不同氧体积分数下脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞的旁分泌能力

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0880

中国组织工程研究 ›› 2018, Vol. 22 ›› Issue (21): 3322-3327.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.0880

• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇下一篇

不同氧体积分数下脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞的旁分泌能力

杨记农¹，姜亦瑶^2，3，袁超^1，3，刘志刚¹，刘晓程¹

¹中国医学科学院北京协和医学院，泰达国际心血管病医院心外科，天津市 300457；²蚌埠医学院第一附属医院心脏外科，安徽省蚌埠市 233000；³南开大学，天津市 300071

修回日期:2018-05-04 出版日期:2018-07-28 发布日期:2018-07-28
通讯作者: 刘晓程，中国医学科学院北京协和医学院，泰达国际心血管病医院心外科，天津市 300457
作者简介:杨记农，中国医学科学院北京协和医学院，泰达国际心血管病医院心外科，天津市 300457
基金资助:
天津市滨海新区卫生局基金项目(2014BHKY010)；天津市企业博士后创新项目择优资助计划(2015-001)；安徽省高校优秀青年人才支持计划重点项目(GXYQZD2016167)

Paracrine abilities of adipose-derived mesenchymal stem cells and umbilical cord mesenchymal stem cells under different oxygen concentrations

Yang Ji-nong¹, Jiang Yi-yao^{2, 3}, Yuan Chao^{1, 3}, Liu Zhi-gang¹, Liu Xiao-cheng¹

¹Department of Cardiac Surgery, TEDA International Cardiovascular Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Tianjin 300457, China; ²Department of Cardiac Surgery, First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu 233000, Anhui Province, China; ³Nankai University, Tianjin 300071, China

Revised:2018-05-04 Online:2018-07-28 Published:2018-07-28
Contact: Liu Xiao-cheng, Department of Cardiac Surgery, TEDA International Cardiovascular Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Tianjin 300457, China
About author:Yang Ji-nong, Department of Cardiac Surgery, TEDA International Cardiovascular Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Tianjin 300457, China
Supported by:
the Health Bureau Fund Project of Binhai New Area, Tianjin, No. 2014BHKY010; Tianjin Enterprise Postdoctoral Innovation Funding Program, No. 2015-001; Anhui Provincial Young Talent Support Project for Universities, No. GXYQZD2016167

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
旁分泌效应：细胞分泌某种细胞因子对邻近靶细胞(可以同种细胞也可以是异种细胞，主要与内分泌长程效应相对)表现出的生物学作用。需要指出自分泌效应是细胞产生因子再作用于自身细胞产生的生物学作用。
血管内皮生长因子：是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，具有促进血管通透性增加、细胞外基质变性、血管内皮细胞迁移、增殖和血管形成等作用。

摘要
背景：间充质干细胞治疗急性心肌梗死的机制与间充质干细胞的迁移、定植和分化相关，更重要的是间充质干细胞的旁分泌作用。
目的：评估低氧体积分数下脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞的旁分泌及促血管再生能力，为选择合适的间充质干细胞应用于治疗急性心肌梗死提供依据。
方法：分离并培养人脂肪间充质干细胞和人脐带间充质干细胞，流式细胞术鉴定细胞的免疫表型；2种细胞按氧体积分数不同各分为体积分数3% O₂预处理组、体积分数5% O₂预处理组和体积分数21% O₂对照组，培养24 h；酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子水平。
结果与结论：①2种间充质干细胞阳性表达CD73、CD90、CD105，阴性表达CD34、CD45、CD54、HLA-DR；②各氧体积分数条件下，人脂肪间充质干细胞分泌血管内皮生长因子水平均显著高于人脐带间充质干细胞 (P < 0.01)；③在体积分数5% O₂条件下，人脂肪间充质干细胞分泌肝细胞生长因子水平显著高人脐带间充质干细胞(P < 0.05)；④在体积分数3% O₂和体积分数5% O₂条件下，人脐带间充质干细胞分泌神经生长因子水平显著高于人脂肪间充质干细胞(P < 0.01)；⑤在体积分数3% O₂和体积分数5% O₂条件下，人脐带间充质干细胞分泌角质细胞生长因子水平显著高于人脂肪间充质干细胞(P < 0.01或P < 0.05)，在体积分数21% O₂条件下，人脂肪间充质干细胞分泌角质细胞生长因子水平显著高于人脐带间充质干细胞(P < 0.01)；⑥结果表明，低氧能够提高2种干细胞旁分泌效应。人脂肪间充质干细胞在血管内皮生长因子旁分泌能力上明显优于人脐带间充质干细胞，故认为人脂肪间充质干细胞可能更适合用于心肌梗死的干细胞治疗。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0002-4649-1947(杨记农)

