氧化修饰高密度脂蛋白激活活性氧启动p38信号促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡

doi:10.12307/2024.168

中国组织工程研究 ›› 2024, Vol. 28 ›› Issue (19): 3055-3060.doi: 10.12307/2024.168

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氧化修饰高密度脂蛋白激活活性氧启动p38信号促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡

郭琴，吴敏敏，陶莹

广东药科大学附属第一医院/第一临床医学院妇产科，广东省广州市 510080

收稿日期:2023-03-25 接受日期:2023-06-01 出版日期:2024-07-08 发布日期:2023-09-26
通讯作者: 陶莹，硕士，主任医师，广东药科大学附属第一医院/第一临床医学院妇产科，广东省广州市 510080
作者简介:郭琴，女，1984年生，湖南省株洲市人，汉族，2018年广州医科大学毕业，硕士，副主任医师，主要从事妇科肿瘤研究。
基金资助:
广东省医学科学技术研究基金项目(A2019364)，项目负责人：郭琴

Oxidized high-density lipoprotein promotes rat ovarian granulosa cell apoptosis through reactive oxygen species-initiated p38 signaling pathway

Guo Qin, Wu Minmin, Tao Ying

Department of Obstetrics and Gynecology, The First Affiliated Hospital/The First Clinical Medicine School of Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China

Received:2023-03-25 Accepted:2023-06-01 Online:2024-07-08 Published:2023-09-26
Contact: Tao Ying, Master, Chief physician, Department of Obstetrics and Gynecology, The First Affiliated Hospital/The First Clinical Medicine School of Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China
About author:Guo Qin, Master, Associate chief physician, Department of Obstetrics and Gynecology, The First Affiliated Hospital/The First Clinical Medicine School of Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China
Supported by:
Guangdong Medical Science and Technology Research Fund Project, No. A2019364 (to GQ)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

多囊卵巢综合征：育龄期女性常见的生殖功能障碍和内分泌代谢紊乱性疾病，是以稀发排卵、高雄激素表现以及卵巢多囊样改变等生殖障碍并伴有内分泌异常、代谢紊乱甚至合并一些精神问题为特征的一组临床综合征。
卵泡闭锁：指卵泡未完全发育成熟或未排卵而与卵通过细胞凋亡机制进入自行退化的过程。

背景：多囊卵巢综合征患者体内高密度脂蛋白发生了部分氧化修饰，而氧化修饰高密度脂蛋白与排卵障碍的关系及其机制尚不清楚。

目的：探讨氧化修饰高密度脂蛋白对卵巢颗粒细胞凋亡的影响，并分析其可能的作用机制。
方法：构建多囊卵巢综合征大鼠模型，取心脏血并分离血清，进一步分离高密度脂蛋白，采用高密度脂蛋白炎症指数、丙二醛水平和脂蛋白琼脂糖凝胶电泳法检验其氧化程度。分离正常大鼠卵巢颗粒细胞，分别给予模型大鼠血清分离的高密度脂蛋白和氧化修饰高密度脂蛋白处理，CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，H2DCF-DA染色检测活性氧生成水平，Western blot检测p38信号活性。卵巢颗粒细胞分别给予活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和四甲基哌啶(Tempol)和p38抑制剂SB203580预处理后，再给予氧化修饰高密度脂蛋白处理，然后检测细胞凋亡、活性氧生成和p38信号活性。

结果与结论：多囊卵巢综合征模型大鼠血清中高密度脂蛋白部分发生氧化修饰。模型大鼠血清分离的高密度脂蛋白和氧化修饰高密度脂蛋白抑制卵巢颗粒细胞活力和促进细胞凋亡(均P < 0.05)，二者能促进大鼠卵巢颗粒细胞活性氧生成和提高p38活性(均P < 0.05)。NAC、Tempol和SB203580均能逆转氧化修饰高密度脂蛋白诱导的卵巢颗粒细胞凋亡(均P < 0.05)；Tempol、NAC能抑制氧化修饰高密度脂蛋白诱导的p38活性(均P < 0.05)；SB203580对活性氧的生成没有调节作用(P > 0.05)。结果表明：多囊卵巢综合征能促使高密度脂蛋白发生部分氧化修饰，氧化修饰高密度脂蛋白能通过激活活性氧-p38信号通路促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡。

https://orcid.org/0000-0003-4655-3869 (郭琴)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 多囊卵巢综合征, 氧化修饰高密度脂蛋白, 卵巢颗粒细胞, 凋亡, 活性氧, p38

