人牙髓细胞分化过程中DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族的表达

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2015.14.022

中国组织工程研究 ›› 2015, Vol. 19 ›› Issue (14): 2261-2266.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.14.022

• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇下一篇

人牙髓细胞分化过程中DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族的表达

饶利佳，李启梦，李金铃，徐琼

中山大学光华口腔医学院•附属口腔医院牙体牙髓病科；广东省口腔医学重点实验室，广东省广州市 510055

修回日期:2015-03-02 出版日期:2015-04-02 发布日期:2015-04-02
通讯作者: 徐琼，博士，主任医师，主要从事口腔牙体牙髓病诊治工作。中山大学光华口腔医学院?附属口腔医院牙体牙髓病科；广东省口腔医学重点实验室，广东省广州市 510055
作者简介:饶利佳，女，1988年生，广东省梅州市，汉族，中山大学在读硕士。
基金资助:
国家自然科学基金项目(81170953)

Expression pattern of ten-eleven translocation family during differentiation of human dental pulp cells

Rao Li-jia, Li Qi-meng, Li Jin-ling, Xu Qiong

Department of Conservative Dentistry and Endodontics, Guanghua School of Stomatology, Hospital of Stomatology, Sun Yat-sen University; Guangdong Provincial Key Laboratory of Stomatology, Guangzhou 510055, Guangdong Province, China

Revised:2015-03-02 Online:2015-04-02 Published:2015-04-02
Contact: Xu Qiong, M.D., Chief physician, Department of Conservative Dentistry and Endodontics, Guanghua School of Stomatology, Hospital of Stomatology, Sun Yat-sen University; Guangdong Provincial Key Laboratory of Stomatology, Guangzhou 510055, Guangdong Province, China
About author:Rao Li-jia, Studying for master’s degree, Department of Conservative Dentistry and Endodontics, Guanghua School of Stomatology, Hospital of Stomatology, Sun Yat-sen University; Guangdong Provincial Key Laboratory of Stomatology, Guangzhou 510055, Guangdong Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81170953

摘要/Abstract

摘要：

背景：DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族可将甲基胞嘧啶氧化为羟甲基胞嘧啶，参与机体DNA去甲基化，调控细胞增殖与分化，但其在牙髓细胞中的表达模式仍不清楚。

目的：检测TET家族在牙髓细胞成牙本质分化过程中的表达模式。

方法：采用酶消化法分离培养人牙髓细胞，细胞免疫荧光法检测TET家族的表达及分布；Western Blot检测TET家族在牙髓细胞传代培养(P1-P7代)中的表达规律；对第3代牙髓细胞矿化诱导7，14 d，qRT-PCR法检测矿化诱导第0，7，14 d的TET家族mRNA水平，Western Blot法检测其蛋白量的表达变化。

结果与结论：TET家族在人牙髓细胞的细胞质和细胞核中均有表达。在牙髓细胞体外传代培养过程中，TET1蛋白在P1-P6代随细胞传代呈上升趋势，TET2蛋白在P2和P3代细胞中表达增强(P < 0.05)，TET3表达量在不同细胞代数之间差异无显著性意义(P > 0.05)。细胞经矿化诱导后，TET1，TET2和TET3的mRNA和蛋白表达量均升高(P < 0.05)。以上结果提示TET家族可能参与调控牙髓细胞成牙本质分化进程。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

全文链接：

关键词: 干细胞, 分化, 牙髓细胞, 表观遗传, DNA甲基化双加氧酶, DNA甲基化, DNA去甲基化, 甲基胞嘧啶, 羟甲基胞嘧啶, 矿化诱导, 细胞分化, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Ten-eleven translocation (TET) family proteins are recently discovered DNA dioxygenases that convert methylcytosine to hydroxymethyl cytosine, which is essential for regulating cell proliferation and differentiation, but the expression pattern of TET family proteins in human dental pulp cells is still unclear.

OBJECTIVE: To investigate the expression pattern of TET family proteins during the differentiation of human dental pulp cells.

METHODS: Cellular distribution and expression of TET family proteins were determined by immunofluorescence in human dental pulp cells that were cultured and isolated using digestion method. The protein levels of TETs during cell passage (P1-P7) were detected with western blot assay, and their potential changes during odontogenic induction (7 and 14 days) were confirmed using real-time quantitative PCR and western blot analyses at mRNA and protein levels, respectively.

