胃癌微环境对大鼠骨髓间充质干细胞形态、生长及CD34、CD44表达的影响

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.14.009

中国组织工程研究 ›› 2016, Vol. 20 ›› Issue (14): 2040-2045.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.14.009

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胃癌微环境对大鼠骨髓间充质干细胞形态、生长及CD34、CD44表达的影响

吴高峰¹，刘喜平¹，杨柏林¹，李沛清¹，明海霞¹，张炜²

1甘肃中医药大学基础医学院，甘肃省兰州市 730000；2兰州大学第一附属医院，甘肃省兰州市 730000

收稿日期:2016-02-21 出版日期:2016-04-01 发布日期:2016-04-01
通讯作者: 刘喜平，博士，教授，甘肃中医药大学基础医学院，甘肃省兰州市 730000
作者简介:吴高峰，男，1988年生，湖北省武汉市人，汉族，甘肃中医药大学在读硕士，主要从事消化系统疾病的基础与临床研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目(81260525)

Morphology and proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and expressions of CD34 and CD44 under stomach cancer microenvironment

Wu Gao-feng¹, Liu Xi-ping¹, Yang Bai-lin¹, Li Pei-qing¹, Ming Hai-xia¹, Zhang Wei²

1Basic Medicine School of Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 73000, Gansu Province, China; 2the First Affiliated Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 73000, Gansu Province, China

Received:2016-02-21 Online:2016-04-01 Published:2016-04-01
Contact: Liu Xi-ping, M.D., Professor, Basic Medicine School of Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, Gansu Province, China
About author:Wu Gao-feng, Studying for master’s degree, Basic Medicine School of Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, Gansu Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81260525

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
肿瘤微环境：是一个复杂的综合系统，是肿瘤在其发生发展过程中所处的内环境，主要由肿瘤细胞本身、众多基质细胞及肿瘤细胞产生的细胞因子、蛋白水解酶、微血管、微淋巴管、组织液等共同构成。
CD34分子：是高度糖基化的i型跨膜糖蛋白，选择性地表达于人类及其他哺乳动物造血干/祖细胞表面，并随细胞的成熟逐渐减弱至消失。目前已有愈来愈多的研究结果表明CD34分子在介导细胞间黏附作用中发挥着重要作用，可以参与造血干细胞的运输、定植，参与炎症反应以及淋巴细胞的归巢。

背景：临床胃癌组织及裸鼠体内致瘤组织分离得到的胃癌间质干细胞(GC-MSCs)，其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似，并证明是肿瘤微环境的重要组成部分，可促进肿瘤的生长，作者推测骨髓间充质干细胞在胃癌微环境中生物学特性可能发生变化。
目的：观察胃癌微环境对骨髓间充质干细胞形态、生长及CD34、CD44表达的影响。
方法：设立骨髓间充质干细胞单独常规培养为对照组，实验组采用transwell小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠骨髓间充质干细胞非接触共培养建立胃癌微环境，倒置相差显微镜观察骨髓间充质干细胞形态的变化、四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)观察骨髓间充质干细胞的增殖率、流式细胞术(FCM)检测骨髓间充质干细胞周期及表面抗原CD34、CD44的表达。
结果与结论：①实验组骨髓间充质干细胞排列紊乱，不规则，细胞间连接疏松，细胞变细、变长，胞核变小，呈团生长，与人胃BGC-823癌细胞形态有相似之处；②G₁期细胞比例明显降低，S期细胞比例明显增加(P < 0.01)、G₂/M期细胞比率显著增加(P < 0.05)；③实验组骨髓间充质干细胞的CD44阳性表达率显著降低，CD34阳性表达率显著降升高(P < 0.01)；④结果表明，将人胃癌BCG-823细胞与大鼠骨髓间充质干细胞非接触共培养模拟胃癌微环境对骨髓间充质干细胞形态、生长增殖及CD34、CD44表达有显著影响，有向胃癌细胞恶性转化的趋势。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0002-7681-0363(刘喜平)

关键词: 干细胞, 骨髓干细胞, 胃癌微环境, 骨髓间充质干细胞, 细胞增殖, CD34、CD44, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Gastric cancer mesenchyal stem cells from clinical stomach cancer specimens and tumorigenic tissues in nude mice are similar to the bone marrow mesenchymal stem cells in biological characteristics, which have been proved to be an important component of tumor microenvironment to promote tumor growth. It is speculated that biological characteristic of bone marrow mesenchymal stem cells may change in stomach cancer microenvironment.

