关节腔注射自体骨髓间充质干细胞治疗轻中度骨性关节炎

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2015.14.015

摘要/Abstract

摘要：

背景：大量来源于动物实验或实验室的证据表明骨髓间充质干细胞具有强有力的免疫抑制、抗炎症、软骨再生能力。但是相对于动物实验，骨关节炎患者的关节微环境更复杂，涉及大量的生物活性因子及免疫机制。

目的：分析经皮穿刺关节腔注射自体骨髓间充质干细胞治疗轻中度骨性关节炎患者的疗效，探讨其炎症抑制、免疫调节、缓解软骨降解等机制。

方法：收集26例轻中度骨性关节炎患者骨髓15 mL，在实验室分离、培养、获得足量的骨髓间充质干细胞，并以流式细胞仪检测其表面标志物，分析其体外诱导成骨、成脂分化能力。26例患者双侧膝关节分别入组实验组及对照组，实验组膝注射自体来源的体外培养的骨髓间充质干细胞(2×10⁷个)，对照组则注射等量不含细胞安慰剂。采用WOMAC评分评价治疗前后膝关节功能变化。在治疗前、治疗后2周，利用ELISA检测关节液中白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、软骨寡聚基质蛋白水平。

结果与结论：按照标准化的细胞分离、培养扩增方案，能获得足量的用于关节腔注射的骨髓间充质干细胞(超过2×10⁷第3代细胞)。从患者分离出来的骨髓间充质干细胞均阳性表达CD105、CD29，阴性表达CD45、CD34，体外具有良好的成骨、成脂能力。治疗后患者的膝关节功能明显改善，而且相对于对照组，实验组关节液中白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、软骨寡聚基质蛋白水平明显下降，而白细胞介素10水平上升。以上结果表明，关节腔注射自体骨髓间充质干细胞治疗轻中度骨性关节炎具有良好的疗效，进一步推测注射到关节腔内的骨髓间充质干细胞有可能通过炎症抑制及逆转软骨降解等机制发挥作用，从而有望成为治疗轻中度骨性关节炎有效、可行的方法。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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关键词: 干细胞, 移植, 骨髓间充质干细胞, 骨性关节炎, 白细胞介素1, 肿瘤坏死因子α, 白细胞介素10, 软骨寡聚基质蛋白, 炎症抑制, 软骨降解

Abstract:

BACKGROUND: Increasing evidence collected from animal experiments or laboratories shows that bone mesenchymal stem cells possess potent immunosuppression and anti-inflammation effects and cartilage regenerative capability. The microenvironment in human knee joint of osteoporosis is more complex and involves lots of bioactive factors and immunologic mechanisms.

OBJECTIVE: The analyze the therapeutic effects of intra-articular injection of autologous bone marrow mesenchymal stem cells on mild-to-moderate osteoporosis, and to investigate the mechanisms for anti-inflammation, immunoregulation and reversion of cartilage degradation.

METHODS: About 15 mL bone marrow was aspired from 26 patients with mild-to-moderate osteoporosis and taken to the laboratory where bone marrow mesenchymal stem cells were isolated and characterized in terms of some surface markers by a flow cytometer, and the ability of osteogenic and adipogenic differentiation was analyzed. The bilateral knees of each patient were divided into two groups at random. The experiment group were treated with autologous bone marrow mesenchymal stem cells by intra-articular injection (2×10⁷ cells), while the control group injected the same volume of control medium without bone marrow mesenchymal stem cells. Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index was used to estimate the function of the knee joints before and after the treatment. We collected the joint fluid before, 2 and 4 weeks post treatment, and then measured the production of interleukin-1, interleukin-10, tumor necrosis factor-α, cartilage oligomeric matrix protein using ELISA.

RESULTS AND CONCLUSION: According to the standardized culture-expansion protocol, a sufficient number of bone marrow mesenchymal stem cells (more than 2×10⁷ passage 3 cells) were obtained for intra-articular injection. The bone marrow mesenchymal stem cells isolated from patients were positive for CD105, CD29 and negative for CD45, CD34, and had the fair osteogenic and adipogenic capacities. The function of the knee joints was improved obviously after treatment. In the experimental group, the secretion of both interleukin-1, tumor necrosis factor-α and cartilage oligomeric matrix protein in the joint fluid was suppressed, while the interleukin-10 level was up-regulated compared to the control group. The results suggest that intra-articular injection of autologous bone marrow mesenchymal stem cells can exert good effect in mild-to-moderate osteoporosis patients. Furthermore, bone marrow mesenchymal stem cells via intra-articular injection can function through anti-inflammation and reversion of degradation of the articular cartilage, which is a new promising approach for treating mild-to-moderate osteoarthritis.

