中国组织工程研究 ›› 2012, Vol. 16 ›› Issue (7): 1267-1270.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.07.030
• 组织构建与生物活性因子 tissue construction and bioactive factors • 上一篇 下一篇
周 敏,钱嫣蓉,张秋蕊,程 挺,万欢英
Zhou Min, Qian Yan-rong, Zhang Qiu-rui, Cheng Ting, Wan Huan-ying
摘要:
背景:以往关于细胞因子信号转导抑制因子1的研究多用脂质体或其他载体转染的技术,但存在效率低和安全性差等问题。 目的:构建细胞因子信号转导抑制因子1 RNA干扰慢病毒载体并进行鉴定。 方法:实验设计3组针对细胞因子信号转导抑制因子1的短发夹RNA序列,应用基因重组技术插入pPll3.7载体,测序正确的重组病毒质粒与包装质粒通过共转染293T细胞,培养48 h后,收集细胞培养上清液,感染A549细胞,western blot检测目的蛋白细胞因子信号转导抑制因子1在靶细胞中的表达。 结果与结论:实验通过对重组载体进行测序分析证实短发夹RNA插入慢病毒载体,慢病毒载体上清成功转染A549细胞后western blot检测结果显示该载体抑制了细胞因子信号转导抑制因子1蛋白在A549细胞有表达。说明实验成功构建了细胞因子信号转导抑制因子1 RNA干扰慢病毒载体。 关键词:细胞因子信号转导抑制因子1;慢病毒载体;RNA干扰;A549细胞;组织构建 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.07.030
中图分类号: