活血化瘀中药治疗股骨头坏死共同作用机制的网络药理学数据

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.3167

中国组织工程研究 ›› 2021, Vol. 25 ›› Issue (17): 2727-2733.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.3167

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活血化瘀中药治疗股骨头坏死共同作用机制的网络药理学数据

辛鹏飞1，柯梦楠2 ，张海涛1，乌日莎娜1，李子祺3，庄至坤1，魏秋实3，何伟3

1广州中医药大学第一临床医学院，广东省广州市 510405；2江西中医药大学，江西省南昌市 330000；3广州中医药大学第三附属医院关节骨科，广东省广州市 510245

收稿日期:2020-03-28 修回日期:2020-04-02 接受日期:2020-05-27 出版日期:2021-06-18 发布日期:2021-01-08
通讯作者: 何伟，博士，教授，广州中医药大学第三附属医院关节骨科，广东省广州市 510245
作者简介:辛鹏飞，男，1996年生，江西省九江市人，汉族，广州中医药大学在读硕士，主要从事中医药防治骨关节疾病的研究。柯梦楠，女，1997年生，江西省九江市人，汉族，江西中医药大学在读硕士，主要从事中医药防治内科疾病的研究。
基金资助:
国家自然科学基金面上项目资助(81873327)，项目负责人：何伟；广东省自然科学基金资助项目(2017A030313698)，项目负责人：魏秋实

Common mechanism of Chinese herbs for promoting blood circulation and removing blood stasis in the treatment of osteonecrosis of the femoral head: an analysis based on network pharmacology

Xin Pengfei1, Ke Mengnan2, Zhang Haitao1, Urishana1, Li Ziqi3, Zhuang Zhikun1, Wei Qiushi3, He Wei3

1The First Clinical Medical College of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, Guangdong Province, China; 2Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330000, Jiangxi Province, China; 3Department of Joint Orthopedics, the Third Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510245, Guangdong Province, China

Received:2020-03-28 Revised:2020-04-02 Accepted:2020-05-27 Online:2021-06-18 Published:2021-01-08
Contact: He Wei, MD, Professor, Department of Joint Orthopedics, the Third Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510245, Guangdong Province, China
About author:Xin Pengfei, Master candidate, the First Clinical Medical College of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, Guangdong Province, China Ke Mengnan, Master candidate, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330000, Jiangxi Province, China Xin Pengfei and Ke Mengnan contributed equally to this work.
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China (General Project), No. 81873327 (to HW); Guangdong Natural Science Foundation, No. 2017A030313698 (to WQS)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
网络药理学：是基于系统生物学的理论对生物系统的网络分析，选取特定信号节点(Nodes)进行多靶点药物分子设计的新学科。网络药理学强调对信号通路的多途径调节，提高药物的治疗效果，降低毒副作用，从而提高新药临床试验的成功率，节省药物的研发费用。
基因本体论(Gene Ontology，GO)：可分为分子功能(molecular function)，生物过程(biological process)和细胞组成(cellular component)3个部分。蛋白质或者基因可以通过ID对应或者序列注释的方法找到与之对应的GO号，而GO号可对应到Term，即功能类别或者细胞定位。