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Key words: Bone Marrow, Mesenchymal Stem Cell Transplantation, Osteoarthritis

中图分类号:

R394.2

梁建基，何智勇，刘康，李晓玲，程伟民，余新平，陈尔东. 关节腔注射自体骨髓间充质干细胞治疗轻中度骨性关节炎[J]. 中国组织工程研究, 2015, 19(14): 2216-2223.

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图/表（结果） 7

2.1 骨髓间充质干细胞的形态 传至第3代的骨髓间充质干细胞铺满瓶底，细胞纯化，均匀性放射状生长，梭形细胞达90%，见图1。

2.2 骨髓间充质干细胞的生长曲线 第3代骨髓间充质干细胞在接种后的第1，2天处于潜伏期，从第3天开始，细胞进入对数增长期，增殖活跃，呈指数级增长，此期持续约3 d。第6天开始细胞增殖速度进入平台期，第7天开始细胞总数量下降，见图2。

2.3 流式分析骨髓间充质干细胞表面标记物 取第3代骨髓间充质干细胞行流式细胞仪分析，可以观察到超过90%干细胞CD34、CD45表面标志物阴性，见图3。超过97%干细胞阳性表达CD29，超过96%干细胞阳性表达CD105，见图4。结果显示，骨性关节炎患者的细胞表面标志物表达情况与文献报道的一致^[2]。

2.4 骨髓间充质干细胞体外诱导成脂及成骨能力鉴定 在成脂诱导液培养下，骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化，2周后，经油红O染色显示大量脂滴形成，见图5。在成骨诱导液培养下，骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化，细胞融合，3周后经茜素红染色显示大量钙结节形成，见图6。骨髓间充质干细胞的体外诱导实验提示其具有多分化潜能，能成功向成骨细胞及脂肪细胞分化。

2.5 参与者数量分析 26例膝关节骨性关节炎患者均进入结果分析。

2.6 治疗前后患者膝关节功能变化的结果分析 治疗前、治疗后2周、治疗后4周膝关节的WOMAC评分数据的分布符合正态(正态性检验采用Shapiro-Wilk检验，设定检验水准α=0.1)，采用x(_)±s进行数据描述，以配对t 检验进行比较。治疗后2，4周的膝关节功能评分[(39.62±15.27)分，(33.65±14.07)分]明显低于治疗前(82.27±12.76)分，差异有显著性意义(P < 0.05)，见图7。治疗后2周膝关节功能评分与治疗后4周比较，差异无显著性意义，结合临床表现可见，相对于治疗后2周，治疗后4周患者的临床症状改善不大。

2.7 实验组及对照组治疗前后关节液中白细胞介素1、白细胞介素10、软骨寡聚基质蛋白、肿瘤坏死因子α水平变化 治疗前，对实验组及对照组白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、软骨寡聚基质蛋白资料基线水平进行了比较，因各独立样品资料不符合正态分布，故分别采用两独立样本的Mann-Whitney U检验，设定检验水准 P=0.05，得出各组资料的统计结果差异无显著性意义(P > 0.05)，见表1，治疗前实验组及对照基线水平一致，故具有可比性。统计分析显示治疗前后白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、软骨寡聚基质蛋白的差值分布不符合正态分布，采用配对资料的秩和检验。实验组经皮膝关节注射自体骨髓间充质干细胞2周后，关节液中白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和软骨寡聚基质蛋白明显下降，白细胞介素10明显升高，实验组治疗前后的白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、软骨寡聚基质蛋白资料经统计，差异均有显著性意义(P < 0.05)；对照组治疗前后白细胞介素1、肿瘤坏死因子α资料经统计发现差异无显著性意义(P > 0.05)，而白细胞介素10及软骨寡聚基质蛋白资料经统计发现差异有显著性意义(P < 0.05)，见图8和表2。通过比较正负平均秩和得出对照组治疗后白细胞介素10平均水平降低，软骨寡聚基质蛋白平均水平升高，见表3。说明骨髓间充质干细胞的植入能很大程度上抑制炎症因子白细胞介素1、肿瘤坏死因子α的产生，促进抗炎症因子白细胞介素10的产生，使软骨降解产物软骨寡聚基质蛋白下降，从而缓解软骨的降解。

