在牙周炎样本中长链非编码RNA LINC00511表达增高并促进破骨细胞增殖

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.1832

中国组织工程研究 ›› 2019, Vol. 23 ›› Issue (33): 5360-5365.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1832

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在牙周炎样本中长链非编码RNA LINC00511表达增高并促进破骨细胞增殖

赵祥宇¹，张桂荣²，郭传波³，史春⁴，吴刘中⁵

沈阳市口腔医院，¹修复科，²正畸科，³口腔颌面外科，⁵牙周科，辽宁省沈阳市 110002；⁴大连医科大学口腔医学院，辽宁省大连市 116041

修回日期:2019-05-23 出版日期:2019-11-28 发布日期:2019-11-28
通讯作者: 吴刘中，博士，副主任医师，沈阳市口腔医院牙周科，辽宁省沈阳市 110002
作者简介:赵祥宇，男，1981年生，辽宁省沈阳市人，满族，2010年中国医科大学毕业，硕士，副主任医师，主要从事口腔修复及种植研究。
基金资助:
辽宁省自然科学基金(20180550563)，项目负责人：史春

Increased expression of long-chain non-coding RNA LINC00511 in periodontitis promotes osteoclast proliferation

Zhao Xiangyu¹, Zhang Guirong², Guo Chuanbo³, Shi Chun⁴, Wu Liuzhong⁵

¹Department of Prosthodontics, ²Department of Orthodontics,³Department of Oral and Maxillofacial Surgery, ⁵Department of Periodontology, Stomatology Hospital of Shenyang, Shenyang 110002, Liaoning Province, China; ⁴Dalian Medical University School of Stomatology, Dalian 116041, Liaoning Province, China

Revised:2019-05-23 Online:2019-11-28 Published:2019-11-28
Contact: Wu Liuzhong, MD, Associate chief physician, Department of Periodontology, Stomatology Hospital of Shenyang, Shenyang 110002, Liaoning Province, China
About author:Zhao Xiangyu, Master, Associate chief physician, Department of Prosthodontics, Stomatology Hospital of Shenyang, Shenyang 110002, Liaoning Province, China
Supported by:
the Natural Science Foundation of Liaoning Province, No. 20180550563 (to SC)

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
长链非编码RNA LINC00511：定位在17号染色体q24.3区域，包含包括5个外显子。
破骨细胞：为多核细胞，由于破骨细胞本身生存周期较短，目前对于破骨细胞的培养主要采用破骨前体细胞，在体外对其进行诱导后形成成熟的破骨细胞。

摘要
背景：LINC00511是一个较为全新的Lnc RNA，研究表明，lincRNA-ANRIL与牙周病的发生及发展密切相关。
目的：观察LINC00511在牙周炎中的表达情况及对破骨细胞的增殖及分化的影响。
方法：研究方案经沈阳市口腔医院伦理委员会批准，参与试验的患病个体及其家属对试验方案完全知情同意。取牙周炎患者及正畸拔牙患者的正常牙周膜组织(对照组)，采用Realtime PCR检测牙周炎患者LINC00511、抗酒石酸酸性磷酸酶及cathepsin K的表达；取第3代的破骨前体细胞RAW264.7细胞进行破骨细胞诱导并鉴定。将LINC00511-siRNA转染破骨细胞，以未转染的破骨细胞为对照，Realtime PCR检测转染效率。采用100 μg/L的脂多糖作用于RAW264.7细胞0，24和48 h，检测LINC00511的表达；采用CCK8及抗酒石酸酸性磷酸酶检测LINC00511对破骨细胞的增殖及分化的影响。
结果与结论：①人牙周炎样本中LINC00511、抗酒石酸酸性磷酸酶及cathepsin K表达均显著高于对照组；②脂多糖作用于RAW264.7细胞LINC00511的表达随着时间增加而增高；③荧光显微镜观察及Realtime PCR检测结果均显示，与对照组相比，LINC00511-siRNA转染后细胞LINC00511表达显著降低(P < 0.05)；④LINC00511促进破骨细胞的增殖及分化；⑤结果表明，在牙周炎样本中LINC00511表达增高，LINC00511可以促进破骨细胞的增殖。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0003-0194-8146(赵祥宇)

