蚕丝蛋白由丝素蛋白和丝胶两部分组成。丝素蛋白是蚕丝中主要的组成部分，通常通过蚕茧脱胶过滤得到，约占蚕丝蛋白质量的 70%。其中丝素蛋白由轻、重两条链构成，相对分子质量分别为25 000和325 000，两条链紧紧缠绕，结构致密^[6]。一般认为丝素蛋白具有从无规卷曲到丝素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型等4种高级结构^[7-8]，这些高级结构具有不同的物理性能，之间可以相互转化。研究表明丝素蛋白构象转变的本质是氢键的重组过程，并且SilkⅠ结构包含水合作用，而转变成SilkⅡ后则不存在水合作用， SilkⅠ结构是丝素蛋白无规结构转为SilkⅡ结构的中间结构^[9]。丝素在高湿、高温、高渗，或加入乙醇、甲醇、聚乙二醇等其他物质时容易形成SilkⅡ结构。在多种改变丝蛋白构象的方法中，用醇处理是最直接、简便、有效的方法，已经得到了深入研究和广泛应用^[10]。丝素蛋白的这些化学特性，可以通过控制丝素蛋白生成不同的结构及各种结构之间的比例得到不同需要的性能。

2.1.2 丝素蛋白的生物相容性蚕丝作为外科缝合材料已有几个世纪的历史，但是早期应用蚕丝缝线常导致机体产生较严重的炎症反应和异物反应，之后的研究发现，脱胶处理后的丝素蛋白在体内实验中所引起的机体炎症反应较可吸收外科缝线还要轻微^[11]，这就说明分离提纯的丝素蛋白有着优秀的生物相容性。动物实验方面，上海材料研究测试中心在小鼠身上分别对医用丝素蛋白进行了细胞毒性及溶血反应测试，结果表示丝素蛋白无细胞毒性^[12]。Dal-Pra^[13]将丝素蛋白支架植入大鼠皮下6个月后，显示支架被上皮血管等填充生长，未发现细胞免疫反应发生。这些研究表明丝素蛋白不会引起明显的体内炎性反应，具有良好的生物相容性。

2.1.3 丝素蛋白的特殊性能丝素蛋白拥有促表皮生长的功能，谢菁等^[14]使用丝素膜表面培养猪髋动脉内皮细胞株，结果显示丝素薄膜是对贴壁依赖型内皮细胞的生长具有支持作用的表面材料，并可通过整合酸性成纤维细胞生长因子，增强对内皮细胞生长的促进功能。Yamada等^[15]研究发现丝素蛋白膜可促进人皮肤成纤维细胞的增殖生长，并通过分离丝素蛋白分解肽，确定丝素蛋白H链N-末端有2段基序NINDFDED和VITTDSDGNE对人皮肤成纤维细胞增殖有促进作用。Inouye等^[16]发现用溴化锂溶解得到的丝素蛋白可以很好地支持人和动物细胞系的黏附和增殖，这主要是由于丝素蛋白序列中的羧基端可以同带有负电荷的细胞表面形成紧密黏合。

此外，抗凝作用是小口径人工血管保持通畅的另一个必要因素。丝素蛋白的氨基酸排列是以-(Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ser)-重叠结构为特征的，其中Ser(丝氨酸)之间的距离，与肝磷脂中硫酸基间的距离十分相近，因此如果在丝素中的丝氨酸上引入硫酸基进行改性处理就可以增加其血液相容性^[17]。Tamada^[18]报道将丝素蛋白磺酸化后具有抗凝血作用。

丝素蛋白分子拥有稳定安全的生物活性，结构已知，自身同降解产物均无生物毒性。可以通过调控化学结构构造不同的物理机械性能以满足特定需求。此外，还拥有促细胞生长，抗凝等诸多优点。可控的机械性能可以调节出合适的血管顺应性，以满足体内动态的血流波动环境，此外，抗凝及促内皮细胞定植能力都是提高人工血管假体远期通畅率的重要性质，并且可以通过共价嫁接功能集团来提高丝素蛋白的血液相容性，方法简单，效果可靠。