背景：有文献报道了活血化瘀类中药是治疗股骨头坏死的最常用中药，而川芎、牛膝、丹参、骨碎补、红花为治疗股骨头坏死最常用的活血化瘀中药。
目的：探讨五味(川芎、牛膝、丹参、骨碎补、红花)临床常用的活血化瘀中药治疗股骨头坏死的共同作用机制。
方法：通过中药系统药理学分析平台数据库(TCMSP)搜索，获得五味中药的主要活性成分，并推测其作用基因靶点，再通过Excel表格取交集函数获得五味中药共同能作用的潜在基因靶点。通过GeneCards和OMIM数据库获得股骨头坏死疾病的相关靶点。构建活血化瘀中药-治疗成分-靶点-股骨头坏死网络图，进行基因本体论(GO)功能和KEGG通路富集分析。
结果与结论：①通过TCMSP数据库搜索共筛选出五味中药有效活性成分132种，相应得到2 593个潜在作用靶点基因，五味中药共有的潜在作用靶点有31个；通过搜索OMIM 、GeneCards数据库得705个与股骨头坏死疾病相关靶点，取交集后得到五味活血化瘀中药共有-股骨头坏死疾病交集基因8个(PPARG、NOS3、F2、NCOA2、NOS2、GSK3B、ESR1、NR3C1)；②GO生物分析显示活血化瘀中药治疗股骨头坏死的主要生物过程与血小板活化负调控、一氧化氮生物合成过程、血管舒张的正调控等有关；③KEGG通路显示活血化瘀中药治疗股骨头坏死的主要通路与甲状腺激素信号通路、缺氧诱导因子1信号通路、催乳激素信号通路、雌激素信号通路等密切相关；④推测活血化瘀类中药治疗股骨头坏死的可能主要机制可能是：活血化瘀中药中的有效成分槲皮素、小檗碱、黄连碱、丹参新酮等通过作用于ESR1、NOS3、NOS2、PPARG等靶点，从而参与调控甲状腺激素信号通路、缺氧诱导因子1信号通路、催乳素信号通路、雌激素信号通路等，通过调控成骨与破骨细胞活性，改善血液高凝状态及血管通透性、促进血管的新生，进一步促进坏死的股骨头进行修复而达到治疗作用。该研究只是对作用机制的预测探讨，具体的作用机制还需后续的实验进行验证。
https://orcid.org/0000-0002-4570-842X (辛鹏飞) ；https://orcid.org/0000-0003-4639-9806 (柯梦楠)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 骨, 活血化瘀, 中药, 股骨头坏死, 破骨细胞, 血管舒张, 通路, 网络药理学

Abstract: BACKGROUND: Chinese herbs for promoting blood circulation and removing blood stasis are the most commonly used Chinese medicines for the treatment of osteonecrosis of the femoral head (ONFH), while Chuanxiong, Achyranthes bidentata, Salvia miltiorrhiza, rhizoma drynariae, and safflower are the most commonly used herbs for treating ONFH.
OBJECTIVE: To explore the common mechanism of five Chinese herbs for promoting blood circulation and removing blood stasis in the treatment of ONFH
METHODS: The main active ingredients of five herbs were obtained by searching the database of TCM system pharmacology analysis platform (TCMSP), and the gene targets of five herbs were speculated. Then the potential gene targets of all five traditional Chinese herbs could be obtained by taking the intersection function through the Excel table. Relevant targets of ONFH disease were obtained through GeneCards and OMIM databases. Chinese herbs for promoting blood circulation and removing blood stasis-therapeutic ingredients-targets-ONFH network was constructed, followed by gene ontology (GO) function and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) pathway enrichment analysis.
RESULTS AND CONCLUSION: A total of 132 active ingredients of five herbs were screened out through the TCMSP database search, with 2 593 potential target genes correspondingly. There were 31 common potential targets of these five herbs. A search of OMIM and GeneCards databases yielded 705 ONFH disease-related targets, and 8 intersected genes (PPARG, NOS3, F2, NCOA2, NOS2, GSK3B, ESR1, NR3C1) were obtained. GO biological analysis showed that the main biological process of five Chinese herbs in ONFH was related to negative regulation of platelet activation, nitric oxide biosynthesis, and positive regulation of vasodilation. The KEGG pathway analysis showed that the main pathway of five Chinese herbs in ONFH was related to Thyroid hormone signaling pathway, hypoxia-inducible factor-1 signaling pathway, prolactin signaling pathway, and estrogen signaling pathway. The possible main mechanisms of five Chinese herbs in the treatment of ONFH may be: the effective ingredients in herbs such as quercetin, berberine, coptisine, miltirone, by acting on ESR1, NOS3, NOS2, PPARG and other targets, participate in the regulation of thyroid hormone signaling pathway, hypoxia-inducible factor-1 signaling pathway, prolactin signaling pathway, and estrogen signaling pathway, and by regulating the activity of osteoblast and osteoclast, they can improve the hypercoagulability of blood and vascular permeability and promote angiogenesis, further promoting the repair of the necrotic femoral head to achieve the therapeutic effect. However, this study only predicted the mechanism of action, and the specific mechanism of action still needs to be verified by follow-up experiments.