OBJECTIVE: To observe the effect of stomach cancer microenvironment on morphology and proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and expressions of CD34 and CD44.

METHODS: Rat bone marrow mesenchymal stem cells were cultured alone as control group. In the test group, rat bone marrow mesenchymal stem cells were co-cultured with human stomach cancer BGC-823 cells using Transwell chamber assay to establish the stomach cancer microenvironment. Then, cell morphology, proliferation, cell cycle and CD34, CD44 expressions were observed and detected using inverted phase contrast microscope, MTT assay, and flow cytometry, respectively.

RESULTS AND CONCLUSION: In the test group, bone marrow mesenchymal stem cells were similar to human stomach cancer cells BGC-823 that arranged disorderly and irregularly, were interconnected loosely, became thinner and longer, and grew in clusters with smaller nuclei. The cell proportion in G₁ phase significantly decreased, but that in S and G₂/M phases significantly increased (P < 0.01, P < 0.05). The positive rate of CD44 significantly declined, and the CD34 expression significantly raised (P < 0.01). In conclusion, stomach cancer microenvironment by non-contact co-culture with BCG-823 cells has an obvious effect on the morphology, proliferation and surface antigens expressions of bone marrow mesenchymal stem cells that will tend to be malignant gastric cancer cells.
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Mesenchymal Stem Cells, Cell Proliferation, CD34, CD44, Tissue Engineering

吴高峰，刘喜平，杨柏林，李沛清，明海霞，张炜. 胃癌微环境对大鼠骨髓间充质干细胞形态、生长及CD34、CD44表达的影响[J]. 中国组织工程研究, 2016, 20(14): 2040-2045.

Wu Gao-feng, Liu Xi-ping, Yang Bai-lin, Li Pei-qing, Ming Hai-xia, Zhang Wei. Morphology and proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and expressions of CD34 and CD44 under stomach cancer microenvironment[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2016, 20(14): 2040-2045.

图/表（结果） 7

参考文献

[1] Nakamizo A,Marini F,Amano T,et al.Human bone marrow-derived mesenchymal stemcell in the treatment of gliomas.Cancer Res.2005;65(8): 3307-3318.

[2] Nakamura K,Ito Y,Kawano Y,et al.Anti-tumor effect of genetically engineered Mesenchymal stem cells in a rat gliomas.Gene Therapy.2004;11(14):1155-1164.

[3] Studeny M,Marini FC,Dembinski JL,et al.Mesenchymal Stem Cells:potential precursors for tumor stroma and targeted-delivery vehiclesfor anticancer agents.J Natl Cancer Inst.2004;96(21):1593-1603.

[4] Miuraa M,Miura Y,Padilla-Nash HM,et al.Accumulated chromo-somal instability in murine bone marrow mesenchymal stem cells tomalignant transformation. Stemcell.2006;24(4):1095-1103.

[5] Rosland GV,Svendsen A,Torsvik A ,et al.Long-term cultures of bone marrow derived human　mesenchymal stem cells frequently un-dergo spontaneous malignant transformation.Cancer Res.2009;69(13):5331-5339.

[6] Laconi E.The evolving concept of tumor microenvironments.Bioessays.2007;29(8):738-744.

[7] Bexell D, Gunnarsson S, Tormin A, et a1.Bone marrow mu1potent mesenchym al storm a cells act as pericyte-1ike migratory vehicles in experim ental gliomas.Molecular Therapy.2009;17(6):183-190

[8] Bergfeld SA,DeClerck YA.Bone marrow- derived mesenchymal stem cells and the tumor microenvironment. Cancer Metastasis Rev.2010;29( 2): 249 -261.

[9] 张亚兰,朱静,田杰,等.肿瘤微环境中间充质干细胞的相关生物学特性分析.解放军医学杂志,2010,35(1):67-70.

[10] 刘永琦,王倩,秦洁,等.肿瘤微环境对骨髓间充质干细胞形态、生长及增殖的影响[J].中国细胞生物学学报,2013, 35(2):180-187.

