丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶促进慢性根尖周炎模型小鼠的骨破坏

doi:10.12307/2021.035

中国组织工程研究 ›› 2021, Vol. 25 ›› Issue (23): 3654-3659.doi: 10.12307/2021.035

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丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶促进慢性根尖周炎模型小鼠的骨破坏

杨彩会1，刘启成1，董明1，王丽娜1，左美娜2，陆颖1，牛卫东1

1大连医科大学口腔医学院，辽宁省大连市 116044； 2大连医科大学口腔医学院附属口腔医院，辽宁省大连市 116000

收稿日期:2020-05-19 修回日期:2020-05-20 接受日期:2020-06-29 出版日期:2021-08-18 发布日期:2021-01-26
通讯作者: 牛卫东，博士，教授，博士生导师，大连医科大学，辽宁省大连市 116044
作者简介:杨彩会，女，1994年生，辽宁省营口市人，汉族，大连医科大学在读硕士，主要从事牙体牙髓研究。刘启成，男，1964年生，河南省信阳市人，硕士，副教授，主要从事牙体牙髓研究。
基金资助:
国家自然科学基金(81700962)，项目负责人：陆颖

Serine/threonine protein kinases can promote bone destruction in mouse models of chronic periapical periodontitis

Yang Caihui1, Liu Qicheng1, Dong Ming1, Wang Lina1, Zuo Meina2, Lu Ying1, Niu Weidong1

1School of Stomatology, Dalian Medical University, Dalian 116044, Liaoning Province, China; 2Stomatological Hospital, School of Stomatology, Dalian Medical University, Dalian 116000, Liaoning Province, China

Received:2020-05-19 Revised:2020-05-20 Accepted:2020-06-29 Online:2021-08-18 Published:2021-01-26
Contact: Niu Weidong, MD, Professor, Doctoral supervisor, School of Stomatology, Dalian Medical University, Dalian 116044, Liaoning Province, China
About author:Yang Caihui, Master candidate, School of Stomatology, Dalian Medical University, Dalian 116044, Liaoning Province, China Liu Qicheng, Master, Associate professor, School of Stomatology, Dalian Medical University, Dalian 116044, Liaoning Province, China Yang Caihui and Liu Qicheng contributed equally to this work.
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81700962 (to LY)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
慢性根尖周炎：是发生在牙根周围组织的炎症，进展缓慢病程较长，病变过程复杂，大多数继发于牙髓疾病。牙髓炎症发展到晚期，牙髓组织大部分或全部都病变坏死时，感染牙髓的细菌及其代谢产物经根尖孔可直接扩散至根尖周组织导致炎症反应，引起根尖周组织发炎，而且常常会波及邻近的牙槽骨和根尖部的牙骨质，导致骨质吸收、破坏。
AKT：是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，又叫做蛋白激酶B，是PI3K/AKT信号转导通路上的主要因子。在信号通路中具有承上启下的作用，是PI3K控制细胞增殖、存活和细胞周期的主要下游靶蛋白，同时磷酸化的AKT还可调控下游因子介导炎症反应，与炎症反应及骨破坏密切相关。

