2.1   文献筛选结果   初步检出相关文献3 328篇，根据纳入和排除标准逐层筛选后，最终纳入30篇文献[4-7，10-35]。文献筛选流程及结果见图1。



2.2   纳入研究的基本特征   共纳入30篇动物实验文献，纳入的大鼠品系包括SD大鼠、Albin大鼠、Wistar大鼠和Lewis大鼠，性别雌雄不限，体质量均在220-320 g。干细胞的种类包括骨髓间充质干细胞、神经干细胞、毛囊干细胞、脐带间充质干细胞、羊膜间充质干细胞、嗅黏膜间充质干细胞、人牙髓干细胞、胎盘间充质干细胞，移植剂量均在1×105-1×106，移植途径包括静脉移植(尾静脉、阴茎静脉)、动脉移植、脑内移植。疗效指标为神经功能缺损评分、脑梗死体积分数、肿瘤坏死因子α表达水平。基本特征见表1。



2.3   偏倚风险评价结果    偏倚风险评价结果表明，仅有1篇文献采用随机数字表法描述了分配序列的产生[13]；所有研究都没有充分描述分配隐藏；所有研究均没有明确描述实验过程中动物被随机放置；仅有1篇文献描述了对研究者施盲[14]；所有研究都没有报道结果评价中随机选择动物进行测量；仅1篇文献存在动物的失访[11]，也并未说明该失访是否影响结果；仅8篇文献对结果评价者施盲[7，12-14，21，23，29，35]。虽然全部文献均无法获得研究计划书，但均清楚地报告了其研究结果，见图2。



2.4   Meta分析结果   
2.4.1   神经功能缺损评分的Meta分析结果   纳入有19篇文献[4-6， 10-11，13-20，23-26，30，34]，基于随机效应模型的Meta分析表明干细胞移植能够显著降低神经功能缺损评分[SMD= -1.70，95%CI(-2.18，-1.21)]。亚组分析结果显示：骨髓间充质干细胞-静脉移植组和骨髓间充质干细胞-动脉移植组要显著优于对照组，差异有显著性意义，且动脉移植途径的疗效更好。骨髓间充质干细胞-脑内移植组和羊膜间充质干细胞-静脉移植组与对照组比较，差异无显著性意义，见图3。



2.4.2   脑梗死体积分数的Meta分析结果   纳入有14篇文献报告了脑梗死体积分数[4，7，12，17，20-23，27，29，31-34]，基于随机效应模型的Meta分析表明，干细胞移植能够显著降低脑梗死体积分数[SMD=-6.49，95%CI(-8.87，-4.19)]，有2个研究中脑梗死体积分数与对照组比较降低[22-23]，但差异无显著性意义(P > 0.05)。亚组分析结果显示：骨髓间充质干细胞-静脉移植组要显著优于对照组，差异有显著性意义。脐带间充质干细胞-静脉移植组与对照组比较，差异无显著性意义，见图4。



2.4.3   肿瘤坏死因子α表达水平的Meta分析结果   纳入有8篇文献报告了肿瘤坏死因子α表达水平[4-5，21，24，28，30，32，35]，其中有1篇文献采用PCR技术，3篇文献采用Western blot技术，3篇文献采用ELISA技术，1篇文献同时采用PCR和Western blot技术。在采用ELISA技术中，其中又有2篇文献同时报告了2种干细胞移植途径，共11个研究。基于随机效应模型的Meta分析表明干细胞移植能够有效抑制肿瘤坏死因子α表达水平[SMD=-3.23，95%CI(-4.49，-1.96)]。有1个研究中肿瘤坏死因子α表达水平与对照组比较[35]，差异无显著性意义(P > 0.05)。亚组分析结果显示骨髓间充质干细胞-静脉移植-ELISA组和骨髓间充质干细胞-动脉移植-ELISA组显著优于对照组，差异有显著性意义，且骨髓间充质干细胞-动脉移植的疗效优于骨髓间充质干细胞-静脉移植，见图5。