RESULTS AND CONCLUSION: All TETs were expressed in the nucleus and the cytoplasm of human dental pulp cells During serial cell passage, TET1 protein expression was increased until the 6th passage, TET2 significantly increased at the 2^nd and 3^rd passages and then decreased (P < 0.05), and TET3 showed no statistically significant change (P > 0.05). Both mRNA and protein expression levels of all TETs were elevated during odontogenic induction (P < 0.05). These results indicated that TETs may contribute to cell differentiation of human dental pulp cells.

全文链接：

Key words: Stem Cells, Dental Pulp, Cell Differentiation, Tooth Remineralization

中图分类号:

R394.2

饶利佳，李启梦，李金铃，徐琼. 人牙髓细胞分化过程中DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族的表达[J]. 中国组织工程研究, 2015, 19(14): 2261-2266.

Rao Li-jia, Li Qi-meng, Li Jin-ling, Xu Qiong. Expression pattern of ten-eleven translocation family during differentiation of human dental pulp cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2015, 19(14): 2261-2266.

图/表（结果） 3

参考文献

[1] Jones PA, Liang G. Rethinking how DNA methylation patterns are maintained. Nat Rev Genet. 2009;10(11):805-811.
[2] Fuks F, Hurd P J, Wolf D, et al. The methyl-CpG-binding protein MeCP2 links DNA methylation to histone methylation. J Biol Chem. 2003;278(6):4035-4040.
[3] Wu SC, Zhang Y. Active DNA demethylation: many roads lead to Rome. Nat Rev Mol Cell Biol. 2010;11(9):607-620.
[4] Tahiliani M, Koh KP, Shen Y, et al. Conversion of 5-methylcytosine to 5-hydroxymethylcytosine in mammalian DNA by MLL partner TET1. Science. 2009;324(5929):930-935.
[5] Ito S, D'Alessio AC, Taranova OV, et al. Role of Tet proteins in 5mC to 5hmC conversion, ES-cell self-renewal and inner cell mass specification. Nature. 2010;466(7310):1129-1133.
[6] Chen J, Gao Y, Huang H, et al. The combination of tet1 with oct4 generates high-quality mouse-induced pluripotent stem cells. Stem Cells. 2015;33(3):686-698.
[7] Lin LL, Wang W, Hu Z, et al. Erratum to: Negative feedback of miR-29 family TET1 involves in hepatocellular cancer. Med Oncol. 2015;32(3):39.
[8] Hsu CH, Peng KL, Kang ML, et al. TET1 suppresses cancer invasion by activating the tissue inhibitors of metalloproteinases. Cell Rep. 2012;2(3):568-579.
[9] Langemeijer SM, Kuiper RP, Berends M, et al. Acquired mutations in TET2 are common in myelodysplastic syndromes. Nat Genet. 2009;41(7):838-842.
[10] Kunimoto H, Fukuchi Y, Sakurai M, et al. Tet2 disruption leads to enhanced self-renewal and altered differentiation of fetal liver hematopoietic stem cells. Sci Rep. 2012;2:273.
[11] Ko M, Huang Y, Jankowska AM, et al. Impaired hydroxylation of 5-methylcytosine in myeloid cancers with mutant TET2. Nature. 2010;468(7325):839-843.
[12] Ko M, Bandukwala HS, An J, et al. Ten-Eleven-Translocation 2 (TET2) negatively regulates homeostasis and differentiation of hematopoietic stem cells in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011;108(35):14566-14571.
[13] Li T, Yang D, Li J, et al. Critical role of Tet3 in neural progenitor cell maintenance and terminal differentiation. Mol Neurobiol. 2015;51(1):142-154.
[14] Gronthos S, Mankani M, Brahim J, et al. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 2000;97(25):13625-13630.
[15] Xu Y, Wu F, Tan L, et al. Genome-wide regulation of 5hmC, 5mC, and gene expression by Tet1 hydroxylase in mouse embryonic stem cells. Mol Cell. 2011;42(4):451-464.