背景：根尖周炎的主要表现为骨破坏和形成炎症性肉芽组织，研究发现丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)可促进破骨细胞分化。
目的：观察AKT在小鼠实验性根尖周炎组织中的表达变化。
方法：选用25只C57BL/6J野生型雌性小鼠，通过双侧下颌第一磨牙开髓后将髓腔暴露于口腔中的方法，建立小鼠根尖周炎动物模型。将5只未开髓的小鼠作为健康对照组，其余20只作为实验组，开髓后1，2，3，4周每周随机处死5只小鼠，分离下颌骨，制作冰冻切片。采用苏木精-伊红染色，观察小鼠根尖组织炎症情况；采用免疫组织化学染色，观察AKT的表达与分布情况；采用酶组织化学染色，观察根尖组织破骨细胞的表达，并分析AKT与破骨细胞表达的相关性。
结果与结论：①苏木精-伊红染色结果显示：健康对照组小鼠根尖周围组织仅见少量炎性细胞，牙周组织完整；开髓术后1周，根尖周组织牙周膜有少量增宽，有小范围的中性粒细胞浸润；开髓术后2周，牙周膜宽度明显增大，根尖周围组织可见大量的中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞浸润，出现了明显牙槽骨吸收；开髓术后三四周，炎症范围继续扩大，主要为淋巴细胞浸润，牙槽骨的吸收范围更加明显，牙周膜宽度继续增宽；说明小鼠慢性根尖周炎动物模型建立成功；②AKT免疫组织化学染色结果显示：健康对照组仅有少量阳性细胞表达；实验组AKT的表达量在开髓后1周时开始增多；开髓后2周时达到高峰；三四周时数目下降；各实验组AKT阳性细胞数均高于健康对照组，1周与4周之间相比差异无显著性意义(P > 0.05)，其余各组间差异均有显著性意义(P < 0.05)；③酶组织化学染色结果显示：破骨细胞数目随着时间延长而呈现一定的趋势，在开髓后二三周时达到高峰；4周时下降；AKT 吸光度值与破骨细胞计数值之间存在中度相关性(r=0.634，P < 0.001)；④提示AKT在小鼠慢性根尖周炎中有表达，且表达增高；AKT参与了慢性根尖周炎的疾病过程，并可能对根尖周炎骨破坏起促进作用。
https://orcid.org/0000-0001-7439-7088 (杨彩会)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 根尖周炎, AKT, 蛋白激酶B, 破骨细胞, 牙周膜, 免疫组织化学, 染色

Abstract: BACKGROUND: The main manifestations of periapical periodontitis are bone destruction and formation of inflammatory granulation tissue. Studies have found that serine/threonine protein kinases (AKT) can promote osteoclast differentiation.
OBJECTIVE: To observe the expression of AKT in mice with experimental periapical periodontitis.
METHODS: Twenty-five C57BL/6J wild-type female mice were selected, and the animal model of periapical periodontitis was established in 20 mice by pulpectomy to expose the pulp cavity of bilateral mandibular first molars. The remaining five mice without pulpectomy were used as the healthy control group. Five mice from the experimental group were randomly killed to separate the mandible and prepare frozen sections at each observational time, including 1, 2, 3, and 4 weeks after pulpectomy. Hematoxylin-eosin staining was used to observe the inflammation of the mouse apical tissue. Immunohistochemical staining was used to observe the expression and distribution of AKT. Enzyme histochemical staining was used to observe the expression of osteoclasts in the mouse apical tissue. Correlation between AKT and osteoclast expression was analyzed.
RESULTS AND CONCLUSION: Hematoxylin-eosin staining results showed that in the healthy control group, only a small amount of inflammatory cells were seen in the tissues around the apex, and the periodontal tissue was intact. At 1 week after the pulpectomy, the periodontal ligament in the periapical tissue was slightly widened, and there were a small amount of infiltrated neutrophils. At 2 weeks after pulpectomy, the width of the periodontal ligament increased significantly, and a large number of neutrophils, macrophages, and lymphocytes infiltrated in the tissues around the apex, and obvious alveolar bone resorption appeared. At 3 to 4 weeks after the pulpectomy, mainly due to lymphocyte infiltration, the range of inflammation continued to expand, the range of alveolar bone resorption was more obvious, and the periodontal ligament width continued to widen. These indicated the successful establishment of the animal model of chronic periapical periodontitis in mice. The results of AKT immunohistochemical staining showed that there were only a few positive cells in the healthy control group; the expression of AKT in the experimental group began to increase at 1 week after pulpectomy, peaked at 2 weeks after pulpectomy, and then decreased at 3-4 weeks after pulpectomy. The number of AKT positive cells in the experimental group was higher than that in the healthy control group. There was no significant difference in the experimental group between 1 and 4 weeks after pulpectomy, and significant differences were observed in the experimental group at other observational times after pulpectomy. The results of enzyme histochemical staining showed that the number of osteoclasts had a certain trend with time, which reached the peak at 2-3 weeks after pulpectomy, and decreased at 4 weeks after pulpectomy. There was a moderate correlation between AKT absorbance value and osteoclast count (r=0.634, P < 0.001). To conclude, AKT is expressed in mice with chronic periapical periodontitis, and the expression is increased. AKT participates in the progression of chronic periapical periodontitis, and may promote bone destruction of periapical periodontitis.