2.4.4   发表偏倚的检测   该研究的3项指标均存在一定的发表偏倚。神经功能缺损评分、脑梗死体积分数、肿瘤坏死因子α表达水平发表偏倚的漏斗图，见图6。

[1] HUANG Z, GUO L, HUANG L, et al. Baicalin-loaded macrophage-derived exosomes ameliorate ischemic brain injury via the antioxidative pathway. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;126:112123. [2] BARZEGAR M, KAUR G, GAVINS FNE, et al. Potential therapeutic roles of stem cells in ischemia-reperfusion injury. Stem Cell Res. 2019;37:101421. [3] 王晓平,倪京满.脑缺血再灌注损伤的研究及药物治疗进展[J].中国新药杂志, 2016,25(6):659-663,691. [4] 郝磊,刘磊,董岸莺,等.大鼠缺血再灌注损伤脑内骨髓间充质干细胞移植抑制TNF-α表达的上调促进TGFβ1表达的上调[J].中国组织化学与细胞化学杂志, 2017,26(4):327-335. [5] 赵宇,谢鹏,朱晓峰,等.神经干细胞移植抑制缺血再灌注大鼠脑内星形胶质细胞的激活和炎症反应[J].第二军医大学学报,2010,31(6):678-681. [6] 李蒙,李传文,孙俊启,等.人脐血间充质干细胞移植对脑缺血再灌注大鼠SIRT1-P53通路的影响[J].安徽医科大学学报,2019,54(4):534-538. [7] HE H, ZENG Q, HUANG G, et al. Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation exerts neuroprotective effects following cerebral ischemia/reperfusion injury by inhibiting autophagy via the PI3K/Akt pathway. Brain Res. 2019; 1707:124-132. [8] BONCORAGLIO GB, RANIERI M, BERSANO A, et al. Stem cell transplantation for ischemic stroke. Cochrane Database Syst Rev. 2019; 5(5):CD007231. [9] HOOIJMANS CR, INTHOUT J, RITSKES-HOITINGA M, et al. Meta-analyses of animal studies: an introduction of a valuable instrument to further improve healthcare. ILAR J. 2014;55(3):418-426. [10] 黄月,许予明,宋波,等.骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响[J].郑州大学学报(医学版),2006,41(5):862-864. [11] 景文莉,闫凤霞. 经颈动脉移植骨髓间充质干细胞治疗局灶性大鼠脑缺血损伤[J].中国组织工程研究与临床康复,2007, 11(24):4747-4751. [12] TAKAHASHI K, YASUHARA T, SHINGO T, et al. Embryonic neural stem cells transplanted in middle cerebral artery occlusion model of rats demonstrated potent therapeutic effects, compared to adult neural stem cells. Brain Res. 2008;1234:172-182. [13] 王宗立,范红杰,庞超健,等.骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及survivin、caspase-3蛋白表达的影响[J].中国医科大学学报,2009, 38(11):834-837. [14] 杜志刚,伊红丽,王艳玲,等.人脂肪神经干细胞移植对大鼠脑缺血后血管新生和细胞因子的作用[J].中国组织工程研究与临床康复,2009,13(10):1823-1828. [15] 郑海洪,冯念苹,梁松岚,等.骨髓间质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注凋亡蛋白Caspase-3的影响[J].中国比较医学杂志,2009,19(4):27-30,51,封3. [16] 王娜.骨髓间充质干细胞移植及生长相关蛋白43表达在脑修复中的作用[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(40): 7474-7478. [17] 李文嫒,王莹,孙平,等.骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注损伤Livin和Caspase-3表达的影响[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2011,20(6):554-558. [18] 徐颖,凌伟华,陆士奇,等.尾静脉移植羊膜间充质干细胞治疗大鼠脑缺血再灌注损伤[J].中国组织工程研究与临床康复,2011,15(49):9198-9201. [19] DAI J, LI SQ, QIU YM, et al. Migration of neural stem cells to ischemic brain regions in ischemic stroke in rats. Neurosci Lett. 2013;552:124-128. [20] 何志旭,严虎,刘俊峰,等.骨髓间充质干细胞移植治疗缺血再灌注脑损伤[J].中华实用儿科临床杂志,2013,28(6):435-439. [21] GU N, RAO C, TIAN Y, et al. Anti-inflammatory and antiapoptotic effects of mesenchymal stem cells transplantation in rat brain with cerebral ischemia. J Stroke Cerebrovasc Dis. 2014;23(10):2598-2606. [22] LI D, ZHANG M, ZHANG Q, et al. Functional recovery after acute intravenous administration of human umbilical cord mesenchymal stem cells in rats with cerebral ischemia-reperfusion injury. Intractable Rare Dis Res. 2015;4(2):98-104. [23] TOYOSHIMA A, YASUHARA T, KAMEDA M, et al. Intra-Arterial Transplantation of Allogeneic Mesenchymal Stem Cells Mounts Neuroprotective Effects in a Transient Ischemic Stroke Model in Rats: Analyses of Therapeutic Time Window and Its Mechanisms. PLoS One. 2015;10(6): e0127302. [24] 屈新辉,王万松,吴凌峰,等.动、静脉移植骨髓间充质干细胞治疗急性期缺血再灌注大鼠模型的比较[J].中国老年学杂志,2015,35(24):6965-6969. [25] 黄春兰,唐艳,汤永红.骨髓间充质干细胞移植对缺血再灌注脑组织miR-34a、miR-21表达的影响[J].实用医学杂志, 2017,33(23):3871-3875. [26] 赵宇.尾静脉移植羊膜间充质干细胞对缺血再灌注损伤后神经功能恢复的影响[J].中国组织工程研究,2017,38(5):707-712. [27] ABD EL MOTTELEB DM, HUSSEIN S, HASAN MM, et al. Comparison between the effect of human Wharton’s jelly-derived mesenchymal stem cells and levetiracetam on brain infarcts in rats. J Cell Biochem. 2018;119(12):9790-9800. [28] NITO C, SOWA K, NAKAJIMA M, et al. Transplantation of human dental pulp stem cells ameliorates brain damage following acute cerebral ischemia. Biomed Pharmacother. 2018;108:1005-1014. [29] LIU K, GUO L, ZHOU Z, et al. Mesenchymal stem cells transfer mitochondria into cerebral microvasculature and promote recovery from ischemic stroke. Microvasc Res. 2019;123:74-80. [30] QU XH, WANG WS, LIU SM, et al. A Study on Acute Ischemia-Reperfusion Models in Rats Treated by Bone Mesenchymal Stem Cells Grafting via Arteries and Veins. J Hard Tissue Biol. 2019;28(4):323-328. [31] HE J, LIU J, HUANG Y, et al. Olfactory Mucosa Mesenchymal Stem Cells Alleviate Cerebral Ischemia/Reperfusion Injury Via Golgi Apparatus Secretory Pathway Ca2+ -ATPase Isoform1. Front Cell Dev Biol. 2020; 8:586541. [32] KIM J, SHIN K, CHA Y, et al. Neuroprotective effects of human neural stem cells over-expressing choline acetyltransferase in a middle cerebral artery occlusion model. J Chem Neuroanat. 2020;103:101730. [33] ZHANG X, TANG H, MAO S, et al. Transplanted hair follicle stem cells migrate to the penumbra and express neural markers in a rat model of cerebral ischaemia/reperfusion. Stem Cell Res Ther. 2020;11(1):413. [34] LI Y, DONG Y, RAN Y, et al. Three-dimensional cultured mesenchymal stem cells enhance repair of ischemic stroke through inhibition of microglia. Stem Cell Res Ther. 2021;12(1):358. [35] TANG W, LV X, HUANG J, et al. Neuroprotective effect of stroke pretreated MSCs against cerebral ischemia/reperfusion injury in rats. World Neurosurg. 2021. doi: 10.1016/j.wneu.2021.04.114.  [36] 崔煦然,刘钊,张志斌,等.大鼠局灶性脑缺血模型评价方法间关联性分析[J].中国实验动物学报,2015,23(5):506-508,512. [37] ZHENG Y, HE R, WANG P, et al. Exosomes from LPS-stimulated macrophages induce neuroprotection and functional improvement after ischemic stroke by modulating microglial polarization. Biomater Sci. 2019;7(5):2037-2049. [38] SOWMITHRA S, JAIN NK, BHONDE R, et al. Recovery of Human Embryonic Stem Cells-Derived Neural Progenitors Exposed to Hypoxic-Ischemic-Reperfusion Injury by Indirect Exposure to Wharton’s Jelly Mesenchymal Stem Cells Through Phosphatidyl-inositol-3-Kinase Pathway. Cell Mol Neurobiol. 2022;42(4):1167-1188. [39] Zhang Y, Yu S, Tuazon JP, et al. Neuroprotective effects of human bone marrow mesenchymal stem cells against cerebral ischemia are mediated in part by an anti-apoptotic mechanism. Neural Regen Res. 2019;14(4):597-604. [40] TEO GS, ANKRUM JA, MARTINELLI R, et al. Mesenchymal stem cells transmigrate between and directly through tumor necrosis factor-α-activated endothelial cells via both leukocyte-like and novel mechanisms. Stem Cells. 2012;30(11):2472-2486. [41] STEINGEN C, BRENIG F, BAUMGARTNER L, et al. Characterization of key mechanisms in transmigration and invasion of mesenchymal stem cells. J Mol Cell Cardiol. 2008;44(6):1072-1084. [42] VAHIDINIA Z, AZAMI TAMEH A, NEJATI M, et al. The protective effect of bone marrow mesenchymal stem cells in a rat model of ischemic stroke via reducing the C-Jun N-terminal kinase expression. Pathol Res Pract. 2019;215(9):152519. [43] BOND AM, MING GL, SONG H. Adult Mammalian Neural Stem Cells and Neurogenesis: Five Decades Later. Cell Stem Cell. 2015;17(4):385-395. [44] JIANG XC, XIANG JJ, WU HH, et al. Neural Stem Cells Transfected with Reactive Oxygen Species-Responsive Polyplexes for Effective Treatment of Ischemic Stroke. Adv Mater. 2019;31(10):e1807591. [45] WANG G, WU HL, LIU YP, et al. Pre-clinical study of human umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation for the treatment of traumatic brain injury: safety evaluation from immunogenic and oncogenic perspectives. Neural Regen Res. 2022;17(2):354-361.  [46] 张培培,刘慧纯,阎晓玲,等.脑缺血再灌注损伤大鼠尾静脉移植脐带间充质干细胞的安全性[J].中国组织工程研究, 2012,16(14):2581-2584. [47] LIAU LL, LOOI QH, CHIA WC, et al. Treatment of spinal cord injury with mesenchymal stem cells. Cell Biosci. 2020;10:112. [48] SHIN DA, KIM JM, KIM HI, et al. Comparison of functional and histological outcomes after intralesional, intracisternal, and intravenous transplantation of human bone marrow-derived mesenchymal stromal cells in a rat model of spinal cord injury. Acta Neurochir (Wien). 2013;155(10):1943-1950. [49] TATOR CH. Review of treatment trials in human spinal cord injury: issues, difficulties, and recommendations. Neurosurgery. 2006; 59(5):957-982. [50] EL-FTESI S, CHANG EI, LONGAKER MT, et al. Aging and diabetes impair the neovascular potential of adipose-derived stromal cells. Plast Reconstr Surg. 2009; 123(2):475-485. [51] DRUKKER M, BENVENISTY N. The immunogenicity of human embryonic stem-derived cells. Trends Biotechnol. 2004;22(3): 136-141.

