2.1   肝脏类器官文献年度分布   将2002年1月至2022年11月关于肝脏类器官的文献进行统计，如图1所示，共有705篇文献发表，肝脏类器官的研究总体呈现上升趋势。2002-2014年年发文量增长不稳定，部分年份甚至出现年发文量减少的情况。2014-2018年呈迅速上升趋势，由7篇逐年增至58篇，而2018-2021年，发文量激增，由原来的58篇增至143篇(由于检索日期截止到2022-11-12，故2022年数据不完整，其发文量不具有典型性)。可见与肝脏类器官相关的文献量近年来逐年上升，表明其极具发展潜力，逐渐成为研究的热点。



2.2   肝脏类器官文献国家(地区)分布   肝脏类器官文献国家共现分析，结果如图2显示：节点表示国家或者地区，连线表示联系，节点大小与发文量呈正比。发文量前5名分别是美国(248篇)、中国(139篇)、日本(122篇)、荷兰(90篇)、德国(77篇)，见图3。中介中心性代表一个节点的影响力，中介中心性≥0.1为高中心性[10]，表示与其他节点合作频繁，影响力大。高中心性的国家包括美国(0.43)、荷兰(0.41)、意大利(0.18)、沙特阿拉伯(0.17)、瑞士(0.14)、德国(0.14)、中国(0.11)，这表明美国和荷兰2个国家的肝脏类器官研究最具影响力。







2.3   肝脏类器官文献研究机构分布   发文量作为衡量科研实力的一项重要指标，是一个科研机构实力强弱的重要外在表现。如图4所示，以已发表的文献作为参考项目，截至2022年11月共有310个机构参与了肝脏类器官的研究。根据发文量的多少进行排位，前10名机构分别是荷兰乌得勒支大学医学中心(29篇)/乌得勒支大学(23篇)、日本横滨市立大学(25篇)、英国剑桥大学(21篇)、美国辛辛那提儿童医院医学中心(20篇)、中国科学院(20篇)、美国辛辛那提大学(19篇)、日本九州大学(17篇)、荷兰鹿特丹伊拉斯姆斯大学医学中心(16篇)、中国复旦大学(16篇)。图中连线紧密，表明机构之间的合作较多。



2.4   肝脏类器官研究作者分布与作者突现分析   对数据进行作者共现分析和可视化后得到图5，大部分作者间的合作关系紧密，且其合作越频繁发文量越多。发文量前10的作者见表1，发文量最高的是CLEVERS H(34篇)，同时与其他学者合作交流最频繁的也是这位作者。另外，从前9名作者突现表(表2)中发现，尽管NAKAZAWA K持续突现的时间稍短，但是突现度最高，强度达到6.33，这表明NAKAZAWA K在肝脏类器官研究领域发展潜力大、能力强。根据核心作者最低发文量公式N=0.749×ηmax1/2(ηmax即该领域中最高产的作者发文量)[11]，ηmax=34，N≈4，筛查出核心作者人数为91人。












2.5   肝脏类器官文献共引分析   对肝脏类器官文献进行文献共引分析得到网络图谱，见图6。共引频次最高的前5篇文章分别是“Long-term culture of genome-stable bipotent stem cells from adult human liver”(92次)、“Human primary liver cancer-derived organoid cultures for disease modeling and drug screening”(75次)、“Vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant”(52次)、“Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer”(49次)、“Modeling Development and Disease with Organoids”(49次)，详见表3。说明这5篇文章的学术性高，参考性强，被广泛认可。







2.6   肝脏类器官文献期刊双图叠加分析   对肝脏类器官文献进行期刊双图叠加分析和可视化，得到图7，左侧代表该领域的施引期刊，右侧代表被引期刊，椭圆横轴长度与作者数量呈正比，而纵轴长度则与期刊刊载的文章数量呈正比，中间的引证连线将施引期刊与被引期刊建立起联系，其粗细与期刊间的知识流动频率及强度有关。图中2条显著的连线由上到下分别表示发表在Molecular(分子学)/Biology(生物学)/Immunology(免疫学)类期刊的文章多引用Molecular/Biology/Genetics(遗传学)类期刊的文献；发表在Medicine(医学)/Medical(内科)/Clinical(临床)类期刊的文章常引用Molecular/Biology/Genetics类期刊的文献。此外，肝脏类器官研究还涉及Mathematics(数学)、Physics(物理学)、Animal(动物)、Science(自然科学)等领域，表明肝脏类器官的研究与其他学科交叉融合，综合性高。