Key words: periapical periodontitis, AKT, protein kinase B, osteoclasts, periodontal ligament, immunohistochemistry, staining

中图分类号:

杨彩会, 刘启成, 董明, 王丽娜, 左美娜, 陆颖, 牛卫东. 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶促进慢性根尖周炎模型小鼠的骨破坏[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3654-3659.

Yang Caihui, Liu Qicheng, Dong Ming, Wang Lina, Zuo Meina, Lu Ying, Niu Weidong. Serine/threonine protein kinases can promote bone destruction in mouse models of chronic periapical periodontitis[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2021, 25(23): 3654-3659.

图/表（结果） 6

2.1 实验动物数量分析实验选用小鼠25只，分为5组，实验过程无脱失，全部进入结果分析。
2.2 小鼠根尖组织的苏木精-伊红染色结果苏木精-伊红染色结果显示，健康对照组小鼠根尖周组织中牙周膜纤维没有明显病变，牙周膜未见增宽，仅可见极少量炎性细胞；术后1周的根尖周组织中可见到小范围的炎症细胞的浸润，属于炎症的早期，牙周膜轻度增宽；术后2周，炎症范围增大进入炎症急性期，大量巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞聚集根尖周围，破骨细胞较活跃，此时出现了牙槽骨的吸收；术后3周炎症范围进一步增大，根尖周围主要是淋巴细胞，可见成纤维细胞和毛细血管，亦出现了大量的破骨细胞；4周时骨破坏范围最大，见图1。

2.3 AKT在小鼠慢性根尖周炎中的表达免疫组织化学染色结果表明，在根尖周炎的发展过程中均可见到AKT的阳性细胞。AKT阳性细胞多为圆形、椭圆形或分叶状，表达在深褐色的胞质中，且主要表达在中性粒细胞和破骨细胞中。健康对照组见到少量阳性细胞；开髓术后1周，阳性细胞数目增多；开髓术后2周，阳性细胞数目达到高峰；3周时，数目减少；术后4周，阳性细胞数目更少，见图2。各实验组AKT阳性细胞数均大于健康对照组，AKT统计学结果为1周与4周之间差异无显著性意义(P > 0.05)，其余各组间相比差异均有显著性意义(P < 0.05)，见图3。

2.4 酶组织化学染色结果酶组织化学染色结果显示，健康对照组小鼠根尖周围破骨细胞数目最少；术后1周，由于炎症的浸润，牙槽骨被吸收，牙槽骨边缘多核破骨细胞增多；开髓后二三周，破骨细胞数目达到峰值，更加活跃；术后4周，数目减少，骨吸收范围继续增大，见图4。2周与3周之间破骨细胞阳性细胞数相比差异无显著性意义(P > 0.05)，其余各组之间相比差异均有显著性意义(P < 0.05)，见图5。

