二至丸提取物干预去势骨质疏松雌性模型大鼠的骨重建特点

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2975

中国组织工程研究 ›› 2021, Vol. 25 ›› Issue (2): 191-195.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2975

• 骨组织构建 bone tissue construction • 上一篇下一篇

二至丸提取物干预去势骨质疏松雌性模型大鼠的骨重建特点

李平，林煜，陈翔，刘振涛，肖莉莉，林学义，华鹏

厦门大学附属福州第二医院骨科，福建省福州市 350007

收稿日期:2019-11-21 修回日期:2019-12-16 接受日期:2020-03-13 出版日期:2021-01-18 发布日期:2020-11-21
通讯作者: 林煜，博士，主治医师，讲师，厦门大学附属福州第二医院骨科，福建省福州市 350007
作者简介:李平，男，1974年生，汉族，副主任医师。
基金资助:
福建省自然科学基金(2017J01332)

Characteristics of bone remodeling in female ovariectomized rat models of osteoporosis undergoing Erzhi Pill extract intervention

Li Ping, Lin Yu, Chen Xiang, Liu Zhentao, Xiao Lili, Lin Xueyi, Hua Peng

Department of Orthopedics, Fuzhou No. 2 Hospital affiliated to Xiamen University, Fuzhou 350007, Fujian Province, China

Received:2019-11-21 Revised:2019-12-16 Accepted:2020-03-13 Online:2021-01-18 Published:2020-11-21
Contact: Lin Yu, MD, Attending physician, Lecturer, Department of Orthopedics, Fuzhou No. 2 Hospital affiliated to Xiamen University, Fuzhou 350007, Fujian Province, China
About author:Li Ping, Associate chief physician, Department of Orthopedics, Fuzhou No. 2 Hospital affiliated to Xiamen University, Fuzhou 350007, Fujian Province, China
Supported by:
the Natural Science Foundation of Fujian Province, No. 2017J01332

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
二至丸：明代名医王三才在其著作《医便》中第一次记载了补益肝肾，滋阴止血的二至丸，该方由女贞子及墨旱莲配伍而成。

背景：研究表明二至丸可改善去势大鼠的骨密度、骨影区、骨矿物质含量以及血清雌二醇水平，但未对其可能的机制进行探讨。
目的：二至丸干预去势骨质疏松雌性模型大鼠的骨重建特点。
方法：建立绝经后骨质疏松症大鼠模型，采用6，9，12 g/(kg·d)二至丸提取物灌胃，灌胃每日1次。各组于术后第13周开始给药，分别于第16，20，24周取材。通过苏木精-伊红染色观察骨组织形态，Motic 6.0光镜图像分析系统测量骨小梁百分比，骨密度仪测定大鼠右侧胫骨骨密度，采用qPCR检测第一腰椎骨组织中骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体、抗酒石酸酸性磷酸酶和骨钙素 mRNA表达水平。
结果与结论：相对同期模型大鼠，各剂量二至丸组大鼠的骨小梁形态结构较好，骨小梁数量、骨密度及骨组织骨保护素水平增加，而骨钙素、细胞核因子κB受体活化因子配体、抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA水平降低(P < 0.05)，并均呈剂量依赖性。上述数据证实，二至丸醇提物可通过改善去势大鼠高转化型骨质疏松状态，促进骨保护素表达，同时抑制细胞核因子κB受体活化因子配体表达进，而发挥到抑制破骨细胞活性的作用，最终促进去势骨质疏松雌性模型大鼠的骨重建。
https://orcid.org/0000-0002-8957-4777 (李平)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 二至丸, 绝经后骨质疏松症, 大鼠, 去势, 骨钙素, 骨保护素, 骨形态, 骨重建

Abstract: BACKGROUND: Some studies have shown that Erzhi Pill can improve the bone density, bone shadow area, bone mineral content and serum estradiol level of ovariectomized rats, but the possible mechanism has not been explored.
OBJECTIVE: To investigate the effect of Erzhi Pill on bone remodeling in an ovariectomized rat model of osteoporosis.
METHODS: A rat model of post-menopausal osteoporosis was established, and the extracts of Erzhi Pills of 6, 9, and 12 g/kg per day were administered intragastrically. Administration in each group began at the 13th week after surgery, and the samples were taken at 16, 20, and 24 weeks after surgery. The bone tissue morphology was observed by hematoxylin-eosin staining, the percentage of trabecular bone was measured by Motic 6.0 system, and the bone density of the rat right tibial bone was detected by a bone densitometer. Expressions of osteoprotegerin, nuclear factor κB receptor activating factor ligand (RANKL), tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) and osteocalcin mRNAs in the first lumbar vertebrae were detected by qPCR.