2.2 丝素小口径人工血管制备中涉及的相关技术

2.2.1 丝素蛋白的分离提取丝胶蛋白易于溶于热碱水中，在中国，自古就有用热碱水沸煮蚕丝达到脱胶目的的手法。目前，实验室常用的脱胶溶液主要包括高浓度尿素，中性pH值肥皂水或碳酸钠溶液^[19]，还有韩国学者用电解纯水制备出强碱性电解水，其实验证明此电解水可减少脱胶过程对丝素蛋白机械性能的影响^[20]。其中最常用的方法将蚕丝蛋白放入2 g/L，5 g/L Na₂CO₃溶液煮沸30 min，然后用蒸馏水反复冲洗，以去除附着的少量丝胶蛋白。然后放入76-78 ℃的CaCl-CH-CH- OH–HO(mole ratio=1∶2∶8)溶液中(另有使用溴化锂作为溶剂^[21])，不停搅拌，直至完全溶解。随后应用透析膜反复进行透析，最终可得到丝素蛋白溶液^[22-23]。溶解后的丝素蛋白于去离子水中透析至盐离子完全移除，在室温、鼓风烘箱、冷冻抽干机中可分别制得室干膜、烘干膜及海绵状冷冻膜。

2.2.2 制备丝素蛋白纳米纤维的静电纺丝技术 Smith等^[24]曾偶然于动物实验体内的丝质缝线中发现，体内细胞组织可以透过织物的孔隙在内部结构生长，形成类似于血管内皮的包覆体，从而使修复材料逐渐被机化而不致形成血栓。以此为启发，随后Voorhees等将聚乙烯维萦人工血管成功应用于临床，随后研制出奥纶及尼龙人工血管。随着纤维材料和生物医学材料的不断发展，有孔隙的人造血管不断出现，合适的孔隙有利于内皮细胞快速形成稳定覆盖，以提高血管整体的远期通畅率。现如今生物医学应用材料已逐渐进入纳米级材料范畴，目前大量研究表明，直径接近细胞外基质的纳米级纤维可同内皮细胞形成稳定链接，更能促进内皮细胞增殖生长。Bondar^[25]和他的同事分别对比了血管内皮细胞在纳米及微米级纤维丝增殖过程中细胞形态，细胞间接触及黏附分子表达水平的差别，结果显示纳米级纤维组在促内皮细胞定植及细胞与基质交互作用水平方面明显优于微米级纤维组。

大量研究表明，促使人工血管的表面尽快内皮化，形成具有功能的完整内皮层可以有效抑制血管狭窄及堵塞的发生^[26]。Soffe及Zhang等^[27-28]利用纳米级丝素电纺丝制作出管状血管，体外实验用人冠状动脉平滑肌细胞及人大动脉内皮细胞孵化一段时间后，观察到细胞都有非常稳定紧密的附着。这些都足以证明纳米级纤维可以有效促进细胞生长、黏附和增殖。综上，模拟细胞外基质的纳米级纤维可以有效促进细胞增殖，形成快速、稳定的贴附。

而目前，得到近于细胞外基质的纳米级纤维，一般有3种方法-自体组装、相分离和静电纺丝。自体组装及相分离方法一般操作复杂，生产效率较低，所以在推广应用及制作环节限制了其的发展^[29-31]。而静电纺丝技术是一种独特的得到纳米纤维的方法，已日益引起人们的重视，其操作简单，费用低廉，可以大规模量化生产。此外，通过调整静电纺丝过程中的参数，还能可控的将多种聚合材料电纺为直径从几微米纤维到几十纳米不等的纤维^[32]。

静电纺丝技术最早为Formhals在纳米纤维无纺布的构建中使用，而后该技术才广为人知。其基本原理是使带电流体在静电场中流动与变形，最终得到纤维状物质^[33]。一般的静电纺丝机由喷丝头、高压电场、接收器组成，通过喷丝头喷出的电纺液在电场中受力运动形成纳米级纤维纺丝，然后于接收板上获得。可以通过调节注射速率、电场强度、喷丝头距接收器距离等参数得到不同纳米级别直径的纤维纺丝。

进行静电纺织，首先需要将丝素蛋白溶解形成电纺液，有学者使用再生蛋白水溶液，也可以将丝素蛋白溶于甲酸或者六氟异丙醇制备出电纺液，进行电纺^[34-35]。但经过研究分析，单纯由丝素溶液进行电纺，得到的纤维机械强度均比原始丝的机械性能有所降低，不能达到人工血管等材料的强度要求。因此有人尝试将丝素蛋白与其他高聚物共纺，以提高血管假体的机械强度，McClure等^[36-37]把丝素蛋白分别与聚己内酯和聚二恶烷酮共混进行电纺，另有使用丝素蛋白同明胶共混，得到的丝素蛋白纤维纺丝抗断强度及延展性能等都有明显的改善。