关键词: 急性心肌梗死, 脂肪间充质干细胞, 脐带间充质干细胞, 低氧, 旁分泌, 干细胞

Abstract:

BACKGROUND: Therapeutic mechanisms of mesenchymal stem cells for acute myocardial infarction are related to the migration, colonization, and differentiation of mesenchymal stem cells, and more importantly, it is related to the paracrine effects of mesenchymal stem cells.
OBJECTIVE: To evaluate the paracrine and vascular regeneration abilities of human adipose-derived mesenchymal stem cells (hAD-MSCs) and human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) under low oxygen concentrations, thereby providing the basis for the selection of appropriate mesenchymal stem cells used in the treatment of acute myocardial infarction.
METHODS: hUC-MSCs and hAD-MSCs were isolated and cultured, and cell immunophenotype was identified using flow cytometry. Two kinds of cells were pretreated with 3%, 5% and 21% (control) O₂ for 24 hours. Enzyme linked immunosorbent assay was used to detect the contents of hepatocyte growth factor (HGF), vascular endothelial growth factor (VEGF), nerve growth factor (NGF) and keratinocyte growth factor (KGF) in the cell supernatant in each group.
RESULTS AND CONCLUSION: hUC-MSCs and hAD-MSCs were positive for CD73, CD90 and CD105, and negative for CD34, CD45, CD54 and HLA-DR. Under different oxygen concentrations, the VEGF level in the hAD-MSCs was significantly higher than that in the hUC-MSCs (P < 0.01). Under 3% O₂ conditions, the HGF level in the hAD-MSCs was significantly higher than that in the hUC-MSCs (P < 0.05). Under 3% and 5% O₂, the NGF level in the hUC-MSCs was significantly higher than that in the hAD-MSCs (P < 0.01). Under 3% and 5% O₂, the KGF level in the hUC-MSCs was significantly higher than that in the hAD-MSCs (P < 0.01 or P < 0.05). Under 21% O₂, the KGF level in the hAD-MSCs was significantly higher than that in the hUC-MSCs (P < 0.01). To conclude, hypoxia can promote the paracrine effects of and hAD-MSCs. Moreover, hUC-MSCs show better paracrine ability than hAD-MSCs. Therefore, hAD-MSCs are more likely to be a stem cell therapy suitable for myocardial infarction.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Myocardial Infarction, Adipose Tissue, Umbilical Cord, Mesenchymal Stem Cells, Cell Hypoxia, Vascular Endothelial Growth Factors, Hepatocyte Growth Factor, Nerve Growth Factor, Tissue Engineering

中图分类号:

R394.2

杨记农，姜亦瑶，袁超，刘志刚，刘晓程. 不同氧体积分数下脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞的旁分泌能力[J]. 中国组织工程研究, 2018, 22(21): 3322-3327.

Yang Ji-nong, Jiang Yi-yao, Yuan Chao, Liu Zhi-gang, Liu Xiao-cheng. Paracrine abilities of adipose-derived mesenchymal stem cells and umbilical cord mesenchymal stem cells under different oxygen concentrations[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2018, 22(21): 3322-3327.

图/表（结果） 1

2.1 脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的形态 原代细胞在24-48 h内，少量细胞开始贴壁，呈梭形，多角形分布；5-7 d可见贴壁细胞数量增多；7-10 d融合率达80%以上，12 d左右细胞密度增高。按1∶2-1∶3的比例传代，传代细胞于接种后4-6 h迅速贴壁，最初为短粗的梭形或卵圆形。随后，细胞展开呈梭形、多角形，细胞均匀分布，可呈片状融合，低倍镜下细胞排列紧密，具有方向性，杂质细胞明显减少。经传代扩增，细胞形态不变(图1)。

2.2 脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的免疫表型鉴定结果 脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的免疫表型表达具有共性，即CD73、CD90、CD105呈阳性表达，而CD34、CD45、CD54、HLA-DR为阴性表达。

