高压氧联合许旺细胞移植脊髓损伤大鼠电生理及后肢功能的变化

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2015.14.013

摘要/Abstract

摘要：

背景：高压氧治疗可以改善脊髓损伤区微环境，联合许旺细胞移植有望提高大鼠脊髓损伤疗效。

目的：观察高压氧联合许旺细胞移植对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响。

方法：80只雌性SD大鼠建立脊髓损伤模型后随机分成4组，每组20只，空白对照组和细胞移植组分别在建模6 h后尾静脉注射L-DMEM培养液和许旺细胞(3×10⁶个)悬液，高压氧组建模1 h后开始高压氧治疗，联合组进行高压氧和许旺细胞移植联合治疗。于移植后1，3 d以及1，2，3，4周进行斜板试验、改良Tarlov 评分，BBB评分评定大鼠后肢运动功能恢复情况；移植第4周PCR检测各组脊髓组织中SRY基因表达；移植第8周行辣根过氧化物酶示踪及神经电生理检测。

结果与结论：联合组下肢运动功能优于细胞移植组和高压氧组，细胞移植组和高压氧组优于空白对照组。细胞移植组和联合组有SRY基因表达，对照组和高压氧组未检测到SRY基因。辣根过氧化物酶阳性神经纤维数：联合组>细胞移植组和高压氧组>空白对照组，差异有显著性意义(P < 0.01)。联合组大鼠体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期、波幅明显优于其他3组(P < 0.05或P < 0.01)。结果提示高压氧与许旺细胞移植联合应用可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生，改善肢体运动功能和电生理功能，其治疗效果优于单独应用高压氧或许旺细胞。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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关键词: 干细胞, 移植, 许旺细胞, 高压氧, 脊髓损伤, 细胞移植

Abstract:

BACKGROUND: Hyperbaric oxygen therapy can improve the microenvironment of the injured spinal cord, and hyperbaric oxygen combined with Schwann cell transplantation is expected to improve the therapeutic efficacy on spinal cord injury.

OBJECTIVE: To investigate the effect of Schwann cell transplantation plus hyperbaric oxygen on the neural functional recovery of rats with spinal cord injury.

METHODS: A total of 80 female SD rats with spinal cord injury were randomized into 4 groups, with 20 in each group: blank control group, injection of L-DMEM via the tail vein at 6 hours after modeling; cell transplantation group, injection of 3×10⁶ Schwann cell suspension via the tail vein at 6 hours after modeling; hyperbaric oxygen group, hyperbaric oxygen therapy at 1 hour after modeling; combination group, combined therapy of Schwann cell transplantation and hyperbaric oxygen. Inclined plane test, modified Tarlov score, Basso-Beattie-Bresnahan score for motor function evaluation of rat hind limbs were performed and measured at 1, 3 days, 1, 2, 3, 4 weeks after treatment. SRY gene expression in the spinal cord was measured at 4 weeks after transplantation using PCR method. Horseradish peroxidase tracer and electroneurophysiology detection was done at 8 weeks after transplantation.

RESULTS AND CONCLUSION: The motor function of the lower limbs was better in the combination group than the cell transplantation and hyperbaric oxygen groups, as well as better in the cell transplantation group and hyperbaric oxygen groups than the blank control group. SRY expression was detected in the cell transplantation group and combination group, but not in the blank control group and hyperbaric oxygen group. The number of nerve fibers positive for horseradish peroxidase was higher in the combination group than the cell transplantation and hyperbaric oxygen groups followed by the blank control group, and there were significant differences between different groups (P < 0.01). In addition, the latencies and amplitudes of somatosensory evoked potential and motor evoked potential in the combination group were also better than those in the other groups (P < 0.05 or P < 0.01). These findings indicate that the combined therapy of Schwann cell transplantation and hyperbaric oxygen can promote the synaptic regeneration, improve limb motor function and electrophysiological function in rats with spinal cord injury, which is superior to hyperbaric oxygen or Schwann cell transplantation alone.

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Key words: Schwann Cells, Hyperbaric Oxygenation, Spinal Cord Injuries, Genes, sry

中图分类号:

R394.2

王国玺，王国乾，张树泉. 高压氧联合许旺细胞移植脊髓损伤大鼠电生理及后肢功能的变化[J]. 中国组织工程研究, 2015, 19(14): 2205-2210.

