骨髓间充质干细胞修复急性呼吸窘迫综合征

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.32.012

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
急性呼吸窘迫综合征：是指由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭。早在1950年首先由Tenkin提出休克肺概念，随着发现存在多种原因导致该种疾患，1967年Ashbaugh提出“呼吸窘迫综合征”。为区别婴儿因缺乏表面活性物质导致的肺泡表面张力增加，致使部分肺泡萎陷而引起的呼吸困难，人们将由其他因素导致的在成人多发的呼吸窘迫综合征统一命名为成人呼吸窘迫综合征(adult respiratory distress syndrom)，此命名的采用的确曾经对此类疾病的准确诊断和治疗起到过积极的作用。随着人们对其病理生理认识的不断深入，发现急性呼吸窘迫综合征主要是各种急性、严重的肺内或肺外疾病发展到一定程度时，各种炎性递质导致肺内皮和上皮同时受损的结果，不但在成人而且在儿童也可以有此并发症。因此，在1992年欧洲和美国呼吸协会一致将原来“adult respiratory distress syndrome”的adult改为acute，即急性呼吸窘迫综合征。

摘要
背景：临床上骨髓间充质干细胞运用于急性呼吸窘迫综合征尚缺乏报道。
目的：验证骨髓间充质干细胞在大鼠急性呼吸窘迫综合征中的修复效果。
方法：63只SD大鼠随机对照方法分为正常对照组、损伤对照组和骨髓间充质干细胞组，每组21只，另一只用于取干细胞。建立SD大鼠急性呼吸窘迫综合征模型。损伤对照组待其苏醒后不作处理，骨髓间充质干细胞组经尾静脉注入氟尿嘧啶标记的骨髓间充质干细胞。对肺组织切片进行苏木精-伊红染色，采用ELISA检测大鼠肺组织匀浆中白细胞介素1β水平，比较3组SD大鼠肺损伤修复效果。
结果与结论：①苏木精-伊红染色显示：骨髓间充质干细胞组大鼠肺部炎症细胞消退，肺部组织水肿、充血开始消退，并未发生实变情况；损伤对照组肺部组织炎症变化明显，存在明显的水肿和充血情况；对照组大鼠肺部组织正常，未见炎症，未见实变；②骨髓间充质干细胞组肺水肿指数、肺组织匀浆白细胞介素1β含量，显著低于损伤对照组(P < 0.05)，损伤组显著高于正常对照组(P < 0.05)；③结果提示，全骨髓培养法能获得骨髓间充质干细胞，用于大鼠急性呼吸窘迫综合征效果理想，吸入脂多糖后大鼠出现典型的急性呼吸窘迫综合征改变，骨髓间充质干细胞可减少炎症因子释放，直接参与损伤肺上皮修复。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0002-1301-4028(张蕾)

关键词: 干细胞, 移植, 急性呼吸窘迫综合征, 骨髓间充质干细胞, 脂多糖, 氟尿嘧啶, 组织水肿, ；肺水肿指数, 白细胞介素1β

Abstract:

BACKGROUND: To date little is reported clinically on bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) for acute respiratory distress syndrome (ARDS).
OBJECTIVE: To study the effect of BMSCs in ARDS rats.
METHODS: Sixty-three Sprague-Dawley rats were randomly assigned into normal control group, model and BMSCs groups (n=21 per group), followed by establishment of ARDS models. After awakening, rats in the model group were given no treatment, while those in the BMSCs group given tail vein injection of fluorouracil-labeled BMSCs. Then, pathological observation of the lung tissue was conducted using hematoxylin-eosin staining, and ELISA method was employed to detect interleukin-1β level in the rat lung tissue homogenates. Repair effects on lung injury were compared between two groups.
RESULTS AND CONCLUSION: Hematoxylin-eosin staining showed that inflammation, edema and congestion in the rat lung tissue were vanished gradually, but no consolidation was found in the BMSCs group, while there was visible edema and congestion in the lung tissue of rats in the model group. Compared with the model group, pulmonary edema and interleukin-1β level in the lung tissue were significantly reduced in the BMSCs group (P < 0.05). Therefore, the whole bone marrow culture method is suitable to obtain BMSCs that have desired effects on ARDS in rats. In ARDS rats, due to inhalation of lipopolysaccharide, BMSCs can be directly involved in lung epithelial repair by reducing the release of inflammatory factors.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Stem Cells, Mesenchymal Stem Cells, Respiratory Distress Syndrome, Adult, Tissue Engineering

中图分类号:

R394.2

张蕾. 骨髓间充质干细胞修复急性呼吸窘迫综合征[J]. 中国组织工程研究, 2016, 20(32): 4792-4797.