2.7   肝脏类器官文献关键词时序图分析与聚类分析   关键词是一篇文章的精髓，是对文章主旨的高度概括和凝练，其出现频次反映一个研究领域的热点与趋势。对关键词进行分析后，得到关键词时序图，见图8，节点的大小与关键词出现频次呈正比，节点越大出现的频次越多。把出现频次排在前10位的关键词进行统计，见表4。通过聚类分析，得到了Q=0.424 4，S=0.735 4的关键词聚类图，见图9(Q值与S值是衡量聚类结构是否合理的2个重要指标，Q > 0.3说明聚类结构显著，S > 0.5提示聚类结果同质性较高)[16]，表明图9的聚类结构具有合理性。聚类标签代表文章的研究主题，是根据文章的标题、摘要、关键词通过特殊的算法得到[10]。根据关键词聚类图把肝脏类器官研究分成8个聚类标签：colorectal cancer(结直肠癌)、organoids(类器官)、hepatic stellate cell(肝星状细胞)、cell culture(细胞培养)、tissue engineering(组织工程)、gene expression(基因表达) 、expression(表达)、gastrointestinal stem cell(胃肠道干细胞)。图中各关键词聚类重叠，表明各关键词联系紧密，主要的研究方向一致。综合表4、图8与图9，总结出肝脏类器官领域的主要研究热点是体外干细胞三维培养、分化及基因表达。











2.8   肝脏类器官文献关键词突现分析   对肝脏类器官文献进行关键词突现分析得到表5，其中bioartificial liver(生物型人工肝)突现强度最强，高达8.29，这表明在2002-2013年，bioartificial liver热度高，备受欢迎；而tissue engineering(组织工程)强度虽然只有3.41，但持续时间长，表明tissue engineering发展空间大，一直是该研究领域的前沿。



2.9   肝脏类器官研究领域发展趋势   关键词时区图主要是在时间维度上客观地反映肝脏类器官研究重点的演变。结合图10可以清晰地看出肝脏类器官的发展动态和热点趋势：2005年以前的研究主要集中在体外干、祖细胞的培养、增殖与分化及基因表达上，以肝脏类器官的前期研究为主；随着这些研究领域的不断成熟，学者们开始转向了对组合型人工肝和类器官的培养上，直到2009年，第一个类器官出现[17]；自2010年起，研究热点主要集中在了结肠、小肠、血管等类器官研究，2012-2013年，3D培养风靡学术界，是当时的研究热点，其中肝脏类器官于2013年被首次成功培育[18]；2014年起，多能干细胞、体外扩增和定向分化引起了科研工作者的关注；从2016年开始，学者们将肝脏类器官与药物筛选、药毒性联系起来，研究热点逐渐地偏向于药物发展等方面。根据时区图推测出今后的发展方向和研究专题主要以临床应用如再生医学、精准医学等为主。



2.10   肝脏类器官研究的发展问题、瓶颈和突破方向   肝脏类器官拥有着众多的优势，但同样也存在着许多的问题和瓶颈：①缺乏血管化结构[19]，容易导致类器官缺氧和代谢障碍，最终诱发组织坏死；②难以还原肝癌与免疫系统相互作用关系；③肝脏类器官成本较高、耗时长，这是其限制因素之一；④肝脏类器官的培育方法、质量控制以及药物筛选指标等缺乏全球性的统一标准，这是导致不同国家和机构在肝脏类器官领域出现研究差异的重要原因之一；⑤工程技术问题，现有技术培育的肝脏类器官尺寸较小，未能达到标准肝脏大小，且难以完全模拟肝脏复杂的生理结构和功能，如肿瘤类器官培养过程中缺乏基质细胞，导致肿瘤微环境无法重新建立，最终影响实际应用效果。此外，肿瘤类器官的高昂培育成本导致其无法在临床上广泛应用[20]。同时，在进入临床应用之前，安全问题、伦理关系以及法律责任等问题是肝脏类器官不容忽视的矛盾。因此，推动制定全球性统一标准，结合3D打印、微流体、基因编辑等技术来打破研究瓶颈，并且与动物模型等多种培养方式相结合以提高实验精准性[19]。最后，国家应制定相关法律法规，规范类器官的临床应用，同时加大政策支持，培养高尖人才，促进国内肝脏类器官的快速发展。

