C57小鼠脂肪及骨髓间充质干细胞生物学特性的比较

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.19.012

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (19): 3023-3029.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.19.012

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C57小鼠脂肪及骨髓间充质干细胞生物学特性的比较

张荣耀¹，毕晓娟²，马艳²，段显琳¹，薛文婧¹，王一淳¹，江明^1，2

1新疆医科大学第一附属医院血液病中心，新疆维吾尔自治区血液病研究所，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054
2新疆医科大学临床医学研究院干细胞室，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054

修回日期:2014-03-31 出版日期:2014-05-07 发布日期:2014-05-07
通讯作者: 江明，硕士，主任医师，教授，硕士生导师，博士生导师，新疆医科大学第一附属医院血液病中心，新疆维吾尔自治区血液病研究所，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054；新疆医科大学临床医学研究院干细胞室，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054
作者简介:张荣耀，男，1985年生，湖北省十堰市人，汉族，新疆医科大学在读硕士，主要从事造血干细胞移植、血液病的研究。

Biological characteristics of bone marrow versus adipose-derived mesenchymal stem cells from C57 mice

Zhang Rong-yao¹, Bi Xiao-juan², Ma Yan², Duan Xian-lin¹, Xue Wen-jing¹, Wang Yi-chun¹, Jiang Ming^{1, 2}

1Hematology Center of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Institute of Hematology of Xinjiang Uygur Autonomous Region, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
2Stem Cell Laboratory, Clinical Medicine Research Institute of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Revised:2014-03-31 Online:2014-05-07 Published:2014-05-07
Contact: Jiang Ming, Master, Chief physician, Professor, Master’s supervisor, Doctoral supervisor, Hematology Center of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Institute of Hematology of Xinjiang Uygur Autonomous Region, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; Stem Cell Laboratory, Clinical Medicine Research Institute of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Zhang Rong-yao, Studying for master’s degree, Hematology Center of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Institute of Hematology of Xinjiang Uygur Autonomous Region, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

摘要/Abstract

摘要：

背景：研究发现，脂肪源干细胞具有和骨髓间充质干细胞一样的贴壁和形成成纤维样克隆特性，并具有向骨、脂肪、软骨等多系分化的能力。
目的：比较C57小鼠脂肪源间充质干细胞和骨髓间充质干细胞的生物学特点。
方法：在无菌的条件下分别从C57小鼠的脂肪和骨髓中获取脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞。体外分离、培养并将脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞传至第3代，进行细胞形态、表面标记、生长动力学分化潜能测定和Notch信号相关基因的检测。
结果与结论：脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞形态学相似，第3代的脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞均表达CD29、CD105、Sca-1，不表达CD34、CD133，但骨髓间充质干细胞还表达CD45；生长曲线和细胞克隆分析显示脂肪间充质干细胞的增殖速度明显比骨髓间充质干细胞快；脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞均可向成骨、成脂、成软骨诱导分化，脂肪间充质干细胞更易向成骨诱导；Notch相关基因检测显示脂肪源干细胞的Jagged-1表达水平明显比骨髓间充质干细胞低，而Hes-1的表达水平脂肪源干细胞明显高于骨髓间充质干细胞的表达水平。提示脂肪间充质干细胞比骨髓间充质干细胞扩增能力更强，更易向成骨分化,可能与Hes-1表达水平有关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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关键词: 干细胞, 脂肪干细胞, 间充质干细胞, 脂肪源间充质干细胞, 骨髓间充质干细胞, 生物学特性, 诱导分化

Abstract:

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BACKGROUND: Adipose-derived stem cells have similar characteristics of bone marrow mesenchymal stem cells, including adhesion and fibroblast-like clone formation. In addition, adipose-derived stem cells can differentiate into bone, adipose, cartilage.
OBJECTIVE: To compare the biological characteristics of C57 mouse adipose-derived and bone marrow mesenchymal stem cells.
METHODS: Mesenchymal stem cells were obtained respectively from the adipose and bone marrow of C57 mice under sterile condition. Adipose-derived and bone marrow mesenchymal stem cells were isolated and purified in vitro to determine cell morphology, suface marker, growth kinetics, differentiation potential and Notch signal related gene.
RESULTS AND CONCLUSION: Morphology was similar between adipose-derived and bone marrow mesenchymal stem cells under an optical microscope. Adipose-derived and bone marrow mesenchymal stem cells at passage 3 expressed CD29, CD105, Sca-1, but not expressed CD34, CD133. In addition, bone marrow mesenchymal stem cells also expressed CD45. The growth kinetics and cell clone analysis indicated that the proliferation rate of adipose-derived mesenchymal stem cells was significantly faster than that of bone marrow mesenchymal stem cells. Both of adipose-derived and bone marrow mesenchymal stem cells were induced to osteoblasts, adipocytes and chondrocytes, but the adipose-derived mesenchymal stem cells were easier to the osteogenetic differentiation than bone marrow mesenchymal stem cells. Notch signal related gene detection shown that adipose-derived mesenchymal stem cells expressed lower levels of Jagged-1 mRNA, but higher levels of Hes-1 mRNA compared with bone marrow mesenchymal stem cells. These findings suggest that the proliferation rate of adipose-derived mesenchymal stem cells is significantly faster than that of bone marrow mesenchymal stem cells, and the former is apt to the osteogenetic differentiation and may be related with the expressed levels of Hes-1 mRNA.