2.5 AKT A值与破骨细胞数的相关性 Pearson相关分析结果显示，AKT A值与破骨细胞计数值之间存在中度相关性(r=0.634，P < 0.001)，见图6。

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引言

慢性根尖周炎是发生在牙根周围组织的炎症，是一个复杂的过程，牙髓炎发展到晚期牙髓组织大部或全部坏死时，或有细菌感染，会引起根尖周组织发炎。
相关研究表明，PI3K/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路在多种口腔疾病中均发挥作用，如牙周炎、颞下颌关节疾病、口腔颌面部肿瘤等[1-3]，并且与破骨细胞的分化与存活有密切联系[4-5]。AKT作为PI3K/AKT信号通路上的重要因子，其在根尖周炎进程中的作用机制尚未明确。AKT是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，因在结构上与蛋白激酶A和蛋白激酶C相似而称为蛋白激酶B(protein kinase B，PKB)，属于PI3K下游的直接靶蛋白，在PI3K/AKT信号通路中起到了承上启下的作用。AKT可调控多种细胞活动如促进葡萄糖代谢、细胞增殖、凋亡、转录以及迁移等[6]，其主要表达在细胞质中。AKT家族有3种亚型，分别为AKT1/PKBα、AKT2/PKBβ、AKT3/PKBγ，AKT1和AKT2大量表达在破骨细胞中[7]，磷酸化的AKT可激活下游因子核因子κB趋化中性粒细胞等炎性因子聚集在炎性部位导致炎症反应[8-10]。LIN等[11]通过实验发现PI3K/AKT信号通路通过激活核因子κB可增强基质金属蛋白酶13的大量增殖、分化与表达，并且抑制PI3K/AKT/核因子κB轴，能够防止骨关节炎小鼠的异常骨形成和软骨退化。KAWAMURA等[7]研究发现AKT1是破骨细胞和成骨细胞的重要调节器，可促进破骨细胞与成骨细胞的分化和存活；由于成骨细胞中RANKL的表达降低，在破骨细胞中AKT1缺乏会引起细胞自主功能障碍，从而导致骨吸收受损，并引起细胞非自主性抑制破骨细胞的生成。CHEN等[12]研究发现在MC3T3-E1细胞中敲除AKT2会使细胞中骨钙素的表达降低，PI3K/AKT途径在破骨细胞骨吸收介质促进MC3T3-E1细胞的分化与钙化中起到了关键作用。此外，SUGATANI等[13]的实验表明了在破骨细胞前体细胞中敲除AKT1和AKT2后抑制破骨细胞分化的作用是RANKL诱导核因子κBp50 DNA结合活性下调所引起的。
目前，有关AKT在根尖周炎中的作用还尚未见研究，故此次实验建立了小鼠根尖周炎动物模型，采用苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色、酶组织化学染色3种染色方法观察AKT在根尖周炎进展过程中的表达情况，探讨AKT在慢性根尖周炎中的作用与影响。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。
1.2 时间及地点于2018至2019年在大连医科大学口腔医学院240实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物选取25只6周龄的C57BL/6J 雌性小鼠，体质量20-22 g，由大连医科大学SPF实验动物中心饲养，动物实验经大连医科大学伦理委员会批准。
1.3.2 实验主要试剂伊红、苏木精(Solarbio，中国)，DAB试剂(中杉金桥公司，中国)，PV-9001试剂(中杉金桥公司，中国)，AKT多克隆抗体(Bioworld，中国)。
1.3.3 实验主要仪器便携式电动牙钻机(Densply，日本)，恒温箱(上海华岩仪器设备有限公司，中国)，冷冻切片机(Thermo，美国)，显微照相系统OLYMPUS (BX-43)(Olympus，日本)，-80 ℃冰箱(Thermo，美国)，微波炉(Galanz公司，中国)。
1.4 实验方法
1.4.1 建立小鼠慢性根尖周炎模型将25只小鼠按随机数字表法分为5组，5只作为健康对照组，其余20只作为实验组。对20只实验组小鼠的双侧下颌第一磨牙开髓，使用小号锉扩大开髓孔，将髓腔直接暴露于口腔。

1.4.2 制作冰冻切片取健康对照组的5只鼠和开髓后1，2，3，4周时各实验组5只鼠吸入乙醚，腹腔注射4%水合氯醛进行麻醉，心脏灌流固定全身组织，分离下颌骨刮净上面软组织置于多聚甲醛溶液中固定24 h，放置在盛有10%EDTA的容器中在摇床上摇1.5个月。用OCT包埋组织，冰冻切片机制作6 μm厚的组织切片，在-80 ℃冰箱中保存。
1.4.3 苏木精-伊红染色取出切片置于恒温箱中烘干2 h。PBS漂洗3遍，每遍5 min；苏木精染色2 min后流动水冲洗玻片背面；60 ℃温水中返蓝；伊红染色10 s然后流动水冲洗玻片背面；将玻片置于梯度乙醇中脱水；二甲苯透明3次，每次10 min；中性树胶封固。
1.4.4 免疫组织化学染色将切片置于恒温箱中烘干2 h。PBS漂洗3遍，每遍5 min；在体积分数0.3%的过氧化氢中固定
15 min；PBST漂洗3次，每次5 min；PBS漂洗5 min；滴加AKT抗体于4 ℃冰箱过夜；PBST漂洗3次，每次5 min；PBS漂洗5 min；滴加二抗2液孵育1 h；PBST漂洗3次，每次5 min；PBS漂洗5 min；滴加二抗3液孵育1 h；DAB发色2 min停止发色；PBS漂洗3次，每次5 min；苏木精复染2 min流水冲洗玻片背面；放置于梯度乙醇中进行脱水；二甲苯透明3次，每次10 min；中性树胶封固。
1.4.5 酶组织化学染色将切片置于恒温箱中烘干2 h。冰冻切片水洗后放入常温固定液中30 s后，37 ℃去离子水洗
30 min，避光下37 ℃水浴孵育1 h后清洗，苏木精染核约
2 min流水冲洗，封固。用OLYMPUS (BX-43)光学显微镜镜下查看根尖区阳性表达区域，每组选取3张非连续切片，每张5个组织，一共15个远中根尖，每个根尖拍5张400倍镜下根尖周围区域照片，使用Image Pro Plus 7.0测量PI3K和AKT的平均吸光度(A)值。
1.5 主要观察指标采用苏木精-伊红染色，观察小鼠根尖组织炎症情况；采用免疫组织化学染色，观察AKT的表达与分布情况；采用酶组织化学染色，观察根尖组织破骨细胞的表达，并分析AKT与破骨细胞之间表达的相关性。
1.6 统计学分析使用SPSS Statistics 17.0软件运用单因素方差分析的方法分析实验结果，数据用x±s表示，LSD法进行不同时间点比较；Pearson相关分析AKT阳性细胞数与破骨细胞数之间的相关性，P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