[1]	党 祎, 杜成砚, 姚红林, 袁能华, 曹 金, 熊 山, 张顶梅, 王 信. 激素型骨坏死与氧化应激[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(9): 1469-1476.
[2]	王彦金, 周英杰, 柴旭斌, 禚汉杰. 3D打印多孔钛合金椎间融合器在颈椎前路椎间盘切除植骨融合中应用效果与安全性的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(9): 1434-1440.
[3]	蒋晓成, 石 璐, 王胤斌, 李秋江, 席创珍, 马泽丰, 蔡利军. 特立帕肽治疗骨质疏松合并腰椎退行性变经椎间融合后骨融合率的系统评价[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(9): 1427-1433.
[4]	李梦菲, 仉 红, 赵少剑, 殷广浩, 王其宝. 叉头样转录因子3在粪肠球菌感染模型大鼠难治性根尖周炎病变中的表达[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(8): 1187-1192.
[5]	聂晨晨, 苏凯奇, 高 静, 凡勇福, 阮晓迪, 袁 洁, 段昭远, 冯晓东. 环状RNA调控脑缺血发病的作用与机制[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(8): 1286-1291.
[6]	白玉龙, 李忠海, 赵彦涛, 夏岑灿, 石 磊. 中国医用组织库的发展历史、现状及展望[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(8): 1306-1312.
[7]	徐 聪, 赵 赫, 孙 岩. 生物材料导管修复面神经损伤与再生[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(7): 1089-1095.
[8]	史业弘, 王 成, 陈世玖. 小口径人工血管的早期血栓形成与预防[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(7): 1110-1116.
[9]	薛 婷, 张新日, 孔晓梅. 纳米材料多模态显像示踪技术在间充质干细胞治疗尘肺中的应用[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(7): 1133-1140.
[10]	李文婕, 游艾佳, 周俊丽 , 方素娟, 李 春. 不同种类敷料治疗烧伤疗效的网状Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(7): 1141-1148.
[11]	田沁玉, 田兴贵, 田 壮, 眭 翔, 刘舒云, 鲁晓波, 郭全义. 四氧化三锰纳米颗粒抗氧化损伤保护骨髓间充质干细胞的伸展功能[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(6): 821-826.
[12]	刘文涛, 冯兴超, 杨 毅, 白生宾. M2型巨噬细胞外泌体诱导骨髓间充质干细胞的成骨分化[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(6): 840-845.
[13]	龙燕鸣, 谢梦生, 黄加洁, 薛文利, 荣 慧, 李晓捷. 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1调控骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的成骨能力[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(6): 878-882.
[14]	崔连旭, 江文康, 陆大鸿, 许峻荣, 刘小翠, 王丙云. 临床级人脐带间充质干细胞对创伤性脑损伤大鼠神经功能的改善作用[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(6): 835-839.
[15]	李欣悦, 李熙恒, 毛天娇, 唐 亮, 李 江. 三维培养人牙周膜干细胞的形态、活性及成骨分化能力[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(6): 846-852.