Key words: stem cells, mesenchymal stem cells, adipose tissue

中图分类号:

R394.2

张荣耀，毕晓娟，马艳，段显琳，薛文婧，王一淳，江明. C57小鼠脂肪及骨髓间充质干细胞生物学特性的比较[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(19): 3023-3029.

Zhang Rong-yao, Bi Xiao-juan, Ma Yan, Duan Xian-lin, Xue Wen-jing, Wang Yi-chun, Jiang Ming. Biological characteristics of bone marrow versus adipose-derived mesenchymal stem cells from C57 mice[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(19): 3023-3029.

图/表（结果） 6

2.1 脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的形态学 脂肪源干细胞原代培养48 h后，细胞呈集落状团簇分布，随着培养时间延长细胞呈长梭形铺满皿底，细胞传至第3代，细胞形态较单一的长梭形(图1A)；骨髓间充质干细胞原代培养48 h后可见贴壁的圆形细胞生长为星形、不规则形，并可见的贴壁细胞和少量的细胞集落形成，细胞传至第3带时，细胞多为长梭形，其中夹杂有大小不等的圆形细胞(图1B)。

2.2 脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的生长曲线和细胞周期 培养第3代的脂肪源干细胞约24 h进入明显的对数生长期，细胞增殖较快，96 h就进入了平台期(图2A)；培养第3代的骨髓间充质干细胞约72 h进入明显的对数生长期，但细胞增殖较慢，约在第6天进入平台期(图2B)。提示体外脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞增殖相对稳定，但是脂肪源干细胞比骨髓间充质干细胞增殖速度更快。对于处于对数生长期的脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的细胞周期分析显示脂肪源干细胞：G₁：51%，G₂：6.3%，S：41.9%(图2C)；骨髓间充质干细胞：G₁：36.3%，G₂：0%，S：63.7%(图2D)，但多次检测的结果二者差异无显著性意义(n=3)(图2E)。结果显示脂肪源干细胞与骨髓间充质干细胞在细胞周期上没有明显不同。

2.3 脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的流式细胞术检测结果 流式结果显示：脂肪源干细胞的CD29、CD105、Sca-1表达阳性，而CD34、CD45、CD133表达阴性；而骨髓间充质干细胞表达CD29、CD105、Sca-1、CD45而不表达CD34、CD133。初步说明从皮下脂肪和骨髓中分离出来的贴壁细胞具有干细胞的特性(图3)。

2.4 脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞克隆形成能力 第3代的脂肪源干细胞在培养第6天时可在镜下见到细胞集落形成，脂肪源干细胞形成的细胞集落比骨髓间充质干细胞形成较多，在培养第10天时骨髓间充质干细胞才可见到细胞集落形成，但数目较少。14 d后染色可见脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的细胞集落(图4A，B)可见脂肪源干细胞呈长梭形，排列较紧密；而骨髓间充质干细胞宽大向四周铺平且不规则，细胞排列不齐较稀疏。集落计数显示脂肪源干细胞的细胞克隆数明显多于骨髓间充质干细胞克隆数，差异有显著性意义(P ≤ 0.05，n=3，图4C)。

2.5 脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞多向分化潜能 为了进一步验证脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的成脂、成骨和成软骨的多向分化能力。利用茜素红、油红O以及甲苯胺蓝染色证明。对照组茜素红、油红O、甲苯胺蓝染色为阴性(图5a-f)。在成骨诱导中，脂肪源干细胞比骨髓间充质干细胞成骨的时间早(脂肪源干细胞为11 d、骨髓间充质干细胞为19 d茜素红染色可见到钙结节)，表明在同样的诱导条件下脂肪源干细胞比骨髓间充质干细胞更容易诱导成骨；成脂诱导脂肪源干细胞与骨髓间充质干细胞都是在1周左右染色呈阳性；软骨诱导均为3周左右，通过石蜡包埋，甲苯胺蓝染色为阳性(图5A-F)。

