国产多孔钽对兔成骨细胞生物学行为及功能的影响

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0969

中国组织工程研究 ›› 2018, Vol. 22 ›› Issue (30): 4757-4762.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.0969

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国产多孔钽对兔成骨细胞生物学行为及功能的影响

王茜¹，滕雪峰¹，甘洪全²，张辉³，崔逸爽⁴，陈婧婧⁴，李琪佳¹，王志强²

¹华北理工大学医学实验研究中心，河北省唐山市 063210；²华北理工大学附属医院骨科，河北省唐山市 063000；³唐山市第二医院关节一科，河北省唐山市 063000；⁴华北理工大学研究生学院，河北省唐山市 063009

收稿日期:2018-07-10 出版日期:2018-10-28 发布日期:2018-10-28
通讯作者: 王志强，教授，博士生导师，华北理工大学附属医院骨科，河北省唐山市 063000
作者简介:王茜，女，1981年生，河北省衡水市人，汉族，副教授，博士，主要从事神经解剖学、骨组织工程研究。
基金资助:
国家科技部科技支撑课题资助项目(2012BAE06B03)；河北省科技支撑资助项目(16277776D)；河北省医学科学研究重点课题计划资助项目(20160225)；华北理工大学博士科研启动基金资助项目(28606299)

Effects of domestic porous tantalum on biological behavior and function of rabbit osteoblasts

Wang Qian¹, Teng Xue-feng¹, Gan Hong-quan², Zhang Hui³, Cui Yi-shuang⁴, Chen Jing-jing⁴, Li Qi-jia¹, Wang Zhi-qiang²

¹Medical Experimental Center, North China University of Science and Technology, Tangshan 063210, Hebei Province, China; ²Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of North China University of Science and Technology, Tangshan 063000, Hebei Province, China; ³First Department of Joint, Second Hospital of Tangshan, Tangshan 063000, Hebei Province, China; ⁴Graduate School, North China University of Science and Technology, Tangshan 063009, Hebei Province, China

Received:2018-07-10 Online:2018-10-28 Published:2018-10-28
Contact: Wang Zhi-qiang, Professor, Doctoral supervisor, Department of Orthopedics, Affiliated Hospital of North China University of Science and Technology, Tangshan 063000, Hebei Province, China
About author:Wang Qian, MD, Associate professor, Medical Experimental Center, North China University of Science and Technology, Tangshan 063210, Hebei Province, China
Supported by:
the Supporting Program for Science and Technology Research of the Ministry of Science and Technology of China, No. 2012BAE06B03; the Supporting Program for Science and Technology Research in Hebei Province, No. 16277776D; the Medical Science Research Project of Hebei Province, No. 20160225; the Doctoral Research Startup Fund of the North China University of Technology, No. 28606299

摘要/Abstract

摘要：

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文题释义：

多孔钽：是一种理想的骨科植入金属材料，具有弹性模量低、孔隙率高、表面摩擦系数高的特点，能克服临床常用金属植入材料耐腐蚀性差、弹性模量过高、容易出现应力遮挡等缺陷。多孔钽具备与松骨质类似结构，利于细胞在支架上黏附、生长和增殖，易于骨及软组织附着、长入，具备良好的骨再生性和骨诱导能力。

成骨细胞的主要功能：合成并分泌骨钙素、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白等细胞外基质，促进基质钙化形成骨组织，可通过观察成骨细胞生物学特征了解骨愈合进程。

背景：国产多孔钽植入材料具备三维立体空间结构，而材料的三维立体结构可能会影响细胞的生长及分泌。

目的：观察与国产多孔钽复合培养后成骨细胞増殖、细胞周期、成骨性细胞因子分泌功能的变化。

方法：提取第3代兔成骨细胞，分3组培养：正常组常规培养，对照组加入多孔钽材料浸提液，实验组加入多孔钽支架材料。培养3，5，7 d，CCK-8法检测各组细胞增殖，扫描电镜观察实验组成骨细胞在多孔钽支架上的生长情况，Elisa试剂盒检测各组成骨细胞内骨钙素与Ⅰ型胶原的分泌；培养7 d时，流式细胞仪检测各组细胞周期。

