急性力竭运动模型大鼠鱼腥草素干预后的肾滤过屏障变化

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.36.010

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (36): 5793-5798.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.36.010

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急性力竭运动模型大鼠鱼腥草素干预后的肾滤过屏障变化

林喜秀^1，2，邱继旺¹，罗自强²，瞿树林³，赵用强¹

1湖南工业大学体育学院，湖南省株洲市 412000
2中南大学基础医学院博士后流动站，湖南省长沙市 410000
3湖南师范大学医学院，湖南省长沙市 410012

修回日期:2014-08-02 出版日期:2014-08-30 发布日期:2014-08-30
通讯作者: 罗自强，博士，教授，中南大学基础医学院博士后流动站，湖南省长沙市 410000 并列通讯作者：瞿树林，教授，硕士，博士生导师，湖南师范大学医学院，湖南省长沙市 410012
作者简介:林喜秀，女，1973年生，湖南省辰溪县人，苗族，1998年湖南师范大学医学院毕业，博士，讲师，主要从事低氧细胞生理研究。并列第一作者；邱继旺，硕士，讲师，主要从事体育训练与运动康复方面的研究。
基金资助:
中国博士后第53批面上项(2013M531794)；湖南工业大学湖湘体育文化研究基地资助(13HXTYWHO4)；湖南工业大学2013年校级教育教学改革研究项目(2013C43)；2012年湖南省博士后日常经费资助(2012，11)；2012中南大学博士后启动基金资助

Changes in glomerular filtration barrier in rat models of acute exhaustive exercise after intervention with sodium houttuyfonate

Lin Xi-xiu^{1, 2}, Qiu Ji-wang¹, Luo Zi-qiang², Qu Shu-lin³, Zhao Yong-qiang¹

1Physical Education College, Hunan University of Technology, Zhuzhou 412000, Hunan Province, China
2Postdoctoral Research Station, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha 410000, Hunan Province, China
3Medical College of Hunan Normal University, Changsha 410012, Hunan Province, China

Revised:2014-08-02 Online:2014-08-30 Published:2014-08-30
Contact: Luo Zi-qiang, M.D., Professor, Postdoctoral Research Station, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha 410000, Hunan Province, China Qu Shu-lin, Professor, Master, Doctoral supervisor, Medical College of Hunan Normal University, Changsha 410012, Hunan Province, China
About author:Lin Xi-xiu, M.D., Lecturer, Physical Education College, Hunan University of Technology, Zhuzhou 412000, Hunan Province, China; Postdoctoral Research Station, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha 410000, Hunan Province, China Oiu Ji-wang, Master, Lecturer, Physical Education College, Hunan University of Technology, Zhuzhou 412000, Hunan Province, China Lin Xi-Xiu and Qiu Ji-wang contributed equally to this paper.
Supported by:
the China Postdoctoral 53rd Batch General Project, No. 2013M531794; the Huxiang Sports Culture Research Base Program of Hunan University of Technology, No. 13HXTYWHO4; the Education Reform Project of Hunan University of Technology in 2013, No. 2013C43; the Postdoctoral Daily Funding of Hunan Province in 2012, No. 2012, 11; the Postdoctoral Start Fund of Central South University in 2012

摘要/Abstract

摘要：

背景：大强度急性力竭运动过程中，机体既要承受由于运动强度的增加内脏血流急骤下降的“运动性缺血”，同时随着运动进行，能源物质耗蝎、代谢产物堆积及氧化应激等因素致使机体出现病理损伤，导致机体运动能力下降，那么，其对肾滤过屏障有何影响?肾组织将如何适应其变化?鱼腥草具有清热解毒、利尿通淋、止血、祛痰止咳、镇痛等多种功能，是否对急性力竭运动引起的肾损伤有保护作用及其机制尚未见有文献报道。
目的：探索急性力竭运动对大鼠肾滤过屏障的影响及鱼腥草素的干预作用。
方法：SD大鼠静养与观察3 d，在速度为10 m/min坡度为0°的跑台上进行适应性跑15 min，筛选出24只能完成跑的大鼠，按体质量分层随机分为正常对照组，力竭运动组和运动给药组，各8只。力竭运动组和运动给药组在坡度为10°的动物跑台上进行的一次性力竭运动；运动给药组在运动前30 min腹腔注射鱼腥草素10 mL/kg；正常对照组大鼠不运动。
结果与结论：与正常对照组比，力竭运动组大鼠血清尿素氮、血清肌酐、尿蛋白含量、丙二醛浓度、肾细胞凋亡率及凋亡指数显著增加，肾组织一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性明显下降(P < 0.05或0.01)，肾小球滤过上皮细胞、基膜及足细胞的肾滤过屏障损害明显，见大量细胞凋亡，偶见坏死；与力竭运动组比，运动给药组大鼠尿蛋白含量、血清肌酐、丙二醛浓度、肾细胞凋亡率及凋亡指数显著下降，肾组织一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性明显增加(P < 0.05)，肾组织未见明显病理改变，可见细胞凋亡。提示鱼腥草素可使力竭运动诱导的肾细胞损伤减少，考虑可能与凋亡显著减少；并可使一氧化氮合酶含量增加、丙二醛下降及超氧化物歧化酶明显增高有关，从而对力竭运动诱导大鼠肾组织损伤起保护作用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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关键词: 实验动物, 组织构建, 急性力竭运动, 肾滤过屏障, 一氧化氮, 一氧化氮合酶, 鱼腥草素, 肾功能, 自由基