2.8 不良反应 注射骨髓间充质干细胞过程中未发生发热、感染、软骨软化等不良反应。

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引言

材料方法

设计：随机对照试验。

时间及地点：于2013年3月至2014年3月在中山市人民医院肿瘤研究所细胞实验室完成。

对象：

入选标准：①同意参加临床试验并签署书面知情同意书，充分了解试验伦理批件。②年龄在40岁及60岁之间(不包括40及60岁)，性别不限。③符合1995年美国风湿病协会修订的膝关节骨性关节炎诊断标准：a.1个月以来多数时间膝痛；b.X射线片示膝关节边缘骨赘；c.关节液检查符合骨性关节炎(清晰、黏稠、白细胞> 2×10⁹ L^-¹)；d.年龄≥40岁；e.晨僵持续时间≤30 min；f.活动时有关节摩擦音。符合 a，b或a，c，e，f或a，d，e，f即可确诊。④初次就诊患者，双侧膝关节症状相当，就诊前未接受过关节镜或注射透明质酸钠等治疗方案。⑤应用Kellgren和Lawrence的放射学诊断标准^[1]，患者骨性关节炎分级属于0级、Ⅰ级、Ⅱ级。⑥膝关节WOMAC评分< 120分。

排除标准：①年龄>65岁或<40岁。②患者就诊前接受过手术等影响疗效观察的治疗。③既往有股骨、胫骨平台、胫腓骨骨折病史；有膝关节肿瘤、类风湿性关节炎、感染性膝关节炎等影响膝关节结构的疾病。④有严重粒细胞和血小板缺乏等血液病或痛风、系统性红斑狼疮等结缔组织病。⑤有骨髓穿刺术禁忌证。⑥有精神障碍或精神病、癫痫等不能够配合治疗者。⑦孕妇或哺乳期妇女。

剔除标准(符合以下任意一条将从试验中剔除)：①试验过程中出现严重不良事件，如过敏反应等。②患者要求退出试验。③患者因各种原因无法完成随访。④患者依从性差，在试验期间接受影响结果观察的其他治疗方法。

方法：

骨髓间充质干细胞分离、培养：①抽取骨髓：签署骨髓穿刺知情同意书后，常规消毒铺巾，以18号穿刺针行髂后上棘穿刺，穿刺成功后，用20 mL注射器(内含肝素钠注射液1.25×10⁴ U)抽取骨髓15 mL。②用PBS 1∶1稀释骨髓，将骨髓经1 500 r/min离心10 min，吸除上层脂肪组织，洗涤3次。用PBS 1∶1悬浮骨髓，将细胞悬液以2∶1注入人淋巴细胞分离液。室温下1 500 r/min离心20 min，离心后取中间单个核细胞，PBS洗涤2次，抽吸单个核细胞，将其重悬于FasGrow人间充质干细胞条件培养基中(此培养过程不含胎牛血清)。调整细胞密度为2×10⁵/cm²接种于 75 cm²培养瓶中，于37 ℃，体积分数为5%CO₂培养箱中培养。③24 h后骨髓间充质干细胞开始贴壁生长，3 d后半量换液，去除非贴壁细胞。以后每3 d换液1次，换液过程中剩余少量悬浮细胞将被洗去。④细胞融合达90%时，予0.25%胰蛋白酶消化，PBS洗涤2次，以2×10⁵/cm²传代培养；倒置相差显微镜下每天观察细胞形态及生长情况。⑤取3代内部分细胞予0.25%胰蛋白酶消化，用PBS洗涤2次后，离心制成浓度为1×10⁶ L^-¹细胞悬液，接种到24孔培养板中培养(每孔200 μL)，观察1周，每天取3个孔进行消化，检测3个孔中细胞总数，计算当天培养板总细胞数。以细胞数为纵坐标，培养时间为横坐标作生长曲线，计算倍增时间。⑥取3代内部分细胞(总共培养时间为3-6周)，依据现行版《中华人民共和国药典》中的生物制品无菌试验、支原体检测、内毒素检测规程，分别进行细菌、真菌、支原体、内毒素污染检测，确保均无污染。