Key words: bone, promoting blood circulation and removing blood stasis, Chinese herbs, osteonecrosis of the femoral head, osteoclast, vasodilatation, pathway, network pharmacology

中图分类号:

辛鹏飞, 柯梦楠 , 张海涛, 乌日莎娜, 李子祺, 庄至坤, 魏秋实, 何伟. 活血化瘀中药治疗股骨头坏死共同作用机制的网络药理学数据[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(17): 2727-2733.

Xin Pengfei, Ke Mengnan, Zhang Haitao, Urishana, Li Ziqi, Zhuang Zhikun, Wei Qiushi, He Wei. Common mechanism of Chinese herbs for promoting blood circulation and removing blood stasis in the treatment of osteonecrosis of the femoral head: an analysis based on network pharmacology[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2021, 25(17): 2727-2733.

图/表（结果） 8

2.1 五味活血化瘀中药活性成分及其作用靶点信息收集通过TCMSP数据库搜索，根据筛选条件口服生物利用度(OB≥30%)和类药性指数(DL≥0.18)，共筛选出有效活性成分132个，其中川芎7个，牛膝20个，丹参65个，骨碎补18个，红花22个，五味活血化瘀中药的主要活性成分见表1(由于结果较多，故根据OB值，仅列出各药物的前5项活性成分)。再将132个有效成分输入TCMSP数据库，共得到2 593个潜在作用靶点，其中川芎61个，牛膝361个，丹参1 349个，骨碎补386个，红花436个潜在作用靶点。

2.2 五味活血化瘀中药共同作用靶点的筛选通过Excel删除重复值，得到川芎32个，牛膝99个，丹参103个，骨碎补112个，红花129个潜在基因，其中有31个基因靶点是五味活血化瘀中药共同的潜在作用靶点(见图1，表2)。

2.3 五味活血化瘀中药治疗股骨头坏死靶点的收集及网络构建和分析通过搜索OMIM 、GeneCards数据库删除重复值后共获得705个与股骨头坏死疾病相关靶点。通过Excel表格取交集，得到五味活血化瘀中药同有——股骨头坏死交集靶点基因8个(PPARG、NOS3、F2、NCOA2、NOS2、GSK3B、ESR1、NR3C1)，再通过Excel表格查找筛选功能，从原数据中得到能作用于这8个靶点的化合物98个，其中能够作用于PPARG靶点的有47种化合物，作用于NOS3的有25种化合物，作用于F2的有68种化合物，作用于NCOA2的有39种化合物，作用于NOS2的有68种化合物、作用于GSK3B的有63种化合物、作用于ESR1的有94种化合物，能作用于NR3C1的有17种化合物。将药物、靶点、化合物导入Cytoscape3.7.2软件中，得到“活血化瘀中药-治疗成分-靶点-股骨头坏死网络图”(见图2)

网络拓扑参数分析：共111个节点，活血化瘀中药5个节点，药物成分节点98个，基因靶点8个，平均Degree值为9.3，丹参Degree值为59，牛膝Degree值为14，骨碎补Degree值为10，红花Degree值为9，川芎Degree值为6。药物成分Degree最高值为8，Degree值较高的有：槲皮素(quercetin)、小檗碱(berberine)、黄连碱(coptisine)、丹参新酮(miltirone)等。潜在靶点ESR1的Degree值最高为94。
2.4 靶蛋白相互作用网络的构建将活血化瘀中药共有的可能与治疗股骨头坏死相关的8个靶点导入STRING 数据库得到靶蛋白相互作用关系，见图3，PPI蛋白互作网络包含8个节点，13条边(节点间的相互作用关系)，平均Degree值为3.25。此网络Degree值从高到低排序依次为糖皮质激素受体(NR3C1)、过氧化物酶体增生激活受体γ(PPARG)、内皮一氧化氮合成酶(NOS3)、雌激素受体(ESR1)、糖原合成酶激酶(GSK3B)、核受体辅激活因子2(NCOA2)、一氧化氮合酶(NOS2)。