Abstract:

BACKGROUND: In high-intensity exhaustive exercise process, the body must bear the exercise intensity decreasing splanchnic blood flow “ischemia”, at the same time, along with the movement of energy and material consumption, metabolite accumulation and oxidative stress in the body cause pathological damage, leading to a decline in exercise capacity. Thus, what is the impact on kidney filtration barrier? How to adapt to the change of renal tissue? Houttuynia cordata has the functions of heat clearing and detoxifying, dieresis for treating strangurtia, hemostatic, expelling phlegm to arrest coughing and analgesia, if it has a protective effect on the renal injury caused by acute exhaustive exercise and its mechanism has not been reported in the literature.
OBJECTIVE: To explore the effect of acute exhaustive exercise on kidney filtration barrier in rats and the intervention effect of Houttuynia cordata.
METHODS: After resting and watching for 3 days, Sprague-Dawley rats received adaptive running for 15 minutes at a speed of 10 m/min on a 0° treadmill. A total of 24 rats, which can finish the running, were selected. They were divided into normal control group, exhaustive exercise group and dosed exhaustive exercise group according to the weight of layer (n=8). Rats in the exhaustive exercise group and dosed exhaustive exercise group on the 10° treadmill received once exhaustive exercise. Dosed exhaustive exercise group received intraperitoneal injection of sodium houttuyfonate 10 mL/kg at 30 minutes before exercises. The normal control group did not do any exercise.
RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the normal control group, serum urea nitrogen, serum creatinine, urine protein content, malondialdehyde concentration, renal cell apoptosis and apoptosis index were significantly increased, but nitric oxide content and nitric oxide synthase activity in the renal tissue were significantly deceased in the exhaustive exercise group (P < 0.05 or 0.01). Glomerular filtration epithelial cells, the kidney filtration barrier of basement membrane and podocyte damage were obvious, showing abundant cell apoptosis, occasionally necrosis. Compared with the exhaustive exercise group, urine protein content, serum creatinine, malondialdehyde concentration, renal cell apoptosis and apoptosis index were significantly reduced, but nitric oxide content and nitric oxide synthase activity were significantly increased in the dosed exhaustive exercise group (P < 0.05). No obvious pathological changes were detected, but apoptosis was visible. These findings confirmed that houttuynine made a reduction in renal cell injury induced by exhaustive exercise and possibly significantly reduced apoptosis, increased nitric oxide synthase content, decreased malonaldehyde, and apparently increased superoxide dismutase activity, and finally protected injured renal tissue induced by exhaustive exercise.

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Key words: houttuynia, apoptosis, glomerular filtration rate, kidney diseases

中图分类号:

R318

林喜秀，邱继旺，罗自强，瞿树林，赵用强. 急性力竭运动模型大鼠鱼腥草素干预后的肾滤过屏障变化[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(36): 5793-5798.

Lin Xi-xiu, Qiu Ji-wang, Luo Zi-qiang, Qu Shu-lin, Zhao Yong-qiang. Changes in glomerular filtration barrier in rat models of acute exhaustive exercise after intervention with sodium houttuyfonate[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(36): 5793-5798.