[1] LUI VC, HUI KP, BABU RO, et al. Human liver organoid derived intra-hepatic bile duct cells support SARS-CoV-2 infection and replication. Sci Rep. 2022;12(1):5375.  [2] HUCH M, GEHART H, VAN BOXTEL R, et al. Long-term culture of genome-stable bipotent stem cells from adult human liver. Cell. 2015; 160(1-2):299-312. [3] AKBARI S, SEVINÇ GG, ERSOY N, et al. Robust, Long-Term Culture of Endoderm-Derived Hepatic Organoids for Disease Modeling. Stem Cell Rep. 2019;13(4):627-641.  [4] 林丽,雷妙,林佳漫,等.肝脏类器官的研究进展及应用[J].中国科学:生命科学,2023,53(2):185-195. [5] ASRANI SK, DEVARBHAVI H, EATON J, et al. Burden of liver diseases in the world. J Hepatol. 2019;70(1):151-171.  [6] KIM J, KOO BK, KNOBLICH JA. Human organoids: model systems for human biology and medicine. Nat Rev Mol Cell Biol. 2020;21(10):571-584.  [7] 任全娥.大数据背景下的文献计量学研究进展与学科融合[J].情报理论与实践,2019,42(1):48-52.  [8] 潘颖,孙瑜峥,刘岩.科技文献阅读中语素意识研究的可视化分析[J].情报科学,2019,37(12):123-127.  [9] 史艳龙,方德宝,冉启豪,等.基于Web of Science数据库的2000-2019年结直肠癌肝转移文献计量分析[J].中国普通外科杂志, 2020,29(4):400-411.  [10] 谭令,龙霖梓,邓秘,等.抗血小板活化的文献计量学及可视化分析[J].世界科学技术-中医药现代化,2022,24(1):195-208.  [11] 陈莹,常静玲,李新龙,等.基于CiteSpace的近20年蚓激酶相关研究的文献计量学分析[J].世界科学技术-中医药现代化,2022, 24(1):388-397.  [12] BROUTIER L, MASTROGIOVANNI G, VERSTEGEN MM, et al. Human primary liver cancer-derived organoid cultures for disease modeling and drug screening. Nat Med. 2017;23(12):1424-1435. [13] TAKEBE T, SEKINE K, ENOMURA M, et al. Vascularized and functional human liver from an iPSC-derived organ bud transplant. Nature. 2013; 499(7459):481-484.  [14] BOJ SF, HWANG CI, BAKER LA, et al. Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer. Cell. 2015;160(1-2):324-338.  [15] CLEVERS H. Modeling Development and Disease with Organoids. Cell. 2016; 165(7):1586-1597.  [16] 高振,徐一喆,董竞成.基于文献计量学的中外中医药研究主题及热点比较[J].中医杂志,2022,63(13):1283-1290.  [17] SATO T, VRIES RG, SNIPPERT HJ, et al. Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche. Nature. 2009;459(7244): 262-265. [18] HUCH M, DORRELL C, BOJ SF, et al. In vitro expansion of single Lgr5+ liver stem cells induced by Wnt-driven regeneration. Nature. 2013; 494(7436): 247-250. [19] 王溢贤,朱妍静,王红阳,等.肝脏类器官研究进展与应用[J].中国细胞生物学学报,2021,43(6):1132-1141.  [20] CORRÒ C, NOVELLASDEMUNT L, LI VSW. A brief history of organoids. Am J Physiol Cell Physiol. 2020;319(1):C151-C165. [21] AKBARI S, ARSLAN N, SENTURK S, et al. Next Generation Liver Medicine Using Organoid Models. Front Cell Dev Biol. 2019;7:345.  [22] 赵梦雨,代荣阳,张钰哲.从免疫浸润角度分析肝癌患者性别和预后生存关系的差异[J].昆明理工大学学报(自然科学版),2020, 45(6):119-127.  [23] PRIOR N, INACIO P, HUCH M. Liver organoids: from basic research to therapeutic applications. Gut. 2019;68(12):2228-2237.  [24] 丁明宁,薛晓勇,李晓骄阳.肝胆类器官在中药研究中的应用进展[J].中草药,2021,52(18):5789-5795.  [25] ZHAO Y, YIN X, QIN H, et al. Two supporting factors greatly improve the efficiency of human iPSC generation. Cell Stem Cell. 2008;3(5):475-479.   [26] LIN Y, FANG ZP, LIU HJ, et al. HGF/R-spondin1 rescues liver dysfunction through the induction of Lgr5+ liver stem cells. Nat Commun. 2017; 8(1):1175.  [27] DEKKERS JF, WIEGERINCK CL, DE JONGE HR, et al. A functional CFTR assay using primary cystic fibrosis intestinal organoids. Nat Med. 2013; 19(7):939-945.  [28] 王佳慧,郭新华,郑博文,等.基于miR-125b/NLRP3信号通路探讨莪术醇抗肝纤维化的作用机制[J]. 中华中医药学刊,2022,40(11): 95-99. [29] 王挺帅,张荣臻,王明刚,等.基于Kuffer细胞NF-κB信号通路探讨解毒化瘀颗粒拮抗肝功能衰竭的作用机制[J].中华中医药杂志, 2021,36(4):1878-1883. [30] BAI Y, YANG Z, XU X, et al. Direct chemical induction of hepatocyte-like cells with capacity for liver repopulation. Hepatology. 2023;77(5): 1550-1565.