2.3 脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子蛋白分泌量 在低氧环境下，2种干细胞的血管内皮生长因子分泌均呈现增高趋势。在脂肪间充质干细胞中，与对照组相比，体积分数为3% O₂预处理组血管内皮生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)。在脐带间充质干细胞中，与对照组相比，体积分数为3% O₂预处理组血管内皮生长因子蛋白分泌量同样差异有非常显著性意义(P < 0.01)。在体积分数为3% O₂条件下，脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的血管内皮生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)，在体积分数为5% O₂条件下，脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的血管内皮生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)，见表1，图2A。

在低氧环境下，2种干细胞的肝细胞生长因子分泌均呈现增高趋势。在脂肪间充质干细胞中，与对照组相比，体积分数为3% O₂预处理组肝细胞生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)。在脐带间充质干细胞中，与对照组相比，体积分数为3% O₂预处理组肝细胞生长因子蛋白分泌量同样差异有非常显著性意义(P < 0.01)。在体积分数为5% O₂条件下，脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的肝细胞生长因子蛋白分泌量差异有显著性意义(P < 0.05)，见表2，图2B。

在低氧环境下，脐带间充质干细胞的神经生长因子分泌呈现增高趋势，与对照组相比，体积分数为3% O₂预处理组神经生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)。在体积分数为3% O₂条件下，脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的神经生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)，在体积分数为5% O₂条件下，脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的神经生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)，见表3，图2C。

在低氧环境下，脐带间充质干细胞的角质细胞生长因子分泌呈现增高趋势，与对照组相比，体积分数为3% O₂预处理组角质细胞生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)。在体积分数为3% O₂条件下，脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的角质细胞生长因子蛋白分泌量差异有非常显著性意义(P < 0.01)，在体积分数为5% O₂条件下，脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的角质细胞生长因子蛋白分泌量差异有显著性意义(P < 0.05)，见表4，图2D。

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引言

材料方法

1.1 设计 细胞学体外对比观察实验。

1.2 材料 低氧细胞培养箱(Thermo Scientific公司)；流式细胞仪(美国Becton Dickinson公司)；酶标仪(TECAN公司)；肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子的ELISA试剂盒(北京嘉美生物)；单克隆抗体PE-CD31、PE-CD45、PE-CD54、PE-CD73、PE-CD90、PE-CD105、PE-HLA-DR、PE-IgG1(美国BD Biosciences公司)。

1.3 实验方法

1.3.1 脂肪间充质干细胞的分离与培养 患者知情同意后，经吸脂术获取脂肪组织并剪除组织中明显的血管。用含有2 mL双抗(100 U/mL青霉素，1 g/mL链霉素)的200 mL D-Hank’s清洗组织两三次后剪碎。将剪碎的组织通过150目尼龙筛网过滤，用含有DNase Ⅰ(40 U/50 mL)和250 mg/L两性霉素的D-Hank’s冲洗滤网上的组织。将组织加入D-Hank’s中，并以1 500 r/min离心5 min，将上清转移至离心管中，加入含有0.5%胶原酶Ⅰ的等体积D-Hank’s，在37 ℃恒温振荡器上振荡约75 min后，以1 800 r/min离心5 min，弃上清，加入含有体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养基，调整每个T75 cm²培养瓶中的细胞数约为2×10⁶，置入37 ℃，体积分数为5% CO₂孵箱中培养，约24 h后，将未贴壁的细胞移除，7-10 d后瓶中细胞增殖并铺满瓶底，待融合率达到80%，以0.25%胰蛋白酶-0.01%EDTA消化，所得细胞为原代细胞，继续培养，每3 d换液1次，当细胞融合率达80%时，用0.25%胰蛋白酶消化、传代。

1.3.2 脐带间充质干细胞的分离与培养 脐带来源于行剖腹产术的健康初产妇，经产妇及家属同意，在手术室无菌条件下采集脐带，置于含生理盐水的无菌瓶中。清洗剪碎脐带的方法同脂肪，用200目滤网过滤脐带组织，获得直径约1 mm的脐带组织块，经含有双抗的D-Hank’s清洗后，将组织块接种在T75 cm²培养瓶，放置于恒温培养箱内静置2 h，待组织块贴壁比较牢固后，添加含体积分数为10%胎牛血清、100 U/mL双抗、1%谷氨酰胺与10 μg/L表皮生长因子的DMEM/F12完全培养液，置于恒温培养箱内继续培养，5 d后贴壁细胞铺满约80%，以0.25%胰蛋白酶-0.01%EDTA消化，所得细胞为原代细胞。