[11] 景明,陈正君,王雅莉,等.结肠癌微环境对骨髓间充质干细胞形态、增殖及CD13、CD133表达的影响,2014,33(9): 497-500.

[12] Ogasawara N, Tsukamoto T, Inada K, et al.Frequent c-Kit gene mutations not only in gastrointestinal stromal tumors but also in intersti-tial cells of Cajal in surrounding normal mucosa.Cancer Lett.2005;230(2): 199-210

[13] Houghton J, Stoicov C, Nomura S, et al.Gastric cancer originating from bone marrow-derived cells.Science. 2004; 306(3):1568-1571

[14] 李争艳,刘杨,翟丽丽,等.胃癌细胞 SGC-7901对骨髓来源的间充质干细胞作用的研究[J].临床与实验病理学杂志,2011,27(8):856-859

[15] Jones DL ,Wagers AJ.No place like home:anatomy and function of the stem cell niche.Nature Reviews Molecular Cell Biology.2008;9(1):11-21.

[16] De Ugarte DA, Alfonso Z, Zuk PA, et al.Differential expression of stem cell mobilization-associated molecules on multi-lineage cells from adipose tissue and bone marrow.Immunol Lett.2003;89(3): 267.

[17] Shahdadfar A, Fronsdal K, Haug T, et al.In vitro expansion of human mesenchymal stem cells choice of serum is a determinant of cell proliferation, differentiation, gene expression, and transcriptome stability.Stem Cells.2005;23(9): 1357-1366.

引言

材料方法

1.1 设计细胞学体外实验观察。

1.2 时间及地点于2014年1至7月在甘肃中医药大学科研实验中心完成。

1.3 材料

实验动物：SPF级2周龄SD乳大鼠8只，体质量(45±5) g，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，合格证号SCXK(京)2014-0004。

胃癌细胞：人胃癌BGC-823细胞，由上海中科院细胞库提供，用含有青链霉素各100 u/mL的DMEM/F12培养基置于体积分数5% CO₂、37 ℃条件下的培养箱中培养，定期换液传代，选择对数生长期的BGC-823细胞用于实验。

胃癌微环境对大鼠骨髓间充质干细胞影响实验用主要试剂及仪器：
试剂和仪器	来源
胎牛血清、PBS消化液、DMEM/F12培养基、FBS消化液	Hyclone公司
0.05%胰酶-EDTA、1%青链霉素混合液	Gibco公司
MTT试剂盒、CD34/FITC抗体、 CD44/PE抗体	英国abcam公司
流式细胞仪	美国Becton Dicknson公司
Transwell小室	美国Costar公司

1.4 实验方法

1.4.1 大鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养取SD乳大鼠，颈椎脱臼法处死后，分离出大鼠股骨和胫骨，从中剪断骨头，用2 mL无菌注射器吸取DMEM/F12溶液冲出骨髓细胞多次，再用针头吹打，吸管吸入离心管内，1 000 r/min离心5min，弃上清，用PBS重悬细胞，缓慢将细胞悬液加入预先装有5 mL淋巴细胞分离液的15 mL离心管内，2 000 r/min离心15-25 min，离心后溶液分4层，吸取中间骨髓基质细胞层(白色浑浊状)，PBS洗3次。用含体积分数15%胎牛血清及青链霉素的DMEM/F12以10⁹ L^-¹的细胞浓度接种于25 cm²培养瓶中，置37 ℃、体积分数5% CO₂恒温培养箱中传代培养。

1.4.2 实验分组及细胞共培养体系的建立实验分为对照组(骨髓间充质干细胞单独常规培养)、实验组(骨髓间充质干细胞与BGC-823细胞共培养)。对照组以第3代骨髓间充质干细胞以2×10⁵的量接种于Transwell小室内，下层为为含体积分数10%胎牛血清和1%青链霉素混合液的DMEM/F12基础培养液。实验组采用具有PET膜的Transwell悬挂式培养小室结合6孔板进行非接触式共培养，将第3代骨髓间充质干细胞以2×10⁵的量种植于Transwell共培养系统的下室，再将Transwell的上室置于孔中，BGC-823细胞以2×10⁵的量接种于上室内。分别在37 ℃、体积分数5% CO₂恒温培养箱中培养7 d后终止培养，进行相关检查。

