急性不完全脊髓损伤模型大鼠相关炎症因子的表达

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.18.004

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (18): 2806-2811.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.18.004

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急性不完全脊髓损伤模型大鼠相关炎症因子的表达

宗少晖¹，方晔²，彭金珍²，高太行²

¹广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科，广西壮族自治区南宁市 530021；²广西医科大学研究生学院，广西壮族自治区南宁市 530021

收稿日期:2014-02-17 出版日期:2014-04-30 发布日期:2014-04-30
通讯作者: 宗少晖，男，1972年生，广西桂林市人，2005年毕业于北京大学，博士后，教授，硕士生导师，主要从事脊柱脊髓损伤机制研究。
作者简介:宗少晖，男，1972年生，广西壮族自治区桂林市人，瑶族，2005年北京大学毕业，博士，教授，主要从事脊髓损伤研究。
基金资助:
广西教育厅科研基金资助项目(广西高校科研项目 201204LX063)

The expression of inflammatory factors in different periods after acute spinal cord injury in rats

Zhong Shao-hui¹, Fang Ye², Peng Jin-zhen², Gao Tai-hang²

¹Department of Spine Osteopathia, the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University; ²Graduate School of Guangxi Medical University, Nanning, Guangxi, 530021, China

Received:2014-02-17 Online:2014-04-30 Published:2014-04-30
About author:Zong Shao-hui, M.D., Professor, Department of Spine Osteopathia, the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China
Supported by:
the Science Research Project for Institutions of Higher Education from Guangxi Department of Education, No. 201204LX063

摘要/Abstract

摘要：

背景：随着现代交通和工矿事业的发展，脊髓损伤成为临床常见的多发病，严重的影响了人类身心健康和生活质量。
目的：检测在大鼠急性脊髓损伤模型中磷酸化信号转导与转录激活因子3（p-STAT3）介导的IL-1β、IL-6、IL-17等炎症因子的表达变化情况，探讨IL-1β、IL-6、IL-17等炎症因子在急性脊髓损伤后炎症反应过程中的作用。
方法：雄性成年SD大鼠75只，随机分为对照组和脊髓损伤1h、6h、24h和72h四个亚组（n=15只）。采用改良Allen氏法建立脊髓损伤模型，对照组仅行椎板全切除术。在建模之后相应的时间点获取损伤段脊髓、脾脏组织，免疫组织化学染色法检测IL-6和IL-17在损伤段脊髓组织中的分布及表达情况，蛋白免疫印迹法检测p-STAT3在损伤段脊髓组织中的表达变化，采用RT-PCR法检测IL-1βmRNA、IL-6mRNA和IL-17AmRNA在脾脏组织中的表达情况。
结果与结论：脊髓损伤后p-STAT3、IL-1β、IL-6和IL-17的表达明显高于对照组（P＜0.05）。损伤后炎症因子表达量立即升高，IL-1β和IL-6在损伤后6h小时到达高峰，随后开始下降；p-STAT3和IL-17在损伤后24h到达高峰，随后开始下降，至损伤后72h表达量仍高于对照组。损伤早期p-STAT3介导的促炎因子IL-1β和IL-6表达增加，可能导致损伤区域炎症级联放大，诱导继发性脊髓损伤；促炎因子IL-17的异常升高，可能在继发性损伤炎症反应中起着重要作用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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关键词: 实验动物, 组织构建, 白细胞介素1β, 白细胞介素6, 白细胞介素17, p-STAT3, 脊髓损伤

Abstract:

BACKGROUND: With the development of modern transportation and mining industrial, spinal cord injury has become a common clinical frequently-occurring disease which was serious influence human physical health and quality of life.

OBJECTIVE: To investigate the inflammatory factors expression of interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-17A (IL-17A) in the rat model of acute spinal cord injury via phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3 (p-STAT3) and explore the role of interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-17A (IL-17A) in the acute inflammatory reaction after spinal cord injury.