2.6 脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞Notch相关基因的表达 通过荧光定量PCR检测脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的Jagged-1、Notch-1、Jagged-2、Notch-2、Hes-1的基因表达水平显示；脂肪源干细胞几乎不表达Jagged-1，但HES-1的表达水平是骨髓间充质干细胞的4倍，差异有显著性意义(P ≤ 0.05，n=3)。而脂肪源干细胞的Notch-1、Jagged-2、Notch-2基因的表达水平略低于骨髓间充质干细胞的表达水平，差异无显著性意义(图6)。

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引言

骨髓间充质干细胞是目前研究较为成熟的间充质干细胞，但将间充质干细胞用于细胞治疗或协同移植时均需要大量的细胞，而骨髓中只含有少量间充质干细胞，仅占骨髓细胞的0.01%-1%，并随年龄的增加而减少^[1-2]，严重阻碍了临床的广泛运用。

Friedenstein等首次从大鼠骨髓中分离出类似成纤维样形态的细胞，后定义为间充质干细胞，经研究其来源于中胚层，具有免疫原性低、自我更新和多向分化的潜能，现已成为细胞治疗和组织工程研究的重点^[3-4]。目前在临床和实验中最常用的间充质干细胞是骨髓间充质干细胞，然而骨髓间充质干细胞在获取过程中是有创的，常需要多次穿刺、获取量很低、易于污染等缺点限制了临床的广泛运用。

2001年，Zuk等^[5]发现了一种来源于脂肪组织的干细胞群被称为脂肪源干细胞，体外培养时呈梭形貼壁生长，与成纤维细胞形态相似，胞质丰富，是一种来源于中胚层的具有向成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等多向分化能力的细胞^[6-8]。脂肪组织来源丰富，可反复取材，较少涉及医学伦理学问题^[9]。

Notch信号是一类在进化上高度保守的受体蛋白在脊椎动物和无脊椎动物中高度保守，在决定细胞分化上起关键作用^[10-11]。最近有研究表明间充质干细胞向成骨分化受Notch信号通路调控^[12]。Wang等发现Notch信号促进间充质干细胞向成骨分化主要是通过其下游靶基因如Hes-1发挥作用，过表达Hes-1可以增加间充质干细胞向成骨细胞分化^[13-15]。如果脂肪源干细胞与骨髓间充质干细胞有相似的生物学特性，那么细胞治疗和移植领域，脂肪源干细胞将会有更广阔的应用空间。因此实验通过比较这两种不同间充质干细胞的生物学特性，为医学实验和细胞治疗提供一定的基础。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
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材料方法

设计：对比观察细胞学实验。

时间及地点：实验于2012年12月至2013年9月在新疆医科大学临床医学院干细胞室完成。

材料：

动物：选择6-8周健康雄性C57BL/6小鼠5只，由新疆医科大学实验动物中心提供，许可证号为SCXK(新) 2003-001，并获得动物审理学审批(编号2010GXB02)。实验过程中对动物的处置符合2006年《关于善待实验动物的指导性意见》的规定。

实验方法：

C57小鼠脂肪源干细胞的培养和传代^[6]：取6-8周健康的C57BL/6小鼠颈椎脱臼处死，体积分数75%的乙醇中浸泡10 min后逆毛消毒。在无菌条件下获取腹股沟和附睾处脂肪，于含1 000 U/mL青/链霉素的磷酸盐缓冲液(PBS)中侵泡10 min，后再用PBS清洗3遍，去除筋膜、血管等组织，剪碎至1 mm×1 mm×1 mm大小，0.1%Ⅰ型胶原酶，37 ℃水浴中摇动消化30 min，使其成糊状，加入3倍的PBS，以1 200×g，离心10 min后去上清，将沉淀重悬置入37 ℃，饱和湿度的体积分数5%CO₂培养箱中，48 h后首次换液，以后每3 d换1次液，细胞汇合达80%时传代，细胞传至第3代备用。

C57小鼠骨髓间充质干细胞的培养传代^[3]：小鼠脱臼处死，在无菌条件获取C57小鼠股骨、胫骨，剔除附着的肌肉，用小鼠间充质干细胞专用培养液[含有10%小鼠间充质干细胞专用添加物(小鼠间充质干细胞刺激补充剂)的小鼠间充质干细胞基础培养液]充分冲洗骨髓腔，将细胞用7号针头吹打成单个核细胞，调整细胞浓度为1×10⁹ L^-¹接种于10 mL的培养皿中，置入37 ℃，饱和湿度的体积分数5% CO₂培养箱中，48 h首次换液，首次换液时用缓冲液PBS洗净非贴壁细胞，以后每3 d换液1次，每次换液时用缓冲液PBS洗净非贴壁细胞。待细胞汇合率达80%-90%用PBS洗涤2次，用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化后，收集细胞悬液，以402×g，离心5 min，弃上清液，计数，调节细胞密度为5×10⁴/cm²接种，传至第3代备用。