另外，有多名学者在电纺溶液中直接加入肝素钠及促内皮生长因子等来增加血管的血液相容性。Wang 等^[38]利用静电纺丝技术，将电纺液浓度，电场强度，喷丝流速及喷丝头与收集器之间的距离等参数分别设定为13%，30 kV，0.2 mL/h，13 cm，制作出纳米级人工血管支架，对比了等离子肝素接枝及直接共混肝素钠溶液电纺两种方式处理的人工血管。体外凝固时间实验表明，肝素修饰支架活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间和凝血酶时间均明显优于未经处理的单纯丝素蛋白血管。目前存在多种血管表面改性，包括物理、化学、生物等多种方式，但改性集团同材料之间都难以形成稳固的链接，共混电纺为材料改性提供了一种很好的选择。

静电纺丝技术是得到纳米级纤维纺丝的最佳方式，可以通过甲醛、乙醇等后处理增加机械性能^[38-39]，以及共混功能集团改善材料的生物相容性。丝素蛋白取材方便，机械性能良好，目前几种丝素蛋白电纺丝血管，对比胶原等其他常用天然生物材料，无论在抗拉强度上及机械性能方面都表现出明显的优越性^[40-42]。

2.2.3 多层丝素蛋白人工血管自体血管是由多种蛋白及细胞构成的极其复杂的多层组织结构。不同层分的细胞在维持血管功能机械强度上共同发挥作用，以适应高血流速，以及动态波动压力构成的内部复杂环境。自体血管壁由3层结构组成，分别是血管内膜、平滑肌层及血管外膜。内膜直接与血流接触，由单层内皮细胞构成，是防止血栓形成的主要屏障；平滑肌层较厚，由多层平滑肌细胞构成。针对血管内的复杂环境，已有众多学者尝试制作多层人工血管，以模拟自体血管的抗凝功能、机械强度及弹性等。

之前，研究者常在已有涤纶人工血管上采用简单浸渍涂层方法模拟自体血管内膜，密封管壁孔隙，减少人工血管渗漏，同时便于组织的浸润生长和生物性愈合。由于丝素蛋白相比传统材料对成纤维细胞和内皮细胞均有较好的黏附性，取材方便，具有优良的生物相容性^[43]，既往有研究应用甲醛蒸汽将丝素蛋白溶液与涤纶血管交联制备人工血管，相比传统涤纶血管可以更快内膜化，同时涤纶血管无明显机械性能损失^[44]。同样，在原有机械性能良好血管表面覆膜的技术也是试图模拟血管内皮的抗凝功能，提高血管远期通畅率，国内学者根据肝素抗凝机制在丝素蛋白膜中整合磺酸基团，然后分别利用等离子技术与人工血管交联，体外实验已证明血管的抗凝性明显增强^[45-46]。

目前，已有许多学者利用丝素制作出多层人工血管。Michael等^[47]利用不同浓度比例的丝素蛋白、胶原蛋白、弹性蛋白及聚己酸内酯模拟3层血管结构组成，采用分层套管的方法制造出3层血管假体。体外实验中证实其机械性能已接近于最常用于血管置换的自体大隐静脉。

国内Liu等^[21]研制出的双层人工血管，分别由包含肝素的强化纤维内膜及由高孔隙的丝素外层组成，外层纳米级电纺纤维丝层具有高孔隙，为平滑肌细胞和成纤维细胞的生长提供了合适环境，而内部层丝纤维增强膜可以持续释放肝素，也增强了血管机械性能。体外实验证明其拥有较理想的机械强度、爆破压力、顺应性等。

在小口径人工血管中，单层结构难以在抗血栓性、弹性、机械强度上得到全面满意的效果，多层结构更能适应机体复杂的压力动态波动环境。

2.2.4 丝素蛋白在组织工程血管中的应用组织工程血管是指通过提供血管细胞种植的三维机制材料，使特定增殖细胞定位贴附生长，分化形成完整的血管3层结构。因此组织工程血管的研究主要集中在定植细胞的研究、支架即细胞外基质替代物的研上。目前常用的支架材料主要有脱细胞基质、生物可降解的高分子聚合物与天然蛋白等。

