骨髓间充质干细胞移植肝硬化大鼠肝脏超微结构、体视学参数和肝功能的变化

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2015.50.019

中国组织工程研究 ›› 2015, Vol. 19 ›› Issue (50): 8144-8148.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.50.019

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骨髓间充质干细胞移植肝硬化大鼠肝脏超微结构、体视学参数和肝功能的变化

丁体龙，马艳春，于莉，马勇

解放军第123医院南京军区肝病中心，安徽省蚌埠市 233015

收稿日期:2015-10-29 出版日期:2015-12-03 发布日期:2015-12-03
通讯作者: 马勇，博士，教授，解放军第123医院南京军区肝病中心，安徽省蚌埠市 233015
作者简介:丁体龙，男，1978年生，江苏省盐城市人，汉族，2011年蚌埠医学院毕业，硕士，主要从事肝脏病基础研究。
基金资助:
南京军区医学科技创新经费资助项目重点课题(11Z012)

Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for liver cirrhosis in rats: variation of liver ultrastructure, stereology parameters and liver function indexes

Ding Ti-long, Ma Yan-chun, Yu Li, Ma Yong

Nanjing Military Center of Liver Disease, the 123^rd Hospital of PLA, Bengbu 233015, Anhui Province, China

Received:2015-10-29 Online:2015-12-03 Published:2015-12-03
Contact: Ma Yong, M.D., Professor, Nanjing Military Center of Liver Disease, the 123rd Hospital of PLA, Bengbu 233015, Anhui Province, China
About author:Ding Ti-long, Master, Nanjing Military Center of Liver Disease, the 123rd Hospital of PLA, Bengbu 233015, Anhui Province, China
Supported by:
the Nanjing Military Medical Technology Innovation Fund, No. 11Z012

摘要/Abstract

摘要：

背景：间充质干细胞移植治疗肝硬化的疗效在学术界尚有一定的争议，对受体组织结构和功能的影响有待进一步研究。
目的：探讨骨髓间充质干细胞对肝硬化大鼠肝脏超微结构、体视学参数和肝功能的影响。
方法：构建大鼠肝硬化模型，并采用骨髓间充质干细胞移植治疗，透射电镜观察大鼠肝组织的超微结构，体视学分析软件分析模型组、治疗组、正常组大鼠肝窦的体视学参数变化，生化仪检测肝功能指标的改变。
结果与结论：①模型大鼠肝细胞缺氧严重，许多线粒体破坏，核固缩明显，肝窦呈毛细血管化；骨髓间充质干细胞治疗组肝组织超微结构明显改善，肝细胞核基本正常，线粒体肿胀显著缓解，核膜孔堵塞现象有所减轻。②模型组大鼠肝窦数目明显减少，而肝窦总面积及平均直径明显增大，与治疗组及正常组比较差异有显著性意义(P < 0.05)。③与模型组比较，治疗组肝功能明显改善，白蛋白水平显著升高，谷丙转氨酶及直接胆红素水平显著下降(P < 0.05)，但谷草转氨酶变化不明显(P > 0.05)。④结果提示骨髓间充质干细胞移植可改善肝硬化大鼠肝功能和肝组织结构，减轻肝窦病变，对肝硬化有一定的治疗作用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 干细胞, 移植, 肝硬化, 超微结构, 骨髓间充质干细胞, 体视学, 肝功能

Abstract:

BACKGROUND: Mesenchymal stem cell transplantation has a certain controversy in the treatment of liver cirrhosis, and its effects on the receptor liver structure and function need further studies.
OBJECTIVE: To study the changes in liver ultrastructure, stereology parameters and liver function indexes of rat models with liver cirrhosis treated by bone marrow mesenchymal stem cell transplantation.
METHODS: Rat models of liver cirrhosis were made using carbon tetrachloride and treated by bone marrow mesenchymal stem cell transplantation. Liver ultrastructure of all the rats were observed by transmission electron microscope, the stereology parameters of the hepatic sinusoid were analyzed by a stereology analysis software, and the serum liver function indexes were detected by a biochemical analyzer.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) The hepatic cells in the rat models exhibited acute hypoxia, lots of mitochondria were destroyed, and obvious karyopycnosis and capillarization of the hepatic sinusoid were found. The liver ultrastructure of rats undergoing cell transplantation was improved remarkably, the hepatic cell nucleus was nearly normal, mitochondrial swelling relieved notably and nuclear pore clogging lessened. (2) The number of hepatic sinusoids in the model group was reduced dramatically, but the total area and mean diameter of the hepatic sinusoid were enlarged significantly as compared with the cell transplantation and normal groups (P < 0.05). (3) Compared with the model group, the albumin level was significantly increased, but the levels of alanine aminotransferase and direct bilirubin were significantly decreased in the cell transplantation (P < 0.05). In addition,
there was no significant difference in the level of aspartate aminotransferase between the model and cell transplantation groups (P > 0.05). These findings indicate that bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can improve liver function and structure of rats with liver cirrhosis and lessen pathological changes of hepatic sinusoid, so it is an effective treatment for liver cirrhosis.