2.5 GO和通路分析将8个靶点基因导入DAVID数据库后，得到GO分析19个生物过程(biological process，BP)、22个分子功能(molecular function，MF)、4个细胞组分(cell components CC)，得到7条KEGG通路，根据筛选条件P ≤ 0.05，按P值大小将GO生物过程和KEGG通路由小到大排序，得到前10的GO生物过程和KEGG通路气泡图(见图4，5)。图中气泡图颜色越深，点越大，则代表该生物过程或通路可能性越大。
由图4可知活血化瘀中药治疗股骨头坏死的主要生物过程与血小板活化负调控(negative regulation of platelet
activation)、一氧化氮生物合成过程(nitric oxide biosynthetic process)、血管舒张的正调控(positive regulation of vasodilation)等有关，分子功能主要与类固醇激素受体活性(steroid hormone receptor activity)、一氧化氮合酶活性(nitric-oxide synthase activity)、四氢生物蝶呤结合(tetrahydrobiopterin binding)等相关，细胞组分主要与细胞核、胞质的核周区、细胞质有关。

由图5可知活血化瘀中药治疗股骨头坏死的主要通路与甲状腺激素信号通路(Thyroid hormone signaling pathway)、精氨酸生物合成(Arginine biosynthesis)、催乳素信号通路(Prolactin signaling pathway)、缺氧诱导因子1信号通路
(HIF-1 signaling pathway)、雌激素信号通路
(Estrogen signaling pathway)密切相关。各靶点参与调控的通路见图6。

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引言

股骨头坏死是临床上好发于中青年的骨科难治性疾病之一，其发病与应用激素、酗酒和髋部创伤等多种因素密切相关[1]。股骨头坏死患者后期必将面临髋关节疼痛、股骨头塌陷及关节活动障碍等问题，将给患者带来严重的经济及心理负担[2]。人工全髋关节置换术是当前治疗股骨头坏死主要的有效方法，但患者仍需面临一次或多次翻修的问题，如何通过早期诊断、早期治疗在股骨头坏死早期阶段保留患者自身髋关节成为目前的研究热点[3]。相比手术治疗，祖国医学基于“上医治未病”的理念，在疾病的早期治疗方面具有一定的优势，且有多项临床研究表明中医药在股骨头坏死的早期治疗中具有较好的临床疗效[4-8]。
股骨头坏死在祖国医学中属于“骨蚀”“骨痿”“骨痹”等范畴。袁浩教授认为“瘀血”型为股骨头坏死患者的主要中医证型,“肾虚”型和“痹证”型为中医亚型[9]。魏秋实等[10]认为“血瘀”在股骨头坏死发病过程中起着主导作用。韩晓蕊等[11]通过MRI对比观察发现股骨头坏死患者股骨头内微循环状态发生改变。正所谓“瘀血不去、新血不生”，故活血化瘀法为治疗股骨头坏死的立方之本，且众多医家使用活血化瘀中药治疗股骨头坏死均取得了较好的临床效果[4，6]。有文献报道了活血化瘀类中药是治疗股骨头坏死的最常用中药，而川芎、牛膝、丹参、骨碎补、红花为治疗股骨头坏死最常用的活血化瘀中药[12]。现代药理学表明活血化瘀中药具有改善血流动力学及微循环等作用[13]；此外还有研究表明活血化瘀中药可增强内皮祖细胞的功能，从而促进血管新生的作用[14]。但基于中药的多成分、作用多靶点及多途径的特性，未曾有文献从药物的活性成分、作用靶点及通路方面深入研究活血化瘀药作用于股骨头坏死的作用机制。