METHODS: A total of 75 adult male SD rats were divided into two groups, the sham operation group and the spinal cord injury group; then put them into the subgroups randomly, which were 1h, 6h, 24h and 72h (n = 15) Acute spinal cord injury rat model was established by the modified Alleng weight drop method. The sham operation group just underwent laminectomy. The rats were sacrificed at corresponding time after operation and spinal cord, spleen tissues were collected. Immunohistochemical used to detect the expressions of IL-6 and IL-17 in spinal cord tissue injury segment dynamic changes, mRNA expression of IL-1β, IL-6 and IL-17A were detected by RT-PCR, Western blot used to detect the expressions of p-STAT3 dynamic changes.

RESULTS AND CONCLUSION: The average expression level of p-STAT3, IL-1β, IL-6, and IL-17 in SCI group had significant increased from those in the sham operation group. The expression of inflammatory cytokines IL-1β and IL-6 immediately increased following injured and peaked at 6 h; the expression of IL-17 and p-STAT3 immediately increased and peaked at 24 h; then sluggishly decreased, but its expression of 72h after injury still more than the sham operation group(P <0. 05). The expression of pro-inflammatory cytokines IL-1β and IL-6 had significant increased following early injured via p-STAT3 may be play a role in secondary spinal cord injury by inflammatory cascade; abnormally elevated pro-inflammatory cytokines IL-17, possibly in secondary injury plays an important role in inflammation.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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Key words: spinal cord injuries, interleukin-1 beta, interleukin-6, interleukin-17

中图分类号:

R318

宗少晖，方晔，彭金珍，高太行. 急性不完全脊髓损伤模型大鼠相关炎症因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(18): 2806-2811.

Zhong Shao-hui, Fang Ye, Peng Jin-zhen, Gao Tai-hang. The expression of inflammatory factors in different periods after acute spinal cord injury in rats[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(18): 2806-2811.

图/表（结果） 3

2.1 实验动物数量分析实验选用大鼠75只，分为5组，造模成功，实验过程无动物脱失，全部进入结果分析。

2.2 急性不完全脊髓损伤模型大鼠区组织免疫组织化学染色结果

白细胞介素6表达：高倍镜下观察发现，白细胞介素6阳性表达主要在灰质内的神经胶质细胞和小胶质细胞，细胞的胞浆呈棕黄色或棕褐色颗粒。对照组脊髓组织中只能检测到少量的阳性表达细胞；脊髓损伤后1 h，在损伤附近灰质内检测到白细胞介素6的阳性细胞；脊髓损伤后6 h，在损伤的背腹侧、脊髓灰质内均可见阳性表达，中央管附件区域灰质内神经元细胞的阳性表达高于脊髓其他区域，表达量到达峰值，而后缓慢下降；脊髓损伤后24 h至72 h，白细胞介素6仍有阳性表达，主要在损伤临近区域脊髓灰质可检测到阳性细胞。

白细胞介素17表达：白细胞介素17阳性表达细胞的胞浆呈棕黄色或棕褐色颗粒。对照组脊髓组织中只能检测到少量白细胞介素17的阳性表达细胞；脊髓损伤后1 h，在损伤附件区域检测到白细胞介素17的较多阳性表达细胞；脊髓损伤后24 h，在损伤的背腹侧、脊髓白质、灰质内均可见阳性表达，中央管附件区域灰质内神经元细胞的阳性表达高于脊髓其他区域，表达量到达峰值，而后缓慢下降；脊髓损伤后24 h至72 h，白细胞介素17仍有阳性表达，主要在损伤临近区域脊髓白质、灰质可检测到阳性细胞。

脊髓损伤各亚组间比较白细胞介素6、白细胞介素17表达差异有显著性意义(P < 0.05)，脊髓损伤组白细胞介素6、白细胞介素17阳性表达明显高于对照组(P < 0.05，表1)。

2.3 大鼠脾脏、脊髓组织p-STAT3 Western blot检测结果对照组脊髓、脾脏组织中p-STAT3的表达量较少；脊髓损伤1 h后，p-STAT3的表达量开始上升，24 h p-STAT3的表达量到达峰值，随后开始缓慢下降；24-72 h，p-STAT3的表达量仍高于对照组。各时间组比较p-STAT3表达差异有显著性意义(P < 0.05)，脊髓损伤组在不同时间点p-STAT3阳性表达明显高于对照组(P < 0.05，表2)。