[16] Yu J, He H, Tang C, et al. Differentiation potential of STRO-1+ dental pulp stem cells changes during cell passaging. BMC Cell Biol. 2010;11:32.
[17] Rawluszko-Wieczorek AA, Siera A, Horbacka K, et al. Clinical significance of DNA methylation mRNA levels of TET family members in colorectal cancer. J Cancer Res Clin Oncol. 2015.
[18] Li Q, Rao L, Zhang D, et al. Expression features of DNA methylcytosine dioxygenase ten-eleven translocation 1 in human dental pulp cells. J Endod. 2014;40(11):1791-1795.
[19] Guo X, Wang Y, Guo Z, et al. TET Proteins: A New Family of DNA Modifying Enzymes. Zhongguo Shengwu Huaxue yu Fenzi Shengwu Xuebao. 2011;27(12):1101-1106.
[20] Langemeijer SM, Kuiper RP, Berends M, et al. Acquired mutations in TET2 are common in myelodysplastic syndromes. Nat Genet. 2009;41(7):838-842.
[21] Song J, Rechkoblit O, Bestor T H, et al. Structure of DNMT1-DNA complex reveals a role for autoinhibition in maintenance DNA methylation. Science. 2011;331(6020): 1036-1040.
[22] Dunican DS, Pennings S, Meehan RR. The CXXC-TET bridge-mind the methylation gap! Cell Res. 2013;23(8): 973-974.
[23] Ko M, An J, Bandukwala HS, et al. Modulation of TET2 expression and 5-methylcytosine oxidation by the CXXC domain protein IDAX. Nature. 2013;497(7447):122-126.
[24] Arioka Y, Watanabe A, Saito K, et al. Activation-induced cytidine deaminase alters the subcellular localization of Tet family proteins. PLoS One. 2012;7(9):e45031.
[25] Wu H, D'Alessio AC, Ito S, et al. Dual functions of Tet1 in transcriptional regulation in mouse embryonic stem cells. Nature. 2011;473(7347):389-393.
[26] Williams K, Christensen J, Pedersen MT, et al. TET1 and hydroxymethylcytosine in transcription and DNA methylation fidelity. Nature. 2011;473(7347):343-348.
[27] Ficz G, Branco MR, Seisenberger S, et al. Dynamic regulation of 5-hydroxymethylcytosine in mouse ES cells and during differentiation. Nature. 2011;473(7347):398-402.
[28] Zhang R R, Cui Q Y, Murai K, et al. Tet1 regulates adult hippocampal neurogenesis and cognition. Cell Stem Cell. 2013;13(2):237-245.
[29] Ko M, Bandukwala H S, An J, et al. Tet2 Negatively Regulates Homeostasis and Differentiation of Hematopoietic Stem Cells in Mice. Blood. 2011;118(21):1017.
[30] Li T, Yang D, Li J, et al. Critical Role of Tet3 in Neural Progenitor Cell Maintenance and Terminal Differentiation. Mol Neurobiol. 2014.
[31] David L, Hirsch CL. How Tets and cytoskeleton dynamics MET in reprogramming. Cell Stem Cell. 2014;14(4):417-418.
[32] Hu X, Zhang L, Mao SQ, et al. Tet and TDG mediate DNA demethylation essential for mesenchymal-to-epithelial transition in somatic cell reprogramming. Cell Stem Cell. 2014;14(4):512-522.
[33] Zhang RR, Cui QY, Murai K, et al. Tet1 regulates adult hippocampal neurogenesis and cognition. Cell Stem Cell. 2013;13(2):237-245.
[34] Wang P, Qu J, Wu MZ, et al. "TET-on" pluripotency. Cell Res. 2013;23(7):863-865.
[35] Wang T, Wu H, Li Y, et al. Subtelomeric hotspots of aberrant 5-hydroxymethylcytosine-mediated epigenetic modifications during reprogramming to pluripotency. Nat Cell Biol. 2013; 15(6): 700-711.
[36] Spruijt CG, Gnerlich F, Smits AH, et al. Dynamic readers for 5-(hydroxy)methylcytosine and its oxidized derivatives. Cell. 2013;152(5):1146-1159.
[37] Huang Y, Chavez L, Chang X, et al. Distinct roles of the methylcytosine oxidases Tet1 and Tet2 in mouse embryonic stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2014;111(4):1361-1366.