图/表（结果） 2

2.1 实验动物数量分析 所有大鼠全部进入结果分析，实验过程无脱失。
2.2 鱼腥草素对急性力竭运动大鼠一般情况的影响 力竭运动组和运动给药组大鼠均完成运动，运动给药组大鼠表现较正常；力竭运动组出现神态倦怠，眼神黯淡；力竭运动组和运动给药组的力竭时间分别为(180.50±41.52) min和(226.75±64.03) min，运动给药组力竭时间有延长的趋势，但力竭运动组和运动给药组大鼠的力竭时间的差异无显著性意义(P > 0.05)。

2.3 鱼腥草素对急性力竭运动大鼠肾功能的影响 与正常对照组相比，大鼠力竭运动后24 h，尿蛋白含量、血清尿素氮及肌酐水平均明显增加(P < 0.05或0.01)，而与力竭运动组相比，经鱼腥草素治疗的大鼠尿蛋白含量及血清肌酐降低(P < 0.05)，而血清尿素氮的变化差异无显著性意义(P > 0.05)；见表1。

2.4 鱼腥草素对急性力竭运动大鼠体质量、肾丙二醛、超氧化物歧化酶的影响 3组大鼠体质量接近(P > 0.05)。与正常对照组相比，大鼠力竭运动后24 h丙二醛浓度上升 (P < 0.05)，超氧化物歧化酶活性下降(P < 0.05)；而与力竭运动组相比，经鱼腥草素治疗的大鼠丙二醛浓度降低 (P < 0.05)，而超氧化物歧化酶的变化差异无显著性意义(P > 0.05)；见表2。

2.5 鱼腥草素对急性力竭运动大鼠肾组织一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响 与正常对照组相比，力竭运动后24 h大鼠肾组织中一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性均明显降低(P < 0.05或0.01)；而与力竭运动组相比，经鱼腥草素治疗的大鼠肾组织中一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性均明显上升(P < 0.05或0.01)；见表3。

2.6 鱼腥草素对急性力竭运动大鼠肾脏病理变化的影响

苏木精-伊红染色显示：正常对照组肾小球及肾小管无明显异常，肾组织结构基本正常；力竭运动组大鼠肾皮质苍白，髓质淤血暗红，肾小球明显淤血、肿胀、红细胞渗出、肾小囊腔变窄，肾小管上皮细胞崩解、变性、脱落，管腔扩张，可见蛋白管型和红细胞管型，同时可见管壁剥离和断裂；运动给药组大鼠病理改变比力竭组轻，肾小球基底膜较完整，淤血明显减轻，肾小管上皮细胞变性轻，管腔扩张以及管腔中的脱落绒毛和上皮细胞少，偶见蛋白管型和细胞管型，罕见管壁剥离和断裂(图1)。

电镜显示：正常对照组大鼠肾脏组织中内皮细胞分布清晰可见，基膜厚度及电子密度均匀，肾足细胞突起分布均匀，滤过膜结构完整；肾小管襄腔清晰可见，细胞核形态完整，细胞膜边界清晰，染色质均匀的分布；力竭运动组大鼠肾脏组织中可见肾小球内皮细胞的变化：内皮细胞肿胀、成对，胞质连拱状，内皮细胞与基膜剥离、融合等，其中肾小球内皮细胞变化最为突出；基膜结构的改变包括：基膜扭曲、塌陷、三层结构消失驼峰样等变化；肾小球足细胞的变化包括肾小球外周袢足细胞胞体脱落，可见足细胞足突融合、足细胞出现变异并有分布减少，滤过屏障结构破坏明显；肾小管襄腔结构模糊或肾小管襄腔明显增宽，形态不规则等改变；细胞核形态不完整，有细胞核呈分叶状的典型细胞凋亡样改变，染色质浓缩、不均匀分布、大量分布于核膜下等改变；致使滤过膜3层结构改变，模糊不清；运动给药组大鼠肾脏组织病理变化较力竭组肾细胞超微结构有明显改善，内皮细胞与肾足细胞突起分布较均匀，基膜厚度较均匀，边界清晰，但肾细胞核边界存在模糊现象，偶见有细胞核的分叶改变，可见线粒体脊较清晰，但有部分空泡化，微绒毛稀少或消失(图2)。

2.7 鱼腥草素对急性力竭运动大鼠肾细胞凋亡变化的影响 TUNEL染色显示，正常对照组大鼠肾脏组织未见细胞凋亡；力竭运动组大鼠肾脏组织出现大量凋亡细胞，细胞间隙大。与正常对照组相比，力竭运动组和运动给药组大鼠细胞凋亡发生率和凋亡指数均显著增加(P < 0.01)；与力竭运动组相比，运动给药组大鼠凋亡指数显著下降 (P < 0.05；图3，表4)。