[1]	冯睿钦, 韩 娜, 张 蒙, 谷馨怡, 张丰识. 1%富血小板血浆联合骨髓间充质干细胞促进周围神经损伤的修复[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 985-992.
[2]	王 雯, 郑芃芃, 孟浩浩, 刘 浩, 袁长永. 过表达Sema3A促进牙髓干细胞和MC3T3-E1的成骨分化[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 993-999.
[3]	邱晓燕, 李碧欣, 黎敬弟, 范垂钦, 马 廉, 王鸿武. MAFA-PDX1过表达慢病毒感染人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的分化[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 1000-1006.
[4]	刘麒薇, 张俊辉, 杨 袁, 王金娟. 脐带间充质干细胞治疗多囊卵巢综合征的作用及机制[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 1015-1020.
[5]	王姗姗, 舒 晴, 田 峻. 物理因子促进干细胞的成骨分化[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 1083-1090.
[6]	潘小龙, 樊飞燕, 应春苗, 刘飞祥, 张运克. 中药抑制间充质干细胞衰老的作用及机制[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 1091-1098.
[7]	刘瀚峰, 王晶晶, 余云生. 人造外泌体治疗心肌梗死：应用现状及前景[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 1118-1123.
[8]	马树微, 何 生, 韩 冰, 张缭云. 间充质干细胞来源外泌体治疗动物急性肝衰竭的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 1137-1142.
[9]	孙宇康, 宋丽娟, 温春丽, 丁智斌, 田 昊, 马 东, 马存根, 翟晓艳. 基于Web of Science近十年干细胞治疗心肌梗死的可视化分析[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(7): 1143-1148.
[10]	张克凡, 石 辉. 细胞因子治疗骨关节炎的研究现状及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(6): 961-967.
[11]	韦沅汛, 陈 锋, 林宗汉, 张 驰, 潘成镇, 韦宗波. Notch信号通路与骨质疏松症及中医药防治[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(4): 587-593.
[12]	林 峰, 程 玲, 高 勇, 周建业, 商青青. 透明质酸水凝胶包裹骨髓间充质干细胞改善心肌梗死大鼠的心功能(Ⅲ)[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(3): 355-359.
[13]	毕玉杰, 马笃军, 彭力平, 周紫琼, 赵 静, 朱厚均, 钟秋辉, 杨玉鑫. 中医药联合医用水凝胶治疗疾病的策略及意义[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(3): 419-425.
[14]	吕默然, 许文鑫, 王 迪, 李 明. 功能性训练在医疗健康领域研究的新趋势与新动态[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(2): 302-307.
[15]	谢恩礼, 陶慧敏. 血流限制训练在临床康复医学中的应用趋势[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(2): 258-262.