Zhang Lei. Bone marrow mesenchymal stem cells for repairing acute respiratory distress syndrome[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2016, 20(32): 4792-4797.

图/表（结果） 1

2.1 实验动物数量分析 实验选用SD大鼠63只，全部进行结果分析数量，中途无脱失。

2.2 大鼠骨髓间充质干细胞培养与鉴定 采集的骨髓间充质干细胞培养7 d后细胞开始贴壁生长，细胞体积较小，成梭形，并且其形态与成纤细胞十分类似，细胞核较大，核浆较大，细胞聚集生长，见图1A。第2代骨髓间充质干细胞分布相对比较均匀，见图1B。

2.3 骨髓间充质干细胞鉴定 通过免疫荧光法对大鼠骨髓间充质干细胞进行鉴定，结果显示：骨髓间充质干细胞CD29、CD44呈阳性，CD34和CD45为阴性。

2.4 大鼠骨髓间充质干细胞传代生长情况 骨髓间充质干细胞在传代生长过程中随传代次数的不断增加，细胞增殖能力出现下降趋势，且每次传代经历两三天，经2-5 d后经历对数增殖期而进入平台期，见表1，图2。

2.5 各组大鼠大体观察 3组大鼠均取得手术成功，损伤对照组6只出现呼吸困难，2只不活动，3只不进食；骨髓间充质干细胞组1只呼吸困难，1只不活动，均能按时进食，对照组大鼠呼吸正常，未见异常。3组大鼠大体观察差异有显著性意义(P < 0.05)。

2.6 各组大鼠肺组织观察 2个月后处死大鼠，对肺部组织进行切片苏木精-伊红染色结果显示：骨髓间充质干细胞组大鼠肺部炎症细胞消退，肺部组织水肿、充血开始消退，并未发生实变情况见图3A；损伤对照组肺部组织炎症变化明显，存在明显的水肿和充血情况，见图3B；正常对照组大鼠肺部组织见图3C。

2.7 各组大鼠氧合指数、肺水肿指数、匀浆白细胞介素1β含量比较 骨髓间充质干细胞组氧合指数显著增高，肺水肿指数、肺组织匀浆白细胞介素1β水平，显著低于损伤对照组(P < 0.05)，损伤组显著高于正常对照组(P < 0.05)，见表2。