关键词: 破骨细胞, 牙周炎, RAW264.7细胞, 增殖, LINC00511, Lnc RNA

Abstract:

BACKGROUND: LINC00511 is a relatively new long-chain non-coding RNA (Lnc RNA). Studies have shown that lincRNA-ANRIL is closely related to the occurrence and development of periodontal disease.
OBJECTIVE: To study the expression of LINC00511 in periodontitis, and to explore LINC00511 effects on osteoblast proliferation and differentiation.
METHODS: The study protocol was approved by the Ethics Committee of Stomatology Hospital of Shenyang. Patients and their relatives were fully informed of study protocol and informed consent was signed prior to the inception of the trial. Periodontal ligament tissues were extracted from patients with periodontitis and patients undergoing orthodontic extraction (control group). The expression of LINC00511, tartrate-resistant acid phosphatase and cathepsin K in periodontitis patients was detected by real-time PCR. The third generation of osteoclast precursor cells RAW264.7 were induced to differentiate into osteoclasts and identified. LINC00511-siRNA was transfected into osteoclasts, and non-transfected osteoclasts were used as control. Transfection efficiency was detected by real-time PCR. RAW264.7 cells were cultured with 100 μg/L lipopolysaccharide for 0, 24, and 48 hours, and the expression of LINC00511 was detected. After LINC00511 transfection, proliferation and differentiation of osteoclasts were detected by cell counting kit-8 and tartrate-resistant acid phosphatase, respectively.
RESULTS AND CONCLUSION: The levels of LINC00511, tartrate-resistant acid phosphatase and cathepsin K in human periodontitis samples were markedly higher than those in the control group. The expression of LINC00511 was time-dependently increased in osteoclasts after lipopolysaccharide treatment. Findings from fluorescence microscopy and real-time PCR showed that the expression of LINC00511 was significantly decreased after LINC00511-siRNA transfection compared with the control group (P < 0.05). LINC00511 promoted the proliferation and differentiation of osteoclasts. To conclude, the expression of LINC00511 is increased in periodontitis samples, and LINC00511 can promote the proliferation of osteoclasts.

Key words: osteoclasts, periodontitis, RAW264.7 cells, proliferation, LINC00511, Lnc RNA

中图分类号:

赵祥宇，张桂荣，郭传波，史春，吴刘中. 在牙周炎样本中长链非编码RNA LINC00511表达增高并促进破骨细胞增殖[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(33): 5360-5365.

Zhao Xiangyu, Zhang Guirong, Guo Chuanbo, Shi Chun, Wu Liuzhong. Increased expression of long-chain non-coding RNA LINC00511 in periodontitis promotes osteoclast proliferation[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2019, 23(33): 5360-5365.

图/表（结果） 3

2.1 参与者数量分析 纳入牙周炎患者20例及正畸拔牙患者10，试验过程无脱落，全部进入结果分析。

2.2 两组患者基线资料比较 见表2。

2.3 LINC00511在牙周炎患者中的表达情况 结果显示，LINC00511在牙周炎样本中的表达高于正常对照组，说明LINC00511在牙周炎中表达增高(P < 0.05)。同时检测了牙周炎的骨破坏标志因子TRAP及cathepsin K，结果显示在牙周炎样本中，TRAP及cathepsin K 表达都增高，见图1。

2.4 采用Realtime PCR检测脂多糖作用下破骨前体细胞LINC00511的表达 结果显示：在100 μg/L的脂多糖作用于破骨前体细胞RAW264.7细胞24 h后，LINC00511表达增高，随着时间的进展，在48 h后 LINC00511表达显著高于24 h(P < 0.05)，见图2。结果说明，在脂多糖介导的炎症微环境中LINC00511的表达随着时间增高而增高，其趋势与临床样本结果一致。

2.5 LINC00511-siRNA转染效率的验证 荧光显微镜观察显示，转染LINC00511-siRNA到破骨细胞，与对照组相比，LINC00511表达量降低，见图3。Realtime PCR检测结果显示，与对照组相比，LINC00511表达显著降低(P < 0.05)，说明LINC00511-siRNA转染效率较好，见图4。