Wang Guo-xi, Wang Guo-qian, Zhang Shu-quan. Hyperbaric oxygen combined with Schwann cells transplantation for spinal cord injury in rats: electrophysiological and functional changes of the hind limbs [J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2015, 19(14): 2205-2210.

图/表（结果） 4

2.1 许旺细胞形态及鉴定 倒置相差显微镜观察，培养五六天时细胞汇合布满瓶底，多数为许旺细胞，少数为成纤维细胞。经纯化后，许旺细胞可达95%以上，细胞呈长梭形，细胞较窄，核较小，细胞周围有大量分泌物(图1)。MBP免疫荧光鉴定：许旺细胞胞体及突起发出绿色荧光(图2)。许旺细胞和成纤维细胞的细胞核在DAPI作用下荧光显微镜观察呈蓝色，而成纤维细胞胞质未染色呈透明状。

2.2 下肢运动功能评价结果 造模前各组大鼠的BBB评分、斜板试验及改良的Tarlov评分接近(P > 0.05)。高压氧组及细胞移植组3项评分在各时间点(造模后2-4周)较模型组均明显升高(P < 0.05)，以联合组升高最为显著，见表1。

2.3 移植后4周PCR检测各组脊髓组织中SRY基因表达 移植后4周，在细胞移植组和联合组脊髓组织中有SRY基因表达，说明移植的许旺细胞存活，并参与了脊髓损伤的修复过程。对照组和高压氧组未检测到基因SRY，见图3。

2.4 辣根过氧化物酶逆行神经示踪 辣根过氧化物酶经DAB呈色反应后，在注射部位出现一中心部位深染其周围逐渐变浅的区域。空白对照组大鼠经腰膨大处注入辣根过氧化物酶2 d后，辣根过氧化物酶逆行运输，至T₈以上节段可见较少的辣根过氧化物酶阳性颗粒标记的神经纤维[(13.2±2.22)个/40倍视野]，见图4A。细胞移植组[(19.8± 2.34)个/40倍视野]和高压氧组[(20.3±1.82)个/40倍视野下]可见有辣根过氧化物酶阳性神经纤维，但数目较联合组少，较空白对照组多，见图4B，C。联合组脊髓可见到较多辣根过氧化物酶阳性颗粒标记的神经纤维[(38.8±6.34)个/40倍视野]，见图4D。移植后8周联合组与对照组辣根过氧化物酶阳性神经纤维数比较差异有非常显著性意义(P < 0.01)，联合组与细胞移植组和高压氧组比较差异有显著性意义(P < 0.05)。

2.5 各组大鼠体感诱发电位和运动诱发电位的检测结果 建立脊髓损伤模型后，进行体感诱发电位和运动诱发电位检测发现各组动物的诱发电位波形完全消失。移植后8周，空白对照组体感诱发电位和运动诱发电位少量恢复，联合组体感诱发电位和运动诱发电位明显恢复，波幅增高。细胞移植组和高压氧组与空白对照组比较差异有显著性意义(P < 0.05)，联合组与空白对照组比较差异有非常显著性意义(P < 0.01)。细胞移植组和高压氧组与联合组比较差异有显著性意义(P < 0.05)，表明联合组电信号从后肢到头皮传导时间比其他组都短，传导通路已经畅通，恢复较好，见表2。

参考文献

[1] Duchossoy Y, David S, Baulieu EE, et al. Treatment of experimental spinal cord injury with 3β-methoxy- pregnenolone. Brain Res. 2011;1403:57-66.
[2] De Vries M, Cooper HM. Emerging roles for neogenin and its ligands in CNS development. J Neurochem. 2008;106(4): 1483-1492.
[3] Fehlings MG, Sekhon LH. Acute interventions in spinal cord injury: what do we know, what should we do. Clin Neurosurg. 2001;48:226-242.
[4] Chi GF, Kim MR, Kim DW, et al. Schwann cells differentiated from spheroid-forming cells of rat subcutaneous fat tissue myelinate axons in the spinal cord injury. Exp Neurol. 2010; 222(2):304-317.
[5] Ban DX, Kong XH, Feng SQ, et al. Intraspinal cord graft of autologous activated Schwann cells efficiently promotes axonal regeneration and functional recovery after rat's spinal cord injury. Brain Res. 2009;1256:149-161.
[6] Amar AP, Levy ML. Pathogenesis and pharmacological strategies for mitigating secondary damage in acute spinal cord injury. Neurosurgery. 1999;44(5):1027-1039.
[7] 万虹,林野,孙梅珍,等.雪旺氏细胞脑内移植前的体外培养[J].中华神经外科杂志,2003,19(3):213-215.
[8] Young W. Spinal cord contusion models. Prog Brain Res. 2002;137:231-255.
[9] Finch AM, Wong AK, Paczkowski NJ, et al. Low-molecular- weight peptidic and cyclic antagonists of the receptor for the complement factor C5a. J Med Chem. 1999;42(11):1965-1974.
[10] Pallini R, Vitiani LR, Bez A, et al. Homologous transplantation of neural stem cells to the injured spinal cord of mice. Neurosurgery. 2005;57(5):1014-1025.
[11] Albin RL, Mink JW. Recent advances in Tourette syndrome research. Trends Neurosci. 2006;29(3):175-182.
[12] Haku T, Okuda S, Kanematsu F, et al. Repair of cervical esophageal perforation using longus colli muscle flap: a case report of a patient with cervical spinal cord injury. Spine J. 2008;8(5):831-835.
[13] Pearse DD, Sanchez AR, Pereira FC, et al. Transplantation of Schwann cells and/or olfactory ensheathing glia into the contused spinal cord: Survival, migration, axon association, and functional recovery. Glia. 2007;55(9):976-1000.
[14] Papastefanaki F, Chen J, Lavdas AA, et al. Grafts of Schwann cells engineered to express PSA-NCAM promote functional recovery after spinal cord injury. Brain. 2007;130(Pt 8): 2159-2174.
[15] Weaver FM, Burns SP, Evans CT, et al. Provider perspectives on soldiers with new spinal cord injuries returning from Iraq and Afghanistan. Arch Phys Med Rehabil. 2009;90(3):517-521.
[16] Chu D, Bakaeen FG, Shenaq SA, et al. Open-heart operations in patients with a spinal cord injury. Am J Surg. 2007;194(5):663-667.
[17] Lepore AC, Neuhuber B, Connors TM, et al. Long-term fate of neural precursor cells following transplantation into developing and adult CNS. Neuroscience. 2006;139(2): 513-530.
[18] Saberi H, Moshayedi P, Aghayan HR, et al. Treatment of chronic thoracic spinal cord injury patients with autologous Schwann cell transplantation: an interim report on safety considerations and possible outcomes. Neurosci Lett. 2008; 443(1):46-50.
[19] Crowe MJ, Bresnahan JC, Shuman SL, et al. Apoptosis and delayed degeneration after spinal cord injury in rats and monkeys. Nat Med. 1997;3(1):73-76.
[20] Liu XZ, Xu XM, Hu R, et al. Neuronal and glial apoptosis after traumatic spinal cord injury. J Neurosci. 1997;17(14): 5395-5406.
[21] Ohta S, Iwashita Y, Takada H, et al. Neuroprotection and enhanced recovery with edaravone after acute spinal cord injury in rats. Spine (Phila Pa 1976). 2005;30(10):1154-1158.
[22] Banno M, Mizuno T, Kato H, et al. The radical scavenger edaravone prevents oxidative neurotoxicity induced by peroxynitrite and activated microglia. Neuropharmacology. 2005;48(2):283-290.
[23] Kwon BK, Tetzlaff W, Grauer JN, et al. Pathophysiology and pharmacologic treatment of acute spinal cord injury. Spine J. 2004;4(4):451-464.
[24] Crowe MJ, Bresnahan JC, Shuman SL, et al. Apoptosis and delayed degeneration after spinal cord injury in rats and monkeys. Nat Med. 1997;3(1):73-76.
[25] Liu XZ, Xu XM, Hu R, et al. Neuronal and glial apoptosis after traumatic spinal cord injury. J Neurosci. 1997;17(14):5395- 5406.
[26] Ohta S, Iwashita Y, Takada H, et al. Neuroprotection and enhanced recovery with edaravone after acute spinal cord injury in rats. Spine (Phila Pa 1976). 2005;30(10):1154-1158.
[27] Banno M, Mizuno T, Kato H, et al. The radical scavenger edaravone prevents oxidative neurotoxicity induced by peroxynitrite and activated microglia. Neuropharmacology. 2005;48(2):283-290.
[28] Björklund E, Lindberg E, Rundgren M, et al. Ischaemic brain damage after cardiac arrest and induced hypothermia--a systematic description of selective eosinophilic neuronal death. A neuropathologic study of 23 patients. Resuscitation. 2014;85(4):527-532.
[29] Ariake K, Ohtsuka H, Motoi F, et al. GCF2/LRRFIP1 promotes colorectal cancer metastasis and liver invasion through integrin- dependent RhoA activation. Cancer Lett. 2012;325(1):99-107.
[30] Pearse DD, Sanchez AR, Pereira FC, et al. Transplantation of Schwann cells and/or olfactory ensheathing glia into the contused spinal cord: Survival, migration, axon association, and functional recovery. Glia. 2007;55(9):976-1000.
[31] Pallini R, Vitiani LR, Bez A, et al. Homologous transplantation of neural stem cells to the injured spinal cord of mice. Neurosurgery. 2005;57(5):1014-1025.
[32] Chuang SK. Limited evidence to demonstrate that the use of hyperbaric oxygen (HBO) therapy reduces the incidence of osteoradionecrosis in irradiated patients requiring tooth extraction. J Evid Based Dent Pract. 2011;11(3):129-131.
[33] 丁进京.高压氧治疗对急性期脑梗死患者血清ACA水平的影响[J].中国实用神经疾病杂志,2012,15(3): 34-36.