参考文献

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引言

大强度急性力竭运动过程中，随着运动强度的增加机体血液重新分布，肾血流急骤下降，这种不完全缺血状态形成了“运动性缺血”，运动停止后血供恢复形成“运动性缺血再灌注”，同时由于能源物质耗蝎、代谢产物堆积及氧化应激所造成的自由基损伤等多种因素的影响，致使机体出现病理损伤，导致机体运动能力下降^[1]。如何克服大强度运动过程中机能水平下降过快以及加快运动后运动性疲劳的消除，防止损伤的发生，一直是运动医学界研究的热点问题之一。

鱼腥草是中国传统常用的药物之一，富含蛋白质、油脂、维生素等营养成分，具有清热解毒、利尿通淋、止血、祛痰止咳、镇痛等多种功能，临床用于痰热喘咳、热痢、热淋，其含有的蛋白酶抑制活性物质更是抑制肿瘤的重要物质^[2]。近年来发现，清热解毒中药鱼腥草对糖尿病肾组织有明显的保护作用，可明显抑制糖尿病模型大鼠肾小球的肥大，降低尿β2微球蛋白、尿白蛋白排泄率和肌酐清除率，且鱼腥草给药组的肾组织转化生长因子β1表达明显减少^[3]；鱼腥草蒸馏液对高糖、高脂饮食配合链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠，能改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗和减轻尿蛋白的作用^[4]。国内外研究表明，急性力竭运动诱导肾小管上皮细胞自由基、一氧化氮活酶的改变和凋亡的发生，其不仅在肾损伤的发病机制中具有重要作用，而且，对其干预治疗后可保护肾损伤、防止运动能力明显下降^[5-6]。鱼腥草素是否对急性力竭运动引起的肾损伤有保护作用及其机制尚未见有文献报道。由此，本实验通过观察急性力竭运动对大鼠肾滤过屏障的影响及鱼腥草素的干预作用，为探讨运动、竞技训练提供理论依据，同时为传统中药鱼腥草的开发和推广起促进作用。

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材料方法

设计：随机对照动物实验。

时间及地点：实验于2011年1月至2014年4月在湖南师范大学医学院应用生理学实验室、中南大学基础实验室、湖南省肿瘤医院基础实验室及及湖南中医药大学基础实验室完成。

材料：

实验动物：8周龄成年雄性SD大鼠24只，体质量为(200±10) g，购于湖南农业大学实验动物学部，许可证号：scxk(湘)2003-0003，为Ⅱ级实验动物，国家标准啮齿类动物饲料饲养。
药物：鱼腥草素注射液，成分为鲜鱼腥草，辅料为氯化钠、聚山梨酯-80，批准文号：国药准字Z20043470，每支装20 mL，购自四川升和制药有限公司。

方法：

实验动物分组：SD大鼠适应性喂养3 d后，在速度为 10 m/min坡度为0°的跑台上进行适应性跑15 min，按体质量分层随机分为正常对照组、力竭运动组和运动给药组，每组8只。

力竭运动：在坡度为10°的动物跑台上进行的一次性力竭运动，按18，22 m/min的速度各跑10 min，接着26 m/min的速度跑15 min，最后稳定在30 m/min(相当于最大摄氧量的92.3%强度)的速度跑至力竭，偶尔使用电刺激。正常对照组大鼠不进行运动。

腹腔注射鱼腥草素：运动给药组在运动前30 min腹腔注射鱼腥草素10 mg/kg。

取材：各组动物均于力竭运动后24 h用速眠新Ⅱ(0.8-1.2 mL/kg)腹腔注射，麻醉满意后心脏取血致死，离心取血清，放置-20 ℃保存备验；剖开腹腔，用4号针头及微量注射器从膀胱抽取尿液，仰卧位固定于手术台上，剪开腹壁，小心切取肾髓质外皮质部位组织，在冰冷的生理盐水中漂洗干净，滤纸吸干水分，体积分数10%甲醛缓冲溶液内固定备作肾组织病理检查，尽快将皮髓质交界的肾组织分切成<1 mm³的小块，放于滴有戊二醛固定液的载玻片上，4 ℃、体积分数2.5%的戊二醛中固定2 h，待作超微结构分析；余分离肾皮质液氮速冻后-70 ℃保存，送TUNEL检测。

苏木精-伊红染色：将肾组织标本置于40 g/L的多聚甲醛PBS(0.1 mol/L，pH 7.4)中固定24 h左右后，进行常规石蜡包埋，切片。常规进行脱蜡、染色、封固。