2.4 脊髓损伤模型大鼠不同时间点脾细胞白细胞介素1β mRNA、白细胞介素6 mRNA和白细胞介素17A mRNA表达水平 RT-PCR检测显示，脊髓损伤组中大鼠脾脏的白细胞介素1β mRNA、白细胞介素6 mRNA和白细胞介素17A mRNA相对表达水平明显高于正常对照组。脊髓损伤后1 h白细胞介素1β mRNA、白细胞介素6 mRNA和白细胞介素17A mRNA的相对表达水平开始增加，白细胞介素1β mRNA和白细胞介素6 mRNA至6 h上升至峰值，白细胞介素17A mRNA至24 h上升至峰值随后开始缓慢下降；24-72 h白细胞介素1β mRNA、白细胞介素6 mRNA和白细胞介素17A mRNA的相对表达量仍高于对照组，各时间组比较白细胞介素1β mRNA、白细胞介素6 mRNA和白细胞介素17A mRNA表达比较差异有显著性意义(P < 0.05，表3)。

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引言

随着现代交通和工矿事业的发展，脊髓损伤成为临床常见多发病，由原发性脊髓损伤和继发性脊髓损伤两种损伤机制联合严重影响人类健康和生活质量的致残性损伤^[1]。原发性脊髓损伤是脊髓组织遭受外力损伤后瞬间引起的组织损坏，是不可逆性损伤。损伤后在原发性损伤的基础上因多种因素参与而引发的脊髓组织进行性、自毁性级联放大的破坏过程称为继发性脊髓损伤，其损害程度远远超过了原发性脊髓损伤^[2]。因此，研究继发性脊髓损伤免疫机制，在预防和逆转继发性脊髓损伤以及最大程度地保留残存的脊髓功能和促进损伤脊髓结构及功能重建具有重要意义。

最近研究报道，在脊髓损伤模型大鼠脊髓损伤后继发性损伤中JAK/STAT3信号转导通路是异常激活的，信号转导和转录激活因子3(Signal transducer and activator of transcription，STAT3)在继发性脊髓损伤细胞凋亡过程中可能起着重要调控作用^[3]。

白细胞介素1β和白细胞介素6是具有广泛生物学效应的细胞因子，机体内多种有核细胞都可能产生白细胞介素1β和白细胞介素6，如单核细胞、B细胞、T细胞、纤维母细胞和内皮细胞等^[4-5]。Frei等^[6]报道脑内白细胞介素1β和白细胞介素6可能来源于小胶质细胞和星形胶质细胞。脊髓损伤早期神经元和神经胶质细胞分泌产生的细胞因子白细胞介素1β和白细胞介素6能调节中枢神经系统内细胞生长和功能，参与中枢神经内的炎症反应和免疫反应，可能是导致损伤区域炎症反应放大，造成损伤后继发免疫损伤的重要因素^[7]。

白细胞介素17是最近新发现的具有强致炎性作用的细胞因子，主要来源于CD4⁺T细胞亚群中的Th17细胞，其家族包括6个成员(白细胞介素17A-F)，其中以白细胞介素17A最常见且活性最强^[8]。白细胞介素17能有效的介导中性粒细胞动员的兴奋过程，从而将适应性免疫与固有免疫链接起来，有效的介导了组织的炎症反应。大量研究表明，白细胞介素17与自身免疫性脑脊髓炎和多种炎症感染性疾病的发生发展过程有着密切的联系，可介导胞外防御反应、抗肿瘤和移植排斥等病理生理过程，是近几年炎症免疫学的研究热点^[9]。

Ankeny等^[10]在研究脊髓损伤后T细胞亚群的变化时发现，抗炎细胞Th2/Treg和促炎细胞Th1/Th17均有激活，说明在脊髓损伤后脊髓炎性损伤中Th17细胞可能起到了一定作用。同时，STAT3的异常激活可以调控Th17细胞的分化，白细胞介素17的分泌^[11]。因此实验通过制备急性脊髓损伤模型，探讨STAT3介导的在实验性脊髓损伤中白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素17等炎症因子的表达变化情况，旨在探讨脊髓损伤后相关炎症因子在继发性脊髓损伤中是否存在潜在的生物学意义，为临床治疗继发性脊髓损伤提供新的思路。