2.6 干扰LINC00511可以促进破骨细胞增殖 破骨细胞中转染LINC00511-siRNA后，通过CCK8实验检测破骨细胞的增殖能力，结果显示与对照组相比，LINC00511-siRNA组的细胞增殖显著下调(P < 0.05)，见图5A及表3，表明LINC00511可以促进破骨细胞的增殖能力。同时通过TRAP检测破骨细胞的分化能力，结果显示与对照组相比，LINC00511-siRNA组的细胞分化显著下调(P < 0.05)，见图5B，表明LINC00511可以促进破骨细胞的分化能力。

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引言

牙周炎是口腔内科常见的感染性疾病之一，牙周炎可导致牙槽骨缺损^[1-2]，如果未经治疗，可能会引起全身性疾病，如免疫系统疾病及心血管疾病^[3]。牙周炎是机体对牙周感染物质的免疫应答在牙周组织的局部表现^[4-5]，是一种宿主产生的氧化应激过程，机体组织细胞受到致病菌的侵袭后，将引发一系列炎症反应^[6]。免疫炎症反应长期持续性作用于机体，会发生氧化应激信号传导通路的变化，使骨改建的平衡失调，造成牙周软硬组织的损伤和丧失，当破骨细胞活性大于成骨细胞时，机体表现为骨破坏，当成骨细胞活性大于破骨细胞时，机体表现为骨形成^[7-8]。深入研究牙周病相关的分子机制，可以为牙周病的治疗提供新的可能。由于牙周炎骨改建的平衡失调，成骨细胞的增殖被抑制，且出现了大量的凋亡，造成牙周硬组织的损伤和丧失^[9-10]。研究牙周病相关的分子机制，可以为牙周病的治疗提供新的可能。

长链非编码RNA (Long non-coding RNA，Lnc RNA)的序列不仅在同一物种上具有进化保守性，还呈现明显的跨物种保守性^[11-13]。Lnc RNA参与转录调控和表观遗传调控，具有多种生物学功能^[12，14-16]，近年来，对Lnc RNA的研究备受关注。Lnc RNA在牙周病中的作用及相关分子机制报道很少。有研究表明，lincRNA-ANRIL与牙周病的发生及发展密切相关，lincRNA-ANRIL也可以通过NF-κB信号通路调控牙周膜成纤维细胞的炎症反应^[17]。作者在预实验中针对于牙周炎的样本进行了Lnc RNA检测，结果显示LINC00511在牙周炎中样本中高表达，所以此次实验选取LINC00511为研究对象，长链非编码RNA LINC00511定位在17号染色体 q24.3区域，包含包括5个外显子^[18-19]。

LINC00511是一个较为全新的Lnc RNA，已有研究报道了其在不同正常组织中的表达情况。目前关于LINC00511的研究主要集中于肿瘤^[20-21]，研究表明，LINC00511可以促进肿瘤细胞的增殖及分化^[22]，其功能在非小细胞肺癌、头颈部鳞癌以及胰腺导管腺癌中表达增高^[23-24]，并且可以促进癌细胞的增殖及迁移侵袭^[25]；也有文献报道指出，LINC00511在人骨肉瘤中表达降低，并且可以抑制人骨肉瘤细胞MG63的增殖及侵袭能力，说明LINC00511可以抑制成骨细胞的增殖能力^[26-27]。那么LINC00511对于破骨细胞的作用及机制如何？LINC00511在骨破坏中的作用如何，目前尚无报道指出。所以文章主要研究LINC00511在牙周炎骨破坏中的功能，并在脂多糖的炎症微环境下检测LINC00511的表达情况，进而采用RNA干扰技术，使LINC00511表达降低，进一步检测LINC00511对于破骨细胞增殖能力及分化的影响，通过以上实验为牙周炎的治疗提供新的靶向基因的实验室依据。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计 牙周炎组织样本实验，细胞学实验。