慢性根尖周炎是最为常见的一类口腔疾病，进展缓慢病程较长，大多数继发于牙髓疾病。感染牙髓的细菌及其代谢产物经根尖孔可直接扩散至根尖周组织导致炎症反应，而且常常会波及邻近的牙槽骨和根尖部的牙骨质，导致骨质吸收、破坏。
破骨细胞是骨吸收的主要细胞，是从髓系造血细胞分化而来的多核巨细胞[14]，炎症微环境有利于破骨细胞的形成和活化。PI3K/AKT信号通路是近几年的热点通路，并已被证实在炎症、癌症以及骨破坏相关疾病中均有参与[15-16]。慢性根尖周炎的主要特征为炎症反应和骨破坏，然而，AKT与慢性根尖周炎的关系尚未得到详细的研究，这是接下来要进一步探讨和研究的内容。因此这次实验采用将小鼠髓腔开放的方法建立了小鼠的根尖周炎模型[17]，通过苏木精-伊红染色可直观地看到健康对照组的炎症范围较小，炎细胞数量较少，一两周时病变进展较快，中性粒细胞逐渐增多进入急性炎症期；到三四周时病变进展较缓慢进入慢性炎症期，可见大量淋巴细胞和巨噬细胞。此次实验结果与作者所在课题组以往的实验结果相同[18]，说明此次实验根尖周炎模型建立成功。
通过观察免疫组织化学染色结果发现，AKT阳性细胞在慢性根尖周炎发展过程中持续存在，健康对照组仅有少量的阳性细胞；开髓后2周时数量最多，多见于中性粒细胞和破骨细胞中。从酶组织化学染色结果可见健康对照组破骨细胞非常少，实验组数量增多，表达高峰在第3周。由于AKT主要表达在中性粒细胞和破骨细胞中，中性粒细胞在2周时即急性炎症期时最多，而破骨细胞活跃期也在第二三周，于是将AKT A值与破骨细胞数目进行相关性分析，结果显示AKT A值与破骨细胞计数值之间存在中度相关性(r=0.634，
P < 0.001)，AKT阳性细胞的表达趋势与根尖周组织急慢性炎症期的进程一致，说明AKT与根尖周炎骨破坏有一定联系。
MOON等[19]多位学者研究AKT与破骨细胞的关系时发现AKT可介导破骨细胞的分化。KE等[20]通过阻断小鼠c-src-PI3K-AKT信号通路的c-src发现小鼠有骨质硬化的表现，研究其机制发现c-src被激活后可激活下游PI3K，被激活的PI3K可活化下游AKT，活化的AKT可以调节破骨细胞移动和骨架重置，抑制破骨细胞凋亡并促进破骨细胞存活。以上几位学者的研究结果与此次实验结论基本一致，学者们发现AKT可促进破骨细胞存活，而此次实验发现AKT的表达与破骨细胞的趋势基本一致，并进一步分析了AKT与破骨细胞之间的相关性，发现二者之间呈正相关，均证明了AKT与骨破坏有一定的关系。而此次实验发现了在根尖周炎症组织中AKT与骨破坏具有一定的关系，这是以往学者没有研究过的。此外，CEJKA等[21]对类风湿关节炎患者的滑膜组织采用免疫组织化学的方法进行分析，发现p-AKT在组织中有表达且表达在破骨细胞中。而此次实验选取根尖周炎症组织行免疫组织化学分析发现，AKT也表达在破骨细胞中。由于p-AKT为AKT的活化状态，二者表达的位置相同，再一次证明此次实验的染色结果正确。此外，AKT在骨发育及形成过程中的作用同样不可忽视。徐杨等[22]学者研究发现，AKT1若缺乏AKT1基因嵌合性体细胞突变会导致 Proteus综合征，主要表现为骨骼异常；敲除AKT1和AKT1、AKT2均敲除的小鼠都会表现为骨质异常，骨质减少或骨发育迟缓[23-25]；成骨细胞前体中内源性PI3K抑制剂Pten的缺失导致AKT信号增强或AKT的过表达[26-27]，促进了骨形成并增加了骨量[28]。