透射电子显微镜观察：取小部分肾皮质，固定；依次用体积分数50%乙醇-体积分数70%乙醇-体积分数95%乙醇-无水乙醇脱水30 min；氧化丙烯透明3次，每次10-15 min；氧化丙烯工作液等量混合，浸透肾组织块；新鲜配制工作液包理肾组织5 h；包埋的组织块逐渐加温(< 60 ℃)，使之聚合变硬；切片机制成1 μm半薄切片，0.5%美蓝溶液染色5 min，切成0.2 mm×0.3 mm×0.2 mm大小；超薄切片机制成0.05 μm的超薄切片，染色。透射电镜观察。

TUNEL检测细胞凋亡：将5 μm肾皮髓质交界组织切片于二甲苯中浸泡2次，5 min/次；置于体积分数100%，95%，85%乙醇溶液中各2 min复水；自来水冲洗；蒸馏水冲洗2次，每次间隔5 min；PBS冲洗3次，每次间隔5 min；柠檬酸pH 6.0先预热3 min(350 W)，放入切片(350 W)，5 min到温度80 ℃，加温到95 ℃后维持5 min；体积分数3%H₂O₂室温孵育10 min；蒸馏水冲洗2次，每次间隔5 min；PBS冲洗2次，每次间隔5 min；试剂准备：从2号瓶中取出 100 μL至2个阴性对照组，将1号瓶中取出50 μL加入到2号瓶中，混合后正好是500 μL并盖上盖玻片，放入滴加甘油的湿盒中，7 ℃孵育1 h；PBS冲洗3次，每次间隔5 min；加入转化剂POD试剂37 ℃ 30 min并盖上盖玻片，37 ℃孵育30 min；PBS冲洗3次，每次间隔5 min；DAB显色5 min；自来水冲洗；苏木精复染4 min；自来水冲洗；1%盐酸乙醇脱水；自来水冲洗；烤片；封固。普通光学显微镜观察。每张切片光镜(40×10倍)观察10×500个细胞，计算每100个细胞中的平均阳性凋亡细胞数，即凋亡指数。用Motic B5显微摄像系统和MIAS医学图像分析系统进行摄像计数。光学显微镜(×400)下每张切片随机观察6个视野，每个视野至少500个细胞水平。由北京麦思奇高科技有限公司生产的Simple PCI显微图像分析软件测试每100个细胞中的平均阳性凋亡细胞数，即凋亡指数^[7-8]。凋亡发生率是指每一组大鼠里面有多少只大鼠的肾组织发生了肾细胞凋亡，发生凋亡的大鼠只数比上这一组的大鼠总数，就是凋亡发生率。

肾组织一氧化氮生成、超氧化物歧化酶、丙二醛和肾功能指标检测：约0.1 g肾皮质入9倍质量的生理盐水，用电动匀浆器制备成10%的匀浆，离心取上清液立刻用硝酸还原酶法测定一氧化氮浓度，测定单位重量组织蛋白质单位时间内生成一氧化氮的nmol数反映一氧化氮活性，考马斯亮蓝法测定组织蛋白质含量；上清液用于丙二醛测定，采用硫代巴比妥酸比色法，超氧化物歧化酶检测使放射免疫计数器，均相竞争抑制原理放免法检测；二乙酰一肟比色法测定血清尿素氮浓度，苦味酸比色法检测血清肌酐，双缩脲法检测尿蛋白含量。操作完全按试剂盒说明^[9-14]。

主要观察指标：肾组织的形态结构及生化指标。

统计学分析：所有数据用x(_)±s表示；各组间显著性差异采用方差分析、组内显著性差异用双侧t 检验；在满足方差齐性条件下，使用LSD法和SNK法进行多重比较，显著性水平为α=0.05；所有数据均用上海卡贝信息技术有限公司生产的SPSS 11.5统计学软件进行处理。