组织血管支架材料一般需要满足几个基本条 件^{[48- 49]}：首先，同非组织工程人工血管相同，该材料必须具有生物相容性，在促进定植细胞增殖生长的同时，不能引起局部或全身炎症反应等；其次，该材料血管支架应该具有较高的孔隙率以提供足够的表面积，来承载更多的定植细胞。同时较高的孔隙率可以增强细胞与支架材料间的交互作用；此外，同其他非组织工程血管不同的是，大多数组织工程血管应用材料需要可完全生物降解吸收，并且降解速率需要控制在一定的范围内，过快的降解速率将可导致组织完整性及功能的损失，而太慢的降解速率可能会阻碍组织的正常分化形成。

而前文已介绍丝素蛋白拥有良好的生物相容性，体内试验证明无炎性反应发生，表面易化学共价修饰黏附位点和细胞因子以加强定植细胞的生长；可部分生物降解，在体内外降解速率可控，降解产物不仅对组织无毒副作用，还对周围组织有营养与修复作用。Li等^[50]使用α-糜蛋白酶、胶原酶ⅠA、蛋白酶ⅩⅣ研究多孔丝素膜的体外酶降解行为发现，不同酶类得到的降解产物稍有不同，半数以上为游历氨基酸。Horan等^[51]体外酶类实验表明，丝素蛋白会在一个相对较长的时间内缓慢降解。

综上，丝素蛋白是适应组织工程血管制作的理想材料，不仅可以促进细胞增殖，拥有良好的组织相容性及较好的机械性能，并可以在一个相对合适的时间内缓慢降解，为组织生成提供足够的时间。

2.3 人工血管制作最新技术及展望 人工血管在材料方面经历有多聚合物到生物大分子，然后是组织工程类血管的建立，而最终目的就是建立可以拥有良好组织相容性的人工血管，在结构和功能上尽可能模拟自体血管。随着近年来材料及制作技术的发展，涌现出大量的新技术，新材料等。

三维打印是一种快速成形技术，它以数字化模型为基础，运用粉末状材料，应用黏合剂通过逐层“打印”的方式构造物体，拥有高精度、材料多样性等优点。已有德国学者运用化学高分子材料结合能够有效抵抗排异反应的生物分子制作出了一种特殊的“印刷墨水”，其印制出来的物质经化学反应，然后用密集程度极高的激光脉冲能激发材料中的分子，使其聚集在一个焦点上完成交联，以这种方式研制出高精度，拥有良好弹性结构的人工血管假体。同时为提高血管假体的生物相容性，他们已尝试在血管壁进一步进行分子修饰，并开始研制共混肝素等化学物质的打印墨水，可以在一开始的血管打印中就整合进各种基团，以增强血管的组织相容性^[52]。三维打印在人工血管等生物材料制备中有广阔前景。

诱导多能干细胞是由日本学者Yamanaka小组将Oct3/4，Sox2、c-Myc和Klf4这4种转录因子导入小鼠成纤维细胞，诱导其转化成的全能性干细胞^[53]。虽然由于诱导多能干细胞自身的安全性问题，到目前为止，诱导多能干细胞还无法应用于临床治疗，但在生物医学领域，对诱导多能干细胞研究的热潮丝毫未减。诱导多能干细胞在血管方面主要是应用其全能性，诱导出血管细胞前体细胞，以分化出完整血管结构。目前，美国学者Samuel等^[54]近期已利用人体诱导多能干细胞成功制造出血管前体细胞，将这些前体细胞移植到实验鼠大脑的表面，2周后前体细胞分化形成功能性血管，动物实验证实血管寿命可达280 d，这将带给心脑血管疾病治疗方式的重要突破。诱导多功能干细胞为生物组织工程血管提供了新的定植细胞选择，无伦理问题，取材方便，便于控制，目前已掀起研究热潮。