引言

材料方法

设计：随机对照动物实验。

时间及地点：实验于2011年4月至2013年9月在天津医科大学细胞生物实验室完成。

材料：

实验动物：健康纯系雄性SD大鼠8只，健康纯系雌性SD大鼠80只，体质量200-250 g，均购自中国医学科学院动物实验室，动物质量合格证号：SCXK(津)20050076。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。

实验方法：

许旺细胞体外培养纯化及MBP免疫荧光鉴定：按照万虹等^[7]的描述，在显微镜下无菌剥离雄性SD大鼠坐骨神经，2.5 g/L胰蛋白酶-2 g/L胶原酶消化40 min，1 000 r/min离心5 min，加入DMEM/F12培养液(含体积分数10%的胎牛血清)于37 ℃，含体积分数5%CO₂培养箱中培养。30 min后，差速贴壁去除成纤维细胞，24 h后加入100 μL阿糖胞苷(10^-⁵ mmol/L)进一步杀灭成纤维细胞，培养3 d，按1︰3比例传代。将传4代的许旺细胞置于盖玻片上培养48 h，PBS洗3次，40 g/L多聚甲醛液(pH=7.4)室温固定20 min，PBS洗3次，加入MBP一抗，4 ℃湿盒过夜。PBS洗3次，加入二抗(山羊抗兔IgG抗体)，37 ℃温箱2 h，然后加入DAPI反应10 h。PBS洗3次，加入封固剂观察。

动物模型的建立：选择雌性SD大鼠80只，实验室饲养2周后，用25 g/L氯胺酮(20 mg/kg)腹腔注射麻醉，将大鼠俯卧位固定于实验台上，腰背部剪毛，以T₈_-₉棘突为中心，自背部正中切口，显露T₇_-₁₀棘突及椎板，切除T₈_-₉棘突及部分椎板组织，暴露脊髓组织作为损伤区。制模方法参照改良Allen打击法^[8]，将10 g重物从2.5 cm高度垂直落下并直接撞击大鼠脊髓组织(术后大鼠尾巴痉挛摆动后双下肢瘫痪表明制模成功)，青霉素盐水冲洗伤口，逐层缝合组织。各组大鼠造模后每日上、下午各进行1次腹部按摩和挤压操作以协助排尿。

实验分组及干预：采用随机区组法将80只SD大鼠分为4组，每组20只。①空白对照组：建模6 h后尾静脉注射1 mL L-DMEM培养液，1次/d，共3 d。②细胞移植组：建模6 h后尾静脉注射1 mL许旺细胞(3×10⁶个)悬液，1次/d，共3 d。③高压氧治疗组：建模1 h后，将大鼠置于高压氧舱内，用纯氧洗舱10 min，以0.01 MPa/min的速率匀速加压至0.2 MPa，稳压30 min，期间间断通纯氧以维持氧体积分数在70%以上，随后匀速减压10 min至常压，4次/d，连续7 d。④联合组：建模6 h后尾静脉注射1 mL许旺细胞(3×10⁶个)悬液，1次/d，共3 d。许旺细胞注射后给予高压氧治疗，4次/d，连续2 d。