骨髓间充质干细胞鉴定：

流式分析骨髓间充质干细胞表面标记物表达：取第3代骨髓间充质干细胞，予0.25%胰蛋白酶消化，用PBS洗涤2次后，离心制成1×10⁹ L^-¹细胞悬液，分别在4个试管中加入100 μL细胞悬液后分别加入CD-29PE、CD-34PE、CD-45PE、CD-105PE，室温下避温孵育30 min后，流式细胞仪检测。

骨髓间充质干细胞体外诱导分化能力鉴定：取第3代细胞，以4×10³/cm²的密度接种于6孔板。①体外诱导成脂分化能力鉴定：细胞贴壁100%融化后，加入成脂诱导液(体积分数为10%胎牛血清，10 mg/L牛胰岛素，1 μmol/L地塞米松，0.5 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤，0.2 mmol/L吲哚美辛)，成脂诱导72 h后，再用脂肪保持液(高糖DMEM培养基，10 mg/L牛胰岛素，体积分数为10%胎牛血清)处理3 d，2周后油红O染色观察是否有脂质沉淀。②体外诱导成骨分化能力鉴定：细胞贴壁70%融合后，加入成骨细胞诱导液(含体积分数为10%胎牛血清，100 nmol/L地塞米松，10 mmol/L β-甘油磷酸钠，50 mg/L抗坏血酸)培养，每3 d换液1次，第21天终止诱导，茜素红染液37 ℃染色 30 min鉴定。

试验分组：对每一个受试患者的双侧膝关节进行编号，并随机抽样，选出实验组及对照组。

关节腔内注射自体骨髓间充质干细胞及标本的收集：严格无菌消毒后，分别于患者双侧膝关节外侧膝眼抽取0.2-0.3 mL关节液，将1.5 mL生理盐水+0.5 mL 20%人血白蛋白注入对照组膝关节；获得第3代总数量约2×10⁷个骨髓间充质干细胞，悬浮于1.5 mL生理盐水+0.5 mL 20%人血白蛋白，20 min内注入实验组膝关节。2周后分别抽取双侧膝关节关节液0.2-0.3 mL，1 500 r/min离心后，-70 ℃保存。治疗前及治疗后2，4周时，分别进行WOMAC评分评估膝关节功能。

双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测关节液中的白细胞介素1、白细胞介素10、软骨寡聚基质蛋白、肿瘤坏死因子α水平：分别设立空白孔、标准孔、待测样品孔。按上海信帆生物科技有限公司提供的ELISA检测试剂盒操作说明进行操作。

主要观察指标：①膝关节的WOMAC评分。②关节液白细胞介素1、白细胞介素10、软骨寡聚基质蛋白、肿瘤坏死因子α水平。

统计学分析：根据样品数据分布特点选择x(_)±s或中位数联合四分位间距描述数据集中及离中趋势。当资料不符合正态分布时，因样本量较大(26例)，可联合采用x(_)±s描述数据分布特征。实验组及对照组治疗前数据基线水平的分析，采用两独立样品t 检验或秩和检验。对于治疗前后疗效的比较，采用配对资料的t 检验或秩和检验。正态性检验及方差齐性检验，设定检验水准α=0.1。其他统计均设定检验水准P=0.05。数据分析采用SPSS 13.0 for windows(SPSS Inc，Chicago，USA)。