参考文献

[1] Rodney AW.Vascular prothesis present status and furture Development[Z].1989443-449.
[2] van Det RJ,Vriens BHR,van der Palen J,et al.Dacron or PTFE for femoro-popliteal above-knee bypass grafting: short-and long-term results of a multicentre randomized trial. Eur J Vasc Endovasc Surg.2009;37(4):457-463.
[3] Shao Z,Vollrath F.Surprising strength of silkworm silk. Nature. 2002;418(6899):741.
[4] Jin HJ,Kaplan DL.Mechanism of silk processing in insects and spiders. Nature.2003;424(6952):1057-1061.
[5] 冯友贤,李建明,郑佳瑾,等.真丝人造血管的临床应用[J].上海第一医学院学报,1981,26(2):98-102.
[6] 刘永成,邵正中,孙玉宇,等.蚕丝蛋白的结构和功能[J].高分子通报, 1998,11(3):19-25.
[7] Valluzzi R,Gido SP,Zhang W,et al.Trigonal crystal structure of Bombyx mori silk incorporating a threefold helical chain conformation found at the air-water interface. Macromolecules.1996;29(27):8606-8614.
[8] Valluzzi R,He SJ,Gido SP,et al.Bombyx mori silk fibroin liquid crystallinity and crystallization at aqueous fibroin–organic solvent interfaces.Int J Biol Macromol. 1999;24(2-3):227-236.
[9] Chen X,Shao Z,Marinkovic NS,et al.Conformation transition kinetics of regenerated< i> Bombyx mori silk fibroin membrane monitored by time-resolved FTIR spectroscopy. Biophys Chem.2001;89(1):25-34.
[10] Sohn S,Strey HH,Gido SP.Phase behavior and hydration of silk fibroin. Biomacromolecules.2004;5(3):751-757.
[11] Salthouse TN.Biologic response to sutures.Otolaryngol Head Neck Surg (1979).1980;88(6):658-664.
[12] 孙皎,宁丽,顾国珍,等.医用丝素蛋白皮肤再生膜的细胞相容性评价[J].生物医学工程学杂志,2000,17(4):393-395.
[13] Dal Pra I,Freddi G,Minic J,et al.De novo engineering of reticular connective tissue in vivo by silk fibroin nonwoven materials. Biomaterials.2005;26(14):1987-1999.
[14] 谢菁,徐殿胜,陆兵,等.丝素蛋白作为生物材料的基础研究[J].华东理工大学学报:自然科学版,2006,32(4):411-414.
[15] Yamada H,Igarashi Y,Takasu Y,et al.Identification of fibroin-derived peptides enhancing the proliferation of cultured human skin fibroblasts. Biomaterials. 2004;25(3): 467-472.
[16] Inouye K,Kurokawa M,Nishikawa S,et al.Use of Bombyx mori silk fibroin as a substratum for cultivation of animal cells.J Biochem Biophys Methods.1998;37(3):159-164.
[17] 周耀祖.蚕丝在医药领域的开发利用──抗凝血物质的研制[J].蚕桑通报,1998,45(3):62-63.
[18] Tamada Y. Sulfation of silk fibroin by chlorosulfonic acid and the anticoagulant activity.Biomaterials.2004;25(3):377-383.
[19] Yoon K,Lee HN,Ki CS,et al.Effects of degumming conditions on electro-spinning rate of regenerated silk.Int J Biol Macromol.2013;61:50-57.
[20] Cao TT,Wang YJ,Zhang YQ.Effect of Strongly Alkaline Electrolyzed Water on Silk Degumming and the Physical Properties of the Fibroin Fiber.PLoS One.2013;8(6):e65654.
[21] Liu S,Dong C,Lu G,et al.Bilayered vascular grafts based on silk proteins. Acta Biomater.2013;9(11):8991-9003.
[22] Liu H,Li X,Zhou G,et al.Electrospun sulfated silk fibroin nanofibrous scaffolds for vascular tissue engineering. Biomaterials.2011;32(15):3784-3793.
[23] Kim UJ,Park J,Kim HJ,et al.Three-dimensional aqueous-derived biomaterial scaffolds from silk fibroin. Biomaterials.2005;26(15):2775-2785.
[24] Smith RB,Arthur B,Voorhees Jr.Pioneer vascular surgeon.J Vasc Surg.1993;18(3):341-348.
[25] Bondar B,Fuchs S,Motta A,et al.Functionality of endothelial cells on silk fibroin nets: comparative study of micro- and nanometric fibre size. Biomaterials.2008;29(5):561-572.
[26] de Mel A,Jell G,Stevens MM,et al.Biofunctionalization of biomaterials for accelerated in situ endothelialization: a review. Biomacromolecules.2008;9(11):2969-2979.
[27] Soffer L,Wang X,Zhang X,et al.Silk-based electrospun tubular scaffolds for tissue-engineered vascular grafts.J Biomater Sci Polym Ed .2008;19(5):653-664.