近期VISWANATH等[29-31]多位学者研究发现Wortmannin可抑制AKT蛋白的稳定，Wortmannin是抑制中性粒细胞功能的主要抑制剂，故推测AKT蛋白在中性粒细胞的黏附中起到至关重要的作用[32]。此次实验中，AKT的阳性表达量在第2周达到高峰，此时根尖周围组织聚集了大量中性粒细胞，根尖周炎处于急性炎症期。作者推测在根尖周炎急性期，AKT可能通过调控中性粒细胞加速根尖周炎的炎症反应，与以上学者的发现基本一致，而在根尖周炎中AKT与中性粒细胞的关系是以往学者没有研究过的。此外，PI3Kγ可以把中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞等炎症细胞聚集到有炎症表现的部位[33]，中性粒细胞的凋亡和巨噬细胞引起的吞噬作用被认为是炎症存在的前提，而所有的Ⅰ型PI3K均可能是通过激活下游AKT来调控由细胞因子干预的中性粒细胞的存活[34]。DONG等[35]学者发现AKT能够通过抑制线粒体激活激酶(p38)和c-Jun N-终端激酶(JNK)来抑制核因子κB从而减轻炎症。相关研究表明AKT激活可减轻由脂多糖引起的心肌功能障碍，并且PI3K/AKT可以抑制巨噬细胞，淋巴细胞和中性粒细胞的凋亡[36-37]。以上研究探讨AKT与炎症的关系时，发现AKT可促进中性粒细胞存活抑制其凋亡，干预中性粒细胞的存活加速炎症反应，与此次实验结果大体相同。此次实验新发现的是在根尖周炎中AKT与中性粒细胞的表达趋势一致，AKT可通过调控中性粒细胞加速炎症反应。
综上所述，AKT在小鼠根尖周炎的动物模型中表达增高，且趋势与根尖周炎急慢性炎症期的进程一致，揭示了AKT参与慢性根尖周炎的进程并且与骨破坏有一定的关系，可为以后临床上的治疗及预防提供实验依据。此次实验虽然存在一定的局限性，其在根尖周炎症中的具体机制还需进行更深一步的研究，但此次实验为其奠定了一定的基础。结合以往学者对AKT与炎症及骨破坏的研究，PI3K/AKT信号通路的下游可能还存在其他因子在根尖周炎中发挥作用，需要进一步深入探索PI3K/AKT信号通路的具体作用机制。目前已有学者研制出PI3K/AKT的抑制剂A005，可抑制骨的吸收溶解[38]。随着未来对PI3K/AKT信号通路研究的增多，该通路可能会成为治疗各种根尖周疾病的治疗靶点，研制出更多的抑制剂应用于临床，同样也为根尖周疾病的治疗找到了新的方向。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶促进慢性根尖周炎模型小鼠的骨破坏

Serine/threonine protein kinases can promote bone destruction in mouse models of chronic periapical periodontitis

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