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讨论

急性力竭运动是过度运动的一种特殊形式，可引起急、慢性肾、心损伤^[8-14]。然而，长期以来，对于大强度运动致机体器官的损伤，一般都着重于肌肉、心、肝脏等器官的研究，而对于肾损伤的结构特征及其防治的研究报道较少，缺乏全面认识。文献表明，急性肾损伤的本质是肾细胞特别是肾滤过屏障、肾小管上皮细胞严重受损或死亡，细胞损伤的严重程度决定细胞的最终结局；肾滤过屏障、肾小管上皮细胞损伤较轻，通过积极干预治疗，可能会逆转相应的病理改变，促进上皮细胞再生；如损伤严重时则主要表现为细胞坏死，而细胞一旦坏死则不能再生，组织损伤将无法逆转^[15]。实验通过动物跑台让大鼠运动至力竭，发现力竭运动后24 h，光、电镜可见大鼠肾滤过膜内皮细胞肿胀、成对，胞质连拱状，内皮细胞与基膜剥离、融合等，其中肾小球内皮细胞变化最为突出；基膜扭曲、塌陷、三层结构消失驼峰样等变化；肾小球足细胞足突融合、足细胞出现变异并有分布减少，滤过屏障结构破坏明显；肾小管襄腔结构模糊或肾小管襄腔明显增宽，形态不规则等改变；细胞核形态不完整，有细胞核呈分叶状的典型细胞凋亡样改变，染色质浓缩、不均匀分布、大量分布于核膜下的细胞凋亡等改变，提示肾滤屏障损伤明显，同时，实验结果发现，力竭后24 h大量蛋白尿的出现；尿素氮、血清肌酐的显著增加，一氧化氮活酶的显著下降，考虑与滤过膜结构损伤，而致肾功能的改变。这些新认识为寻求力竭运动致肾损伤防治的靶位点提供了有意义的信息。

大强度急性力竭运动过程中，肾血流急骤下降，这种不完全缺血状态形成了“运动性缺血”，运动停止后血供恢复形成“运动性缺血再灌注”，存在明显的肾组织缺血缺氧，鱼腥草素对这种急性力竭运动动物模型是否具有减轻肾皮细胞损伤，促进肾细胞恢复作用，目前未见有文献报道。实验结果显示在力竭运动前腹腔注射鱼腥草素10 mg/kg后，大鼠力竭后一般情况明显改善，力竭时间明显延长，血肌酐、血尿素氮、肾组织丙二醛含量、尿蛋白明显降低；超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶的含量和活性明显增加；肾细胞凋亡与力竭运动组相比明显减少，肾组织结构未发现明显异常，这些结果说明，鱼腥草素减轻力竭运动大鼠致肾组织形态学损伤和改善肾功能的同时，明显提高了大鼠的运动能力。

鱼腥草素减轻力竭运动致急性肾损伤的机制可能有：①诱导产生泌尿系统的抗凋亡因子，本研究表明给予鱼腥草素干预后，运动给药组细胞凋亡比力竭运动组明显下降，形态学的病理改变较力竭组明显改善，说明鱼腥草素的抗肾损伤与抗凋亡相关。②与减小一氧化氮引起的损伤和直接抗氧化作用。一氧化氮是生物机体内一种具有重要生理活性的小分子物质，在肾脏正常功能维持中作用重要，其含量异常变化可造成肾组织结构和功能损害^[16]，运动引起机体内多系统器官的一氧化氮含量变化，并对其组织结构和功能产生影响，肾脏皮髓质内均分布有合成一氧化氮的关键酶一氧化氮合酶，在肾脏病理损伤中，一氧化氮合酶缺乏或过表达及活性变化，引起一氧化氮含量过高或过低是重要因素之一。本研究可能因高强度力竭运动对机体刺激过于强烈，肾组织严重缺血缺氧，力竭运动后24 h影响一氧化氮含量降低，丙二醛含量升高；运动给药组给予鱼腥草素干预后，其一氧化氮合酶的含量、活性及超氧化物歧化酶的含量比力竭运动组明显升高，可能是多因素持续存在导致：①机体内明显酸化环境的改善，一氧化氮合成关键限速因子一氧化氮合酶活性受抑制的减除。②可能与合成一氧化氮的底物增加，原料充足；可能与鱼腥草素能清除高强度力竭运动后24 h内产生过多的自由基、血管强烈收缩的血管内皮素在运动中分泌减少，对机体刺激相对轻缓，缺血再灌注和以上变化幅度低，机体恢复24 h后，一氧化氮含量适度上升有关。

实验还表明，应用鱼腥草素后，在大鼠运动时间明显延长的情况下，肾组织结构的损伤并未加重，反而明显减轻，说明鱼腥草素在提高大鼠运动能力的同时在多个环节阻滞了力竭运动引起的急性肾损伤，但其确切的分子作用靶位点有待进一步研究。

急性力竭运动模型大鼠鱼腥草素干预后的肾滤过屏障变化

Changes in glomerular filtration barrier in rat models of acute exhaustive exercise after intervention with sodium houttuyfonate

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