[28] Zhang X,Baughman CB,Kaplan DL.In vitro evaluation of electrospun silk fibroin scaffolds for vascular cell growth. Biomaterials.2008;29(14):2217-2227.
[29] Jayaraman K,Kotaki M,Zhang Y,et al.Recent advances in polymer nanofibers. J Nanosci Nanotechnol. 2004;4(1-2): 52-65.
[30] Smith LA,Ma PX.Nano-fibrous scaffolds for tissue engineering. Colloids Surf B Biointerfaces.2004;39(3):125-131.
[31] Ma Z,Kotaki M,Inai R,et al.Potential of nanofiber matrix as tissue-engineering scaffolds.Tissue Eng. 2005;11(1-2): 101-109.
[32] Sill TJ,von Recum HA.Electrospinning: applications in drug delivery and tissue engineering. Biomaterials.2008;29(13): 1989-2006.
[33] Formhals A.Process and apparatus for preparing artificial threads[Z].US Patent,1934.
[34] Sukigara S,Gandhi M,Ayutsede J,et al.Regeneration of Bombyx mori silk by electrospinning—part 1: processing parameters and geometric properties. Polymer. 2003; 44(19): 5721-5727.
[35] 朱晶心,邵惠丽,胡学超.仿生制备的再生丝素蛋白水溶液的静电纺丝(Ⅰ)——工艺参数及结构特性[J].功能材料, 2008,39(1): 115-118,122.
[36] Mcclure MJ,Sell SA,Ayres CE,et al.Electrospinning-aligned and random polydioxanone-polycaprolactone-silk fibroin-blended scaffolds: geometry for a vascular matrix. Biomed Mater.2009;4(5):55010.
[37] Wang S,Zhang Y,Wang H,et al.Fabrication and properties of the electrospun polylactide/silk fibroin-gelatin composite tubular scaffold. Biomacromolecules.2009;10(8):2240-2244.
[38] Wang S,Zhang Y,Wang H,et al.Preparation, characterization and biocompatibility of electrospinning heparin-modified silk fibroin nanofibers.Int J Biol Macromol.2011;48(2):345-353.
[39] Marelli B,Alessandrino A,Farè S,et al.Compliant electrospun silk fibroin tubes for small vessel bypass grafting.Acta Biomaterialia.2010;6(10):4019-4026.
[40] Marelli B,Alessandrino A,Farè S,et al.Compliant electrospun silk fibroin tubes for small vessel bypass grafting.Acta Biomaterialia.2010;6(10):4019-4026.
[41] Zhou J,Cao C,Ma X.A novel three-dimensional tubular scaffold prepared from silk fibroin by electrospinning.Int J Biol Macromol.2009;45(5):504-510.
[42] Liu H,Li X,Zhou G,et al.Electrospun sulfated silk fibroin nanofibrous scaffolds for vascular tissue engineering. Biomaterials.2011;32(15):3784-3793.
[43] Minoura N,Aiba S,Gotoh Y,et al.Attachment and growth of cultured fibroblast cells on silk protein matrices.J Biomed Mater Res.1995;29(10):1215-1221.
[44] 黄福华.丝素蛋白涂层人工血管的研制[D].中国协和医科大学, 2008.
[45] 李少彬,闫玉生,李辉,等.等离子体磺酸化丝素蛋白膜聚四氟乙烯复合小口径人工血管体外的实验研究[J].南方医科大学学报, 2010,30(9):2100-2103.
[46] 顾晋伟,杨新林,王俐勇,等.丝素蛋白膜表面的等离子体磺酸化及体外抗凝血性能[J].高技术通讯,2001,11(8):7-10.
[47] Mcclure MJ,Simpson DG,Bowlin GL.Tri-layered vascular grafts composed of polycaprolactone, elastin, collagen, and silk: Optimization of graft properties. J Mech Behav Biomed Mater.2012;10:48-61.
[48] Murugan R, Ramakrishna S. Design strategies of tissue engineering scaffolds with controlled fiber orientation.Tissue Eng.2007;13(8):1845-1866.
[49] Kidoaki S,Kwon IK,Matsuda T.Mesoscopic spatial designs of nano- and microfiber meshes for tissue-engineering matrix and scaffold based on newly devised multilayering and mixing electrospinning techniques. Biomaterials.2005;26(1):37-46.
[50] Li M,Ogiso M,Minoura N.Enzymatic degradation behavior of porous silk fibroin sheets.Biomaterials.2003;24(2):357-365.
[51] Horan RL,Antle K,Collette AL,et al.In vitro degradation of silk fibroin. Biomaterials.2005;26(17):3385-3393.
[52] 陈兆瀚.3D 打印造血管[J].科技创业,2011,25(12):70-71.
[53] Takahashi K,Yamanaka S.Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors.Cell.2006;126(4):663-676.
[54] Samuel R,Daheron L,Liao S,et al.Generation of functionally competent and durable engineered blood vessels from human induced pluripotent stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A.2013;110(31):12774-12779.