1.4.3 各组细胞形态学观察各组细胞7 d后终止培养，收集细胞移到培养瓶中继续培养，倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态变化，并照相记录。

1.4.4 MTT法检测骨髓间充质干细胞的增殖收集各组细胞，用0.25%胰蛋白酶将骨髓间充质干细胞消化制成单细胞悬液，并调整细胞浓度为1×10⁷ L^-¹，分别接种于96孔培养板，每组细胞每个培养板接种3复孔，每孔200 μL。同时设不加细胞只加培养液的空白对照孔，其操作与实验组和对照组一致。每组每天每孔加入20 μL 5 g/L MTT溶液，将培养板在体积分数5% CO₂、37 ℃、饱和湿度培养箱中培养内孵育4 h。终止培养，小心吸去孔内培养液。沉淀内加入150 μL二甲基亚砜，摇床上低速震荡10 min，使结晶物充分溶解，用酶联免疫检测仪分别于第1，2，3，4，5，6，7天，选择490 nm波长处测定吸光度(A值)，计算细胞增殖率：细胞增殖率(%)=实验组或对照组-空白孔/空白孔A值× 100%。每个样品计数3次，取平均值，以时间为横坐标，细胞增殖率为纵坐标，绘制细胞增殖曲线图。

1.4.5 FCM检测骨髓间充质干细胞周期各组细胞培养7 d后终止培养，用胰酶将骨髓间充质干细胞消化成单细胞悬液，离心3-5 min后沉淀细胞，弃上清，以冰浴预冷的PBS重悬细胞；用4 ℃冰浴预冷的体积分数70%乙醇固定过夜，再以冰浴预冷的PBS重悬细胞，参考周期试剂盒说明，每管细胞样品中加入0.5 mL碘化丙啶染色液，缓慢并充分重悬细胞沉淀，37 ℃避光温育 30 min。随后可以4 ℃或冰浴避光存放，染色完成后宜在24 h内完成流式检测。FCM在激发波长488 nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况，分析细胞DNA含量和光散射分析，计算G₁、G₂期及S期细胞比例。实验重复3次。

1.4.6 FCM检测骨髓间充质干细胞的CD34和CD44表达取经胰酶消化的骨髓间充质干细胞单细胞悬液，调整细胞浓度为1×10⁸ L^-¹，PBS清洗后弃上清用于标记。每组细胞均按每管约10⁶个细胞的比例，收集至Eppendorf 管中。加入用Staining Buffer稀释后的一抗， 4 ℃孵育30 min。洗涤2次后，实验组与对照组加入异硫氢酸荧光素(FITC)标记的CD34和藻红蛋白(PE)标记的CD44羊抗鼠二抗。另设同型对照管，同型对照管加入Staining Buffer及与实验组、对照组等体积的FITC标记CD34和PE标记CD44同型对照抗体。4 ℃孵育30 min，细胞洗3次，重悬细胞后上流式仪检测。

1.5 主要观察指标通过transwell小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠骨髓间充质干细胞非接触共培养建立胃癌微环境，倒置相差显微镜观察骨髓间充质干细胞形态的变化、骨髓间充质干细胞的增殖率、流式细胞术检测骨髓间充质干细胞周期及表面抗原CD34、CD44的表达。

1.6 统计学分析实验结果采用SPSS 17.0软件进行统计学分析，计量资料用x(_)±s表示，组间比较用配对样本的t 检验，P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