下肢运动功能评价：在造模前及造模后1 d，3 d，1周，2周，3周，4周，对4组大鼠进行运动功能评定。评定项目包括改良Tar-lov评分^[9]、BBB评分^[10-11]、斜板试验^[8]。评定时间均统一为上午8:00开始。评分均为2人合评。采取双盲法进行评分，共检测6次，取均值。

Tarlov评分^[12-13]：0级：后肢无活动，不能负重；1级：后肢可见活动，但不能负重；2级：后肢活动频繁或有力，不能负重；3级：后肢可支持体质量，能走1步或2步；4级：可行走，仅有轻度障碍；5级：行走功能正常。

BBB评分^[13-14]：该评分系统将大鼠后肢运动功能分为22个等级，其中后肢全瘫为0分，功能完全正常为21分，主要观察内容包括关节活动数目和范围、负重程度及前后肢协调性、前后爪和尾部活动情况等。

斜板试验^[7-8]：将实验大鼠置于光滑木板上，其身体轴线与平板纵轴平行，平板每次升高5°，以大鼠能停留5 s(期间保持不下滑)的最大角度为其功能值。

PCR检测各组脊髓组织中SRY基因表达：分别于移植后4周，随机选取4组各8只大鼠以20 g/L戊巴比妥钠过量腹腔注射，深度麻醉后切开胸腔，经左心室插管至升主动脉，切开右心房后灌注泵恒速灌注200 mL冰生理盐水，待右心房流出的液体变成无色后取材(包含脊髓损伤处约1 cm长度的脊髓组织)，标记分组后，按照试剂盒说明提取并保存DNA。大鼠Sry基因引物序列F：5’CTG GCT CTG CTC CTA CCT3’；R：5’GCT GTT TGC TGC CTT TGA3’。PCR扩增体系：DNA 1.0 μL，dNTP 0.2 mmol/L，MgCl₂ 22.0 mmol/L，10×buffer 3.0 μL，Taq酶1 μL，引物各0.5 μmol/L，去离子水补至总体积30 μL。循环参数设置：95 ℃预变性5 min，94 ℃变性30 s ，54 ℃退火45 s，72 ℃延伸50 s，32个循环后再72 ℃延伸7 min。反应产物经2%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色，Gel2Doc200型凝胶成像分析仪拍照，所得片段大小应为325 bp。

体感诱发电位和运动诱发电位的检测：移植后第8周，随机选取4组各6只大鼠，参考文献[11]的方法用KEYPOINT 4诱发电位仪测定体感诱发电位和运动诱发电位。

体感诱发电位检测：10%水合氯醛腹腔注射麻醉，将其平放在水平面上，后肢固定刺激电极。记录电极安放于冠状缝和矢状缝愈合线的相交处头皮下(即后肢皮质感觉区)，参考电极置于其后方0.5 cm处。给予直流方波电脉冲刺激，以后肢轻微抽动为宜，电流强度为5-15 mA，波宽0.2 ms，频率3 Hz，叠加次数50-60次，记录体感诱发电位潜伏期及波幅的变化，观察神经电生理恢复情况。

运动诱发电位检测：麻醉后将针状刺激电极置于顶冠状缝前2 mm、矢状缝旁2 mm处头皮下(即大脑皮质运动区)，刺激强度40 mA，刺激波宽0.1 ms，刺激频率1 Hz，叠加次数300-500次，扫描速度5 ms/D，灵敏度5 μV/D，观察记录运动诱发电位潜伏期及波幅的变化。

辣根过氧化物酶逆行神经示踪：移植后8周，各组随机取3只大鼠，麻醉后手术暴露脊髓。在T₁₂背正中静脉左、右侧1 mm处进针，进针深度为1.5 mm。以0.1 μL/10 min的速度注射50%辣根过氧化物酶1 μL(以生理盐水溶解)，注射完毕后留针15 min，饲养3 d。水合氯醛麻醉下，40 g/L的多聚甲醛心脏灌注，并取出脊髓(T₃-T₁₁)，浸入30%的蔗糖溶液(4 ℃)20 h后制作成5 μm的冰冻切片，DAB加强染色法染色，在光镜下计数脊髓横切面上辣根过氧化物酶阳性神经纤维束数目。