Abstract: BACKGROUND: Oxidative modification of high-density lipoprotein occurs in patients with polycystic ovary syndrome. However, the relationship between oxidized high-density lipoprotein and ovulation dysfunction and its mechanism are unknown.
OBJECTIVE: To investigate the effect and potential mechanism of oxidized high-density lipoprotein on ovarian granulosa cell apoptosis.
METHODS: Polycystic ovary syndrome rat model was established, then the high-density lipoprotein was harvested from the rat serum of heart blood. The degree of oxidation of the high-density lipoprotein was detected by high-density lipoprotein inflammation index assay, malondialdehyde assay and lipoprotein agarose gel electrophoresis assay. The normal rat ovarian granulosa cells were isolated and treated with high-density lipoprotein and oxidized high-density lipoprotein isolated from the model rat serum. Cell viability was detected by CCK-8 assay. Cell apoptosis was detected by flow cytometry. The generation of reactive oxygen species was detected by H2DCF-DA staining. The p38 signaling activity was detected by western blot assay. Ovarian granulosa cells were pretreated with reactive oxygen species inhibitors N-acetylcysteine, tetramethylpiperidine (Tempol) and p38 inhibitor SB203580, and then treated with oxidized high-density lipoprotein. Finally, cell apoptosis, reactive oxygen species production and p38 signaling activity were detected.
RESULTS AND CONCLUSION: A portion of the high-density lipoprotein from the serum of polycystic ovary syndrome model rats affected oxidative modification. High-density lipoprotein and oxidized high-density lipoprotein isolated from the model rat serum inhibited granulosa cell viability and promoted apoptosis (all P < 0.05). They promoted rat granulosa cell reactive oxygen species production and p38 activation (all P < 0.05). N-acetylcysteine, Tempol and SB203580 reversed oxidized high-density lipoprotein induced granulosa cell apoptosis (all P < 0.05). N-acetylcysteine and Tempol suppressed oxidized high-density lipoprotein-induced p38 activation (all P < 0.05). SB203580 did not have a regulatory effect on reactive oxygen species production (P > 0.05). In summary, polycystic ovary syndrome can promote partial oxidative modification of high-density lipoprotein. The oxidized high-density lipoprotein promotes rat granulosa cell apoptosis by the activation of the reactive oxygen species-initiated p38 signaling pathway.

Key words: polycystic ovary syndrome, oxidized high-density lipoprotein, granulosa cell, apoptosis, reactive oxygen species, p38

中图分类号:

郭琴, 吴敏敏, 陶莹. 氧化修饰高密度脂蛋白激活活性氧启动p38信号促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(19): 3055-3060.

Guo Qin, Wu Minmin, Tao Ying. Oxidized high-density lipoprotein promotes rat ovarian granulosa cell apoptosis through reactive oxygen species-initiated p38 signaling pathway[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2024, 28(19): 3055-3060.

图/表（结果） 5

2.1 PCOS大鼠血清中部分HDL发生氧化修饰为验证PCOS大鼠血清中HDL是否发生氧化修饰，采用差速离心分离血清中HDL，然后用HDL琼脂糖凝胶电泳检测迁移印迹，实验发现模型组大鼠血清HDL在HDL和ox-HDL 2个迁移部位均有印迹，提示PCOS大鼠血清中的部分HDL发生氧化修饰，见图1A。用丙二醛活性试剂盒检测对照组和模型组大鼠血清中HDL的氧化程度，结果见图1B，与对照组相比，模型组血清来源HDL的丙二醛活性明显增高(P < 0.05)，但低于阳性对照ox-HDL的丙二醛活性(P < 0.05)，说明PCOS大鼠血清中的部分HDL发生氧化修饰。HDL炎症指数检测结果显示，对照组血清来源HDL、模型组血清来源HDL和阳性对照ox-HDL的HDL炎症指数分别为0.78±0.08，1.46±0.18和2.32±0.15，见图1C，说明PCOS大鼠血清中的HDL炎症指数> 1，代表PCOS大鼠血清中HDL发生氧化修饰。