参考文献

[1] Pereira T, Armada-da Silva PA, Amorim I, et al. Effects of human-mesenchymal stem cells is olatedfromwharton's jelly of the umbilical cord and conditioned media on skeletal muscle regenerationusing a myectomymodel. Stem Cells Int.2014;2014: 376918.
[2] 强勇,梁贵友.间充质干细胞移植治疗急性呼吸窘迫综合征的研究进展[J/CD].中华细胞与干细胞杂志:电子版，2014,4(3):211-216.
[3] 甄国华,刘红梅,张珍祥,等.骨髓间充质干细胞移植对木瓜蛋白酶和[-(60)Co]射所致大鼠肺气肿的作用[J].中国病理生理杂志,2008,24(8):1529-1533.
[4] Fang X,Neyrinck AP,Matthay MA,et al. Allogeneic human mesenchymal stem cells restore epithelial protein permeability in cultured human alveolar type II cells by secretion of angiopoietin-1. J Biol Chem. 2010; 285(34):26211-26222.
[5] 陈建,许林.胸外科手术致急性呼吸窘迫综合征的研究进展[J].医学研究生学报,2009,22(02):205-208.
[6] 黄坤,吴晓梅,王欣燕,等.骨髓间充质干细胞向肺泡细胞转化的实验研究[J].中国呼吸与危重监护杂志,2011,10(06): 572-576.
[7] Bassi EJ,Aita CA,Camara NO. Immune regulatory properties of multipotent mesenchymal stromal cells:Where do we stand. World J Stem Cells.2011; 3(1):1-8.
[8] Lee RH,Pulin AA,Seo MJ,et al. Intravenous hMSC improve myocardial infarction in mice because cells embolized in lung are activated to secrete the anti-inflammatory protein TSG-6. Cell Stem Cell. 2009; 5(1):54-63.
[9] Bove PF,Grubb BR,Okada SF,et al. Human alveolar typeⅡ cells secrete and absorb liquid in response to local nucleotide signaling.J Biol Chem.2010;285(45) : 34939-34949.
[10] 周晓光,刘秀香,刘任红,等.高氧暴露早产大鼠肺泡上皮细胞损伤与细胞外基质变化的动态研究[J].中国新生儿科杂志,2008,23(4):215-218.
[11] 李百玲,柴家科,段红杰,等.肺泡Ⅱ型上皮细胞在急性呼吸窘迫综合征/急性呼吸窘迫综合征中的研究进展[J].中华损伤与修复杂志:电子版,2014,9(3):323-325.
[12] Goto H,Ledford JG,Mukherjee S,et al.The Role of Surfactant Protein A in Bleomycin-induced Acute Lung Injury.Am J Ｒespir Crit Care Med.2010;181(12) : 1336-1344.
[13] Bove PF,Grubb BR,Okada SF,et al.Human alveolar typeⅡ cells secrete and absorb liquid in response to local nucleotide signaling.J Biol Chem.2010;285(45) : 34939-34949.
[14] 中华医学会重症病学分会.急性呼吸窘迫综合征/急性呼吸窘迫综合征诊断与治疗指南(2006)[J].中华急诊医学杂志,2007,16(4):343-349.
[15] 顾晓凌,宋勇.线粒体DNA在急性呼吸窘迫综合征发生、发展中的作用[J].中华肺部疾病杂志:电子版,2012,5(4): 348-350.
[16] 马李杰,李王平,金发光.急性呼吸窘迫综合征/急性呼吸窘迫综合征发病机制的研究进展[J].中华肺部疾病杂志:电子版,2013,6(1):65-68.
[17] 刘涛,任成山.炎症介质在急性呼吸窘迫综合征/急性呼吸窘迫综合征发病机制中的作用[J].中华肺部疾病杂志:电子版,2013,6(3):265-269.
[18] Spragg RG,Bernard GR,Checkley W,et al. Beyond mortality: future clinical research in acute lung injury.Am J Respir Crit Care Med.2010; 181(10): 1121-1127.
[19] Meyer NJ,Li M,Feng R,et al.ANGPT2 genetic variant is associated with trauma-associated acute lung injury and altered plasma angiopoietin-2 isoform ratio. Am J Respir Crit Care Med.2011;183(10):1344-1353.
[20] Brown LM,Calfee CS,Matthay MA,et al. A simple classification model for hospital mortality in patients with acute lung injury managed with lung protective ventilation. Crit Care Med.2011;39(12):2645-2651.
[21] Kangelaris KN,Sapru A,Calfee CS,et al.The association between a Darc gene polymorphism and clinical outcomes in African American patients with acute lung injury. Chest.2012;141(5):1160-1169.
[22] 施卉,任成山.急性呼吸窘迫综合征/急性呼吸窘迫综合征基础及临床研究进展[J].中华肺部疾病杂志:电子版, 2013, 6(4):350-355.
[23] 李天林,文文,赖国祥,等.血管紧张素转化酶2在海水淹溺诱导大鼠急性呼吸窘迫综合征中的作用[J].中国呼吸与危重监护杂志,2012,11(6):537-540.
[24] 张新红,段蕴铀,芮萌,等.不同剂量地塞米松对海水淹溺型急性呼吸窘迫综合征的治疗作用观察[J].解放军医学杂志,2009,34(7):815-818.
[25] Hayashi Y, Tsuji S, Tsujii M,et al.Topical implantation of mesenchymal stem cells has beneficial effects on healing of experimental colitis in rats. J Pharmacol Exp Ther. 2008;326(2):523-531.
[26] Sueblinvong V,Weiss DJ. Cell therapy approaches for lung diseases:current status. Curr Opin Pharmacol. 2009;9(3): 268-273.
[27] Todeschi MR,E Backly R,Capelli C,et al. Transplantedumbilical- cordmesenchymal stem cellsmodify the in vivo microenvironmenten- hancingangiogenesis and leading to boneregeneration. Stem Cells Dev.2015;24(13): 1570-1581.
[28] Wang L,Seshareddy K,Weiss ML,et al.Effect of initial seeding-density on human umbilical cord mesenchymal stromalcells for fibro cartilage tissue engineering.Tissue Eng Part A.2009;15(5):1009-1017.
[29] 华静,冯华松,王庆,等.海水淹溺致大鼠急性呼吸窘迫综合征模型的建立.现代生物医学进展,2013,13(27):5242- 5246.
[30] 张红霞,王蒙蒙,李惠萍,等.白藜芦醇对博来霉素诱导小鼠肺损伤的保护作用.第二军医大学学报,2013,34(12): 1287-1290.
[31] 张祺嘉钰,王国全,余林中,等.两种内毒素经支气管给药致急性呼吸窘迫综合征模型再评价研究[J].中药药理与临床,2012,28(5):226-229.
[32] 张兵华,费晋秀,赵亚玲,等.兔海水淹溺性肺水肿与钠钾-ATP酶的关系及不同剂量地塞米松对其影响[J].陕西医学杂志,2011,40(1):11-14.
[33] Ohno N,Kajiume T,Sear Y,et al.Short-term culture of umbilical cord blood-derived CD34 cells enhances engraftment into NOD/SCID mice through increased CXCR4 expression. Stem Cells Dev.2009;18(8): 1221-1226.
[34] 顾兴,金发光,刘同刚.三七总皂苷对海水淹溺兔肺泡巨噬细胞TNF-αmRNA表达的影响.中国中医急症,2011, 20(10):1608-1610.
[35] 曹万英,金发光,罗颖,等.乌司他丁治疗大鼠海水淹溺型急性呼吸窘迫综合征的实验观察[J].中国呼吸与危重监护杂志,2011,10(2):139-143.
[36] 郭帅,曾志勇,杨胜生,等.骨髓间充质干细胞对海水淹溺致急性呼吸窘迫综合征治疗作用的研究进展[J].中国胸心血管外科临床杂志,2015,22(4):375-379.
[37] Peek GJ,Mugford M,Tiruvoipati R,et al.Efficacy and economic assessment of conventional ventilatory support versus extracorporeal membrane oxygenation for severe adult respiratory failure (CESAR): a multicentre randomised controlled trial. Lancet. 2009; 374(9698):1351-1363.