缺血性脑卒中是以大脑相关区域的血液循环突然丧失引起相应的神经功能缺损为特征的脑血管疾病，是由血栓或栓子导致大脑动脉及其分支闭塞引起的[1]，具有很高的致死率和致残率。目前最有效的治疗方法是静脉溶栓、介入取栓等急性再灌注疗法，而血液快速再灌注会不可避免地破坏血脑屏障，出现神经元代谢障碍、细胞凋亡等病理变化，并伴有神经元死亡和大面积梗死，即脑缺血再灌注损伤[2]。 

目前脑缺血再灌注损伤的常规治疗包括抗自由基损伤药物、抗炎药物、中药等，由于神经损伤的不可逆性，现有的治疗均达不到临床满意效果[3]。干细胞移植是目前治疗脑缺血再灌注损伤的热点。干细胞经静脉移植、动脉移植、脑内移植等途径进入体内，通过旁分泌和细胞替代2种机制，促进脑缺血再灌注损伤后的神经元再生、微血管生成，抑制神经炎症和细胞凋亡，从而发挥脑保护作用[4-7]。目前，应用干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤动物模型的研究已经日趋成熟，但其有效性的循证依据尚不清楚，此外当前治疗脑缺血再灌注损伤的最佳干细胞种类和移植途径等亦不清楚[8]。

作者采用系统评价的方法，搜集国内外已发表的干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤的实验研究，分析动物实验的成功因素，总结其有效性及向临床转化的可行性，为未来临床治疗脑缺血再灌注损伤提供强有力的证据。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

1.1    文献检索策略   许丹与高欣2位研究者通过计算机检索中国知网、万方、维普、CBM、PubMed、The Cochrane Library、Web of Science、Embase数据库，检索时间均为各数据库建库至2021-10-19。中文检索词及检索式：(干细胞OR万能细胞) AND脑AND缺血再灌注损伤；英文检索词及检索式：stem cells AND (brains OR cerebrum OR encephalon)AND(Reperfusion Injury OR ischemia-reperfusion injury OR ischemia-reperfusion OR ischemic reperfusion injury)。
1.2   纳入与排除标准   
1.2.1   研究对象   纳入所有脑缺血再灌注损伤大鼠模型，不限制品系。
1.2.2   干预措施   试验组：干细胞治疗，干细胞的种类、剂量、给药方式、干预时机及治疗时间均不受限制。对照组：磷酸盐缓冲液、生理盐水、培养基和空白对照。
1.2.3   结局指标   ①主要结局指标：神经功能缺损评分、脑梗死体积分数(即缺血侧脑梗死体积/缺血对侧大脑半球体积)；②次要结局指标：促炎因子肿瘤坏死因子α表达水平。
1.2.4   研究类型   随机对照实验(RCT)；不限制是否实施隐蔽分组或盲法。
1.2.5   排除标准   重复发表的研究；文献为病例报告、综述或Meta分析等非相关文献；无法获取全文；无可供分析的结局指标数据；干细胞联合其他干预治疗的研究。
1.3   文献筛选与资料提取   由2名研究者独立筛选文献、提取资料并交叉核对。如有分歧，则通过讨论或与第三方协商解决。文献筛选时首先阅读题目，在排除明显不相关的文献后，进一步阅读摘要和全文以确定是否纳入。缺乏的资料尽量与作者联系予以补充。不能直接从图表中获取数据，则使用Digram Designer软件通过测量图表获得数据。采用资料提取表收集纳入研究的相关资料，包含第一作者、发表年份、国家、大鼠品系、建模方法、体质量和性别、数量、是否随机对照、干细胞种类、干预措施及时间、细胞移植途径及剂量、疗效评价指标。虽然当前尚无干细胞治疗脑缺血再灌注损伤的系统评价，但该研究未提前在PROSPERO等系统评价注册平台注册。
1.4   纳入研究的偏倚风险评价   由2位研究员独立应用SYRCLE动物实验偏倚风险评估工具(SYRCLE’s risk of bias tool for animal studies)评价纳入研究的偏倚风险[9]，并交叉核对结果，如有分歧，则通过协商或由第三方裁决。评估结果分为“低、高和不确定”的偏倚风险。
1.5   统计学分析   研究结局指标均为连续性变量，采用标准化均数差(standardized mean difference，SMD)及其95%可信区间为效应量。采用Stata 16.0软件进行Meta分析。若各研究结果间异质性较小(I2 < 50%)，则采用固定效应模型进行Meta分析；若各研究结果间异质性较大(I2≥50%)，采用随机效应模型进行Meta分析。当异质性较大时，运用亚组分析来评价异质性的来源。若纳入研究数量足够多，可用漏斗图进行发表偏倚评价，否则将无法分析发表偏倚。