1.2 时间及地点 于2018年2至12月在沈阳市口腔医院完成。

1.3 对象 2018年2月至6月期间在沈阳市口腔医院就诊牙周炎患者20例及正畸拔牙患者的正常牙周膜组织10例(对照组)。实验方案由沈阳市口腔医院伦理委员会批准，患者对治疗过程及实验方案完全知情同意。所有样本用于检测牙周组织样本中LINC00511的表达情况。

纳入标准^[28]：①正常对照组：没有炎症且患牙需要进行拔除的牙齿；②牙周炎样本：2个或2个以上牙齿探诊深度(PD)≥ 6 mm，曲面断层显示出现明显的牙槽骨吸收，需要进行牙周手术；③患者在前1个月内未服用非类固醇抗炎药或抗生素。

排除标准：年龄< 18岁。

1.4 材料 RAW264.7细胞(和元生物)；LINC00511 (HQ2381)及内参ACT(QCprimer001)引物(吉玛基因)；LINC00511-siRNA(吉玛基因)；反转录试剂盒、SYBR® Premix ExTaq^T^MⅡ、cathepsin K、TRAP及GAPDH引物、XfectRNA转染试剂(TAKARA)；RNA提取试剂盒(上海生工)；胎牛血清、DMEM培养基、双抗(Gibco)；TRAP检测试剂盒(北京雷根生物科技有限公司)。

1.5 实验方法

1.5.1 样本采取方法 通过牙周手术(牙周翻瓣术、牙龈切除术、磨牙远中楔形瓣切除术)切取牙周袋袋壁上皮牙周组织及炎性肉芽组织。

1.5.2 细胞培养及复苏 ①细胞复苏：在复苏之前打开37 ℃水浴箱，将冻存的RAW264.7细胞从液氮中取出，迅速放入水浴箱中，快速摇动使其融化。溶化后的冻存管放置于离心机中离心(800 r/min，6 min)移至培养皿中，弃上清后加入1 mL培养基混匀，置于培养皿后，37 ℃培养箱中培养；②细胞培养和传代：RAW264.7细胞(1×10⁶)在DMEM高糖培养基中培养，其含体积分数10%FBS，1%双抗。细胞在培养箱中培养(37 ℃，体积分数5%CO₂，90%湿度)。定期换液，待细胞长到80%时，0.25%胰酶消化传代。

1.5.3 破骨细胞诱导 配制破骨细胞诱导液(RANKL 100 μg/L)，将培养至3代的RAW264.7细胞，细胞培养24 h待细胞贴壁后，换液后每孔加入破骨诱导液1 mL，每2 d换液1次。通过光学显微镜、Real-time PCR及抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase，TRAP)染色鉴定破骨细胞诱导成功。

1.5.4 样本总RNA提取

(1)参考UNIQ-10柱式Trizol提取组织总RNA；①将液氮中冻存的样本置于研磨钵中迅速研磨；②加入1 mL Trizol后，静置20 min，4 ℃，12 000 r/min，15 min，取上清；③加入200 μL氯仿，震荡0.5 min，静置5 min；④12 000 r/min 4 ℃，离心15 min。取最上层；⑤加入吸取RNA体积的0.6倍无水乙醇；⑥上述液体全部加入到吸附柱中，静置5 min，12 000 r/min 4 ℃，离心5 min；⑦加入500 μL RPE Solution，静置2 min，10 000 r/min 4 ℃，离心1 min；⑧重复上一步骤；⑨10 000 r/min 4 ℃，离心2 min；⑩吸附柱置于新的EP管中，加入30 μL DEPC ddH₂O，静置5 min，12 000 r/min，4 ℃，2 min；?测量所提取的RNA浓度。

(2)去除基因组DNA：①加入2.0 μL的5×g DNA Eraser Buffer，1.0 μL的gDNA Eraser，400 ng的Total RNA，以补齐到10 μL；②将上述液体混匀后42 ℃，2 min置于PCR仪去除基因组DNA。