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讨论

3.1 骨髓间充质干细胞用于治疗骨性关节炎的剂量 对于如何确定骨髓间充质干细胞移植数量，目前尚无统一标准。根据Madry等^[3]报道，在目前自体软骨细胞移植的临床研究中软骨细胞的移植密度为1×10⁶/cm²。而Evans等^[4]在类风湿关节炎临床基因治疗研究中指出，在掌指关节中植入基因修饰的滑膜成纤维母细胞，细胞数为1×10⁶定义为低剂量，细胞数为(1.5-5.0)×10⁶定义为中等剂量，(6.5-10.0)×10⁶定义为高剂量。Centeno等^[5]在利用关节腔注射骨髓间充质干细胞提高退行性变膝关节软骨量的病例报道中指出，关节腔注射2.24×10⁷干细胞，6个月后MRI显示膝关节内软骨量明显增加。Emadedin等^[6]同样通过关节腔注射自体来源的体外培养的骨髓间充质干细胞，回输(20-24)×10⁶第2代干细胞，6个月后MRI发现6例受试女性患者关节软骨的厚度明显增加。Vangsness等^[7]报道55例患者行半月板切除术后7-10 d内关节注射自体骨髓间充质干细胞，通过1年随访，发现50×10⁶治疗组中24%患者损伤半月板得到超过15%的修复，而150×10⁶治疗组只有6%患者的半月板得到超过15%的修复。本试验在保证其安全性而又不影响临床疗效的前提下，采用2×10⁷细胞治疗量，结果也证实了2×10⁷的干细胞治疗量能获得良好的临床效果，即膝关节功能WOMAC评分由治疗前的(82.27±12.76)分降低到治疗后的(39.62±15.27)分。

3.2 自体骨髓间充质干细胞引入膝关节腔内引起白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10水平的变化 通过分析WOMAC评分并结合临床表现，得出治疗后2周及治疗后4周的关节功能差异无显著性意义，且治疗后4周的WOMAC评分甚至有下降趋势，故仅检测2周时间点关节液中白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10水平。骨关节炎患者来源的骨髓间充质干细胞注入膝关节腔2周后，白细胞介素1由治疗前(18.16±11.38) ng/L降低到(9.84± 7.44) ng/L，肿瘤坏死因子α由治疗前的(66.92±51.89) ng/L降低到(42.76±35.72) ng/L；同时关节液中白细胞介素10由治疗前(73.46±63.95) ng/L升高到(100.43±74.36) ng/L，这种变化与患者临床症状改善(WOMAC评分)相一致，与对照组比较差异有显著性意义。

据此推断，骨关节炎患者膝关节腔微环境中的炎症因子γ-干扰素单独或联合肿瘤坏死因子α、白细胞介素1活化植入的骨髓间充质干细胞^[8-10]，通过与目标细胞的相互作用直接或间接产生一系列活化因子，如吲哚胺2，3-二氧化酶(IDO)、PGE2、转化生长因子β、肝细胞生长因子(HGF)、白细胞介素10、白细胞介素1受体拮抗剂等^[11]。转化生长因子β通过与ALK5(activin-like kinase 5)受体结合而下调SMAD2/3信号通路的表达，诱导金属蛋白酶组织抑制剂的产生，从而阻止软骨细胞的肥大^[12]。一系列活化因子，如IDO、PGE2等抑制T细胞的增殖，降低关节炎症反应，同时通过刺激白细胞介素10的产生抑制巨噬细胞，抑制单核细胞向树突状细胞的分化^[13-14]。

另外，白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α下降导致已激活的细胞核因子κB通道关闭，促使Sox9的表达，从而促进软骨细胞分泌细胞外基质如Ⅱ型胶原^[15-16]。白细胞介素1及肿瘤坏死因子α的下降减少了诱导型的一氧化氮合成酶的激活，从而令一氧化氮产生减少。本试验结果提示骨性关节炎患者膝关节腔中植入的自体骨髓间充质干细胞能发挥炎症抑制、免疫调节作用，改善膝关节中紊乱的微环境，从而缓解软骨的降解。

3.3 自体骨髓间充质干细胞注入膝关节腔内引起软骨寡聚基质蛋白水平的变化 软骨寡聚基质蛋白是软骨中非胶原蛋白的重要成分。软骨寡聚基质蛋白是二硫键连接5个独立的次级单元组成的五聚蛋白，在软骨中，其与Ⅱ级胶原结合，起到稳定胶原网的作用。本实验中，骨性关节炎患者来源的骨髓间充质干细胞注入膝关节腔2周后，软骨寡聚基质蛋白由治疗前(1.61±1.37) μg/L降低到(0.96±1.12) μg/L，这种变化与骨性关节炎患者膝关节功能改善一致，提示骨性关节炎患者关节腔中的软骨寡聚基质蛋白水平与骨性关节炎的进展呈正相关，故其检测有助于判断骨性关节炎患者软骨的病变程度^[17-18]。王晓滨等^[19]也报道骨性关节炎患者关节液中软骨寡聚基质蛋白水平与病情严重程度呈正相关，检测关节液中软骨寡聚基质蛋白的变化能反应软骨破坏进展，有助于骨性关节炎疗效判断。