细胞增殖能力检测：收获培养的第3代的脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化后，以7×10³/cm²的密度接种于24孔板中，每孔1 mL，置入37 ℃，饱和湿度的体积分数5%CO₂培养箱中，每天取2孔细胞胰酶消化用细胞计数仪计数，取平均值，绘制细胞生长曲线。

流式细胞仪检测细胞周期：取培养的第3的脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化后，用冷PBS清洗2遍，再加入体积分数70%的冷乙醇固定过夜。次日加入10 mg/L的RNA酶，37 ℃孵育30 min，之后再加入50 mg/L的二碘化丙锭，避光，4 ℃孵育30 min，送流式细胞仪检测细胞周期。

流式细胞仪检测细胞膜免疫表型：收获培养第3代的脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞，用0.25%的胰蛋白酶消化后，加入细胞培养基终止消化，402×g，离心5 min，弃上清，细胞沉淀用PBS洗涤2遍，加入PBS，细胞计数，调节细胞浓度为1×10⁶ L^-¹，分别加入抗小鼠CD34-FITC，CD45-PE，CD105-PE，CD133-Percp，CD29-FITC，Sca-1-FITC，4 ℃避光孵育30 min后，用PBS洗涤多余的抗体在流式细胞仪分析。

细胞克隆形成能力：收获培养第3代的脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞，用0.25%的胰蛋白酶消化后，调节细胞数为5×10²个/皿于6孔板中，培养14 d后镜下观察集落，计数细胞克隆，标准为≥50个细胞为1个细胞克隆，每种细胞培养3孔取平均值，并用瑞士染液染色。

体外向成骨诱导分化：取培养第3代的细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化后，以8×10³/cm²密度接种于35 mm培养皿中，待细胞汇合达80%，加入成骨诱导液(含体积分数10%胎牛血清，0.1 μmol/L地塞米松，50 μmol/L抗坏血酸，10 mmol/L β-甘油磷酸钠的低糖DMEM)，以加含体积分数10%胎牛血清的低糖DMEM为对照组，每3 d换液1次，培养两三周后镜下观察有黑色沉淀形成即可茜素红染色鉴定。

体外向成脂肪诱导分化：取培养第3代的细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化后，以8×10³/cm²密度接种于35 mm培养皿中，待细胞汇合达80%，吸弃培养液，加入成脂诱导液(含体积分数为10%胎牛血清，1 μmol/L地塞米松，200 μmol/L吲哚美辛，0.5 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤，10 μmol/L胰岛素的低糖DMEM)，以加含体积分数10%胎牛血清的低糖DMEM为对照组，每3 d换液1次，培养8-10 d时镜下观察见透亮脂滴形成即可油红O染色鉴定。

体外向成软骨诱导分化：取培养第3代的细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化后，以8×10³/cm²密度接种于35 mm培养皿中，待细胞汇合达80%，吸弃培养液，消化以402×g，5 min离心后，去上清加入成软骨诱导液(高糖DMEM培养基，地塞米松10^-⁷ mol/L，胰岛素10 μmol/L，转录生长因子β 500 μg/L，抗坏血酸50 μmol/L)，402×g，5 min离心，置入37 ℃，饱和湿度的体积分数5%CO₂培养箱中，以加含体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM培养基为对照组，隔日换液。3周后，石蜡包埋、切片，甲苯胺蓝染色。

Notch相关基因水平的检测：利用TRIzol试剂(Invitrogen)分别从P3代的脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞中提取总RNA。每1×10⁶个细胞加入1 mL的TRIzol试剂，并加入200 μL的三氯甲烷，以12 000×g，15 min，4 ℃离心。将上层的RNA转移至另一无菌的EP管中，将RNA用异丙醇沉淀后用75%的无水乙醇洗涤，将RNA沉淀中加入无RNA酶水20 μL，用分光光度计分析其浓度和纯度，用2%的琼脂糖电泳检验RNA。利用PrimeScriptTMRT试剂盒(Fermentas)为原料将总RNA反转录呈cDNA。运用实时聚合酶链反(RT-PCR)应检测Jagged-1、Notch-1、Jagged-2、Notch-2、Hes-1(引物见表1)。利用ABI7500RT-PCR系统(Applied Biosytems)行定量PCR。PCR循环的程序如下：95 ℃，10 min；40个循环95 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 15 s。用Sequence Detector 系统软件分析数据，结果以相对mRNA表达水平的倍数的变化，用△△CT法以β-action作为内参基因，以骨髓间充质干细胞基因为参照进行数据分析。