(3)反转录cDNA反应：①加入2.0 μL的5×g DNA Eraser Buffer，1.0 μL的gDNA Eraser，400ng的Total RNA，以补齐到10 μL，去除基因组DNA。将上述反应液加入1.0 μL的Prime ScriptRT Enzyme Mix I，1.0 μL的RT Primer Mix，4.0 μL的5×PrimeScript Buffer 2，4.0 μL的RNase Free dH₂O；②将上述液体混匀后37 ℃，15 min；85 ℃，5 s置于PCR仪进行反转录cDNA反应。

(4)Real-time qPCR：按照SYBR® Premix Ex Taq^TM II进行实验反应。①加入12.5 μL的SYBR® Premix Ex Taq^TM II，1.0 μL的PCR Forward Primer(10 μmol/L)，1.0 μL的PCR Reverse Primer(10 μmol/L)，2.0 μL的cDNA溶液，9.5 μL的dH₂O；②将上述反应液置于Real-time PCR仪，反应体系为：95 ℃，30 s；95 ℃，5 s；60 ℃，30 s，共40个循环；95 ℃，15 s；60 ℃，30 s；95 ℃，15 s。检测样本的目的基因与内参的CT值，采用2^-^??Ct法来确定目的基因表达相对量，引物序列见表1。检测LINC00511、TRAP及cathepsin K在牙周炎患者中的表达；参考文献[29]的方法采用100 μg/L的脂多糖作用于破骨细胞前体细胞RAW264.7细胞0，24和48 h，检测LINC00511的表达。

1.5.5 LINC00511-siRNA转染破骨细胞 为进一步分析LINC00511在牙周炎骨破坏中所起的作用，参考Xfect- RNA转染试剂操作步骤，提前24 h铺细胞，使转染时细胞融合度需达到90%。转染试剂(XfectRNA)按配制2个EP管，分别为Tube 1(RNA)及Tube 2(Transfection Polymer)。其中Tube 1包括5 μL siRNA(LINC00511-siRNA或NC siRNA)和95 μL Xfect反应缓冲液，Tube 2包括10μL XfectsiRNA Polymer和90 μL Xfect反应缓冲液。漩涡混匀各管混合物，速度漩涡10 s，室温孵育10 min，将200 μL复合物逐滴加入细胞培养基中，8 h后换液，48 h后通过荧光显微镜、Real-time PCR检测。通过荧光显微镜及Realtime PCR检测其转染效率。

1.5.6 CCK8细胞增殖试验 将转染LINC00511-siRNA及NC siRNA(对照组)的破骨细胞接种细胞于96孔板中，破骨细胞量为1 000，每孔100 μL，培养条件为24 h，37 ℃，体积分数5%CO₂。孵育0，24，48 h。每孔加入CCK8溶液(10 μL)。培养箱内孵育1 h。酶标仪测定450 nm处的吸光度。检测LINC00511对破骨细胞的增殖影响。

1.5.7 TRAP破骨细胞分化实验 将转染LINC00511- siRNA及NC siRNA(对照组)的破骨细胞接种于96孔板中，破骨细胞量为1 000，每孔100 μL，培养条件为24 h，37 ℃，体积分数5%CO₂。孵育0，24，48 h。参考TRAP检测试剂盒(PNP微板法)说明书进行操作。检测LINC00511对破骨细胞的分化的影响

1.6 主要观察指标 ①采用Realtime PCR检测LINC00511、TRAP及cathepsin K在牙周炎患者中的表达；②采用Realtime PCR检测脂多糖作用于破骨细胞后LINC00511的表达；③干扰LINC00511(LINC00511-siRNA)后采用CCK8及TRAP检测LINC00511对破骨细胞的增殖及分化的影响。

1.7 统计学分析 采用SPSS 18.0中方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

牙周炎是一种以牙周部位的骨组织破坏为主要临床症状之一的炎症反应疾病^[28，30]。牙周炎的炎症灶内破骨细胞大量增殖，成骨细胞减少，导致骨动态平衡失调，牙槽骨吸收的原因主要是由于其骨组织的丧失，如果疾病不及时治疗，患者会出现牙齿脱落^[31]。骨质降解是牙周炎的标志病理症状。一旦受到外来致病菌的侵袭后，会产生一系列的炎性反应，激发骨代谢相关的信号通路，造成了破骨细胞的生成量远远大于成骨细胞，形成了骨缺损，牙齿出现脱落。研究表明牙周炎的骨破坏可以被多种因素激活，包括细胞因子和细菌内毒素如脂多糖，脂多糖是革兰阴性细菌的细胞膜成分，在激活炎症和牙周炎骨吸收中起着关键的作用。由于基因治疗的先进性，目前临床都在寻求牙周炎骨修复治疗的靶向因子，为牙周炎的骨修复治疗提供新的方法^[32]。

Lnc RNA数量很多，是一种不能在细胞内翻译出蛋白质的转录物Lnc RNA，Lnc RNA存在相对较长的转录本^[9，33-36]。在以往的研究中学者主要集中在可以蛋白编码的基因，而对于Lnc RNA这种非编码基因认为是“垃圾”^[37-38]。其序列不仅在同一物种上具有进化保守性，还呈现明显的跨物种保守性。Lnc RNA参与转录调控和表观遗传调控，具有多种生物学功能。近年来，对Lnc RNA的研究越来越多，Lnc RNA在细胞的增殖、凋亡、侵袭及转移中参与了多种细胞的生物学过程，与免疫疾病、肿瘤及炎症都存在着密切关系^[39-40]。但是，研究Lnc RNA在口腔系统疾病中作用的文献依然较少。Lnc RNA在牙周病中的作用及相关分子机制报道很少。作者在预实验中，通过Lnc RNA芯片分析的方法，比较牙周病患者与健康对照的临床样本中Lnc RNA的表达水平，发现牙周病样本中有多种Lnc RNA存在异常表达，提示Lnc RNA在牙周炎的发生发展过程中发挥重要作用。前期结果显示，通过Linc芯片筛选出了LINC00511在牙周炎中高表达，所以此次实验以LINC00511为研究对象。近期研究发现，LINC00511通过结合EZH2抑制p57，进而促进肿瘤的侵袭及迁移。在此次实验中，发现LINC00511在牙周炎样本中表达相对于健康牙周膜表达增高，为了更好的研究LINC00511在牙周炎的中的作用，采用脂多糖作用于破骨细胞前体细胞RAW264.7细胞后，结果发现LINC00511的表达也增高，其趋势与临床样本一致。那么LINC00511对于破骨细胞的增殖的影响是什么样的呢？通过干扰LINC00511，将其转染到破骨细胞，结果发现破骨细胞的增殖出现降低，表明LINC00511可以促进破骨细胞的增殖。其原因可能是，LINC00511可以激活PI3K/Akt信号通路，进而促进破骨细胞的过度增殖。目前关于LINC00511的研究主要集中于肿瘤细胞及骨肉瘤细胞MG63，结果表明，LINC00511可以促进肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移，机制上来说，LINC00511结合了一个高度保守的蛋白复合物-组蛋白甲基转移酶EZH2，通过组蛋白H3上的甲基化赖氨酸调节基因表达，作为EZH2/PRC2复合体的模块化支架，协调他们的定位、指定靶基因的组蛋白修饰模式，包括p57，从而改变肿瘤的生物学行为^[41-42]。靶向LINC00511及其通路可能在治疗恶性肿瘤中有重要意义。也有文献报道指出LINC00511会抑制骨肉瘤细胞MG63的增殖，由于MG63也是成骨细胞的一种，结合目前的实验结果，所以推测LINC00511可以促进破骨细胞的增殖，但是会抑制成骨细胞的增殖，进而造成了破骨细胞的量大于成骨细胞，造成了牙周组织出现了骨缺损。但是其具体的机制仍然需要进行探讨及分析。

研究初步对LINC00511在牙周炎中的作用做了研究和阐释，但Lnc RNA对疾病的调节往往是一个复杂的网络。但是在牙周炎的骨破坏中，LINC00511的具体作用机制如何，是否存在LINC00511与mi RNA的相互作用，其具体方式如何，是未来需要进行探讨和分析的。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

在牙周炎样本中长链非编码RNA LINC00511表达增高并促进破骨细胞增殖

Increased expression of long-chain non-coding RNA LINC00511 in periodontitis promotes osteoclast proliferation

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