RESULTS AND CONCLUSION: The trabecular bone had a better morphological structure, and the number of trabeculae, bone miner density, and bone tissue osteoprotegerin level were significantly increased in a dose-depended manner after treatment with Erzhi Pill, whereas the mRNA levels of RANKL and TRAP decreased in a dose-depended manner after treatment with Erzhi Pill (P < 0.05). Therefore, the alcohol extract of Erzhi Pill can improve the status of high-transformation osteoporosis in ovariectomized rats, promote the expression of osteoprotegerin and inhibit the expression of RANKL, so as to inhibit the activity of osteoclasts and ultimately improve the bone remodeling in female osteoporotic rats.

Key words: Erzhi Pills, postmenopausal osteoporosis, rat, castration, osteocalcin, osteoprotegerin, bone morphology, bone remodeling

中图分类号:

李平, 林煜, 陈翔, 刘振涛, 肖莉莉, 林学义, 华鹏. 二至丸提取物干预去势骨质疏松雌性模型大鼠的骨重建特点[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(2): 191-195.

Li Ping, Lin Yu, Chen Xiang, Liu Zhentao, Xiao Lili, Lin Xueyi, Hua Peng . Characteristics of bone remodeling in female ovariectomized rat models of osteoporosis undergoing Erzhi Pill extract intervention[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2021, 25(2): 191-195.

图/表（结果） 7

2.1 实验动物数量分析实验选用SD大鼠150只，实验过程中各组均无脱失，全部进入结果分析。
2.2 各组骨密度变化与同期假手术组对比，去势组骨密度呈现不同程度的降低，其中各期模型组及灌胃24周低剂量二至丸组骨密度下降程度最大(P < 0.05)。组间比较显示，与同期模型组比较，各二至丸用药组骨密度均有不同程度升高，其中以中、高剂量二至丸组升高程度最大(P < 0.05)，见表2。

2.3 各组骨形态学检测结果变化胫骨近端骨组织采用苏木精-伊红染色后骨小梁呈现粉红色，骨髓细胞呈现蓝紫色。假手术组：各期骨小梁形态完整，排布均匀、致密。模型组：时随着手术后间，模型组骨小梁数量逐渐减少，排布疏散，出现骨小梁断裂，且骨小梁孔隙变大。与模型组对比，同期各剂量二至丸组骨小梁数量有所增多，且相对完整，但均不及假手术组，见图1及表3。

骨小梁百分比结果显示，各去势组骨小梁百分比与假手术组对比呈现不同程度减少(P < 0.05)。组间比较显示，与同期模型组对比，各剂量二至丸组均有不同程度升高，其中除灌胃16，20周低剂量二至丸组外，其他各组结果均升高 (P < 0.05)，见表3。

2.4 各组骨代谢指标mRNA的表达 qPCR检测结果发现，与同期假手术组对比，各去势组骨保护素 mRNA均呈现不同程度下降(P < 0.05)。与同期的模型组比较显示，各剂量二至丸组骨保护素 mRNA水平有升高，除灌胃16周低剂量二至丸组外均有显著性差异(P < 0.05)；同期各剂量二至丸组比较显示，随着二至丸药物浓度的增加大鼠骨保护素 mRNA也随之升高，其中高剂量二至丸组与低、中剂量二至丸组比升高最为明显(P < 0.05)，见表4。

与同期假手术组对比，各去势组RANKL，TRACP及骨钙素mRNA水平均呈现不同程度提高(P < 0.05)。与同期的模型组对比显示，各剂量二至丸组RANKL，TRACP及骨钙素 mRNA水平均有不同程度下降(P < 0.05)；同期各剂量二至丸组对比显示，随着二至丸药物浓度的增加大鼠RANKL，TRACP及骨钙素mRNA也呈现不同程度降低，见表5-7。

参考文献

[1] Curtis EM, Moon RJ, Harvey NC, et al. Reprint of: the impact of fragility fracture and approaches to osteoporosis risk assessment worldwide. Bone. 2017;104:29-38.
[2] Borrelli J. Taking control: the osteoporosis epidemic. Injury. 2012; 43(8):1235-1236.
[3] Ballane G, Cauley JA, Luckey MM, et al. Secular trends in hip fractures worldwide: opposing trends East versus West. J Bone Miner Res. 2014;29(8):1745-1755.
[4] Chen P, Li Z, Hu Y. Prevalence of osteoporosis in China: a meta-analysis and systematic review. BMC Public Health. 2016;16(1):1039.
[5] Marini F, Cianferotti L, Brandi ML. Epigenetic mechanisms in bone biology and osteoporosis: can they drive therapeutic choices? Int J Mol Sci. 2016;17(8):1329.
[6] Chen K, Yuan Y, Wang Z, et al. Helvolic acid attenuates osteoclast formation and function via suppressing RANKL-induced NFATc1 activation. J Cell Physiol. 2019;234(5):6477-6488.
[7] Kim B, Lee KY, Park B. Icariin abrogates osteoclast formation through the regulation of the RANKL-mediated TRAF6/NF-kappaB/ERK signaling pathway in Raw264.7 cells. Phytomedicine. 2018;51:181-190.
[8] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部):2010年版[S].北京:中药医药科技出版社, 2010:351-352.
[9] 黄新苹,王武朝.中药女贞子的化学成分研究进展[J].国际药学研究杂志,2011,38(1):47-51.
[10] 林雄浩,吴锦忠.中药复方二至丸的化学成分及抗骨质疏松研究进展[J].解放军药学学报,2009,25(5):421-424.
[11] Ikeda Y, Yonemitsu I, Takei M, et al. Mechanical loading leads to osteoarthritis-like changes in the hypofunctional temporomandibular joint in rats. Arch Oral Biol. 2014;59(12):1368-1376.
[12] Wolski H, Drews K, Bogacz A, et al. The RANKL/RANK/OPG signal trail: significance of genetic polymorphisms in the etiology of postmenopausal osteoporosis. Ginekol Polska. 2016;87(5):347-352.
[13] Sun X, Wei B, Peng ZH, et al. Protective effects of Dipsacus asper polysaccharide on osteoporosis in vivo by regulating RANKL/RANK/OPG/VEGF and PI3K/Akt/eNOS pathway. Int J Biol macromol. 2019;129(15):579-587.
[14] 李冠慧,黄明芳,李西海,等.基于肾主骨生髓探讨骨髓基质干细胞与绝经后骨质疏松肾虚证的关系[J].中国老年学, 2016,36(15): 3846-3848.
[15] 张明发, 沈雅琴.女贞子及其活性成分抗骨质疏松症的研究进展[J].药物评价研究, 2014,37(6):566-571.
[16] Zhang Y, Lai WP, Leung PC, et al. Effects of Fructus Ligustri Lucidi extract on bone turnover and calcium balance in ovariectomized rats. Biol Pharm Bull. 2006;29(2):291-296.
[17] Crockett JC, Rogers MJ, Coxon FP, et al. Bone remodelling at a glance. J Cell Sci. 2011;124(7):991-998.
[18] Matsuo K, Otaki N. Bone cell interactions through Eph/ephrin:
bone modeling, remodeling and associated diseases. Cell Adh Migr. 2012;30:148-156.
[19] Gossiel F, Paggiosi MA, Naylor KE, et al. The effect of bisphosphosphonates on bone turnover and bone balance in postmenopausal women with osteoporosis: the T-score bone marker approach in the TRIO study. Bone. 2020;131:115158.
[20] Sampson TG. Arthroscopic treatment for chondral lesions of the hip. Clin Sports Med. 2011;30(2):331-348.
[21] Li XL, Liu DQ, Li J, et al. Wnt3a involved in the mechanical loading on improvement of bone remodeling and angiogenesis in a postmenopausal osteoporosis mouse model. FASEB J. 2019;33(8): 8913-8924.
[22] Zhou L, Liu Q, Yang M, et al. Dihydroartemisinin, an anti-malaria drug, suppresses estrogen deficiency-induced osteoporosis, osteoclast formation, and RANKL-induced signaling pathways. J Bone Miner Res. 2016;31(5):964-974.
[23] 陈楠,李晓莉,张岩.女贞子及其活性成分抗骨质疏松作用及途径研究进展[J].中国药理学通报,2018,34(8):1057-1060.
[24] 李晓曦,陈宇恒,唐秀凤,等.基于雌激素作用的淫羊藿女贞子配伍对绝经后骨质疏松症大鼠的影响研究[J].中国中医骨伤科杂志, 2019, (9):1-6, 10.
[25] Fellah F, Djenidi R, Chebout I. Protective effect of sphaerococcus coronopifolius crude extract in combination with bacillus calmette-guerin on ligature-induced depression in female wistar rats. Psychiatry Investig. 2020;17(2):130-139.
[26] Song DZ, Cao Z, Huang S, et al. Achyranthes bidentata polysaccharide suppresses osteoclastogenesis and bone resorption via inhibiting RANKL signaling. J Cell Biochem. 2018;18:266-282.
[27] Zhang Y, Li J X, Zhao J, et al. Synthesis and activity of oleanolic acid derivatives, a novel class of inhibitors of osteoclast formation. Bioorg Med Chem Lett. 2005;15(6):1629-1632.
[28] Meng YQ, Kuai ZY, Zhan SW, et al. Design, synthesis, and antitumor activity of oleanolic acid derivatives. J Asian Nat Prod Res. 2018;21(7): 633-651.
[29] 肖宗崇.二至丸配方颗粒汤剂与其传统汤剂化学成分及药效学比较研究[D].广州:广州中医药大学,2017.

引言

当前骨质疏松症已成为全球人口所要面临的重要健康问题，世界拥有庞大的骨质疏松症群体，全球每年因骨质疏松并发骨折的人数达到900万人，而至2050年骨折发生率会增加至240%-310%[1-2]，而绝经后骨质疏松症患者又在其中占据75%左右[3]。有统计显示：至2016年中国绝经后骨质疏松症在老年人口中的患病率高达36%[4]。已知当成骨细胞功能不断减低并且破骨细胞功能持续增强，骨吸收速率超过骨形成速率便导致骨量流失,因此骨重建和骨塑建是2个既对立又统一的过程，如何保持一定程度的骨稳态是防治骨质疏松的重要问题。目前认为绝经后雌激素下降导致的破骨细胞分化大于成骨细胞的分化,致使骨稳态被破坏，是导致绝经后骨质疏松发生的重要因素[5]。而破骨细胞的分化受到多种细胞因子和机体自身分泌激素的调控。研究证实集落抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acidphosphatase，TRACP)、细胞核因子κB受体活化因子配体(RANK ligand，RANKL)为破骨细胞分化所必需的细胞因子。RANKL与破骨细胞膜上受体RANK结合，激活下游信号分子调控破骨细胞的分化[6-7]。此外，成骨细胞的活化因子骨保护素和骨钙素也参与破骨细胞分化的调控[8-10]。因此，探索成骨细胞和破骨细胞在骨质疏松的作用机制，对建立骨质疏松症临床治疗策略至关重要。
明代名医王三才在其著作《医便》中首次记载了补益肝肾、滋阴止血的二至丸，该方由女贞子及墨旱莲配伍而成。二至丸中的女贞子及墨旱莲主要含有黄酮类、萜类及苯醇类等成分以及挥发油和甾体类等物质，可以发挥类雌激素的作用[11-13]。课题组以往相关实验发现，二至丸可改善去势大鼠的骨密度、骨影区、骨矿物质含量及血清雌二醇水平[14-16]。因此文章旨在以去势雌性SD大鼠为实验对象，在二至丸醇提液干预下，通过形态学及qPCR等相关技术方法，检测骨小梁、骨密度、骨保护素、RANKL、TRACP和骨钙素等指标的表达变化，从RANKL/RANK/骨保护素系统角度进一步探求二至丸对去势大鼠骨代谢水平影响，进而探究二至丸有效成分发挥作用的可能机制，为探寻绝经后骨质疏松症的中药治疗提供理论依据。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。
1.2 时间及地点于2017年3月至2018年6月在福建中医研究院学实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物从上海斯莱克实验动物有限责任公司购置健康6月龄SPF级雌性SD大鼠150只，体质量(300±20) g，许可证号：SCXK(沪)2012-0002。所有大鼠在福建中医药动物实验中心鼠类实验室进行饲养和灌胃等实验操作。实验方案经厦门大学附属福州第二医院实验伦理委员会批准，批准号：201605021。
1.3.2 药物二至丸根据《中国药典》中的药物剂量[14]，通过体表面积计算方法估算实验动物的用药量。女贞子及墨旱莲饮片购于福建中医药大学国医堂，由福建中医药大学附属第二人民医院药剂科制备。
药物制备方法：将墨旱莲和女贞子等剂量混合，通过体积分数75%乙醇对生药回流提取3次，提取时间为2 h/次，随后将醇提物浓缩干燥备用。
1.4 实验方法
1.4.1 分组、造模、灌胃及取材
分组：将SD大鼠150只随机分成假手术组30只和去势组120只，去势组再随机分成模型组、低剂量二至丸组、中剂量二至丸组及高剂量二至丸组，每组30只。
造模：用体积分数2%戊巴比妥钠进行麻醉。其中去势组大鼠于麻醉后，取腹部正中切口，寻找双侧卵巢予以结扎切除，术毕予以切口缝合，擦拭切口周围血迹[8]。假手术组除未切除卵巢外其他操作步骤同去势组。造模成功评价标准：去势组骨密度呈现不同程度的降低，胫骨近端骨小梁数量逐渐减少，排布疏散，出现骨小梁断裂，且骨小梁孔隙变大即为造模成功。

灌胃：药物灌胃剂量根据人和动物体表面积折算的等效剂量换算，并根据每周称重结果修改灌胃剂量。低、中、高剂量二至丸组：给予二至丸醇提物6，9，12 g/(kg•d)灌胃。各剂量二至丸组药物均溶解于生理盐水2 mL后灌胃。假手术组及模型组均用2 mL生理盐水灌胃，每日1次，持续12周。
取材：分别于灌胃后第16，20，24周各组随机取10只大鼠，麻醉后取血清、腰椎和胫骨作指标检测。所有大鼠均饲养于SPF级学校动物实验中心，每5只1组饲养于鼠笼。
1.4.2 骨组织形态学检测取材后的左侧胫骨通过脱钙处理后进行苏木精-伊红染色，并对骨组织形态学进行观察分析。通过Motic Med 6.0数码医学图像分析系统，选取苏木精-伊红染色切片中骨骺线下方4 mm范围内骨松质区域进行计算，并统计骨小梁面积百分比[骨小梁面积百分比=测量框内骨小梁面积/测量框总面积)×100%]。
1.4.3 骨密度测定通过双能X射线4 500 W骨密度仪(美国Hologic公司)检测取材后大鼠右侧胫骨骨密度。
1.4.4 qPCR法检测骨代谢指标将取材后的大鼠第一腰椎通过液氮研磨，Trizol法提取RNA，qPCR法检测其中骨保护素、RANKL、TRACP和骨钙素 mRNA的表达。用1 μg RNA液体按照试剂盒组分比例置于冰上配制RT反应液(20 μL反应体系)：Total RNA 1 μg/浓度，5×PrimeScriptTM Buffer (for Real Time) 6 μL，Oligo dT Primer 1.5 μL，PrimeScriptTM RT Enzyme MixⅠ1.5 μL，最后将DEPC水配至20 μL，在9600DNA扩增仪美国PE公司上按试剂盒说明书进行反转录反应，后所得的cDNA置于-20 ℃冰箱中储存备用。PCR引物由上海生物工程技术有限公司合成，见表1。q-PCR步骤按照大连宝生公司SYBR Premix Ex TaqTM PCR Kit步骤行进操作，各目的基因的表达量用2-∆∆Ct法计算得出结果。

1.5 主要观察指标各组qPCR法检测骨代谢指标mRNA表达、骨密度及骨组织形态学变化。
1.6 统计学分析实验数据用SPSS 22.0软件分析，所有数据均进行正态性分布检验和方差齐性检验，计量资料以x±s表示，组间数据比较采取单因素方差分析和LSD检验，P < 0.05差异有显著性意义。

讨论

骨稳态是指破骨细胞和成骨细胞的功能和活性处于平衡的状态，而人体的骨骼代谢是一个动态的过程，当骨骼损伤时，通过骨形成和骨吸收来重建骨骼，以确保机体结构的完整性及骨骼质量的平衡[16-18]。绝经后骨质疏松症是目前中老年女患者常见性疾病，其主要原因是由于绝经后雌激素水平突然降低引起骨代谢紊乱最终导致骨吸收速率超过骨形成速率，破坏了骨稳态。
目前骨保护素/RANKL/RANK系统是已发现的能同时调控成骨细胞和破骨细胞分化过程的重要通路，对维持骨稳态起到重要作用[13]。骨保护素及RANKL均可由成骨细胞表达，其中RANKL可与RANK结合，进而促进破骨细胞活性，加强骨吸收，抑制破骨细胞凋亡，而骨保护素可阻断RANKL的上述作用。一般情况下人体的骨重建处于平衡状态，骨保护素与RANKL在此过程中就扮演杠杆作用。而雌激素可刺激机体对骨保护素的表达，当绝经后骨质疏松症发生时，人体雌激素明显下降，因而骨保护素随之减少，骨保护素与RANKL的比值发生明显改变，最终导致破骨细胞活性及骨吸收的增强。另外，TRACP是由破骨细胞分泌，能够特异性地反映破骨细胞活性，是辅助评价绝经后骨质疏松症的指标之一。骨钙素则由成骨细胞分泌，可很好地评价骨形成能力[19-21]。在绝经后骨质疏松症模型成立后，苏木精-伊红染色显示：模型组骨密度、骨小梁面积百分比与同期假手术组对比有不同程度的下降；模型组的骨小梁出现严重的破坏，呈现疏松、断裂的现象。而通过此次qPCR结果显示，模型组较同期假手术组骨保护素mRNA水平明显降低，而RANKL，TRACP及骨钙素mRNA水平均呈现不同程度提高。由于绝经后骨质疏松症表现为高转换状态[22]，其主要表现为成骨细胞与破骨细胞活性均明显提高，但成骨细胞活性任大于破骨细胞活性。结合上述的结果，可推断，由于去势大鼠机体的雌激素水平迅速下降，机体呈现出高转化型骨质疏松表现，故RANKL、TRACP及骨钙素mRNA水平出现明显升高，而骨保护素mRNA水平未见明显升高考虑是由于雌激素水平的急剧下降引起的。
具有补益肝肾、滋阴止血功效的二至丸，该方由女贞子及墨旱莲配伍而成，该方主治因绝经后“天癸竭”“肝肾阴虚”引起的腰细酸软、骨萎。而现代药理研究显示：构成二至丸的女贞子及墨旱莲含有酪醇和墩果酸等有效成分[23]，而这些成分可以促进维生素D3生成，进而加强钙的摄取，降低钙的排泄，增强骨骼的密度[24-25]。二至丸含有的萜类可抑制破骨细胞样多核细胞的生成，同时激活骨保护素和骨钙素，并刺激成骨细胞使其分化与成熟[26-28]，其含有的黄酮类化合物与雌二醇的结构类似，可发挥类似雌激素样功能[29]。通过课题实验发现，模型组骨密度及骨小梁面积百分比与同期假手术组对比有不同程度的下降；苏木精-伊红染色显示，模型组的骨小梁出现严重的破坏，呈现疏松、断裂的现象。与同期模型组比较显示，各剂量二至丸组骨密度、骨小梁面积百分比均呈现不同程度提高，尤以中、高剂量二至丸组改善最为明显；苏木精-伊红染色结果显示，与同期模型组比较，各剂量二至丸组骨小梁形态相对完整，断裂、不连续现象有所改善。目前形态学及骨密度检测是评价骨质疏松最有效的指标，因此根据实验结果可明确二至丸醇提物能有效改善去势大鼠骨质疏松状态。另一方面，与同期模型组比较，各剂量二至丸组骨保护素 mRNA水平均有明显升高，且随着二至丸浓度的升高骨保护素 mRNA水平也随之升高；同时各剂量二至丸组RANKL，TRACP及骨钙素 mRNA水平则呈现不同程度的降低，且也随着二至丸浓度的升高RANKL，TRACP及骨钙素 mRNA水平出现下降。结合上述实验结果可推断，二至丸醇提物可能通过类雌激素的有效成分改善去势大鼠低雌激素水平的状态,继而促进骨保护素 mRNA水平的升高，而RANKL，TRACP及骨钙素mRNA水平则表明成骨细胞与破骨细胞活性得到抑制，说明二至丸醇提物能有效改善去势大鼠高转化型骨质疏松状态。
综上所述，二至丸醇提物可通过改善去势大鼠高转换型骨质疏松状态，促进骨保护素表达的同时抑制RANKL表达进而达到抑制破骨细胞活性的作用，最终起到改善去势大鼠骨质量的目的。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

二至丸提取物干预去势骨质疏松雌性模型大鼠的骨重建特点

Characteristics of bone remodeling in female ovariectomized rat models of osteoporosis undergoing Erzhi Pill extract intervention

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 7

参考文献

相关文章 2

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	张虎雄, 李微, 杨物鹏, 新苏雅拉图. 3D打印淫羊藿苷/脱钙骨基质修复兔股骨髁骨缺损[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(34): 5461-5466.
[2]	王丹, 尹晶, 王玉英, 杜勇, 李京玲, 俞舜. 人源脱细胞羊膜与脱细胞羊膜下层组织修复皮肤缺损[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(34): 5570-5576.