类器官是体外产生的小型和简化的三维器官，由干细胞和祖细胞等发育而来，并保留了单个组织的生物学特性及真实的微观解剖结构[1]。类器官可以在长期的体外培养中保持结构稳定，经过数代后仍无明显的生理或遗传变化，继续保留着原始组织的特性[2-3]，目前类器官技术已适用于多种组织器官并被广泛应用于医学的多个领域，被《Science》杂志评为2018年年度突破[4]。肝脏是人最大的代谢器官，能够维持机体的生理稳态。近些年，社会与生活压力不断加大，肝病的发病率也随之呈现逐年上升的趋势，全世界每年约有200万人死于肝病[5]，所以，构建一种高效而优质的研究模型来进一步探明肝病的发病机制显得非常急迫，肝脏类器官技术因而应运而生。相对于传统的动物模型与二维细胞模型，类器官有着显著的优势：肝脏类器官能够模拟体内组织的细胞异质性和结构功能，稳定地保留原组织的遗传基因与细胞微环境，最大限度地复原真实的肝脏，复现体内对药物的敏感性，这是其他模型不可比拟的。同时人源性、稳定性、高效性、个体化等优势[6]，促使类器官在疾病造模、医药研究、再生医学、精准医学、基因编辑、器官发育等领域都有着广阔的临床应用前景。
文献计量学是一门用统计学与数学等计量方法，研究文献与其信息系统等知识载体的发展规律与数量关系，并探索其科学动态特征的学
科[7]。CiteSpace软件可以通过知识图谱的形式将大量文献数据信息生动地表现出来，从而寻找该研究领域发展的关键路径与节点、前沿热点与趋势[8]。该文通过CiteSpace软件对肝脏类器官研究领域的文献进行文献计量及可视化处理，总结了该领域的研究热点、最新动态及发展趋势，以便学者快速地了解该研究领域的情况。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

1.1   资料来源   目前最大可用的文献计量学数据库为Web of Science(WOS)数据库[9]。此次研究数据来源于WOS核心合集数据库，引文索引是“Science Citation Index Expanded”(扩展版科学引文索引，SCIE)，检索主题词是“liver organoid OR hepatic organoid OR hepatocellular organoid OR hepatocyte organoid OR hepatobiliary organoid OR cholangiocyte organoid OR bile duct organoid”(肝脏类器官/肝细胞类器官/肝胆类器官/胆管细胞类器官/胆管类器官)，检索时间范围是2002-01-01/2022-11-12，检索语种不限定，检索文献类型是Article(研究性论文)和Review Article(综述论文)。检索后对结果进行去重，共得到705篇文献。
1.2   方法   将上述705篇文献以纯文本文件的格式导出其全记录与引用的参考文献，应用Origin 2021、Office 2016和CiteSpace 6.1.R2软件进行文献计量与可视化分析。文献的一般信息(年发文量、国家、作者、文献和关键词)使用Origin与Office软件绘制成图表。另外将数据导入CiteSpace，设置时间分区为2002年1月至2022年11月，每2年作为一个时间切片；节点类型为每次1个相对应类型(“Country，Institution，Author，Reference，Keyword”)；关联强度为cosine；聚类方法为Log-likelihood rate (LLR算法)；其他的设置为系统默认。然后分别对国家、机构、作者、文献、关键词进行共现分析，作者与关键词进行突现分析，期刊进行双图叠加分析，关键词进行聚类分析和时区图分析。