引言

DNA甲基化在细菌、植物与哺乳动物中广泛存在，是重要的表观遗传修饰形式，指在DNA甲基转移酶的催化下，DNA的CpG二核苷酸的胞嘧啶(Cytosine，C)被选择性地添加甲基，形成5甲基胞嘧啶^[1]。DNA去甲基化则是将5甲基胞嘧啶转化为C的过程。

研究表明，DNA启动子区高甲基化可抑制转录激活因子与DNA的结合，促进阻遏蛋白的招募，形成非活性染色质，与基因沉默密切相关，而该位点的去甲基化常与基因活化相关^[2]，DNA甲基化/去甲基化是可逆过程，在基因表达调控、胚胎发育、X染色体失活、肿瘤发生等多种生理病理过程中发挥重要作用^[3]。

Rao等于2009年首次发现DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET1(ten-eleven translocation 1，TET1)可将5甲基胞嘧啶氧化为5-羟甲基胞嘧啶，进一步经主动或被动去甲基化机制实现DNA去甲基化^[4]，TET1与随后发现的TET2、TET3构成TET家族，是发挥DNA去甲基化作用的重要蛋白^[5]。鼠胚胎干细胞中敲低TET1时，多潜能因子Nanog启动子区甲基化程度增高，Nanog表达降低，细胞出现向外胚层分化的倾向^[6]。在体细胞重编程中，TET1和多潜能因子八聚体4(octamer 4，Oct4)可促使体细胞重编程为干细胞，利用此干细胞可重新获得健康的小鼠^[6]。

TET1在前列腺癌组织、乳腺癌、肝癌组织中表达下降，作为肿瘤抑制子可减少癌细胞入侵及转移，TET1表达下降与肿瘤预后差有关^[7-8]。TET2在骨髓增殖性肿瘤、系统性肥大细胞增多症、白血病、骨髓增生异常综合症等血液系统疾病中发生突变，其缺失可导致髓系肿瘤的转化^[9-10]。造血干细胞中敲低TET2基因可导致全基因组5-羟甲基胞嘧啶水平下降，影响正常骨髓的形成^[11-12]。神经祖细胞中敲低TET3可显著降低5-羟甲基胞嘧啶水平，抑制祖细胞分化^[13]。

目前文献报道TET家族参与细胞增殖与分化，在胚胎发育、肿瘤发生等过程中表达并发挥调控作用，但其在人牙髓细胞中是否与表达尚不清楚。本课题拟明确TET家族在人牙髓细胞体外培养中的表达模式，观察成牙本质向分化诱导对其表达的影响，初步探讨TET家族是否可能参与人牙髓细胞分化过程。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
全文链接：

材料方法

设计：细胞学对比观察实验。

时间及地点：于2014年2至10月在中山大学光华口腔医学院•广东省口腔医学重点实验室完成。

材料：收集中山大学附属口腔医院口腔颌面外科门诊18-25岁患者因正畸拔除的健康第三磨牙，无牙体牙髓疾病，患者知情同意。

实验方法：

人牙髓细胞的培养：参照Gronthos等^[14]的方法，于超净台内用灭菌PBS冲洗并刮净牙齿表面附着物，劈开牙齿并取出牙髓组织。将牙髓组织剪成小块，质量浓度3 g/L Ⅰ型胶原酶消化20 min。等体积含体积分数20%FBS的低糖DMEM培养液终止消化，1 000 r/min离心5 min。弃上清，将牙髓组织移至培养瓶中铺开，加入3 mL含体积分数20%FBS的低糖DMEM原代培养液，倒置培养瓶于体积分数5%CO₂、相对湿度100%、37 ℃恒温培养箱中培养，培养第2天翻瓶。约5 d时牙髓细胞从组织块中爬出，每3 d换液，至细胞70%-80%汇合时胰酶消化，1∶3传代培养。

实验分组：细胞传代培养分组：P1，P2，P3，P4，P5，P6，P7分别为细胞传代第1-7代；细胞矿化培养分组：D0(矿化培养前)，D7(矿化培养7 d)，D14(矿化培养14 d)。

细胞免疫荧光检测：将第3代人牙髓细胞约6 000个/皿接种于激光共聚焦皿上。细胞长至70%-80%汇合时用PBS漂洗，40 g/L多聚甲醛室温固定20 min，体积分数0.2% Triton-X 100透化5 min，5% BSA室温封闭60 min。分别加入TET抗体(TET1抗体1∶100，TET2抗体1∶100，TET3抗体1∶50)，阴性对照为PBS，湿盒中4 ℃过夜。加入相应二抗(体积分数1%BSA稀释为1∶400)，避光孵育60 min，DAPI染色液染色5 min后清洗，加入抗荧光衰减剂，倒置荧光显微镜下观察细胞荧光染色情况^[15]。