结果与结论：①细胞增殖：3组培养不同时间点的细胞增殖无差异；②扫描电镜：复合培养第3天，细胞在多孔钽支架表面和孔隙内黏附生长，排列较稀疏，突起较少；复合培养第5天，细胞边缘有突起向四周伸展，相邻细胞间突起相互连接横跨孔隙，连成片状；复合培养第7天，细胞突起融合汇合成片状，分泌的基质覆盖大部分支架表面；③Elisa检测：随着培养时间的延长，3组成骨细胞骨钙素分泌逐渐增加，Ⅰ型胶原分泌先升高后降低，实验组培养不同时间点的骨钙素分泌均高于正常组、对照组；④细胞周期：3组成骨细胞均是正常的二倍体细胞，无异倍体细胞出现，细胞DNA含量正常，3组细胞周期分布相似；⑤结果表明：多孔钽支架材料具有良好的生物相容性，可能促进成骨细胞的矿化与成骨。

ORCID: 0000-0002-2962-5069(王志强)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

关键词: 骨科材料, 多孔钽, 兔成骨细胞, CCK-8, 细胞周期, 骨钙素, Ⅰ型胶原, 生物材料

Abstract:

BACKGROUND: The domestic porous tantalum implant material has a three-dimensional spatial structure that may affect the growth and secretion of cells.

OBJECTIVE: To investigate the proliferation, cell cycle, osteogenic secretion of osteoblasts co-cultured with domestic porous tantalum scaffolds.

METHODS: Passage 3 rabbit osteoblasts were extracted and divided into three groups: normal culture group, control group added with the porous tantalum extract, and experimental group co-cultured with the porous tantalum scaffold. The proliferation of cells in each group was detected by cell counting kit-8 method at 3, 5, 7 days of culture. The growth of osteoblasts on the porous tantalum scaffold was observed by scanning electron microscopy. ELISA kit assay was applied to detect the levels of osteocalcin and type I collagen in osteoblasts at 3, 5, 7 days of culture. The cell circle of osteoblasts was detected by flow cytometry at 7 days of culture.

RESULTS AND CONCLUSION: (1) Cell proliferation: There was no difference in cell proliferation among the three groups at different time points (P > 0.05). (2) Scanning electron microscopy: On the 3^rd day of compound culture, the cells adhered to the scaffold surface and pores, and arranged sparsely with few protrusions. On the 5^th day, the cells began to extend, and the adjacent cells were interconnected to form a flaky growth. On the 7^th day, the cells merged into pieces, and the secreted matrix covered most of the scaffold surface. (3) ELISA detection: With the cultivation time, the osteocalcin secretion from the osteoblasts was gradually increased in all the three groups, while the secretion of type I collagen was increased first and then decreased. The secretion of osteocalcin and type I collagen in the experimental group at different time points were higher than that in normal culture and control groups. (4) Cell cycle: The osteoblasts in the three groups were normal diploid cells, no aneuploid cells appeared, and the cell DNA content was normal. The cell cycle distribution was similar in the three groups. To conclude, the domestic porous tantalum scaffolds have good biocompatibility and may promote osteoblast mineralization and osteogenesis.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

Key words: Tantalum, Osteoblasts, Cell Proliferation, Osteocalcin, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

王茜，滕雪峰，甘洪全，张辉，崔逸爽，陈婧婧，李琪佳，王志强. 国产多孔钽对兔成骨细胞生物学行为及功能的影响[J]. 中国组织工程研究, 2018, 22(30): 4757-4762.

Wang Qian, Teng Xue-feng, Gan Hong-quan, Zhang Hui, Cui Yi-shuang, Chen Jing-jing, Li Qi-jia, Wang Zhi-qiang. Effects of domestic porous tantalum on biological behavior and function of rabbit osteoblasts[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2018, 22(30): 4757-4762.