3.4 自体骨髓间充质干细胞治疗骨性关节炎的安全性分析 在实验鼠关节腔内注射5百万个间充质干细胞，28 d后能通过影像分析能发现超过1 000个细胞存活，12周后仍能检测到少量的间充质干细胞^[20]，虽然没有直接的进行实验对比，人间充质干细胞在关节腔中存活的时间比鼠要短，但人间充质干细胞也能够存活2-8周^[21]。因本实验随访的时间短，尚不具备足够的证据说明自体骨髓间充质干细胞治疗的安全性。但至今，关于间充质干细胞临床使用的不良事件很少报道，这与临床治疗所涉及的患者例数少且随访时间短密切相关。因治疗用的骨髓间充质干细胞剂量庞大，往往在10⁵-10⁸之间，故不可避免在体外培养扩增，除了具有标准化的生产准则保证其安全性，其细胞的传代次数应严格控制以保证其活性及安全性。Rubio等^[22]研究发现，经过体外长时间培养(四五个月)，人脂肪来源间充质干细胞将发生自发性转化，转化后的细胞不再表现为长梭形，且核型不稳定(核型呈三倍体或四倍体或染色体重新排列)，复制时间更短，CD34、CD90、CD105的表达下降，接触抑制，倾向于移动，提示向恶性肿瘤转变。Bernardo等^[23]报道与Rubio相反，随着培养代数的增加，10位健康人来源的骨髓间充质干细胞在体外培养过程中并没有表现出自发性转化、永生或核型的异常，相反其增殖的能力下降，即失去活性，这种活性丢失的时间与个体相关，最早从第4代开始，但绝大部分从第9代开始。目前更多研究倾向于支持骨髓间充质干细胞随着培养代数的增加，其增殖能力及细胞活性下降，表达出永生化的概率非常低^[24]。Wang等^[25]通过SFDA批准在中国开展1期干细胞临床试验，其标准程序要求体外培养的间充质干细胞理想代数不超过6代，故在保证间充质干细胞的活性前提下兼顾其安全性，本试验采取的均为第3代骨髓间充质干细胞，得到的临床疗效相对肯定(即膝关节功能WOMAC评分由治疗前的82.269±12.758降低到治疗后的39.615±15.274)。而且有类似研究的安全性报道，2014年初，Thomas Vangsness在美国的THE JOURNAL OF BONE & JOINT SURGERY杂志(2012年影响因子为3.234)发表的1篇文章报道：55例患者性半月板切除后7-10 d内关节注射自体骨髓间充质干细胞，通过1年随访，发现50×10⁶治疗组中24%患者损伤半月板得到超过15%的修复，而150×10⁶治疗组只有6%患者的半月板得到超过15%的修复，而且2年过程的随访并没有发现有异常的事件或临床安全事件发生，该研究证据等级定义为1级(即随机双盲RCT试验)^[7]。Jo等^[26]于2014年发表在STEM CELLS文章报道：对18例骨性关节炎患者进行脂肪来源间充质干细胞关节腔注射(1×10⁸的干细胞治疗量)，通过6个月的随访，并未发现与治疗相关的不良事件。

结论：通过分析治疗前后WOMAC评分的变化，骨性关节炎患者来源的自体骨髓间充质干细胞引入关节腔内，能明显的缓解轻中度骨性关节炎患者关节疼痛、关节僵硬等临床症状，有效改善关节功能。进一步分析可知自体骨髓间充质干细胞注入导致关节腔内白细胞介素10水平升高，白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、软骨寡聚基质蛋白水平下降，从而推断骨髓间充质干细胞可能通过免疫调节及炎症抑制两种机制调节关节腔内紊乱微环境，缓解软骨的降解。本实验提示关节腔注射自体骨髓间充质干细胞有望成为治疗轻中度骨性关节炎的有效方案，同时为临床研究提供依据。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
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