引言

人工血管作为一种修复和替代病变血管的假体，是一种非来源于自然器官和组织的血管代用品，亦称为人造血管^[1]。目前诸如聚四氟乙烯和聚对苯二甲酸乙二醇酯(涤纶)人造血管已经投入商业量产，并取得满意的远期效果。据统计，聚四氟乙烯及涤纶人工血管(内径≥6 mm)5年通畅率分别可达到26%-46%和42%-62%，而动物实验表明，小口径人工血管(内径＜6 mm)的远期通畅率却只有20%-25%^[2]。当今，冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)发病率不断提高，冠状动脉旁路移植作为国际公认治疗冠心病的最有效手段，一直受到自体血管桥取材的限制，如何得到合适的血管假体成为亟需解决的问题。因此小口径人工血管的开发一直是近年来热点研究问题。目前，由于生物相容性材料拥有一系列独特的物理、化学和生物学特性，受到越来越多的关注^[3-4]。其中，丝素蛋白提取自蚕丝蛋白，而蚕丝是中国自古以来就有广泛应用的农产物。蚕丝取材方便，并且拥有理想的组织相容性，优良的机械性能这些人工血管必须具备的特性。中国早在21世纪60年代就开展研制丝质血管，临床应用于腹主动脉替换等已取得较大成功^[5]。目前上海丝绸研究所已制成多种类型和不同直径的真丝人造血管。近年来，来自日本及国内众多学者将丝素蛋白应用到小口径人工血管的研发过程中，得到的人工血管拥有较好的抗血栓性及优秀的机械强度，在动物实验中也取得了满意的远期通畅率。文章旨在概述丝素蛋白在小口径人工血管中的具体应用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
全文链接：

丝素蛋白在小口径人工血管中的应用

Fibroin in small-caliber vascular prostheses

PDF

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 1

参考文献

相关文章 15

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[2]	张同同, 王中华, 文杰, 宋玉鑫, 刘林. 3D打印模型在颈椎肿瘤手术切除与重建中的应用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1335-1339.
[3]	张超, 吕欣. 髋臼骨折固定后的异位骨化：危险因素、预防及其治疗进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1434-1439.
[4]	周继辉, 李新志, 周游, 黄卫, 陈文瑶. 髌骨骨折修复内植物选择的多重问题[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1440-1445.
[5]	王德斌, 毕郑刚. 尺骨鹰嘴骨折-脱位解剖力学、损伤特点、固定修复及3D技术应用的相关问题[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(9): 1446-1451.
[6]	姬志祥, 蓝常贡. 尿酸盐转运蛋白在痛风中的多态性和治疗相关性[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1290-1298.
[7]	袁美, 张新新, 郭祎莎, 毕霞. 循环microRNA在血管性认知障碍诊断中的应用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1299-1304.
[8]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[9]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[10]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[11]	赵敏, 冯柳祥, 陈垚, 顾霞, 王平义, 李一梅, 李文华. 低氧环境下外泌体可作为疾病的标志物[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1104-1108.
[12]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[13]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
[14]	焦慧, 张一宁, 宋雨晴, 林宇, 王秀丽. 乳腺癌类器官研究进展及临床应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1122-1128.
[15]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.