肝脏作为人体最大的器官，具有代谢、内外分泌、产生胆汁、促进血液解毒和调节血液稳态等重要功能，随着环境和生活习惯的改变等，酒精性肝病、乙型肝炎、脂肪性肝炎、药物性肝损伤、恶性肿瘤等成为了肝脏损伤的危险因素[21]。以肝细胞癌(HCC)为例，晚期无法切除的肝细胞癌的主要治疗方案是酪氨酸激酶抑制剂瑞戈非尼与索拉菲尼，但是严重的耐药性和毒副作用导致治疗效果不佳，5年内的复发率达到70%[22]。肝脏类器官是解决该难题的一大方向，其借助体外三维培养技术，在诱导多能干细胞、胚胎干细胞或者来源于组织的干或祖细胞的基础上培养而成的细胞簇[23]，其能够模拟肝脏的损伤、修复以及被用作药物筛选、药物毒性测验等。肝脏类器官的深入研究是未来医学的必然趋势。   
3.1　结果分析  肝脏类器官研究领域近20年的发文量、被引频次、加入研究的机构和人员总体呈现上升趋势，说明该领域发展迅速，关注度也逐渐升高。在该领域中，美国的发文量最多、影响力最强，虽然投入大量的时间与精力，但是在众多研究机构中美国单个研究机构的发文量并非最高。中国发文量仅次于美国，中国科学院和复旦大学是国内发文量最多的机构。两国的机构皆与其他机构联系不够紧密。因此，建议两国及其他国家的机构消除学术壁垒，合作共赢，共同推动肝脏类器官的发展。
关键词相关分析得到肝脏类器官研究领域的热点主要集中在体外干细胞三维培养、分化及基因表达。三维培养是肝脏类器官的主要培养方法，主要包括悬浮液技术培养与气液界面技术培养两种方式。悬浮液技术培养能够避免与塑料盘直接接触，这主要是由有支架或无支架技术来实现的：①有支架技术：Matrigel是构成支架的一种理想材料，其是由Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠肉瘤细胞分泌而来的异质凝胶蛋白混合物，主要以巢蛋白、层粘连蛋白、胶原蛋白和硫酸乙酰肝素糖蛋白等黏附蛋白组成，如同细胞外环境，为细胞提供细胞外基质的信号分子和结构支持。②无支架技术：在表面张力和重力作用下悬挂于板上的特殊培养基液中培养细胞。在气液界面技术培养中，细胞最初浸泡在成纤维细胞或基质胶的基底层培养基内，随着液体的气化作用上层细胞逐渐裸露在空气中，进而发生极化和分化[20]。此外，通过观察细胞形态、检测尿素、白蛋白生成量、在培养皿上清液中加入HIV-HCV假型病毒和检测荧光素酶含量等是鉴定肝脏类器官功能的主要方法[24]。研究表明，质粒转染的绿色荧光蛋白和碱性磷酸酶染色是诱导多能干细胞分化成功与否的鉴定标准[25]，若两项指标均为阳性，则表明诱导多能干细胞成功分化。HUCH等[18]将小鼠受损肝脏中的单个Lgr5+细胞在含有R-spondin1(Wnt激动剂)的培养基中使用Matrigel进行体外三维培养，结果发现Lgr5+细胞可以发生体外克隆扩增并维持数个月，将其移植到肝损伤的小鼠体内后产生了功能性肝细胞，挽救了肝损伤小鼠的生命。相似地，LIN等[26]研究发现四氯化碳会导致纤维化和促进 Lgr5+肝干细胞增殖，当Lgr5+肝干细胞被分离出来进行体外三维培养后会发生克隆扩增形成类器官。此外，类器官体外培养后的基因表达谱变化也是研究人员的研究所向。BROUTIER等[12]通过建立肝细胞癌、胆管癌和联合肝细胞癌/胆管癌肿瘤类器官模型研究其基因表达，结果发现这些肿瘤类器官培养物保留了原始肿瘤的组织学结构、基因表达、遗传突变信息，即使在相同培养基条件下长期培养后也可以区分不同的肿瘤组织和亚型。
3.2　应用前景分析
3.2.1　替代其他模型   目前国内的肝脏研究主要依靠小鼠实验，小鼠实验可指导研究人员更直观地了解肝祖细胞的分化和肝脏的发育。但是动物肝脏造模时间与经济成本高，对技术要求严格，存在着动物个体差异、互相攻击等不确定因素，失败率高，模型不可复现，且动物模型与人类有着内在的生物学差异。近年来动物研究的伦理哲学观更是把动物研究推向了僵局。另外，二维细胞模型也是研究人员阐明细胞相互作用的常用方法，但同样也存在着许多不足，如培养皿中细胞的均匀分布和没有营养梯度导致生理相关性降低，缺乏细胞与细胞外基质的相互作用、人体内环境的影响，与人体存在较大的差异等。类器官比二维细胞模型更能模拟细胞微环境，细胞微环境会影响药物的反应性，这表明类器官模型更能代表体内组织生物学，是研究药物反应性的理想模型。据报道囊性纤维化是第一个实现类器官建模的疾病，囊性纤维化的跨膜电导调节因子基因突变损坏了胆管细胞的氯离子转运，最终导致胆管内缺乏碱化并随后阻塞[27]。研究表明，囊性纤维化类器官与毛喉素(细胞内环腺苷酸诱导剂)一起培养时在体外重现了这种疾病，从而激活了跨膜电导调节因子的功能。最近，肝脏类器官已成功用于模拟复杂的获得性肝病，包括原发性肝癌和病毒性肝炎[23]。此外，肝脏类器官也可以弥补大部分病原体不能在二维细胞模型培养的缺陷，用来研究传染性病原体感染的发生机制以及病原体与癌症的关系，探索全新高效的治疗方案，从而遏杀病原体与癌细胞，挽救健康肝组织。亦或研究新型纳米机器人，在操控员的控制下仅射杀有害病原体和癌细胞，完成任务后随胆汁排出体外。
3.2.2   药物筛选以及毒理学实验   原发性肝肿瘤类器官保留了患者肿瘤组织中的组织学结构、基因表达模式和基因改变[12]，在进行药物测试时其会以不同程度的敏感性做出反应，可构建根据患者特异性进行药物敏感性测试的平台。此外，随着中医药现代化的推进，中药在肝病研究方面越来越受重视，肝脏类器官可以为中药单体以及汤剂提供测试模型，利于更深入地研究药物首关消除以及逆转肝病的机制，更准确地评估药物对肝脏的毒性和探索杀死病原体的最佳剂量。如莪术醇治疗肝纤维化的作用与解毒化瘀颗粒治疗肝功能衰竭的作用等[28-29]，可通过肝脏类器官模型进行更深入的研究及验证，从而筛选更有效的中药及汤剂，推动精准医学的发展。
3.2.3   再生医学   目前肝脏移植是治疗肝癌终末期患者的主要手段，但是匹配肝源的短缺和终生免疫抑制等并发症导致了同种异体移植效果不佳。肝脏类器官拥有高扩增能力和遗传稳定性，使其成为解决该难题的理想目标。从患者体内取出小部分正常肝组织，分离出干细胞，植入含有信号因子的培养皿内，严格遵循类器官培养准则，培养新鲜健康的肝芽，最后培养成与患者组织结构以及遗传信息一致的正常肝脏，替换患者体内病变肝脏，挽救患者生命。最新研究发现，成纤维细胞可以通过小分子化学诱导基因编辑，形成功能性肝细胞，随后移植到肝衰竭小鼠肝脏中促使肝脏再增殖，挽救了小鼠[30]。可以合理地假设：①上述实验可以把小分子化学诱导基因编辑后得到的肝细胞植入更接近人体生物学的肝脏类器官内，进行进一步深入研究，得到更接近真实人体肝脏的数据；②对于有基因缺陷或者突变的肝脏，如罕见病等，提取干细胞并通过基因编辑改造不足的基因片段，再培养成肝脏类器官，最后进行肝脏移植，挽救患者的性命；③组建不同基因的肝脏干细胞库，进行肝脏类器官培养，供给相同或相似基因且需要肝脏移植的患者，弥补肝脏类器官培养时间长等缺点。
综上所述，该文使用CiteSpace软件对近20年WOS有关肝脏类器官的研究文献进行文献计量与可视化分析，结果直观地展示了近20年的发文量、国家和机构的分布情况、研究热点等，为学者们了解该领域的研究现状和确定研究方向提供参考。   中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