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材料方法

设计：随机对照动物实验。

时间及地点：实验于2013年5至9月在广西医科大学实验中心完成。

材料：

实验动物：成年健康雄性SD大鼠75只(广西医科大学动物实验中心提供)，体质量(250±25) g。实验过程中对动物处理符合动物伦理学标准。

检测急性脊髓损伤模型大鼠相关炎症因子表达实验所需的主要试剂：
试剂及引物	来源
兔抗鼠白细胞介素6、白细胞介素17多克隆抗体(浓缩型)、兔抗大鼠p-STAT3多克隆抗体	Santa Cruz 公司
DAB显色试剂盒、通用性SP-9000试剂盒	北京中杉金桥生物科技有限公司
HRP标记的山羊抗兔IgG	武汉博士德技术有限公司
RAPI蛋白裂解液	上海碧云天生物技术有限公司
BCA蛋白浓度测定试剂盒	北京索莱宝科技有限公司
总RNA提取试剂Trizol	Invitrogen公司
RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis	Kit Fermentas
Taq酶、DNA Marker B	上海生工生物公司
引物	由大连宝生物工程有限公司设计合成

实验方法：

实验动物及模型制备：成年健康雄性SD大鼠75只随机分为对照组和脊髓损伤1，6，24和72 h 4个亚组(n=15只)。运用改良Allen氏重物击落法制作大鼠急性脊髓损伤模型。用10%(400 mg/kg)的水合氯醛腹腔内注射麻醉，俯卧位固定，无菌操作。逐层切开皮肤及皮下组织，暴露T₈-T₁₀椎板，用微型咬骨钳咬除T₉棘突及全椎板，充分暴露硬脊膜并在硬脊膜表面垫一垫片，将重5 g的克氏针从60 mm高处垂直下落，造成大鼠脊髓不完全损伤后迅速移开打击物，对照组只做T₉棘突及全椎板切除术。模型制备成功的标准：重物打击后，大鼠尾巴出现痉挛性摆动及躯体回缩扑动和双下肢瘫痪。造模后各组大鼠均肌肉注射青霉素30 000 U，2次/d，直至各分组预定处理时间。分笼饲养，自由进食，膀胱按摩协助排尿2次/d。

组织固定、取材与切片：分别于造模后4个时间点 (1，6，24，72 h)各取大鼠15只，水合氯醛腹腔内麻醉，左心室插管，切开右心耳，快速灌注4 ℃生理盐水200 mL，再灌注40 g/L多聚甲醛250 mL，以损伤点为中心取长约 8 mm的脊髓，一部分做免疫组织化学检测，40 g/L多聚甲醛固定过夜，常规石蜡包埋、切片(横切)，片厚5 μm；另一部分行蛋白免疫印迹法检测。无菌条件下取大鼠脾脏组织，于液氮中迅速冷冻保存。

免疫组织化学染色：对每例大鼠脊髓标本随机切取数张切片，采用SP法免疫组织化学染色检测白细胞介素6、白细胞介素17表达。一抗过夜，工作浓度为1∶100，滴加二抗、HRP工作液，DAB显色。光学显微镜下观察脊髓组织染色结果，免疫阳性细胞表现为胞浆呈棕黄色或棕褐色着色。光学显微镜400×镜下每张切片选取10个不同视野，运用病理图像分析仪Leica QWin图像分析软件下，根据同一标准染色的灰度，计算出白细胞介素6、白细胞介素17的平均灰度值。

蛋白免疫印迹法检测：取每例大鼠脊髓标本约100 mg，液氮中研磨，蛋白裂解液中匀浆，4 ℃、12 000 r/min离心(离心半径6 cm)10 min后收集上清液，BCA法测定蛋白含量后行SDS-PAGE电泳，半干法转至PVDF膜(Millipore，USA)，5%脱脂奶粉37 ℃封闭1 h，加入一抗p-STAT3 (1∶1 000)4 ℃过夜，37 ℃下二抗(1∶2 000)孵育1 h，显色成像，Image-ProPlus软件进行图片条带灰度值分析。

RT-PCR法：无菌操作，取每例大鼠脾脏组织约50 mg，做RT-PCR检测。运用Trizol法提取标本组织总RNA，取总量RNA 1 μg用反转录法反转录为cDNA。