中图分类号:

R394.2

丁体龙，马艳春，于莉，马勇. 骨髓间充质干细胞移植肝硬化大鼠肝脏超微结构、体视学参数和肝功能的变化[J]. 中国组织工程研究, 2015, 19(50): 8144-8148.

Ding Ti-long, Ma Yan-chun, Yu Li, Ma Yong. Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for liver cirrhosis in rats: variation of liver ultrastructure, stereology parameters and liver function indexes[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2015, 19(50): 8144-8148.

参考文献

[1] 吕素莉,马勇,丁体龙.骨髓间充质干细胞移植在肝纤维化治疗中的应用[J].临床肝胆病杂志,2012,28(11):819-823.

[2] 唐倩,王卓,赵雄,等.四氯化碳诱导大鼠肝硬化腹水模型的改进与优化[J].国际药学研究杂志,2012,39(3):220-224.

[3] Mazariegos G, Shneider B, Burton B, et al. Liver transplantation for pediatric metabolic disease. Mol Genet Metab. 2014;111(4):418-427.

[4] Pareja E, Gomez-Lechon MJ, Cortes M, et al. Human hepatocyte transplantation in patients with hepatic failure awaiting a graft. Eur Surg Res. 2013;50(3-4):273-281.

[5] Wang F, Zhou L, Ma X, et al. Monitoring of intrasplenic hepatocyte transplantation for acute-on-chronic liver failure: a prospective five-year follow-up study. Transplant Proc. 2014; 46(1):192-198.

[6] Timm F, Vollmar B. Heterogeneity of the intrahepatic portal venous blood flow: impact on hepatocyte transplantation. Microvasc Res. 2013;86:34-41.

[7] Kuramitsu K, Sverdlov DY, Liu SB, et al. Failure of fibrotic liver regeneration in mice is linked to a severe fibrogenic response driven by hepatic progenitor cell activation. Am J Pathol. 2013; 183(1):182-194.

[8] Best J, Dollé L, Manka P, et al. Role of liver progenitors in acute liver injury. Front Physiol. 2013;4:258.

[9] Li TZ, Kim JH, Cho HH, et al. Therapeutic potential of bone-marrow-derived mesenchymal stem cells differentiated with growth-factor-free coculture method in liver-injured rats.Tissue Eng Part A. 2010;16(8):2649-2659.

[10] Okumoto K, Saito T, Hattori E, et al. Differentiation of rat bone marrow cells cultured on artificial basement membrane containing extracellular matrix into a liver cell lineage.J Hepatol. 2005;43(1):110-116.

[11] Crosby HA, Kelly DA, Strain AJ. Human hepatic stem-like cells isolated using c-kit or CD34 can differentiate into biliary epithelium. Gastroenterology. 2001;120(2):534-544.

[12] Theise ND, Nimmakayalu M, Gardner R, et al. Liver from bone marrow in humans. Hepatology. 2000;32(1):11-16.

[13] Theise ND, Badve S, Saxena R, et al. Derivation of hepatocytes from bone marrow cells in mice after radiation-induced myeloablation. Hepatology. 2000;31(1): 235-240.

[14] 牛铁兵,陈玉丙,张立新.骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化模型的修复作用[J].吉林大学学报:医学版,2009,35(5):874-876.

[15] 张孝良,商中华,王满仓,等. 不同时期骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的作用[J]. 中国现代医生,2010,48(5):11-12.

[16] 焦艳.朱月永.郑琦.等.骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的作用[J].肝脏,2008,13(1):23-26.

[17] Mohamadnejad M, Alimoghaddam K, Bagheri M, et al. Randomized placebo-controlled trial of mesenchymal stem cell transplantation in decompensated cirrhosis. Liver Int. 2013;33(10):1490-1496.