3.1   证据总结   对于脑缺血再灌注损伤模型的成功性和干细胞移植治疗效果的评价，普遍采用神经功能缺损评分和脑梗死体积作为评价指标。神经功能缺损评分具有主观性，脑梗死体积具有客观性，并且神经功能缺损评分与脑梗死体积具有很好的相关性[36]。

脑缺血再灌注损伤后炎症显著触发，表现为小胶质细胞等被快速激活，释放促炎因子，诱导神经元凋亡，加重脑损伤。肿瘤坏死因子α是重要促炎因子之一，其表达水平在早期即升高[5]，趋化炎症细胞聚集与浸润，增强局部炎症反应[24]。研究表明，肿瘤坏死因子α水平与脑梗死体积也具有强相关性[30]，能很好反映干细胞移植的疗效，故选择肿瘤坏死因子α表达水平作为干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤的效应评价指标之一[37]。目前干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤的2个主要机制是：①旁分泌作用：大量的体内体外实验证明，干细胞通过释放神经保护因子、神经营养因子、血管内皮生长因子等，通过上调沉默信息调节蛋白1、Ca2+-ATPase isoform1(SPCA1)的表达，抑制小胶质细胞活化，减轻Ca2+超载等，从而减轻神经炎症和细胞凋亡，促进缺血区血管生成和神经修复[31，34]。最新的研究更集中探讨干细胞移植治疗的分子机制，研究表明间充质干细胞可通过PI3K/AKT、BDNF/TrkB信号通路等调节细胞凋亡或炎症[38-39]。②直接分化：向脑内移植的神经干细胞、人脐血间充质干细胞等可经过血液循环迁移至病变区域并存活、分化，从而替换、补充受损神经细胞，达到重建或修复的目的[6，31]。