95 ℃预变性5 min，95 ℃ 30 s，60 ℃ 30 s，72 ℃延伸40 s，35个循环，72 ℃再延伸10 min。取PCR产物6 μL在琼脂糖凝胶上电泳，凝胶成像系统下观察并采集图片，用Image J软件对图像进行平均灰度值分析。

主要观察指标：①不同时间点大鼠脊髓损伤区组织白细胞介素6、白细胞介素17染色阳性细胞灰度值。②脊髓损伤大鼠在不同时间点脾脏、脊髓组织p-STAT3表达水平。③脊髓损伤大鼠不同时间点脾细胞白细胞介素1β mRNA、白细胞介素6 mRNA和白细胞介素17AmRNA表达水平。

引物：

白细胞介素1β mRNA

上游引物：5’- GCT ATG GCA ACT GTC CCT GAA C -3’，

下游引物：5’- CGA GAT GCT GCT GTG AGA TTT G-3’，

扩增片段大小为172 bp。

白细胞介素6 mRNA

上游引物：5’- GTC TCC TAT GGT GGG TGT TG -3’，

下游引物：5’- CAG AGG ATA CCA CCC ACA AC -3’，

扩增片段大小为156 bp。

白细胞介素17A mRNA

上游引物：5’-GGG AAG TTG GAC CAC CAC CT -3’，

下游引物：5’-TTC TCC ACC CGG AAA GTG AA -3’，

扩增片段大小为101 bp。

管家基因β-actin

上游引物：5’-GAG AGG GAA ATC GTG CGT GAC-3’，

下游引物：5’-CAT CTG CTG GAA GGT GGA CA -3’，

扩增片段大小为452 bp。

统计学分析：各组实验数据采用SPSS 17.0统计软件包进行分析，以x(_)±s表示，P < 0.05为差异有显著性意义。用单因素完全随机方差分析(ANOVA)比较各分组的数据均数，并做多组间两两均数比较(LSD-t 检验法)，相关性分析采用Spearman等级相关分析。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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炎症因子是调节免疫反应的主要递质，是联接免疫细胞与免疫细胞、免疫细胞与其他细胞的桥梁。白细胞介素1β和白细胞介素6主要由活化的巨噬细胞/小胶质细胞分泌，在脊髓损伤早期神经元和胶质细胞也可分泌产生。作为细胞间信号传导的递质，白细胞介素1β和白细胞介素6调控中枢神经系统的炎症、自身免疫反应、外伤等机体防御性反应。白细胞介素1β可促进血液中的多形核和巨噬细胞浸润到炎症部位，白细胞介素6可促进星形胶质细胞的活化，导致胶质瘢痕的形成，是导致神经功能永久丧失的重要因素。

在作者的早期研究中通过免疫组织化学观察脊髓损伤后大鼠脊髓白细胞介素1β的动态变化，发现白细胞介素1β在损伤后1 h立即升高，48-72 h下降到稍高于对照组，对照组添加白细胞介素1β受体拮抗剂可有效保护脊髓急性损伤^[12]。

本次实验中，对损伤段脊髓中白细胞介素6的表达进行观察。发现白细胞介素6在脊髓损伤后1 h开始升高，6 h到达高峰后缓慢下降，24-72 h表达量仍高于对照组，这也与郑晶晶等^[7]的实验结果相符。脾脏是机体中枢免疫器官之一，也是机体最大的淋巴免疫器官，是淋巴细胞增殖、分化的重要场所，通过多种机制发挥抗炎、抗肿瘤作用，脾脏组织白细胞介素1β mRNA和白细胞介素6 mRNA表达趋势与脊髓组织完全一致。

Th17细胞的发现源于实验性自身免疫性脑脊髓炎和胶原性关节炎^[13-17]，以特异性性分泌白细胞介素17A(即白细胞介素17)而著称。目前，研究证实的白细胞介素17A是一种促进炎症的细胞因子，具有强大的募集和激活中性粒细胞能力，可以诱导活化T细胞及刺激成纤维细胞、巨噬细胞和上皮细胞产生白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、金属蛋白酶和化学增活素等促炎递质进一步诱导炎症^[18-33]，参与机体的炎症反应。