#br#

文题释义：

文献计量学：是一门用统计学与数学等计量方法，研究文献与其信息系统等知识载体的发展规律与数量关系，并探索其科学动态特征的学科。
类器官：是体外产生的小型和简化的三维器官，由干细胞和祖细胞等发育而来，并保留了单个组织的生物学特性及真实的微观解剖结构。类器官可以在长期的体外培养中保持结构稳定，经过数代后仍无明显的生理或遗传变化，继续保留着原始组织的特性。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

近年来随着肝病群体不断地壮大，构建一种高效优质的研究模型来进一步探明肝病的发病机制显得非常急迫，肝脏类器官技术因而应运而生。类器官能够模拟体内组织的细胞异质性和结构功能，稳定地保留原组织的遗传基因与细胞微环境，复现体内对药物的敏感性，这是其他模型不可比拟的。因此，肝脏类器官在医药研究、再生医学、精准医学、基因编辑、器官发育等有着广阔的临床应用前景，类器官研究已经成为国际肝病研究领域的热点。该文通过CiteSpace软件对肝脏类器官研究领域的文献进行文献计量及可视化分析，总结了该领域的研究热点及发展趋势，以便学者快速地了解该研究领域的情况，为其研究提供文献数据的支持和研究方向的参考。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

	阅读次数
	全文
	摘要