2.2 ox-HDL以及PCOS大鼠血清来源HDL对卵巢颗粒细胞活力的影响为验证ox-HDL是否对卵巢颗粒细胞活力产生影响，首先采用CCK-8法确定ox-HDL对卵巢颗粒细胞活力影响，见图2A，卵巢颗粒细胞经不同质量浓度的ox-HDL处理24 h后，细胞活力随ox-HDL质量浓度的增加而降低(P < 0.05)，其中80，120 μg/mL ox-HDL均能显著抑制细胞活力，且二者抑制效果相比无统计学差异，选择终质量浓度为80 μg/mL的 ox-HDL作为后续实验条件。进一步检测80 μg/mL对照组血清来源HDL、模型组血清来源HDL以及阳性对照ox-HDL对卵巢颗粒细胞活力的影响，发现模型组血清来源HDL和ox-HDL能抑制细胞活力(P < 0.05)，见图2B。

2.3 ox-HDL以及PCOS大鼠血清来源HDL对卵巢颗粒细胞凋亡的影响流式细胞术Annexin V/PI 双染法检测对照组和模型组血清来源HDL以及阳性对照ox-HDL对卵巢颗粒细胞凋亡的影响，见图3A，B，相比于空白对照组，对照组血清来源HDL不影响细胞凋亡，而模型组血清来源HDL和阳性对照ox-HDL均能显著促进细胞凋亡(P < 0.05)。进一步采用Western blot分析其cleaved caspase-3表达，发现模型组血清来源HDL和阳性对照ox-HDL均能显著促进 caspase-3切割(P < 0.05)，见图3C，D。

2.4 ox-HDL以及PCOS大鼠血清来源HDL对大鼠卵巢颗粒细胞活性氧生成和p38信号活性的影响为研究对照组血清来源HDL、模型组血清来源HDL以及阳性对照ox-HDL对活性氧生成和p38信号通路影响，实验选择超氧化物染料探针H2DCF-DA检测活性氧的生成以及Western blot检测总p38和p-p38的表达，见图4A-D。相对于空白对照组，对照组血清来源HDL不影响活性氧生成以及总p38及p-p38表达，而模型组血清来源HDL和阳性对照ox-HDL均能促进活性氧生成和p-p38表达(P < 0.05)，但不影响总p38表达。为进一步明确ox-HDL通过活性氧和p38通路激活来诱导卵巢颗粒细胞凋亡，采用活性氧抑制剂Tempol、NAC或p-p38抑制剂SB203580分别预孵育卵巢颗粒细胞30 min，然后与ox-HDL共孵育24 h，采用流式细胞AnnexinV/PI 双染法检测细胞凋亡，见图4E，F，结果显示活性氧抑制剂Tempol、NAC或p-p38 抑制剂SB203580均能部分逆转ox-HDL诱导的卵巢颗粒细胞凋亡(P < 0.05)。

2.5 活性氧激活信号在ox-HDL诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡中是p38上游信号通路为验证在ox-HDL诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡实验中活性氧信号的激活是否早于p38信号激活，实验选择活性氧抑制剂Tempol、NAC预孵育大鼠卵巢颗粒细胞30 min，然后与ox-HDL共孵育24 h，Western blot检测p-p38的表达，见图5A，B，结果显示，活性氧抑制剂Tempol、NAC均能显著抑制ox-HDL诱导的大鼠卵巢颗粒细胞p-p38表达(P < 0.05)，不影响总p38表达。而选择p-p38抑制剂SB203580预孵育大鼠卵巢颗粒细胞30 min，然后与ox-HDL共孵育24 h，H2DCF-DA染色检测活性氧的生成，发现p-p38抑制剂SB203580并不能影响ox-HDL诱导的大鼠卵巢颗粒细胞活性氧生成，见图5C，D。以上结果提示，在ox-HDL诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡实验中，活性氧是p38的上游信号。