1.3.3 干细胞免疫表型鉴定 收集生长状态良好的脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞，经胰酶消化后，用含0.5% BSA的PBS冲洗。将细胞悬液加入8个1.5 mL的EP管中，每管待测细胞数≥10⁵。在EP管中分别加入一抗CD34，CD45，CD54，CD71，CD73，CD90，CD105和HLA-DR，以及IgG-PE的同型对照抗体各4 μL，充分混匀，4 ℃避光孵育30 min，2 000 r/min离心1 min，弃上清，用1 mL PBS洗涤1次，弃上清，40 g/L多聚甲醛400 μL重悬，移至流式上样管，上机检测。

1.3.4 实验分组及低氧处理 将2种干细胞传代至第4代，使细胞融合达50%，更换培养基，分别按以下分组调整氧体积分数：体积分数为3% O₂预处理组(体积分数为3% O₂，体积分数为5% CO₂，体积分数为92% N₂)，体积分数为5% O₂预处理组(体积分数为5% O₂，体积分数为5% CO₂，体积分数为90% N₂)组，对照组(体积分数为5% CO₂，体积分数为95%空气)。在上述氧环境中培养24 h。

1.3.5 酶联免疫吸附法检测肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子水平 经低氧环境培养24 h后，收集各组细胞上清液备用。参照试剂盒说明操作，试剂盒中的96孔酶标孔板已被肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子多抗包被，将酶标板置于4 ℃冰箱内过夜，PBS洗3次；每孔加入1%BSA 200 μL，37 ℃ 1 h，PBS洗3次；每孔加入100 μL以上处理的待测样本，4 ℃过夜，PBS冲洗3次；每孔加入100 μL小鼠抗人肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子单抗(用1%BSA的PBS稀释成4 mg/L)，37 ℃ 1 h，PBS洗3次；每孔加入OPD底物液100 μL，室温10-15 min；每孔加入1 mol/L H₂SO₄ 50 μL终止反应；在450 nm处测定吸光度值。根据标准曲线计算肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子水平。

1.4 主要观察指标 脂肪间充质干细胞与脐带间充质干细胞的形态、免疫表型和肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子蛋白分泌量。

1.5 统计学分析 应用SPSS 19.0统计软件进行统计处理。计量数据以x(_)±s表示，同一氧体积分数下2种干细胞分泌肝细胞生长因子、血管内皮生长因子、神经生长因子、角质细胞生长因子水平的比较用t 检验，同一种细胞不同氧体积分数组间若方差齐则采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，组间两两比较采用LSD法。P < 0.05为差异有显著性意义，P < 0.01为差异有非常显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

近年来尽管药物、介入治疗、外科手术和器官移植等都取得了重大进展，受损心肌的恢复和再生仍然是一个巨大的挑战。干细胞治疗受损心肌仍然吸引着许多学者的兴趣，许多研究证实了干细胞移植治疗心肌梗死仍然是一项非常有潜力的治疗方式^[8-10]，这一治疗方式的作用机制尚不完全明确，近年来旁分泌效应是干细胞治疗疾病的主要机制得到人们的共识。Bourlier等^[11]发现，在低氧条件下(体积分数为1% O₂)，血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、LYVE-1等成血管因子基因表达量增高。另外，抗炎因子白细胞介素1、白细胞介素6和白细胞介素10的基因表达在低氧条件下也得到上调^[11-12]。因此，低氧条件下培养干细胞可明显提高各种细胞因子的表达，对促进组织血管再生、抑制炎症反应都有明显效果。实验通过对比低氧条件下脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞的细胞因子表达与分泌，再次证实低氧培养可以提高干细胞的旁分泌效应。

目前以骨髓间充质干细胞为主的研究都证实干细胞移植治疗心肌梗死的有效性，但骨髓标本的获取是一个痛苦、有创伤、易污染的过程，获取所需的骨髓有一定的困难。与骨髓间充质干细胞相比，皮下脂肪含量十分丰富，提取方便，脂肪间充质干细胞可以分泌具有生物活性的血管内皮生长因子、肝细胞生长因子等多种促进血管新生的因子^[13]。Cai等^[14]研究表明脂肪间充质干细胞能够分泌碱性成纤维细胞生长因子来维持体外的自我更新能力。人脐带间充质干细胞的原料来源于医学废弃物，没有伦理和法律的限制，不会给供者带来痛苦，能够在体外相对容易的扩增出足够数量的干细胞，更低的免疫原性适合同种异体移植，这些特点使其成为最近研宄的热门^[15-16]。实验初步比较了脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞在旁分泌各种细胞因子能力上的差异。