干细胞生存的微环境亦称干细胞巢，它是干细胞维持稳态(homeostasis)，即保持细胞正常增殖、分化、代谢和功能活动的关键，巢的成分改变和巢中信号通路的改变可能导致正常的干细胞发生病变，导致干细胞分化受阻并过度增殖，向肿瘤细胞转化^[6]。肿瘤微环境是一个复杂的综合系统，是肿瘤在其发生发展过程中所处的内环境，主要由肿瘤细胞本身、众多基质细胞及肿瘤细胞产生的细胞因子、蛋白水解酶、微血管、微淋巴管、组织液等共同构成^[7]。肿瘤微环境能调控肿瘤细胞和骨髓间充质干细胞的增殖、分化等多种生物学行为^[8]。已有研究表明，胶质瘤微环境^[9]、肺癌微环境^[10]、结肠癌微环境可诱导骨髓间充质干细胞引起细胞形态^[11]、增殖能力等生物学特性的改变。研究认为胃癌发病与骨髓间充质干细胞有关，幽门螺杆菌等长期慢性感染，骨髓来源的干细胞会聚集到胃粘膜处，参与损伤修复并增生，久而久之发生肠化、不典型增生及癌肿^[12]。临床胃癌组织及裸鼠体内致瘤组织分离得到的胃癌间质干细胞(GC-MSCs)，其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似^[13]，并证明是肿瘤微环境的重要组成部分，可促进肿瘤的生长，研究进一步显示在胃癌微环境中，骨髓间充质干细胞可向肿瘤相关成纤维母细胞(TAFs)转化，表达TAF的特异标志，体内可促进肿瘤细胞生长^[14]。也有研究认为短时间的培养虽影响不到其增殖，但处于胃癌微环境中的骨髓间充质干细胞生物学特性已发生一定的改变来适应肿瘤微环境^[15]。

研究采用transwell 小室将人胃癌BCG-823细胞与大鼠骨髓间充质干细胞共培养方式建立胃癌微环境中骨髓间充质干细胞的生长转化模型。实验结果表明，人胃癌BCG-823细胞与大鼠骨髓间充质干细胞共培养后，细胞排列紊乱，不规则，细胞间连接疏松，细胞变细变长，胞核变小，呈团生长，与人胃BGC-823癌细胞形态有相似之处；G₁期细胞比例明显降低，S期细胞比例明显增加、G₂/M期细胞比率显著增加，骨髓间充质干细胞的增殖率明显增高，表明胃癌微环境对骨髓间充质干细胞的增殖产生显著影响，这与相关研究并不一致^[14]，可能与培养时间差异有关。

骨髓间充质干细胞的表面抗原并不是独特的，目前为止并未找到非常特异性的骨髓间充质干细胞标记分子。一般认为，整合素家族成员黏附分子CD44，是骨髓间充质干细胞的重要标志物^[16]，而骨髓间充质干细胞不表达造血细胞表面抗原，如造血前体细胞标志抗原CD34^[17]。此次研究流式细胞仪检测结果显示，单独培养的骨髓间充质干细胞CD44阳性率呈现高表达状态，CD34阳性表达率则呈现低表达状态，实验组经人胃癌BCG-823细胞与大鼠骨髓间充质干细胞共培养后骨髓间充质干细胞的CD44阳性表达率明显下降，CD34阳性表达率明显升高，提示经胃癌微环境诱导后骨髓间充质干细胞的表面标记物发生明显改变。

作者此次研究初步证实，胃癌微环境对骨髓间充质干细胞形态、生长增殖及其表面标记物CD44、CD34产生显著影响，说明肿瘤微环境可以使骨髓间充质干细胞增殖分化调控失调，干细胞微环境的改变可引起细胞与细胞间质信号交流的异常，从而造成干细胞的失控性增殖，为利用骨髓间充质干细胞作为胃癌生物治疗的载体在胃癌治疗方面的安全应用提供了基础实验依据。但在胃癌微环境中骨髓间充质干细胞是否获得了胃癌细胞的相关生物学特性，值得进一步研究。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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Morphology and proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and expressions of CD34 and CD44 under stomach cancer microenvironment

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[1]	林清凡, 解一新, 陈婉清, 叶振忠, 陈幼芳. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 4970-4975.
[2]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[3]	张秀梅, 翟运开, 赵杰, 赵萌. 类器官模型国内外数据库近10年文献研究热点分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1249-1255.
[4]	刘聪, 刘肃. miR-17-5p调控低氧诱导因子1α介导脂肪细胞分化及血管生成的分子机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1069-1074.
[5]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.
[6]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[7]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[8]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[9]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[10]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
[11]	焦慧, 张一宁, 宋雨晴, 林宇, 王秀丽. 乳腺癌类器官研究进展及临床应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1122-1128.
[12]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
[13]	曾燕华, 郝延磊. 许旺细胞体外培养及纯化的系统性综述[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1135-1141.
[14]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.
[15]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.