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引言

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验和随机对照细胞学实验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用Bonferroni检验。
1.2 时间及地点实验于2020年1月至2021年3月在广东药科大学附属第一医院分子生物学实验室和中心实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 8周龄健康雌性SD大鼠20只，体质量190-230 g，购自广州中医药大学实验动物中心[SCXK(粤)2019-0047]，饲养于广州医科大学动物房[SYXK(粤)2020-0227]。实验方案经广东药科大学附属第一医院动物实验伦理委员会批准，审批号为医伦审[2018]第(82)号。
1.3.2 实验试剂和药物 ox-HDL购于上海抚生实业有限公司；胎牛血清、DMEM/F12培养基购于美国Gibco公司；CCK-8细胞活力试剂盒购于广州亚因生物科技有限公司；丙二醛检测试剂盒、FITC-Annexin V/PI凋亡检测试剂盒购于南京凯基公司；p-p38抑制剂SB203580、活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)、四甲基哌啶(Tempol)购于美国Sigma公司；H2DCF-DA试剂购于美国Invitrogen公司；caspase-3、cleaved caspase-3、p38、p-p38及β-actin抗体购于美国CST公司；HRP标记IgG(H+L)二抗购于江苏碧云天生物研究所；羧甲基纤维素购于上海生工生物工程有限公司；来曲唑和孕马血清促性腺激素购于北京百奥莱博科技有限公司。
1.4 实验方法
1.4.1 PCOS大鼠模型的建立与血清提取将20只SD大鼠随机分为对照组和模型组，每组10只。模型组大鼠给予0.5 mL溶于1%羧甲基纤维素的来曲唑[1 mg/(kg·d)]溶液灌胃，对照组给予0.5 mL 1%羧甲基纤维素溶液灌胃，连续灌胃21 d[12]。从用药第10天起，每日采用阴道涂片观察两组大鼠细胞形态，监测动情周期变化[10]，对照组有正常动情周期和排卵；模型组动情周期失常且无排卵，提示模型构建成功。大鼠最后一次灌胃后禁食12 h，腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉，迅速抽取心脏血，1 500×g低温离心15 min后收集血清。
1.4.2 琼脂糖凝胶电泳将对照组和模型组大鼠的血清按照文献[13]所述的差速离心法分离出HDL。分别取对照组HDL、模型组HDL以及ox-HDL各50 μg与0.5%苏丹黑溶液在EP管中37 ℃孵育30 min，1 500×g离心5 min，去除多余染料沉渣，然后100 V电压进行0.8%琼脂糖凝胶电泳45 min，拍照，观察对照组HDL、模型组HDL和ox-HDL标准品的迁移印迹，并根据迁移印迹判断模型组提取的HDL是否发生了部分氧化修饰。
1.4.3 丙二醛水平测定按照硫代巴比妥酸法检测对照组HDL、模型组HDL以及ox-HDL的丙二醛水平。按丙二醛测定试剂盒说明书操作，分别将对照组血清来源HDL、模型组血清来源HDL以及ox-HDL各50 μg与100 μL 硫代巴比妥酸溶液在100 ℃条件下反应30 min，11 000×g离心10 min，各取100 μL上清液加入96孔板，酶标仪在530 nm处检测吸光度值。
1.4.4 HDL炎症指数检测参照文献[14]测定HDL炎症指数方法进行操作。步骤简述如下：各取90 μL 对照组HDL、模型组HDL和ox-HDL，用PBS调整质量浓度为10 μg/mL，加至黑色聚苯乙烯96孔板，每组3个复孔，再分别加入10 μL PEIPC溶液(质量浓度 50 μg/mL)混匀，另设空白对照孔(100 μL PEIPC)，在37 ℃孵育1 h后，加入10 μL H2DCF-DA试剂，37 ℃孵育1 h，用荧光酶标仪(激发波长488 nm，发射波长530 nm)自带软件输出各孔吸光度值。HDL炎症指数=各实验组吸光度值/空白对照吸光度值，HDL炎症指数< 1代表HDL具有抗氧化作用；HDL炎症指数> 1代表HDL发生氧化修饰。