矿化诱导培养：取第3代人牙髓细胞以1×10⁸ L^-¹的细胞浓度接种于6孔板，待生长至70%汇合时将培养液更换为矿化诱导液(体积分数10%FBS、10 mmol/L β-甘油磷酸钠、50 μg维生素C和0.1 μmol/L地塞米松)^[16]，每3 d换液，于矿化第0，7，14天收集细胞。

茜素红染色：弃细胞培养液后PBS漂洗3次，40 g/L多聚甲醛固定30 min。PBS漂洗3次，体积分数1%茜素红溶液常温下染色5 min。PBS漂洗至漂洗液无色并保持孔板湿润，倒置显微镜下观察矿化结节数目及大小。

荧光定量PCR：矿化诱导培养0，7，14 d收集细胞，PBS清洗后每孔加入1 mL TRIzol，提取总RNA后参照反转录试剂盒说明书逆转RNA为cDNA。荧光实时定量PCR检测矿化诱导不同天数TET1，TET2和TET3 mRNA表达水平变化，设置无模板的阴性对照，LightCycler 480 荧光定量PCR仪中按以下条件进行反应：预孵育95℃ 10 min；扩增反应95 ℃ 10 s；65 ℃退火20 s；72 ℃延伸30 s，扩增45个循环，以GAPDH作为内参基因，2^-^??ct法计算各样本相对表达量^[17]，引物序列见表1。

Western Blot检测：取传代培养第1-7代及矿化诱导前后的人牙髓细胞，裂解液提取总蛋白，BCA法检测蛋白浓度，加入Loading Buffer后变性。每组蛋白上样40 μg，70 V电泳30 min后换为120V电泳1-1.5 h，300 mA湿法转膜 1.3 h，5%脱脂牛奶室温封闭1 h。抗体稀释液稀释一抗(DSPP 1∶400，DMP1 1∶200，TET1 1∶300，TET2 1∶1 000，TET3 1∶1 000，β-Tubulin 1∶2 000)，冰上摇床孵育过夜。TBST缓冲液清洗后常温孵育对应二抗(1∶2 000)1 h。ECL试剂盒化学发光显色，荧光化学发光成像系统检测荧光信号^[18]。采用Image J软件对蛋白显影条带进行灰度值分析，以β-Tubulin为内参，计算目的蛋白的相对表达量。

主要观察指标：免疫荧光检测各组蛋白在人牙髓细胞的表达；茜素红染色检测细胞矿化诱导效果，荧光定量PCR检测TET家族mRNA的表达，Western Blot检测TET家族及成牙本质相关因子DSPP，DMP1的蛋白表达。

统计学分析：实验数据符合正态分布，计量资料x(_)±s表示，采用SPSS 16.0软件进行数据统计分析，所有实验进行生物学、技术重复3次，组间数据差异的比较使用单因素方差分析和SNK法，检验水准α=0.05。

全文链接：

讨论

DNA甲基化/去甲基化修饰作为重要的表观遗传调控方式之一，在胚胎发育、X染色体失活、基因表达调控、肿瘤发生发展等众多生理病理过程中发挥重要作用。牙髓细胞在细菌、机械、化学等外界刺激条件下可分化为成牙本质细胞，产生修复性牙本质，在牙齿损伤修复中起重要作用，但DNA去甲基化修饰在其损伤修复机制过程中作用尚不清楚。

研究表明，TET1表达于干细胞、神经细胞、肿瘤组织、骨骼肌、胸腺等组织中^[19]，TET2高表达于造血系统^[20]，TET3则在神经细胞、肌肉、肾上腺、外周血淋巴细胞等组织中表达^[19]。TET家族在人牙髓细胞中有无表达未见报道。

为阐明TET家族是否表达于人牙髓细胞，实验采用免疫荧光检测3种TET蛋白在牙髓细胞的定位，结果显示，TET1，TET2和TET3在细胞核及细胞质中均有表达。TET1和TET3 N端有1个典型的CXXC型锌指结构，可特异性的结合CpG位点，DNA甲基化因子如DNMT1、甲基CpG结合蛋白1(Methyl-CpG-binding domain protein 1，MBD1) 等均含有该结构域，但不同的是，TET不仅可识别、结合未修饰的胞嘧啶，更倾向于结合被修饰的5甲基胞嘧啶和 5-羟甲基胞嘧啶，并富集于高CpG区域^[21-22]。