[18] Casiraghi F, Remuzzi G, Abbate M, et al. Multipotent mesenchymal stromal cell therapy and risk of malignancies. Stem Cell Rev. 2013;9(1):65-79.

[19] 詹三华,张鲁峰,姚卫民,等.人脐血间充质干细胞移植治疗大鼠肝硬化模型[J].中国组织工程研究,2013,17(19):3461-3466.

[20] 张雯,陈香宇,何巧玉,等.经不同方式移植骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的疗效[J].实用医学杂志,2013,29(6):889-891.

[21] Parekkadan B, van Poll D, Megeed Z, et al. Immunomodulation of activated hepatic stellate cells by mesenchymal stem cells. Biochem Biophys Res Commun. 2007;363(2):247-252.

[22] 梁梓宇,覃山羽,姜海行,等.骨髓间充质干细胞诱导肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡和Caspase-3表达[J].重庆医学,2010,39(20): 2721-2723.

[23] 赵建学,商洪涛,郭海燕,等.骨髓间充质干细胞对四氯化碳诱发大鼠肝纤维化的治疗作用的实验研究[J].实用临床医药杂志,2011, 15(7):13-15,20.

[24] Tanimoto H, Terai S, Taro T, et al. Improvement of liver fibrosis by infusion of cultured cells derived from human bone marrow. Cell Tissue Res. 2013;354(3):717-728.

[25] 魏晓龙,蒋明德,曾维政,等. MMPI过表达的骨髓间充质干细胞对肝纤维化的修复作用[J].中南大学学报:医学版,2014,39(3): 258-264.

[26] Li GC, Ye QH, Xue YH, et al. Human mesenchymal stem cells inhibit metastasis of a hepatocellular carcinoma model using the MHCC97-H cell line. Cancer Sci. 2010;101(12):2546- 2553.

[27] Zheng L, Chu J, Shi Y, et al. Bone marrow-derived stem cells ameliorate hepatic fibrosis by down-regulating interleukin-17. Cell Biosci. 2013;3(1):46.

[28] Li T, Zhu J, Ma K, et al. Autologous bone marrow-derived mesenchymal stem cell transplantation promotes liver regeneration after portal vein embolization in cirrhotic rats. J Surg Res. 2013;184(2):1161-1173.

[29] 陶霖,姜海行,覃山羽,等.骨髓间充质干细胞移植抗大鼠肝纤维化的作用及机制[J].广西医学,2014,36(2):141-145.

引言

材料方法

1.4.1 Wistar大鼠肝硬化模型的构建 Wistar大鼠110只，随机抽取10只处死后作骨髓间充质干细胞培养，另取20只作为正常对照组，其余80只制作大鼠肝硬化模型，参照文献[2]执行。具体方法如下：首次将CCl4按5 mL/kg剂量皮下注射，以后在临用前将CCl4与橄榄油配成40%的CCl4-橄榄油油性溶剂，按3 mL/kg剂量皮下注射，每周2次，共12周，前2周在饮水中加入0.3 g/L的苯巴比妥，第3周起饮水中含体积分数为10%的乙醇。12周后随机抽取模型组及对照组大鼠各5只，取肝右叶作病理切片观察，正常对照组肝细胞作放射状整齐排列在小叶中心静脉周围，模型组肝细胞排列紊乱，出现广泛的变性、坏死、肝窦狭窄和扩张明显，纤维结缔组织增生，形成典型的假小叶结构，提示肝硬化大鼠模型制作成功。
1.4.2 Wistar大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓单个核细胞，实验步骤如下：①0.05 g/mL的盐酸氯胺酮腹腔注射麻醉大鼠，置于体积分数为75%乙醇中全身浸泡消毒30 min，无菌条件下解剖大鼠，取四肢股骨和胫骨，生理盐水冲洗，去除肌肉，剪掉骨端段，置于加有维持型DMEM培养基(DMEM培养基+体积分数为5%胎牛血清)5 mL和12 500 U/mL肝素液40 μL的培养皿中，用5 mL注射器吸取皿中培养基反复冲洗骨髓腔，直至中空发白为止。②制备单细胞悬液：收集骨髓液于15 mL离心管，1 200 r/min离心5 min，弃上清，用5 mL培养基重悬沉淀，充分吹打混匀制成单细胞悬液。再准备一支15 mL干净离心管，加入5 mL Ficoll淋巴细胞分离液(相对密度为1.077)，将细胞悬液轻轻叠加到等体积淋巴细胞分离液中，2 000 r/min离心20 min，离心后溶液分为3层，上层为培养基及少量组织碎屑，中层为白膜层，下层为细胞分离液、多核细胞和红细胞。用2 mL移液管小心吸取白膜层于另一15 mL离心管中，用培养基洗涤细胞2次。调整细胞浓度，接种于25 cm2细胞培养瓶，置于37 ℃，体积分数为5%CO2饱和湿度的培养箱培养。3 d以后首次半量换液，以后每2 d或3 d全量更换培养基，每天在倒置显微镜下观察细胞生长状况。③传代培养：一般7-10 d即可进行第1次传代，细胞进入快速生长期。此后每2 d或3 d当细胞生长至约80%融合时即可传代1次。传代培养的操作方法如下：吸出原培养基，用PBS洗涤细胞2次(加入PBS后轻轻转动培养瓶约30 s，吸弃残留的培养基)，加入0.25%胰酶放培养箱消化，胰酶以刚好没过培养瓶底即可。大约2 min时，在显微镜下观察细胞，当大多数细胞开始变圆，少量细胞开始浮起时，轻轻拍打瓶底，此后迅速加入含体积分数为10%胎牛血清的培养基终止消化。吸取细胞悬液于离心管中，并用PBS洗涤瓶底2次，1 200 r/min离心5 min。弃去上清液，以含体积分数为10%胎牛血清的培养基重悬细胞沉淀，按1︰2比例传代接种。接种后每天大体观察培养基颜色，需要时换液，并用倒置显微镜观察细胞的生长状况和有无污染，待细胞接近80%融合时即可重复传代操作。
1.4.3 大鼠骨髓间充质干细胞的鉴定采用流式细胞仪进行表面标志鉴定[1]。选取生长状态良好的第3代大鼠骨髓间充质干细胞，0.25%胰酶消化，PBS洗涤细胞3次，制成单细胞悬液。细胞分5管，每管100 μL，大约含2×105个细胞。各管依次加入FITC标记的小鼠抗大鼠CD34、CD45、CD44、CD90单克隆抗体，并设置FITC标记的小鼠IgG1同型对照，4 ℃避光孵育30 min。PBS离心洗涤未结合的抗体，最后用500 μL 40 g/L多聚甲醛重悬固定细胞15 min，流式细胞仪检测细胞表面抗原表达。经流式细胞仪分析大鼠骨髓间充质干细胞表面分子CD44、CD90阳性率分别为99.99%，100%，CD34、CD45阳性率分别为1.18%，0.03%，符合间充质干细胞的表型特征，可用于大鼠肝纤维化的治疗。
1.4.4 治疗方法将剩余造模成功的75只大鼠随机分成治疗组40只和模型对照组35只。治疗组造模第12周经病理确认造模成功后开始，经尾静脉输注2 mL骨髓间充质干细胞悬液(细胞浓度为2.0×109 L-1)，3 d后以相同数量的细胞再输注1次，共2次。模型对照组及正常对照组以生理盐水代替骨髓间充质干细胞，输注方法同治疗组，各组于首次治疗后第42天处死，留肝组织及血清待检。
1.4.5 标本采集及检测方法给大鼠腹腔注射10%水合氯醛3.5 mL/kg麻醉，开腹，取心脏血作肝功能指标检测，取肝组织分为2份，一份用4%戊二醛和1%锇酸双固定，乙醇脱水，Epon812树脂包埋，聚合后制备半薄切片，美蓝及碱性复红染色，光镜下定位后做超薄切片，醋酸铀和柠檬酸铅染色，在透射电镜下观察。另一份甲醛溶液固定12 h以上，石蜡包埋，连续4 μm切片，应用北京航空航天大学真彩色图像分析系统体视学分析软件，对肝组织标本切片进行肝窦定量测量，将肝窦限定为肝细胞板之间的腔隙，肝组织切片在光镜下统一放大100倍，每只随机摄取5幅图像，对每幅图像中的肝窦不同表现型逐个用单点彩色分割填充(蓝色)，最后用计算机体视学分析系统测定出肝组织肝窦的数目、总面积、总周长、平均直径等参数。
1.5 主要观察指标 ①各组大鼠肝组织超微结构、肝窦数目、平均直径、总周长及总面积。②各组大鼠血清白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶及直接胆红素水平。
1.6 统计学分析采用SPSS 13.0统计软件处理，数据均以x(_)±s表示，进行t 检验分析。