引言

急性呼吸窘迫综合属于危急重症之一，患者发病后主要以呼吸窘迫、低氧血症等为主，如果不采取积极有效的方法治疗，容易引起多器官衰竭，严重者将威胁其生命^[1]。目前，临床上对于急性呼吸窘迫综合征发病机制尚不完全知晓，诱因也相对较多，如感染、创伤、休克、有毒气体等均容易导致肺部功能损伤^[2-3]。影像学检查下主要以弥漫性肺泡-毛细血管膜损伤为主，导致机体内炎症因子的释放，造成机体肺部功能发生不同程度的侵害，肺部表面物质丧失活性^[4-5]。目前，对于急性呼吸窘迫综合征主要以机械通气治疗、药物治疗等为主，但是患者死亡率高达40%以上^[6-7]。

近年来，组织工程学得到进一步发展，使得人们对于干细胞技术在肺损伤中的修复作用研究较多^[8]。文献报道显示：人体中的各种组织器官存在一种特殊的成体细胞，该类细胞有在组织损伤后修复和再生作用^[9-10]，并且在生理状态下保持静止状态，当机体组织受到损伤后需要进行有效修复时，能在一定条件下被激活，对缺损部位进行修复和再生^[11-12]。骨髓间充质干细胞属于特殊的成体细胞，细胞获取方法相对较多，能在体外大量扩增，且生物相容性较好，不会引起机体免疫排斥反应。因此，临床上急性呼吸窘迫综合征患者采用骨髓间充质干细胞进行修复可能是一种理想的治疗方法^[13-14]。相关学者研究显示：炎症能刺激、诱导机体骨髓干细胞释放，能替换损伤细胞促进缺损部位早期恢复^[15-16]。但是，机体自身修复相对有限，尚需要进行进一步治疗。