1.4.5 大鼠卵巢颗粒细胞的分离与培养对照组大鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素(50 IU/只)，48 h后将大鼠麻醉，置于超净工作台，摘取双侧卵巢，并去除卵巢表面包膜和周围脂肪组织，无菌生理盐水清洗后将其放入DMEM/F12培养基中。体视显微镜下刺破卵泡，收集颗粒细胞，制成5×108 L-1的细胞悬液接种于培养皿中培养过夜，然后3 d换液1次。
1.4.6 CCK-8法测定细胞活力首先选择不同质量浓度(终质量浓度0，40，80，120 µg/mL)的ox-HDL分别处理大鼠卵巢颗粒细胞24 h，CCK-8法筛选ox-HDL对大鼠卵巢颗粒细胞活力有影响的最佳质量浓度。然后选择80 µg/mL上述对照组血清HDL、模型组血清HDL和ox-HDL分别处理大鼠卵巢颗粒细胞24 h，CCK-8法检测细胞活力变化。按照CCK-8细胞活力试剂盒说明书进行操作，取大鼠卵巢颗粒细胞以2×107 L-1浓度接种于96孔板中，每孔100 µL，细胞经过相应处理后，每孔加入10 μL CCK-8试剂，37 ℃孵育2 h，酶标仪检测450 nm波长处吸光度值。
1.4.7 活性氧生成检测按照活性氧试剂盒说明书进行操作，细胞以2×107 L-1浓度接种于黑色聚苯乙烯96孔板，每孔100 µL待细胞贴壁后，分为空白对照组、对照血清HDL组、模型血清HDL组和ox-HDL组。空白对照组细胞不做任何处理；对照血清HDL组细胞给予终质量浓度为80 µg/mL来自对照组大鼠血清分离的HDL处理；模型血清HDL组细胞给予终质量浓度为80 µg/mL来自模型组大鼠血清分离的HDL处理；ox-HDL组细胞给予终质量浓度为80 µg/mL ox-HDL处理，各组细胞在37 ℃孵箱中培养24 h，40 g/L多聚甲醛固定30 min，PBS洗2次；滴加超氧化物染料探针H2DCF-DA(1∶100稀释)，37 ℃孵育1.5 h，PBS洗3次，封固，荧光显微镜下观察并拍照，用Image J软件检测荧光强度值，计算活性氧生成情况。活性氧生成(%)=各实验组荧光强度值/对照HDL组荧光强度值×100%。
1.4.8 Annexin V-FITC /PI染色大鼠卵巢颗粒细胞以2×105个/孔接种于6孔板，待细胞贴壁后，按照1.4.7方法对细胞进行处理，处理结束后按说明书步骤离心收集细胞，然后向细胞中加入500 μL binding buffer重悬，先后加入5 µL annexin V-FITC及碘化丙啶染液孵育10 min，流式细胞仪读取激发波长488 nm和发射波长530 nm处的荧光强度，并根据流式细胞仪自带软件分析其凋亡率。
1.4.9 功能修复实验收集对数期大鼠卵巢颗粒细胞并以2×105个/孔接种于6孔板，分为对照组、10 mmol/L Tempol预处理组、10 mmol/L NAC预处理组、10 mmol/L SB203580预处理组和等体积溶媒对照(Vehicle，5 µL二甲基亚砜)预处理组。待细胞贴壁后，各组分别采用上述试剂预处理卵巢颗粒细胞30 min，再采用80 µg/mL ox-HDL在37 ℃孵箱孵育24 h，然后检测活性氧生成和细胞凋亡率。
1.4.10 Western blot测定蛋白表达提取1.4.7和1.4.9实验的各组细胞的蛋白，蛋白定量后进行SDS-PAGE电泳转印，用5%脱脂牛奶封闭后，加入一抗caspase-3(1∶5 000稀释)、cleaved caspase-3(1∶1 000稀释)、p-p38(1∶1 000稀释)、p38(1∶2 500稀释)及β-actin(1∶8 000稀释)室温孵育1.5 h，TBST洗5 min×3次；加1∶1 000比例的HRP标记羊抗兔二抗，室温孵育1 h；TBST洗膜后，化学发光法显像。以β-actin为内参，将各目的条带吸光度值进行量化分析。
1.5 主要观察指标 ①PCOS大鼠血清中HDL是否发生氧化修饰；②PCOS大鼠血清HDL和ox-HDL对卵巢颗粒细胞活性、凋亡、活性氧生成以及p38活性的影响；③卵巢颗粒细胞分别给予活性氧抑制剂和p38抑制剂预处理后，观察是否能影响ox-HDL诱导的细胞凋亡、活性氧生成和p38活性。
1.6 统计学分析结果以x±s表示，用SPSS 19.0统计学软件进行分析，多组间比较采用方差分析，各组均数间的两两比较用Bonferroni检验，P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