主要观察指标：①许旺细胞形态。②移植后各组大鼠下肢运动功能评价。③移植后4周各组脊髓组织中SRY基因表达。④移植后8周各组大鼠脊髓组织中辣根过氧化物酶阳性神经纤维束数目。⑤移植后8周各组大鼠体感诱发电位和运动诱发电位。

统计学分析：由第二作者用SAS 8.0软件进行统计分析。所得数据以x(_)±s表示，采用重复测量方差分析和t 检验进行统计学检验。P < 0.05为差异有显著性意义。

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讨论

研究表明损伤的脊髓组织确实有神经再生的能力^[1-3]，但是脊髓损伤后，脊髓损伤区形成了抑制轴突再生的微环境，产生了髓磷脂相关抑制物^[15-16]，如轴突生长抑制因子(Nogo-A)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(Omgp)等抑制性因子，并通过激活胞内的RhoA信号转导途径发挥作用^[9-11]，因此RhoA信号通路是调节脊髓损伤后神经轴突再生的主要信号通路。

许旺细胞是周围神经的主要结构和功能细胞，在周围神经损伤、再生和修复过程中发挥着重要作用^[17-18]。许旺细胞可分泌多种神经营养因子、细胞基质及细胞黏附因子，促进中枢神经系统受损的神经修复^[19-20]。Ohta等^[21]将裸鼠T₉_-₁₀脊髓切除，利用PAN/PVC导管，将许旺细胞移植于损伤处，发现此移植物更好整合于宿主脊髓，诱导轴突通过损伤区，移植45 d后，1%的轴突长入对侧宿主脊髓，部分神经功能恢复。Banno等^[22]认为脊髓横断后，由于损伤溶酶体致神经组织水肿及毒性物质释放水解酶，脊髓残端变性坏死产生自切现象，而移植许旺细胞，通过其分泌多种神经营养因子，维持受损神经元的活性，防止脊髓残端的变性坏死。目前国外已有应用许旺细胞治疗脊髓创伤、脊髓脱髓鞘性疾病，并在脊髓神经组织形态上和功能恢复上取得突破性进展的报道，并证实许旺细胞具有促进轴突生长、髓鞘形成和靶向诱导作用的重要生理功能^[23-28]。

脊髓损伤神经学损害由原发性和继发性两种损伤机制引起^[29-32]。继发性脊髓损伤后出现一系列的氧化反应，产生大量自由基，最终可导致神经组织损伤，从而出现临床许多神经功能缺失的症状及体征。近年研究表明神经细胞凋亡在脊髓继发性损伤中具有重要的作用，而且凋亡细胞主要是少突胶质细胞，灰质的神经元却不表现凋亡的特征^[33]。脊髓损伤后行高压氧治疗，有利于减少神经细胞凋亡，减轻患者的残疾程度，能预防和阻止患者病情进一步的恶化，有明显的远期效果。故本实验将高压氧和许旺细胞移植联合治疗大鼠脊髓损伤。实验结果表明，与单纯的许旺细胞移植相比，高压氧联合许旺细胞移植无论从组织学上还是功能学上疗效都有明显的提高。分析高压氧通过下列途径改善了大鼠脊髓损伤区的微环境：①中枢神经系统对氧浓度及其敏感，脊髓损伤时局部水肿缺氧明显，高压氧能显著提高损伤区血氧浓度，增加氧弥散距离，减少细胞缺氧所致的凋亡。②高压氧可以提高红细胞的变形能力，降低毛细血管的通透性，提高局部组织尤其是损伤区的氧气及能量供应。③高压氧能促进损伤区血管的血流速度，减少血小板的聚集，从而降低血黏度。④高压氧能够纠正酸中毒，改善脊髓损伤部位的微循环及血流灌注，维持神经细胞能量代谢，并恢复可逆性损伤的神经元功能。

总之，用高压氧联合许旺细胞能促进脊髓损伤后大鼠神经功能的恢复，移植的许旺细胞可以更好的在损伤部位存活、增殖分化与迁移，这可以为临床治疗脊髓损伤提供新的思路和方法。

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