文章研究骨髓间充质干细胞的分离、鉴定方法，探讨骨髓间充质干细胞在大鼠急性呼吸窘迫综合征中的修复效果。

材料方法

1.1 设计 动物性分析。

1.2 时间及地点 于2014年11月至2015年11月南阳医学高等专科学校动物实验中心完成。

1.3 材料

实验动物：选取63只SD大鼠资料进行分析，SPF级，体质量为0.14-0.38 kg，平均(0.38±0.18) kg，雌雄随机，实验动物均由南阳医学高等专科学校动物实验中心提供，大鼠均行等条件饲养，且对SD大鼠的处理符合《关于善待实验动物的指导性意见》相关规则^[17-18]。采用随机对照方法将63只SD大鼠分为正常对照组、损伤对照组和骨髓间充质干细胞组，每组21只；另选1只SD大鼠用于取干细胞。

仪器和试剂：DMEM培养基(Gibco公司)；乙二胺四乙酸(EOTA)(北京化工厂)；倒置相差显微镜(日本 OLYMPUS公司)；通用型SP-9000免疫组化染色试剂盒(北京天来生物医学科技公司)；小鼠抗细胞角蛋白多抗、抗体稀释液(武汉博士德生物工程公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 骨髓间充质干细胞的分离、鉴定 ①骨髓间充质干细胞分离。取1只大鼠，采用颈椎脱臼法将其处死，浸润于体积分数75%的乙醇中3-5 min中，全身消毒，采用手术剪刀剪去除大鼠后肢皮毛、软组织，采用平镊、咬骨钳无菌分离大鼠后肢股骨、胫骨，清除骨上软组织及骨骺，浸在4 ℃不完全培养基中，抽取完成培养基反复冲洗骨髓腔3次，并将其放置在15 mL离心管中，捶打制作单细胞悬液。将离心管放置在离心沉淀中，进行5 min离心，速度为1 500 r/min，去除上层清夜，沉淀后加入完全培养基进行一次冲洗，制作细胞悬液，按1×(10⁷-10⁸)L^-¹细胞浓度接种在培养皿中进行培养。接种后24 h首次换液，此后3 d换液1次，待细胞融合80%后开始传代，采用新鲜培养基重新悬浮细胞调整细胞密度仪2×10⁸ L^-¹接种在T25培养瓶中^[19-20]。②骨髓间充质干细胞鉴定。取第3代骨髓间充质干细胞，当细胞培养融合80%后进行细胞鉴定。取8孔细胞，取出培养液后加入500 μL浓度为40 g/L的多聚甲醛进行10 min固定，PBS冲洗3次，加入兔抗大鼠多克隆抗体，孵育24 h后采用PBS冲洗并加入300 μL山羊抗兔FITC标记的二抗，PBS冲洗后滤过表面体液，在荧光显微镜下观察^[21-22]。

1.4.2 SD大鼠建模及处理方法 将入选SD大鼠均采用体积分数3.6%水合氯醛进行全身麻醉，待麻醉生效后进行消毒、铺巾。大鼠仰卧固定在手术台上，采用移液枪吸取50 μL质量浓度为1 g/L的脂多糖，注射在大鼠咽后壁，立即捏住大鼠鼻子，30 s后松开舌、鼻，苏醒后不进行任何处理，建立SD大鼠急性呼吸窘迫综合征模型。骨髓间充质干细胞组麻醉后咽后壁吸入脂多糖，7 h后经静脉注入经Brdu标记的骨髓间充质干细胞，含有2.5×10⁶个细胞。正常对照组咽后壁滴入等量生理盐水。2个月后，麻醉解剖大鼠，取血做血气分析，以氧合指数小于300 mm Hg (1 mm Hg=0.133 kPa)作为急性呼吸窘迫综合征模型成功的标志，同时参考肺损伤临床标准对大鼠建模后临床表现以及影像学改变进行测定，说明实验建模成功。2个月后处死3组大鼠后取肺部组织进行观察^[23-24]。

1.4.3 大鼠肺组织匀浆制备及白细胞介素1β测定 取出大鼠肺组织，无菌纱布蘸取表面血迹，电子天平称质量后，计算肺水肿指数：肺质量(g)/体质量(kg)。匀浆白细胞介素1β。采用生理盐水为介质制备浓度为10%均浆，进行15 min离心，速度为3 000 r/min，留取上层清液、备用。利用ABC-ELISA法测定肺组织匀浆中白细胞介素1β含量。

1.5 主要观察指标 ①大鼠骨髓间充质干细胞培养与鉴定；②观察大鼠骨髓间充质干细胞传代生长；③3组大鼠大体情况；④观察3组大鼠肺组织显微镜显示情况；⑤2个月后取动脉血测血气分析，处死大鼠，取其肺组织，测量肺水肿指数、匀浆白细胞介素1β含量。