主要观察指标：①脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的形态。②脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的生长曲线和细胞周期。③脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞的流式细胞术检测结果。④脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞克隆形成能力。⑤脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞多向分化潜能。⑥脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞Notch相关基因的表达。

统计学分析：所有数据用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，实验数据以x(_)±s表示。

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讨论

脂肪源干细胞是一种来源于脂肪组织的间充质干细胞，具有和骨髓间充质干细胞一样的贴壁和形成成纤维样克隆特性，并具有向骨、脂肪、软骨等多系分化的能力。实验选用C57小鼠的脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞进行比较，研究发现C57小鼠的脂肪源干细胞的形态学较均一，呈长梭形，而C57小鼠的骨髓间充质干细胞以长梭形为主，夹杂有较多的圆形细胞，这些可能使骨髓间充质干细胞受到其他细胞的污染，而且在细胞克隆的数目上脂肪源干细胞明显高于骨髓间充质干细胞，细胞克隆主要用来评估间充质细胞产生间充质祖细胞的能力^[16]。生长曲线显示了脂肪源干细胞到达对数生长期的时间比骨髓间充质干细胞早48 h，表明了骨髓间充质干细胞为慢增殖细胞。因此，脂肪源干细胞比骨髓间充质干细胞在临床和实验的运用比骨髓间充质干细胞更有优势。

目前国内外研究表明小鼠间充质干细胞的造血表面标记为阴性，不表达CD45、CD34；然而最近有人研究表明C57小鼠骨髓间充质干细胞中CD45⁺细胞群可以有效的改善心肌的功能，这表明了C57小鼠骨髓间充质干细胞中含有一定的CD45⁺细胞，并对骨髓间充质干细胞的修复产生一定的作用^[17]。

实验结果显示，C57小鼠脂肪源干细胞不表达CD45⁺，而骨髓间充质干细胞表达CD45⁺，考虑到骨髓间充质干细胞在培养过程中可能受到造血细胞的影响，为了明确分离到的细胞是否具有间充质干细胞的特性，实验发现脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞均不表达CD34⁺，且均高表达CD29、CD105等干细胞标记，说明脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞都具有干细胞的特性而非造血干细胞^[3]。由于间充质干细胞目前无特异性的表面标记，对于体外分离培养间充质干细胞的鉴定没有统一的标准，所以最终主要通过其多向分化能力来鉴定小鼠间充质干细胞^[18]。实验结果显示脂肪源干细胞和骨髓间充质干细胞均可向成骨、成脂、成软骨诱导，证明了从脂肪组织和骨髓中分离出来的细胞符合间充质干细胞国际定义的标准。但在相同的条件下脂肪源干细胞在诱导第11天时茜素红染色阳性，而骨髓间充质干细胞在19 d时染色可见到阳性，且成骨的钙化结节较少；说明了脂肪源干细胞比骨髓间充质干细胞更易向成骨分化，表明了脂肪源干细胞比骨髓间充质干细胞的可塑性更强。

本实验显示脂肪源干细胞组的Hes-1的表达水平是骨髓间充质干细胞的4倍，这可以解释脂肪源干细胞与骨髓间充质干细胞在相同的条件下更容易成骨诱导分化。另有学者研究表明Jagged-1介导的Notch信号通路是成软骨诱导的启动关键^[19]，但是在软骨诱导后期Jagged-1表达水平下降。因此，实验结果显示骨髓间充质干细胞的Jagged-1的表达水平明显高于脂肪源干细胞，但是二者的成软骨诱导均在3周时诱导成功，这可能是Jagged-1只影响成软骨诱导的启动，但是不影响后期成软骨诱导的缘故。

由此看来，虽然C57小鼠脂肪源干细胞与骨髓间充质干细胞都具有干细胞的生物学特性，但C57小鼠脂肪源干细胞不但比骨髓间充质干细胞更容易获取，而且扩增更快、可塑性更强更适合临床和实验的应用；脂肪源干细胞比骨髓间充质干细胞更易成骨可能与Notch信号的相关蛋白表达水平有关。

C57小鼠脂肪及骨髓间充质干细胞生物学特性的比较

Biological characteristics of bone marrow versus adipose-derived mesenchymal stem cells from C57 mice

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