PCOS是女性常见的内分泌代谢紊乱性疾病。目前，PCOS的发病机制尚不清楚，但各种原因导致的卵巢卵母细胞或颗粒细胞的过度损伤则会引发卵泡生长异常造成卵泡过度闭锁进而导致PCOS不排卵[10，14-16]。正常状态下，颗粒细胞与卵泡膜细胞共同完成卵巢内激素的合成和分泌，介导卵泡的生长、发育、闭锁和排卵，而外来因素导致其凋亡可能会引起卵泡生长发育异常和卵泡的闭锁，尤其在卵泡发育后期[17-19]。近来研究发现PCOS体内存在氧化应激和脂代谢异常，且氧化应激和脂代谢异常进一步促进PCOS发展[9，20]。ZHANG等[9]发现PCOS患者体内HDL结构和功能发生改变，能加重PCOS氧化应激和慢性炎症。而HDL氧化修饰是否与排卵障碍相关，其相关其机制如何仍不清楚。因此该研究提取分离PCOS模型大鼠血清HDL，观察其氧化程度以及对卵巢颗粒细胞凋亡的影响，结果发现PCOS模型大鼠血清HDL的丙二醛活性明显高于对照组血清HDL；PCOS模型大鼠血清HDL的HDL炎症指数> 1，琼脂糖凝胶电泳迁移显示PCOS大鼠血清HDL在HDL和ox-HDL处均有印迹，以上结果说明，PCOS大鼠血清中HDL发生了部分氧化修饰。进一步研究发现，PCOS大鼠血清分离的HDL能抑制卵巢颗粒细胞活力并促使其凋亡。
众多研究表明，氧化应激和p38通路在卵巢颗粒细胞凋亡中发挥重大作用[21-24]。实验室前期研究也证明了营养过剩可能通过氧化途径导致卵巢颗粒细胞凋亡[10]。该研究同样发现PCOS大鼠血清HDL能促使活性氧生成和提高p38通路的活性，同时发现活性氧是p38通路上游信号。HDL颗粒中心含有大量的胆固醇酯和少量三酰甘油，表面含有磷脂、游离胆固醇、载脂蛋白A-I以及其他载脂蛋白和多种酶类[25-26]，其中对氧磷酶1具有水解多种氧化脂质的作用[27-28]；血小板活化因子乙酰水解酶能高效水解血小板活化因子及血小板活化因子类氧化磷脂[29]；载脂蛋白A-I能够高效结合、转运低密度脂蛋白和外周组织细胞中的氧化脂质，抑制低密度脂蛋白的进一步氧化和炎症反应[30-31]。而PCOS发生后可能导致HDL的上述某些结构和功能改变，使得HDL发生氧化修饰，具体机制将深入研究。
综上，PCOS能促使HDL发生部分氧化修饰，而氧化修饰的HDL能激活活性氧-p38通路促使卵巢颗粒细胞凋亡，而PCOS促使HDL发生部分氧化修饰的具体信号通路有待进一步研究。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

氧化修饰高密度脂蛋白激活活性氧启动p38信号促使大鼠卵巢颗粒细胞凋亡

Oxidized high-density lipoprotein promotes rat ovarian granulosa cell apoptosis through reactive oxygen species-initiated p38 signaling pathway

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