血管内皮生长因子是目前为止在促血管再生方面研究最多的一种细胞因子。血管内皮生长因子能提高血管通透性，从而促进纤维蛋白原和其他血浆蛋白外渗，有利于新生毛细血管网的形成。血管内皮生长因子通过诱导基质蛋白酶的表达诱导内皮细胞迁移。血管内皮生长因子作为促血管再生非常重要的细胞因子，能高度特异地作用于血管内皮细胞的有丝分裂原，能促使动静脉和淋巴管的内皮细胞分裂增生，但对其他细胞没有促有丝分裂作用^[17]。Kalka等^[18]研究证实血管内皮生长因子对动员内皮祖细胞，促进缺血心肌的再血管化有重要作用。Guzman等^[19]研究证实外源性血管内皮生长因子对缺血再灌注后的心功能恢复有益。Markel等^[20]通过siRNA技术干扰成熟骨髓间充质干细胞血管内皮生长因子表达不利于干细胞移植治疗心肌缺血心脏收缩功能的恢复。Scalia等^[21]研究表明血管内皮生长因子可以通过长期抑制白细胞黏附从而抑制慢性炎症反应。

肝细胞生长因子的作用较广泛，对于各种组织和细胞都具有调控作用，它的受体是酪氨酸激酶型受体，且具有高亲和力。细胞膜上的c-Met与HGF结合，将信号传入细胞内，通过作用其下游信号传导通路而产生相关的效应，与细胞的生长、分化、血管生成等有十分紧密的关系^[22]。Cai等^[14]研究证实抑制肝细胞生长因子表达后将损害脂肪间充质干细胞促进缺血组织进行血运重建的能力。

神经生长因子不仅对神经系统具有重要的神经元营养和促神经突起生长的生物效应，在非神经系统中也具有调节免疫，促进损伤修复的作用。在炎性部位，神经生长因子的浓度增高，神经生长因子与TrkA结合，抑制下游TLRS信号介导的炎性反应。神经生长因子能够减少促炎因子如白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素8的产生，增加抗炎因子的释放，以发挥抗炎作用^[23]。神经生长因子有细胞趋化作用，将其应用于烧伤创面后，上皮增生活跃，真皮层有核细胞数明显增多，并使免疫细胞趋化，释放生长因子和胶原酶等基质蛋白酶，帮助清除损伤创面变性坏死的细胞及细胞外基质，有益于新生上皮细胞增殖、爬行，加快创面的愈合^[24-25]。同时，神经生长因子能激活巨噬细胞清除坏死组织细胞和不良的细胞外基质，为创面修复提供了有利环境^[26]。

角质细胞生长因子通过旁分泌作用于上皮细胞，经 MAPK信号途径引起一系列的级联反应，发挥生物学效应^[27]。角质细胞生长因子能够促进皮肤、肺、肝和胃肠等器官细胞的增殖。角质细胞生长因子通过诱导上皮细胞增殖，加快真皮和表皮再生，新生血管形成，促进角质化细胞从伤口边缘移行至基质，促进皮肤及角膜损伤的修复^[28]。动物实验发现，角质细胞生长因子可刺激小鼠气管引起显著的支气管和肺泡上皮细胞的增生，在两三天细胞增殖达到高峰。同时，角质细胞生长因子可减少肝星状细胞激活，抑制肝细胞纤维化、坏死，明显提高肝细胞存活和增殖^[29]。

综上所述，低氧条件下脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞旁分泌各种细胞因子的能力均有所提高，2种干细胞分泌细胞因子的水平又有所差异，其中脂肪间充质干细胞分泌促血管再生细胞因子血管内皮生长因子的量明显多于脐带间充质干细胞，初步认为脂肪间充质干细胞较脐带间充质干细胞更适合心肌梗死的干细胞移植治疗。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

不同氧体积分数下脂肪间充质干细胞和脐带间充质干细胞的旁分泌能力

Paracrine abilities of adipose-derived mesenchymal stem cells and umbilical cord mesenchymal stem cells under different oxygen concentrations

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