Ankeny等^[10]在研究脊髓损伤后T细胞亚群的变化时发现，抗炎细胞Th2/Treg和促炎细胞Th1/Th17均有激活，说明在脊髓损伤后脊髓炎性损伤中Th17细胞可能起到了一定作用。本次实验中，对损伤段脊髓中白细胞介素17的表达运用免疫组织化学染色方法进行观察。发现白细胞介素17在脊髓损伤后1 h开始升高，24 h到达高峰后缓慢下降，24-72 h表达量仍高于对照组，脾脏组织白细胞介素17A mRNA表达趋势与脊髓组织免疫组织化学的结果完全一致。

STAT3是JAK-STAT信号通路中一种重要的核转录因子，磷酸化的STAT3(p-STAT3)在细胞的增殖、分化凋亡及免疫调节等过程中发挥着重要作用。近年来对Th17细胞分化过程的研究报道中发现在白细胞介素6、白细胞介素21、白细胞介素23及转化生长因子β等多种细胞因子共同作用下，通过丝氨酸激酶或YAK诱导转化为P-STAT3并形成二聚体进入细胞核，可能与白细胞介素17启动子直接结合并且调节其转录，进一步促进Th17细胞的分化有关^[34-37]。

Wang等^[38]通过白细胞介素17基因敲除小鼠发现内源性白细胞介素17作用于肿瘤细胞本身或周围间质细胞，促进上述细胞分泌白细胞介素6，通过白细胞介素6活化STAT3信号转导通路，发挥促进肿瘤生长转移的作用。本实验通过对脊髓损伤段组织的Western blot法检测显示，对照组的p-STAT3表达极少，说明脊髓组织里的STAT3在正常生理情况下可能主要以非磷酸化的形式存在。脊髓损伤后1 h p-STAT3表达量缓慢上升至24 h时到达峰值，然后缓慢下降，72 h的表达量仍高于1 h，这符合JAK-STAT信号通路的代谢机制和快速启动及瞬间消失的显著特性^[39]，在正常生理环境下，JAK-STAT会发生瞬间的磷酸化，这种活化状态只持续数分钟至几小时^[40]。脊髓损伤各时间点的表达量p-STAT3均高于对照组，说明磷酸化的STAT3是脊髓损伤后的主要存在形式，进一步说明STAT3信号通路在脊髓损伤后是被异常激活的。

综上所述，实验发现：脊髓损伤大鼠模型损伤段脊髓组织中白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素17A不仅在蛋白水平而且在基因水平上表达均呈阳性，而且较正常对照组的表达量明显上调。同时，对p-STAT3蛋白表达水平研究发现，较正常对照组相比表达量亦是明显升高的。脊髓损伤早期，发现促炎因子白细胞介素1β和白细胞介素6表达明显上调，可能导致损伤区域的免疫反应失调，炎症反应级联放大，这可能是造成继发性炎症反应的重要因素。在脊髓局部损伤后使用白细胞介素1β受体拮抗剂而产生脊髓保护作用。脊髓损伤晚期，强促炎因子白细胞介素17在蛋白基因水平的表达上调很有是在继发性炎症反应中扮演重要角色。

此外，白细胞介素6是目前公认的促进CD4⁺T淋巴细胞向Th17细胞分化的关键性细胞因子，推测STAT3蛋白在白细胞介素6的诱导下发生磷酸化而活化，p-STAT3转入细胞核，诱导Th17细胞特异性因子白细胞介素17的表达，促使CD4⁺T细胞向Th17细胞分化，加重继发性脊髓损伤的炎症反应。

实验结果显示，白细胞介素1β、白细胞介素6、白细胞介素17和p-STAT3四者损伤后随时间变化曲线非常相似，说明四者关系密切；介于白细胞介素1与p-STAT3的调节免疫机制，还需在下一步的实验中来研究证明。由此可见，炎症因子是重要的免疫调节介质，这些炎症因子作用于脊髓组织，在原发性脊髓损伤的基础上进一步诱发继发性脊髓损伤，导致脊髓进一步坏死、凋亡和神经功能丧失，造成脊髓功能永久性丧失。适时恰当的控制炎症因子的表达，从而调控机体的免疫反应，可能在避免继发脊髓损伤促进脊髓恢复起着重要作用。

急性不完全脊髓损伤模型大鼠相关炎症因子的表达

The expression of inflammatory factors in different periods after acute spinal cord injury in rats

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