网络药理学是融合生物信息学、分子生物学、药理学等多学科为一体，利用多种数据库及软件，通过层层筛选、数据可视化等步骤，探讨中药与疾病之间的关系[15]。文章拟基于网络药理学原理，从药物-成分-靶点-疾病方面，深入探讨五味(川芎、牛膝、丹参、骨碎补、红花)临床最常用的活血化瘀中药治疗股骨头坏死的共同作用机制，作者认为常用的活血化瘀中药所能作用于股骨头坏死患者的共同靶点及通路可能为活血化瘀类中药治疗股骨头坏死的主要靶点及通路，故选其共同作用机制进行探讨，为后续研究及临床处方用药提供思路。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计构建中药-成分-靶点-疾病网络图，进行GO功能和KEGG通路富集分析。
1.2 时间及地点研究于2020年2至3月在广州中医药大学完成。
1.3 靶点信息收集
1.3.1 五味活血化瘀中药活性成分及其作用靶点信息收集通过中药系统药理学分析平台数据库(TCMSP，http://
tcmspw.com/index.php)，以关键词“川芎，牛膝，丹参，骨碎补，红花”分别进行搜索，分别得到各中药所对应的化学成分，通过口服生物利用度(OB≥30%)和类药性(DL≥0.18)为筛选条件，筛选出对应的有效成分。再通过TCMSP数据库根据有效成分搜索出其对应作用靶点。并将作用靶点导入Uniprot 数据库(http://www.uniprot.org/)进行基因标准化处理。
1.3.2 五味活血化瘀中药共同作用靶点的筛选将五味活血化瘀中药通过基因标准化处理得到的基因名称全部导入Excel表格中，删除各药物基因的重复值，通过取交集函数，筛选出五味活血化瘀中药所能作用的共同靶点，并利用imageGP 工具绘制“五味活血化瘀中药潜在作用靶点Venn图”。
1.3.3 股骨头坏死疾病靶点信息收集通过在GeneCards(https://www.genecards.org/)、OMIM(https://omim.org/)两个数据库检索关键词“Osteonecrosis of the Femoral Head”检索与股骨头坏死疾病相关的靶点，将两数据库获取的靶点合并，并导入Excel表格中通过删除重复数据得到股骨头坏死疾病相关靶点，再将作用靶点导入Uniprot 数据库(http://www.uniprot.org/)进行基因标准化处理。
1.4 方法
1.4.1 五味活血化瘀中药治疗股骨头坏死靶点的收集及网络构建和分析将五味活血化瘀中药所作用的共同靶点与获得的股骨头坏死疾病背景网络导入Excel表格中，同样通过取交集，即可得到活血化瘀中药治疗股骨头坏死的共同潜在基因靶点。再将共同作用的靶点、靶点所对应的活血化瘀中药活性成分、五味活血化瘀中药分别导入Cytoscape3.7.2软件中，构建“活血化瘀中药-治疗成分-靶点-股骨头坏死网络图”，并通过Cytoscape3.7.2中“NetworkAnalyzer”功能对自由度(Degree)等网络拓扑参数分析网络节点重要性。
1.4.2 靶蛋白相互作用网络的构建及靶蛋白的扩充将获得的治疗股骨头坏死的共同作用靶点输入STRING(https://string-db. org/)数据库，选择“multiple proteins”模式，物种选择“Home sapiens”，保持默认设置，得到蛋白相互作用(Protein-protein interaction，PPI)网络，将所获得的数据通过Cytoscape 3.7.2中“NetworkAnalyzer”功能对自由度(Degree)等网络拓扑参数分析。
1.4.3 基因本体论(Gene Ontology，GO)和通路分析将活血化瘀中药治疗股骨头坏死的共同作用靶点和扩充靶点输入DAVID 6.8 数据库(https://david.ncifcrf.gov/)，物种选择“Homo sapiens”，分别进行GO分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。将所获得的结果导入Excel表格，筛选设定P ≤0.05，根据P值将GO生物过程和KEGG通路由小到大排序，选取前10的GO生物过程和KEGG通路，利用imageGP 工具绘制“五味活血化瘀中药治疗股骨头坏死主要GO生物过程气泡图”和“五味活血化瘀中药治疗股骨头坏死的KEGG通路气泡图”。