图/表（结果） 9

2.1 多孔钽材料观察大体观察多孔钽支架材料外观呈灰色，表面光洁，材料表面及断面内可见均匀分布着蜂窝状孔隙(图1)。

扫描电镜500倍镜下观察可见，支架表面及断面均匀分布直径400-600 µm的微孔结构；1 000倍镜下可见，多孔钽支架内部具有直径20-50 μm之间的微粒结构，微粒之间存在孔径大小50-200 µm的孔隙，孔隙之间互相连通(图2)。

2.2 成骨细胞的形态特征观察及鉴定倒置相差显微镜观察原代细胞接种后为透亮球形，呈多角及梭形，胞浆向外伸展形成突起；第3天细胞体积增大，数量增加，相互连接，形成分散集落；第4-7天细胞快速生长，细胞集落开始融合(图3A，B)；待细胞生长汇合至80%-90%时进行传代培养，传代后细胞多呈长梭形、三角形，体积变大，生长速度加快，5-7 d长满瓶底；第3代细胞形态呈长梭形，趋于单一化。碱性磷酸酶染色呈阳性细胞胞浆内可见蓝染颗粒，显示细胞有较强的碱性磷酸酶活性及钙化能力(图3C)。

2.3 CCK-8法检测成骨细胞增殖采用CCK-8法测定各组成骨细胞1-7 d的吸光度值，根据所测得的吸光度值绘制成骨细胞增殖曲线图(图4)，经方差分析显示，3组培养不同时间点的吸光度值比较无差异。

2.4 扫描电镜观察成骨细胞在多孔钽支架上的黏附生长多孔钽支架材料与成骨细胞复合培养后，随时间延长，细胞在材料表面黏附生长，并逐渐覆盖材料表面。复合培养第3天，细胞在材料表面和孔隙内黏附生长，排列较稀疏，突起较少，随培养时间延长，细胞逐渐伸展、拉长并伸出伪足；第5天，细胞边缘有突起向四周伸展，相邻细胞间突起相互连接横跨孔隙，连成片状；第7天，细胞突起融合汇合成片状，分泌基质覆盖大部分材料表面(图5)。

2.5 流式细胞仪检测各组成骨细胞的细胞周期采用流式细胞仪对细胞周期和倍体进行检测并分析，结果显示3组成骨细胞均是正常的二倍体细胞，无异倍体细胞出现，细胞DNA含量正常，3组细胞周期分布相似；3组细胞均是G₁期比例较高，多数细胞处于静止期，提示多孔钽支架没有细胞毒性，不会引起细胞DNA含量变化。对3组间G₁、G₂、S期细胞比例进行单因素方差分析，结果显示差异无显著性意义(P > 0.05)，见表1，图6。

2.6 Elisa法测定各组成骨细胞骨钙素分泌随着培养时间延长，各组成骨细胞骨钙素分泌量逐渐增多。实验组培养第5，7天的骨钙素分泌量多于其余两组(P < 0.05)；对照组与正常组培养不同时间点的骨钙素分泌量无差异，见表2。

2.7 Elisa法测定各组成骨细胞Ⅰ型胶原分泌随培养时间的延长，各组成骨细胞Ⅰ型胶原分泌量初期逐渐增多，在第5天达高峰，第7天分泌下降；实验组Ⅰ型胶原分泌量均较其他两组略有升高，但3组间比较差异无显著性意义 (P > 0.05)，见表3。

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引言

生物医用金属材料主要以不锈钢、钛合金、钴铬合金为主，这些金属材料在临床使用中取得了良好的临床效果，但也面临弹性模量高、孔隙率低、表面摩擦系数低，易出现应力遮挡，植入物使用寿命有限等问题^[1-5]。钽金属弹性模量与软骨下骨(即软骨下皮质骨及其下方的骨小梁等)接近^[6-7]，但强度为软骨下骨的10倍。有研究发现，钽金属的弹性模量与人松质骨相近，能更好地避免应力遮挡，利于骨质重塑^[8-9]。

多孔钽金属平均孔径在400-600 μm之间，整体孔隙率为75%-85%，具有弹性模量低、孔隙率高、表面摩擦系数高、微观结构类似于松质骨的特点，通过改变多孔钽骨架结构能够设计出各种的骨外科植入器械^[10-12]。国产多孔钽采用真空高温煅烧工艺制备，孔径为400-600 μm，孔隙连接率达65%-80%，与美国Zimmer公司的多孔钽材料参数相当。