讨论

肝硬化由肝纤维化发展而来，是各种慢性肝病最常见的最终发展结果，目前临床上治疗手段有限，效果多不理想。肝移植是当前治疗肝硬化的最有效治疗手段[3-5]，但其缺点也是显而易见的：一是供体缺乏；二是需终身免疫抑制治疗；三是晚期肝硬化时肝移植会有很大风险^[6]，限制了其在临床的广泛应用。骨髓间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的多能干细胞，在特定的诱导条件下可分化为肝、脂肪、骨、肌肉、神经等多种组织细胞，其来源丰富，低表达主要组织相容性复合物Ⅰ和缺乏主要组织相容性复合物Ⅱ^[7]，将可能成为器官移植潜在的替代治疗方案。体内外研究证实，间充质干细在一定条件诱导下，可分化为肝样细胞^[1，8]。损伤的肝脏环境和微环境是骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的前提条件^[9-13]。实验通过透射电镜观察发现，肝硬化大鼠模型肝组织超微结构破坏严重，线粒体基质外溢，肝细胞甚至出现空泡样结构。肝细胞损伤刺激肝内某种应激反应，分泌多种细胞因子，可促进骨髓间充质干细胞向肝细胞分化。移植后的大鼠肝细胞核基本正常，线粒体肿胀明显减轻，肝窦病变明显好转，牛铁兵等^[14]采用苏木精-伊红染色、光镜观察等方法也发现移植间充质干细胞可改善肝硬化大鼠肝组织结构，与本研究结论基本一致。关于骨髓间充质干细胞治疗大鼠肝纤维化时的细胞移植时机问题，多数学者认为早期移植效果较好^[15]，也有人认为肝硬化时移植无效^[16]，国外曾有人用安慰剂做对照试验^[17]，结果显示骨髓间充质干细胞移植组与对照组肝功能无明显改善，但由于该实验样本较少，有待扩大样本进一步研究。
本实验研究中，骨髓间充质干细胞移植可显著升高肝硬化大鼠模型的血清白蛋白水平，并降低血清谷丙转氨酶和直接胆红素水平，且未发现明显不良反应，国外一项大规模的临床研究也证实了这一点^[18]。治疗后的大鼠肝窦数目较治疗前明显增多，肝窦平均直径和平均面积明显缩小，提示骨髓间充质干细胞移植可改善肝窦扩张，人脐血间充质干细胞移植治疗大鼠肝硬化模型亦可取得类似的效果^[19]。采用不同途径移植间充质干细胞其治疗效果不同，静脉移植骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化效果较肝内或腹腔内注射效果要好^[20]，有利于间充质干细胞在肝组织内定居和分化。骨髓间充质干细胞移植抗肝纤维化的机制尚不完全清楚，目前认为主要与其抑制肝星状细胞激活和诱导肝星状细胞凋亡、促进胶原纤维降解、分泌可修复损伤的细胞因子及促进肝细胞再生等作用有^关[21-28]。骨髓间充质干细胞移植可抑制肝纤维化大鼠肝组织中透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的分泌^[29]，并可下调肝纤维化大鼠肝组织Rho信号通路相关因子RhoA、Cdc42、Rac1 mRNA及蛋白表达，从而达到抗肝纤维化的作用，有关骨髓间充质干细胞移植治疗肝硬化的确切机制，有待于更深入的研究。

骨髓间充质干细胞移植肝硬化大鼠肝脏超微结构、体视学参数和肝功能的变化

Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for liver cirrhosis in rats: variation of liver ultrastructure, stereology parameters and liver function indexes

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[1]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[2]	林清凡, 解一新, 陈婉清, 叶振忠, 陈幼芳. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 4970-4975.
[3]	刘翔翔, 黄云梅, 陈文列, 林如辉, 卢小冬, 李钻芳, 许亚晔, 黄美雅, 李西海. 早期骨关节炎模型大鼠半月板白区细胞的超微结构变化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1237-1242.
[4]	张秀梅, 翟运开, 赵杰, 赵萌. 类器官模型国内外数据库近10年文献研究热点分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1249-1255.
[5]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.
[6]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[7]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[8]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[9]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[10]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
[11]	焦慧, 张一宁, 宋雨晴, 林宇, 王秀丽. 乳腺癌类器官研究进展及临床应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1122-1128.
[12]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
[13]	曾燕华, 郝延磊. 许旺细胞体外培养及纯化的系统性综述[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1135-1141.
[14]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.
[15]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.