讨论

股骨头坏死是骨科较为常见的致残性疾病之一，因其发病机制的不明确性，无法针对病因对其进行精准性治疗，而保留患者的自身髋关节为多数股骨头坏死患者的诉求，以中医药为代表的非手术治疗手段具有简、效、廉等优点，较为被患者所接受[16]。在早期通过中医药适当的干预股骨头坏死患者，能显著改善患者症状、功能、生活质量等方面[17]，而中医药治疗过程中，活血化瘀中药具有公认的治疗效果，且具有不可替代的作用，越来越受到大家的重视与关注。
此次研究从网络药理学角度首次探讨活血化瘀类中药治疗股骨头坏死的共同作用机制，网络分析显示五味活血化瘀中药共有的活性成分132种，化合物中显著性较高的有槲皮素、小檗碱、黄连碱丹参新酮等。有研究通过观察股骨头坏死骨标本病理及显微结构特点发现，激素型股骨头坏死以破骨活动活跃和新骨形成不足为主要表现，并且肉芽组织内有充血的静脉窦[18]，槲皮素可通过阻断RANK信号传导并抑制破骨细胞相关基因的表达来抑制破骨细胞、并可促进破骨细胞的凋亡，还可通过MAPK信号通路恢复成骨细胞功能[19-20]。有文献报道了小檗碱能增强骨髓间充质干细胞的成骨分化[21-22]，还可通过激活PI3K/AKt通路，促进大鼠骨髓间充质干细胞的迁移[23]。黄连碱不仅能抑制RANKL诱导的破骨细胞分化的作用，还能在造骨细胞中抑制RANKL和骨保护素基因的表达[24]，而丹参新酮和槲皮素均具有一定的抗血小板聚集活性[25-26]。132种活性成分中丹参具有65种，丹参其潜在的作用靶点删除重负值后有103个，显著多于另外四味活血化瘀中药，说明丹参具有多成分多靶点的特性。
五味活血化瘀中药同有的潜在作用靶点有31个，其中与治疗股骨头坏死相关的靶点有8个，对应的能作用于这8个靶点的相关活性成分共有98种，其中有94种活性成分能作用于ESR1，说明活血化瘀中药能普遍作用于ESR1。现有文献报道和股骨头坏死发生密切相关的靶点有ESR1、PPARG、NOS2、NOS3。骨细胞中的雌激素受体通过调节Wnt拮抗剂的表达在骨小梁形成中具有骨保护功能[27]，雌激素主用通过与雌激素受体结合而发挥生理作用[28]，有文献报道了雌激素缺乏可能会导致股骨头坏死的发生[29]。动物实验表明，雌激素缺乏会引起骨微结构的变化，导致皮质骨血管孔径增大、骨小梁分离增加以及骨小梁数量减少[30]，雌激素通过与受体结合可促进成骨细胞增殖、抑制破骨细胞活性[28]。脂质代谢紊乱与局部血管内凝血是股骨头坏死发生的重要因素[31-32]，而PPARG是体内脂肪形成的必要转录因子，参与了体内脂肪的代谢过程[31]，NOS3可通过组织缺血来调节新血管的形成，对于缺血重塑以及干细胞和祖细胞的动员至关重要[33-34] ，内皮型一氧化氮合酶催化而成的一氧化氮可舒张血管、抑制血小板积聚等作用[33]。
通过富集分析表明，活血化瘀中药治疗股骨头坏死的生物过程与分子功能主要涉及调节血管、血液状态及促进血管新生等方面。活血化瘀中药治疗股骨头坏死的主要通路有甲状腺激素信号通路、缺氧诱导因子1信号通路、催乳激素信号通路、雌激素信号通路等。甲状腺激素升高可导致破骨和成骨细胞活性增加，而破骨细胞活性增强更为明显[34]。有文献报道了质膜整合蛋白αvβ3为甲状腺激素的受体，甲状腺激素与其结合能促进血管的生成[35]。缺氧诱导因子1可在低氧相关的生理及病理过程中发挥作用，通过上调与血管系统相关蛋白的基因表达，来增加血流量，降低缺血损伤[36]，多项研究报道了缺氧诱导因子1α能促进血管的生成[37-39]。已有文献证实催乳素过高可导致骨密度降低、骨吸收的增加[40]。
综上所述，基于常用活血化瘀中药治疗股骨头坏死的共同作用机制可能为活血化瘀类中药治疗股骨头坏死的主要机制的观点，作者从网络药理学角度预测活血化瘀类中药治疗股骨头坏死的可能主要机制是：活血化瘀中药中的有效成分槲皮素、小檗碱、黄连碱、丹参新酮等，通过作用于雌激素受体(ESR1)、内皮一氧化氮合成酶(NOS3)、一氧化氮合酶(NOS2)、过氧化物酶体增生激活受体γ(PPARG)等靶点，从而参与调控甲状腺激素信号通路、缺氧诱导因子1信号通路、催乳素信号通路、雌激素信号通路等，通过调控成骨与破骨细胞活性，改善血液高凝状态及血管通透性、促进血管的新生，进一步促进坏死的股骨头进行修复而达到治疗作用。但此次研究只是对作用机制的预测探讨，具体的作用机制还需后续的实验进行验证。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

活血化瘀中药治疗股骨头坏死共同作用机制的网络药理学数据

Common mechanism of Chinese herbs for promoting blood circulation and removing blood stasis in the treatment of osteonecrosis of the femoral head: an analysis based on network pharmacology

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