多孔钽具备良好的稳定性，可在体内形成惰性氧化涂层，可适应体内的酸碱环境^[13-14]。多孔钽能促进细胞增殖，可以为骨长入提供结构支架，促进成骨细胞的造骨能力^[15-16]。同时多孔钽的高孔隙率能为骨长入提供更大的空间，多孔钽能与新生骨在16周形成相对完整的结合^[17-18]。与传统的多孔材料相比，钽金属在骨整合方面能够提供更大的骨长入空间和更高的机械连接力。有报道指出，多孔钽可促进细胞的黏附、生长和分化，提高成骨细胞的造骨能力，促进骨生长，加强植入物与骨之间的连接，实现生物固定^[19-21]。

材料的三维立体结构可能会影响细胞的生长及分泌，因此该研究对比了兔成骨细胞在正常培养液、多孔钽支架浸提液(平面状态)及与多孔钽支架复合培养(三维立体状态)后的细胞增殖、细胞周期、成骨性细胞因子骨钙素与Ⅰ型胶原的分泌功能，探讨多孔钽三维立体结构对成骨细胞矿化、成骨的作用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

材料方法

1.1 设计对比观察细胞学实验。

1.2 时间及地点实验于2014年1月至2017年12月在华北理工大学完成。

1.3 材料多孔钽材料由重庆润泽医疗器械有限公司提供，此材料采用粉末浇注高温煅烧技术制备，裁剪成直径15 mm、厚4 mm的圆片。

实验动物：3周龄雄性新西兰幼兔11 只，由华北理工大学实验动物中心提供，许可证编号：Scxk(京) 010-0001。

实验主要试剂及仪器：DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶(Gibco公司，美国)；碱性磷酸酶染色试剂盒(Sigma 公司，美国)；Cell Counting Kit-8试剂盒(北京天恩泽基因科技有限公司)；兔骨钙素Elisa试剂盒、兔Ⅰ型胶原ELISA试剂盒(南京建成生物制品有限公司)；倒置相差显微镜(Nikon公司，日本)；Q5000紫外分光光度计(Quawell公司，美国)；高速冷冻离心机(Sigma公司，德国)；S-4800扫描电镜(Hitachi公司，日本)；iMark680酶标仪(BIO-RAD公司，美国)；FACS Calibur型流式细胞仪(美国BD公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 成骨细胞的分离培养、形态观察及鉴定将出生 24 h内乳兔颈椎脱臼处死，取出乳兔颅盖骨，将其剪至 1 mm×1 mm的小块，加0.25%胰蛋白酶溶液，37 ℃消化 3 min，离心弃上清，加0.1%Ⅱ型胶原酶，37 ℃孵育消化60 min，离心弃上清，细胞接种于细胞培养瓶中。待细胞达80%-90%时传代。

采用碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞。取生长状态良好的第3代成骨细胞，胰蛋白酶消化制成单层细胞悬液，以1×10⁹ L^-1的细胞浓度接种于预置无菌盖玻片的6孔板内。待细胞长至50%-60%时，将无菌玻片取出；PBS冲洗3次，每次5 min；40 g/L多聚甲醛固定30 min，PBS冲洗3次，每次5 min；无菌玻片入孵育液中，37 ℃孵育3 h，自来水冲洗3次；2%硝酸钴中浸泡3 min，蒸馏水洗3次；1%硫化铵孵育2 min，自来水冲洗，自然干燥，甘油明胶液封固。

1.4.2 多孔钽浸提液的制备及多孔钽支架与成骨细胞共培养

制备多孔钽支架浸提液：多孔钽经高压灭菌消毒，根据国家标准ISO10993-5:2009(E)制备多孔钽支架浸提液^[22-23]。制备多孔钽浸提液，以体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养基作为浸提递质，按照材料/浸提递质= 0.2 g/mL的比例配制100%浓度标准浸提液，将浸提液放于37 ℃孵箱72 h后待用。

多孔钽材料与成骨细胞共培养：将多孔钽支架经超纯水浸泡、清洗，高压蒸汽灭菌干燥，完全培养基浸湿，在37 ℃、体积分数5%CO₂培养箱中存放24 h备用。

取生长状态良好的第3代成骨细胞，生长至80%融合后，加0.25%胰蛋白酶37 ℃消化3 min，以离心半径8 cm、800 r/min离心10 min，弃上清并计数。将成骨细胞分3组培养，正常组每孔接种2×10⁴个细胞，加入1 mL DMEM培养液培养；对照组每孔接种2×10⁴个细胞，加入1 mL多孔钽支架浸提液培养；实验组将多孔钽支架置于24孔板内，取25 μL成骨细胞悬液，以1×10⁹ L^-1的细胞浓度滴加至多孔钽支架表面，于37 ℃、体积分数5%CO₂及饱和湿度孵箱内静置2 h后，将材料翻转，向另一面滴加相同浓度的细胞悬液25 μL，相同条件静置2 h后，将负载细胞的材料转入新孔中，加入1 mL DMEM培养液继续培养，于原孔中加0.25%胰蛋白酶，37 ℃消化3 min后收集细胞，计数，计算出附着于材料上的细胞数为2×10⁴个。将3组培养板均置于37 ℃、体积分数5%CO₂及饱和湿度孵箱内培养，隔天换液1次，连续培养7 d。

1.5 主要观察指标

CCK-8法检测细胞增殖：连续培养成骨细胞7 d，在各组培养基中滴加CCK-8试剂，使其占总体积的10%，37 ℃、体积分数5%CO₂培养箱孵育4 h，每孔吸出100 μL液体，移入96孔酶标板，使用酶标仪(测定波长为450 nm，参比波长为650 nm)测定各组吸光度值，并以培养天数为横轴，吸光度值为纵轴，绘制细胞生长曲线图。

扫描电镜观察：成骨细胞与多孔钽材料复合培养的后第3，5，7天，取出细胞支架复合物，PBS冲洗3次，2.5%戊二醛固定4 h，梯度乙醇脱水，干燥、喷金，扫描电镜观察成骨细胞在材料上的生长状态。

流式细胞仪检测细胞周期：0.25%胰酶消化收集多孔钽支架材料上的1×10⁶成骨细胞，1 000 r/min离心5 min，弃上清，PBS洗涤3次，每次5 min，1 000 r/min离心5 min，加冰预冷(-20 ℃)的体积分数70%乙醇固定，4 ℃过夜； 1 000 r/min离心5 min，去除固定液，PBS重悬；离心5 min，弃去PBS后重悬，加入PBS 250 μL及10 g/L的RNA酶1 μL；加PI染液300 μL，吹打均匀，4 ℃避光30 min；400目筛网过滤，利用FACS Calibur型流式细胞仪进行检测，PI用氩离子激发荧光，激发光波波长为488 nm，发射光波波长大于630 nm，产生红色荧光，可分析前散射光及对侧散射光散点图及PI荧光直方图。

Elisa法测定骨钙素与Ⅰ型胶原分泌：成骨细胞培养第3，5，7天，采用Elisa试剂盒测定释放至培养基中的骨钙素及Ⅰ型胶原，重复3次。采用Bradford方法测出细胞内总蛋白含量，实验步骤参考Elisa试剂盒操作。

1.6 统计学分析采用SPSS 16.0统计学软件分析实验数据，计量资料数据以x(_)±s表示，实验数据统计采用单因素方差分析，并比较两因素的交互作用、主效应、单独效应及多重比较。以P < 0.05表示差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

讨论

多孔钽是一种理想的骨科植入金属材料，具有弹性模量低、孔隙率高、表面摩擦系数高的特点，能克服临床上常用金属植入材料耐腐蚀性差、弹性模量过高、容易出现应力遮挡等缺陷^[17]。多孔钽具备与松骨质类似结构，利于细胞在支架上黏附、生长和增殖，易于骨及软组织附着、长入，具备良好的骨再生性和骨诱导能力^[11-14]。多孔钽弹性模量接近于人体骨，与松质骨和皮质骨的摩擦系数也较其他支架材料高出40%以上，利于支架材料植入后的初期稳定^[24-26]。实验中国产多孔钽材料直径1.5 cm，厚0.4 cm，呈灰色，表面光洁，材料表面及断面可见均匀分布直径400-600 µm的微孔结构，孔隙率可高达75%-85%，远超其他医用金属材料的孔隙率^[27]。多孔钽具备三维立体空间结构，能提高成骨细胞与材料的接触面积，利于细胞黏附、生长及营养物质的运输^[28-30]。有研究发现，材料表面粗糙度可影响成骨细胞的黏附增殖，粗糙程度越大越易于细胞黏附生长^[31-32]。Mustafa等^[33]也发现成骨细胞生长与材料表面微粒大小有关，微粒直径50-400 µm易于骨组织长入支架内部，并与周围骨组织密切结合；直径63-90 µm对成骨细胞生长促进效果明显。实验中发现随时间增长，细胞在多孔钽支架表面及内部微孔结构中伸出伪足，分泌基质，逐步长入孔隙中，覆盖材料表面，提示国产多孔钽支架的三维立体结构利于成骨细胞的黏附、增殖，可促进骨长入。

实验选择乳兔第3代细胞为种子细胞，细胞表型及功能均较稳定，碱性磷酸酶染色结果显示细胞出现阳性反应，胞浆内可见蓝染颗粒，显示细胞有较强的碱性磷酸酶活性及钙化能力。通过CCK-8法测定细胞增殖生长情况，发现实验组与正常组细胞增殖生长情况无明显差异，提示国产多孔钽材料具备良好的生物相容性，对细胞增殖影响不大。同时采用流式细胞仪对细胞周期和二倍体进行检测，发现3组细胞均为正常二倍体细胞，无异倍体形成，DNA含量正常，细胞总体表现为正常的生长周期，3组细胞周期分布无差异，说明多孔钽支架没有细胞毒性，不会引起细胞DNA含量变化。

成骨细胞主要功能是合成并分泌骨钙素、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白等细胞外基质，促进基质钙化形成骨组织。可通过观察成骨细胞生物学特征了解骨愈合进程。成骨细胞分泌的Ⅰ型胶原是钙盐沉积和细胞黏附的支架^[34-36]；骨钙素是成骨细胞特有的细胞外基质蛋白，由成熟成骨细胞合成分泌，标志着成骨细胞向基质矿化^[37-38]。成骨细胞可通过基质小泡释放钙离子和碱性磷酸酶等酶类物质，在碱性磷酸酶的作用下，钙离子可在胶原纤维丝上沉积，完成基质矿化过程^[39]。成骨细胞经历增殖期、细胞外基质合成期和钙化期3个过程。增殖期Ⅰ型胶原开始表达，基质合成期达高峰；骨钙素在钙化早期出现，后期表达升高^[40]。骨钙素、Ⅰ型胶原可作为成骨细胞功能状态指标。实验采用Elisa试剂盒测定各组培养液中骨钙素及Ⅰ型胶原分泌量，发现随培养时间延长，各组成骨细胞骨钙素分泌量逐渐增多，实验组第5，7天骨钙素分泌量明显高于其余两组，提示多孔钽支架材料表面的粗糙及孔隙结构可能影响了细胞外基质的分泌，造成骨钙素分泌增高。这与丁思阳等^[41]发现的材料表面多孔形态能显著提高骨钙素的表达结果一致。随着培养时间延长，各组成骨细胞Ⅰ型胶原分泌量增多，第5天达高峰，第7天分泌下降，与Ⅰ型胶原的分泌表达规律相符。实验组培养不同时间点的Ⅰ型胶原分泌量均较其他两组略有升高，提示多孔钽支架的三维空间结构可能给成骨细胞的细胞外基质分泌提供了良好空间结构，也利于营养物质的运输，促进了胶原分泌，但多孔钽支架对Ⅰ型胶原分泌的影响并没有对骨钙素分泌的影响明显。

综上所述，成骨细胞能在多孔钽支架上良好的黏附、生长、增殖，并可分泌大量细胞外基质，维持成骨细胞良好的功能活性，证明多孔钽支架材料具备良好的生物相容性；同时与多孔钽支架复合培养的成骨细胞骨钙素分泌增多，提示多孔钽支架对成骨细胞具备良好的矿化、成骨作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

国产多孔钽对兔成骨细胞生物学行为及功能的影响

Effects of domestic porous tantalum on biological behavior and function of rabbit osteoblasts

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