骨髓间充质干细胞可以跨胚层分化为神经细胞，而且因不存在伦理和法律问题、来源广泛且可自体获得、免疫原性低等优点成为应用最广泛的一种多能干细胞。骨髓间充质干细胞可以通过血管细胞黏附分子1和G蛋白偶联受体信号依赖的方式优先黏附和迁移到肿瘤坏死因子α激活的内皮细胞上，激活的内皮细胞也可通过P选择素和E选择素招募骨髓间充质干细胞到梗死区，实现靶向治疗[40-41]。在大鼠大脑中动脉闭塞模型的研究中发现骨髓间充质干细胞可能通过增加脑组织中脑源性神经营养因子、神经生长因子、碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子和基质细胞衍生因子1的表达以及下调p-JNK的表达从而发挥抗凋亡和抗炎作用[23，35，42]。最近的研究结果表明，大脑中动脉闭塞后脑微血管移植骨髓间充质干细胞可改善自身的线粒体活性，促进血管新生[29]。此外，在脑缺血再灌注损伤后，骨髓间充质干细胞通过增加p-Akt和p-mTOR的表达，还可以通过抑制核因子κB的表达，减少炎症和凋亡，从而改善神经功能，降低脑梗死体积[7，21]。但是，骨髓间充质干细胞的采集需要骨髓穿刺和抽吸，而老年人骨髓细胞难以有效采集，以至于自体骨髓间充质干细胞移植不适用于脑卒中急性期的治疗[28]。但是也有研究报道，神经干细胞因其能够进行缺血归巢、以指数方式增殖和分裂、具有多种分化潜能，可向成熟神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化等特点，已成为在脑缺血再灌注损伤中极具有治疗潜力的干细胞种类之一[32，43]，这与此研究的结果：骨髓间充质干细胞疗效优于其他种类的干细胞有所不同，可能是由于神经干细胞在富含活性氧的缺血区域微环境中疗效有限[44]，另外由于需要从正常神经组织中提取自体神经干细胞供研究及临床使用，可能会对患者造成创伤，限制了神经干细胞的研究。此外，脐带间充质干细胞从废弃脐带中获取，因来源广泛、不存在伦理问题、不表达与移植排斥相关的抗原等优点，可适用于不同个体间的移植，成为目前干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤主要研究种类之一[45]。研究表明脐带间充质干细胞可通过生成神经元样细胞和神经胶质样细胞、促进新生血管形成并分泌神经营养因子等因素显著减少脑梗死体积，改善空间记忆能力，促进脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能恢复[6，46]。其他种类的干细胞治疗脑缺血再灌注损伤的研究较少。因此，后续随着研究的不断补充，会更全面、深入地评价干细胞移植的最佳种类。

脑缺血再灌注损伤后干细胞的不同移植途径会导致不同的疗效性。静脉移植后大部分干细胞被其他组织代谢和破坏，只有少部分细胞迁移至病变部位，导致移植的干细胞因到达病变部位的实际数量有限，不能充分发挥修复作用[47]。动脉移植则不用“长途跋涉”，减少了移植细胞的丢失，更好地发挥效应，这符合动脉移植优于静脉移植途径的结论，但其同样受到血脑屏障的影响。以往研究认为：将干细胞直接移植到病损区域，有利于干细胞大量聚集，比动脉移植和静脉移植具有更高的移植效率和神经修复效果[48]，但这种侵入性方法会导致正常组织创伤、移植部位出血和感染等不良反应。该研究结果认为动脉移植疗效优于其他途径，可能受到纳入研究的数量有限、证据质量不高等原因，故未得出一致结论。静脉移植和鞘内注射由于微创和高安全性，临床应用较多，因此今后的研究可以着重改善干细胞对血脑屏障的穿透性和脑靶向性，来提高静脉移植的疗效。

总之，不同种类的干细胞和不同移植途径的最终目的是提高干细胞定植到损伤部位的效率，以发挥神经修复作用。然而基于目前该领域的研究数量不足的原因，结果具有一定的局限性。今后随着该领域基础研究的补充，应进一步探究不同干细胞种类和不同移植途径的优劣及移植过程中的具体操作对脑缺血再灌注损伤神经功能恢复的影响。
3.2   证据质量   基于严格的系统评价，研究发现当前干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤的动物实验证据质量不高，在一定程度上降低了实验结果的可靠性，导致实验结果向临床转化的风险增加。
3.2.1   纳入研究存在一定的异质性   对于神经功能缺损评分的测量，虽然不同的评分标准皆清楚地描述了如何进行评分，然而不同实验研究人员对其评分标准的熟悉与理解程度的差异，会导致不同研究间对同一神经功能损伤程度得出的评分存在差异，最终影响结果的可靠性[49]。此外，不同研究间脑缺血再灌注损伤模型的造模方式(栓塞时间)、手术细节(手术操作的方式、时间、出血量)、干细胞移植的剂量和时机、术后动物的护理等差异均可导致研究间存在一定的异质性。
3.2.2   纳入研究的内在真实性不足   ①在纳入的30篇文献中，29篇文献均未清楚地报告随机分组方法；仅有1篇文献报告采用随机数字表的分组方法，但未报告是否实施隐蔽分组，导致选择性偏倚的可能性较高。因此，今后的实验除需严格实施随机分组和隐蔽分组以降低动物实验的选择性偏倚，同时应该详细报告具体的实验设计、实施过程，以提升动物实验的报告质量。②仅有1篇文献描述了对研究者施盲。在动物实验中尽管不需要对动物施盲，但大多数研究中的研究者又是动物饲养者，其可能会在干预措施的实施、结果测量及评价过程中因主观因素引入实施偏倚和测量偏倚。因此，有必要在干预措施实施及结果测量阶段施盲，以减少实验过程中的实施偏倚和测量偏倚，增加实验结果的真实性。
3.2.3   纳入研究的外部真实性不足   ①在临床脑缺血再灌注损伤病程中，患者的客观和主观因素可能会影响干细胞的疗效，如衰老和糖尿病会导致干细胞的增殖受损、血管生成能力下降和伤口愈合能力降低，而动物实验难以同时模拟人类多种身体条件[50]。②动物研究中，干细胞的疗效仅可通过神经功能缺损评分、脑梗死体积和炎症因子等相对客观的结局指标予以探究，而临床上关注的感觉功能、神经根运动和疼痛方面的细微变化尚不能通过动物实验进行充分研究。③临床上使用的干细胞均为人体来源的干细胞，而动物实验中干细胞的来源多样，会导致强烈的免疫反应，从而影响动物实验结果的真实性[51]。由于上述外部真实性的限制，导致难以有足够的证据支持该研究纳入的动物实验结果和结论能够进一步开展临床试验。
3.3   优势和局限性   该系统评价的优势主要包括：①基于动物实验，首次系统评估和分析了干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤的可行性和局限性，同时指出了该领域目前存在的问题和改进的方向；②基于Meta分析，间接比较不同种类、不同移植途径干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤的疗效，得出了最佳的干细胞治疗策略，对进一步开展体内动物实验研究及临床研究有指导意义；③基于SYRCLE偏倚风险评估工具，严格评估了动物实验的证据质量，指出了该领域在设计和实施方面存在的问题，同时给出了如何提高动物实验研究质量的建议；④纳入研究数量较多，总体样本量大，囊括了目前研究包括的所有干细胞来源、移植途径。