TET2无CXXC区，但TET2基因编码的初期，N端位置会编码一个CXXC4，CXXC4在编码后不久发生自切效应，可介导TET2与DNA的结合^[23]。此外，Arioka等^[24]发现AID可将细胞质内的TET转运至细胞核。以上文献均提示TET家族可在细胞核及细胞质中表达，实验结果与文献报道一致。

TET家族作为去甲基化过程中的关键蛋白家族，对多种细胞的增殖与分化起重要调控作用。研究显示，在小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells，mESCs)中，TET1具有激活和抑制靶基因的双重作用：当靶基因与TET1直接结合时，靶基因启动子区去甲基化，表达上调，即转录激活；而TET1招募多梳蛋白复合体(PRC2)或与共抑制因子Sin3a共定位，则抑制基因表达^[25-26]。当mESCs中TET1和TET2下调时，干细胞全能性相关基因的启动子区去甲基化，其表达降低，细胞出现分化^[27]。

目前大多数研究表明TET1在胚胎干细胞中起维持干性、抑制分化作用，在成体干细胞中是否也如此？Zhang等^[28]发现敲除TET1后，与小鼠神经前体细胞增殖及成体神经发生相关的基因Galanin、Ng2、Ngb、Kctd14及Atp5h等异常高甲基化，表达水平降低。造血干细胞中敲低TET2可导致全基因组5-羟甲基胞嘧啶水平下降，细胞分化延迟^{[11, 29]}。

TET3在神经前体细胞分化过程中表达上升，敲低TET3显著降低其5-羟甲基胞嘧啶水平，抑制祖细胞分化^[30]。由此可见，TET家族介导的DNA去甲基化在细胞分化中起重要作用，且在干细胞与成体细胞中发挥不同功能^[31-36]。此外，TET1和TET2可能存在交互作用，如敲低TETs可引起5-羟甲基胞嘧啶水平下降，但Huang等^[37]发现TET1主要减少基因转录起始位点的5-羟甲基胞嘧啶水平，TET2则主要作用于基因体部的5-羟甲基胞嘧啶，敲低TET2时基因的启动子区/转录起始位点的5-羟甲基胞嘧啶水平反而增加，可能是由于TET1的影响。

实验通过体外牙髓细胞传代培养和矿化诱导培养，探讨TET家族在牙髓细胞分化过程中的表达模式。结果显示在牙髓细胞传代培养过程中，TET1在P1，P2代表达较低，随后表达量逐渐上升，TET2在P2代显著上升后下降，随着TET1表达上升，TET2表达下降，提示TET1和TET2可能在牙髓细胞分化过程中可能存在交互作用。TET1和TET2在矿化诱导促使牙髓细胞发生成牙本质分化后表达量增加，TET3在自然分化过程中表达无统计学差异，但在矿化诱导后表达上升，以上结果提示TET家族可能参与牙髓细胞分化的调控。

综上所述，DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族可表达于人牙髓细胞，且在细胞分化过程中表达量增加，提示TETs及其介导的DNA去甲基化可能参与调控人牙髓细胞分化，具体调控机制有待进一步研究。

人牙髓细胞分化过程中DNA甲基胞嘧啶双加氧酶TET家族的表达

Expression pattern of ten-eleven translocation family during differentiation of human dental pulp cells

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 3

参考文献

相关文章 15

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[2]	林清凡, 解一新, 陈婉清, 叶振忠, 陈幼芳. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 4970-4975.
[3]	张秀梅, 翟运开, 赵杰, 赵萌. 类器官模型国内外数据库近10年文献研究热点分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1249-1255.
[4]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.
[5]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[6]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[7]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[8]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[9]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
[10]	焦慧, 张一宁, 宋雨晴, 林宇, 王秀丽. 乳腺癌类器官研究进展及临床应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1122-1128.
[11]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
[12]	曾燕华, 郝延磊. 许旺细胞体外培养及纯化的系统性综述[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1135-1141.
[13]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.
[14]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.
[15]	史洋洋, 秦英飞, 吴福玲, 何潇, 张雪静. 胎盘间充质干细胞预处理预防小鼠毛细支气管炎[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 991-995.