1.6 统计学分析 采集数据采用SPSS 18.0处理，计数资料采用n(%)表示，行卡方检验，计量资料采用x(_)±s表示，行t 检验，P < 0.05提示差异有显著性意义。

讨论

急性呼吸窘迫综合征是临床上常见的疾病，这种疾病发病率较高，病情凶险，患者发病后如果不采取积极有效的方法治疗，将会诱发其他疾病，严重者将威胁患者生命^[25-26]。目前，临床上对于急性呼吸窘迫综合征治疗方法相对较多，如：药物治疗、手术治疗等，这些方法虽然能改善患者症状，但是临床死亡率较高，预后较差，不利于患者恢复^[27-28]。

实验研究了骨髓间充质干细胞在急性呼吸窘迫综合征中的作用。为了获得稳定的急性呼吸窘迫综合征动物模型，采用脂多糖诱导大鼠产生急性肺损伤。文献报道显示：采用脂多糖对大鼠进行腹腔注射或静脉注射，除了引起机体肺部损伤外，还会引起许多器官产生相应的炎症损伤。同时，大鼠造模后容易引起机体内产生内毒素休克，甚至引起死亡，导致肺部炎症损伤时间过长，造模不稳定。

实验采用脂多糖咽后壁吸入方法建立，利用大鼠自然吸气时吸入脂多糖，保证其能均匀的到达肺部，该建模方法相对稳定，快速、简便，与临床由细菌感染引起的肺损伤十分相似。骨髓间充质干细胞从大的角度来说属于是一种多分化潜能的干细胞，在一定诱导条件下能形成骨、软骨或脂肪等，属于组织工程的种子细胞^[29-30]。

实验中，吸取大鼠后肢股骨/胫骨骨髓进行全骨髓培养，该方法通过换液方法可以去除红细胞等杂细胞，对于贴壁细胞，根据黏附能力不同，能调整胰蛋白酶消化时间，从而能获得纯化的骨髓间充质干细胞，该方法最大限度的暴露了骨髓中的骨髓间充质干细胞，去除了杂细胞。研究采集的骨髓间充质干细胞培养7 d后开始贴壁生长，细胞体积较小，成梭形，并且其形态与成纤细胞十分类似，细胞核较大，核浆较大，细胞聚集生长，第2代骨髓间充质干细胞分布相对比较均匀。目前，临床上骨髓间充质干细胞培养、分离方法相对较多，作为组织工程的种子细胞，细胞的纯度越高更加符合组织工程研究要求^[31-32]。骨髓间充质干细胞具有自我更新及多向分化能力，具有取材容易，细胞增殖快速，生物学稳定，便于自体移植等特点^[33-34]。

研究中3组大鼠均取得手术成功，损伤对照组6只出现呼吸困难，2只不活动，3只不进食；骨髓间充质干细胞组1只呼吸困难，1只不活动，均能按时进食，2组大鼠大体观察差异有统计学意义(P < 0.05)。同时，骨髓间充质干细胞植入损伤肺部后能明显抑制炎症反应，从而能减轻内毒素等引起的肺损伤。骨髓干细胞能够“感受到”目标器官的损伤，移植到损伤部位，进一步分化从而促进组织和功能的修复，通过尾静脉注入的外源骨髓间充质干细胞出现在肺损伤部分，能够产生某些体液调节因子^[35-36]。这些因子能够趋化骨髓间充质干细胞进入损伤的肺组织，进一步刺激骨髓间充质干细胞的增殖^[37]。研究中骨髓间充质干细胞组肺水肿指数、肺组织匀浆白细胞介素1β含量，显著低于损伤对照组(P < 0.05)，损伤组显著高于正常对照组(P < 0.05)。由于脂多糖诱导肺损伤时浸润的炎症细胞中以中性粒细胞为主，并且在肺组织中引起中性粒细胞聚集增多，通过检测肺损伤大鼠骨髓间充质干细胞治疗后大鼠肺组织中白细胞介素1β水平能动态了解大鼠治疗效果。

综上所述，全骨髓培养法能获得骨髓间充质干细胞，用于大鼠急性呼吸窘迫综合征治疗效果理想，可减少炎症因子释放，直接参与损伤肺上皮修复，具有较高的临床应用价值。