该系统评价的局限性主要包括：①测量时间上，采用术后1周测量时点的数据进行合并，若没有1周的时间点，则选择距离1周最近时点的测量数据，这在一定程度上降低了论证强度。②纳入文献的结局指标存在发表偏倚，可能由于研究样本量不足所致，若想获得研究结果的可靠性，仍需大样本、高质量的文献研究纳入分析。③亚组分析结果显示：骨髓间充质干细胞疗效优于其他种类干细胞，动脉移植优于其他移植途径。但此结果通过间接比较得到，并且除骨髓间充质干细胞和神经干细胞以外的其他来源干细胞研究纳入的质量和数量有限，导致结果具有一定的局限性。④该研究未提前在系统评价注册网站注册，可能会产生发表偏倚。

综上所述，现有的动物实验证据表明，干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠具有脑保护作用。干细胞移植后显著改善了脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损评分、降低脑梗死体积分数、抑制肿瘤坏死因子α表达水平。间接比较结果显示：骨髓间充质干细胞的疗效优于其他种类干细胞，动脉移植途径疗效优于其他途径。但该系统评价结果受纳入研究质量与数量限制，其临床应用效果未来尚待更多和更高质量研究进一步证实，以力求寻找到治疗脑缺血再灌注损伤的最佳干细胞种类、剂量、移植途径、干预时机等。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

文题释义：

脑缺血再灌注损伤：是指缺血性脑卒中患者在超早期溶栓、机械取栓等急性再通治疗时，由于产生高水平的兴奋性毒性物质、钙超载、自由基和外周循环炎症细胞的激活、浸润等导致二次损伤，其病理机制复杂，最常见的是神经元损伤和脑水肿。

干细胞促进神经功能恢复的特性：干细胞是一类具有强大的自我更新和分化特性的多潜能细胞，它通过神经替代、神经保护、血管生成、免疫调节和神经可塑性来改善神经功能。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

缺血性脑卒中的治疗旨在恢复脑组织的血流灌注、改善循环。目前最有效的治疗方法是静脉溶栓和介入取栓，但不可避免地会破坏血脑屏障，继发脑缺血再灌注损伤。研究表明，干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤具有广泛的应用前景，可实现细胞替代、功能重建和神经修复等目的。目前，已有部分干细胞完成了阶段性临床试验，但在干细胞种类的选择、移植策略、迁移能力及存活率等方面，仍存在一些问题亟待解决。截至目前，大多数干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤的研究集中在动物模型，因此作者采用系统评价的方法，搜集国内外已发表的干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的实验研究，分析其结果，以期为干细胞种类和移植策略的选择提供参考。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

	阅读次数
	全文
	摘要