中国组织工程研究 ›› 2010, Vol. 14 ›› Issue (10): 1791-1794.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.10.016
胡建新,孙兆林,何 坚,梁韶峰,张 勇,谭宗建,袁 军
Hu Jian-xin, Sun Zhao-lin, He Jian, Liang Shao-feng, Zhang Yong, Tan Zong-jian, Yuan Jun
摘要:
背景:维生素A在体内对精原干细胞生长具有重要作用,目前还没有发现在体外培养过程中能够很好促进精原干细胞生长与分化的诱导物质。
目的:探讨维生素A对体外培养小鼠精原干细胞生长增殖的影响。
方法:无菌收集5~7 d龄昆明雄性小鼠双侧睾丸,采用差速贴壁联合非连续性Percoll密度梯度离心法分离纯化精原干细胞。无菌取出12~15 d龄昆明雄性小鼠双侧睾丸,酶消化法分离纯化Sertoli细胞,贴壁并极化后作为饲养层,将精原干细胞接种在单层Sertoli细胞上。设立2组,实验组向DMEM/F12培养液中加入1 g/L维生素A,对照组不添加维生素A。采用酶联仪测定精原干细胞生长增殖情况,流式细胞仪检测精原干细胞生长周期。
结果与结论:共培养6,9,12,15 d时,实验组精原干细胞吸光度值明显高于对照组(P < 0.05或0.01)。随共培养时间的延长,实验组精原干细胞S期染色体含量逐渐增多,然后又逐渐下降,开始另一个分裂周期;与实验组比较,对照组精原干细胞S期染色体含量增长缓慢(P < 0.05)。小鼠精原干细胞在体外培养过程中,维生素A可促进其增殖分化。
中图分类号: