中国组织工程研究 ›› 2017, Vol. 21 ›› Issue (4): 538-544.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.04.008
• 骨组织构建 bone tissue construction • 上一篇 下一篇
miR-155通过抑制SMAD5调控成骨细胞骨分化
邱诗阳1，付希佳2，白晓雪3，杨 军1
- 1中国医科大学附属盛京医院南湖院区创伤骨科，辽宁省沈阳市 110004；2朝阳市中心医院神经内科，辽宁省朝阳市 122000；3吉林大学第一医院干部病房，吉林省长春市 130021
miR-155 regulates the osteogenic differentiation of osteoblasts by inhibiting SMAD5 expression
Qiu Shi-yang1, Fu Xi-jia2, Bai Xiao-xue3, Yang Jun1
- 1Department of Orthopedics and Traumatology, Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, Liaoning Province, China; 2Department of Neurology, Chaoyang Central Hospital, Chaoyang 122000, Liaoning Province, China; 3Department of Cadre’s Ward, the First Hospital of Jilin University, Changchun 130021, Jilin Province, China
摘要：
文章快速阅读：
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文题释义：
骨形态发生蛋白：能够诱导动物或人体间充质细胞分化为骨、软骨、韧带、肌腱和神经组织。与胚胎骨骼形成有关的蛋白质，在骨形成的数个阶段均起作用，由形态发生的早期阶段开始，并延续至出生后。在中枢神经的发生中也起着关键作用。
靶基因：即目的基因，在分子遗传中，它不仅要具有识别结合功能，还应该具有与位点结合后能表达你所需要的相应功能的作用。
文题释义：
骨形态发生蛋白：能够诱导动物或人体间充质细胞分化为骨、软骨、韧带、肌腱和神经组织。与胚胎骨骼形成有关的蛋白质，在骨形成的数个阶段均起作用，由形态发生的早期阶段开始，并延续至出生后。在中枢神经的发生中也起着关键作用。
靶基因：即目的基因，在分子遗传中，它不仅要具有识别结合功能，还应该具有与位点结合后能表达你所需要的相应功能的作用。摘要
背景：诱导成骨细胞分化为骨细胞是组织工程中的研究热点，但分化过程中的调节机制尚未完全阐明。MicroRNA是一类内源性小RNA分子，可通过与靶基因mRNA的3’端非编码区结合在转录后水平调控基因表达。研究证实，microRNA在骨细胞分化过程中起到重要的调节作用。
目的：研究miR-155对成骨细胞骨分化的调节作用以及作用机制。
方法：取小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞，加入小鼠骨形态发生蛋白2(200 μg/L)进行成骨诱导，并与诱导第1，3，7，14天，通过qRT-PCR检测miR-155 mRNA的表达。并将MC3T3-E1细胞分为对照组、诱导组、miR-155组和miR-155 inhibitor组，对照组用α-MEM培养基培养，诱导组在培养基中加入骨形态发生蛋白2进行成骨诱导，miR-155组和miR-155 inhibitor组在成骨诱导之前分别转染miR-155和miR-155拮抗剂，诱导2周。
结果与结论：①茜素红染色及碱性磷酸酶活性测定：经骨形态发生蛋白2诱导后，miR-155 mRNA表达呈时间依赖性下调。诱导组MC3T3-E1细胞茜素红着色强度、碱性磷酸酶活性和mRNA表达也显著高于对照组(P < 0.01)；miR-155组茜素红着色强度明显低于诱导组，碱性磷酸酶活性和mRNA也明显低于对照组(P < 0.01)，而miR-155 inhibitor组则呈反向变化(P < 0.05)；②荧光报告基因检测和western blot检测：miR-155可与SMAD5 mRNA 3’非编码区结合，并明显降低MC3T3-E1细胞中SMAD5蛋白和mRNA表达(P < 0.01)。结果表明，miR-155可通过负性调控SMAD5表达，抑制MC3T3-E1细胞的成骨分化。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0003-2618-0786(杨军)
中图分类号:
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文题释义：
骨形态发生蛋白：能够诱导动物或人体间充质细胞分化为骨、软骨、韧带、肌腱和神经组织。与胚胎骨骼形成有关的蛋白质，在骨形成的数个阶段均起作用，由形态发生的早期阶段开始，并延续至出生后。在中枢神经的发生中也起着关键作用。
靶基因：即目的基因，在分子遗传中，它不仅要具有识别结合功能，还应该具有与位点结合后能表达你所需要的相应功能的作用。