设计：对比观察动物实验。
时间及地点：于2008年4月至2011年8月在华北煤炭医学院动物实验室完成。
材料：
实验动物及分组：新西兰大耳白兔30只，雌雄不拘，体质量2.5-2.7 kg，由山西省医用组织库实验动物中心提供。随机分成10组，每组3只，用来研究植入后1，2，3，6，9，12，15，18，25，30 d，加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统的体内释药特性；各组动物在实验前均常规喂养2周。
加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释系统体内释药特性实验的试剂与仪器：
实验方法：
加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释制剂的制作：将聚癸二酸酐与加替沙星原料药按加替沙星含量为20%比例在研钵内充分混合，研磨，加入自制模具内，压紧，然后按空白聚癸二酸酐棒的制备方法制备，制成质量(40.0±1.0) mg、大小为直径3 mm×长5 mm的药棒，加替沙星含量为20%。将加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂密封，60Co辐照灭菌，辐照剂量为20 kGy，-40 ℃保存备用。
加替沙星-聚癸二酸酐局部缓释制剂的体内释药实验：实验前1 d，将30只新西兰大耳白兔右侧髂腰部及右后肢用脱毛液脱毛，随机分成10组，每组3只，麻醉后取仰卧位，在右侧膝关节上3 cm处做股骨前外侧纵行切口，切开皮肤、皮下骨膜，用3 mm钻头的手钻，在该处钻2个纵向相连、部分重叠的骨洞，用尖嘴咬骨钳将骨洞修整成3 mm×6 mm大小的骨窗。将加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂放入髓腔内，用骨蜡封闭骨窗，逐层缝合伤口，术后回笼饲养。
血标本采集：术后1，2，3，6，9，12，15，18，25，30 d处死动物，每组动物处死前无菌心脏采血3 mL，肝素抗凝，4 000 r/min离心15 min，吸取上清液，-20 ℃存放待测。
骨组织及骨髓组织标本的采集：各组动物采集完心脏血后，空气栓塞法处死各组动物，取出右侧股骨，用尖嘴咬骨钳咬开股骨，以离药棒两端1 cm处为中心点，在中心点两侧0.5 cm宽度内，采取松质骨及骨干皮质骨标本，骨髓标本取自距药棒边缘0.5 cm处的干骺端。用研钵、研棒进一步粉碎骨标本，称骨粉100 mg，加入含有2 mL 0.1 mol/L的PBS(pH值=7.0)试管中，充分匀浆10 min，4 000 r/min离心15 min，吸取上清液，-20 ℃存放待测。取骨髓组织100 mg，加入含有2 mL 0.1 mol/L的PBS(pH值=7.0)试管中，充分匀浆10 min，4 000 r/min离心15 min，吸取上清液，-20 ℃存放待测。
高效液相色谱法测定各标本内加替沙星浓度[1-3]：
溶液的配置：①pH值7.0 PBS：在100 mL容量瓶内，加磷酸二氢钾0.68 g，0.1 mol/L氢氧化钠溶液 29.10 mL，用蒸馏水稀释至100 mL。②加替沙星标准品储备液：精密称取加替沙星标准品4.20 mg，加入到100 mL容量瓶内，然后加入乙腈-水(3∶10)至刻度，配制成42 mg/L加替沙星标准品储备液。③左氧氟沙星标准品储备液：精密称取左氧氟沙星标准品25.00 mg，加入到25 mL容量瓶内，然后加入乙腈-水(3∶10)至刻度，配制成1 g/L加替沙星标准品储备液。
色谱条件：高效液相色谱仪；色谱柱(Venusil MP-C18 4.6 mm×250 mm，5 µm，安捷伦科技有限公司)；流动相为乙腈-水-十二烷基硫酸钠(500∶500∶3.5)，用磷酸调pH值为3.0；流速1.0 mL/min；检测波长290 nm；柱温35 ℃；进样量20 µL。
方法的专属性：在上述色谱项条件下测得色谱图。
样品预处理：精密量取空白血浆、骨与骨髓组织匀浆液各0.25 mL，分别加入内标溶10.0 µL，pH值7.0 PBS 0.25 mL和二氯甲烷5.0 mL混合后，漩涡振荡 5 min，4 000 r/min离心15 min，吸取下层有机相，然后再加入二氯甲烷5.0 mL，混合提取1次，吸取下层有机相，放入另一试管中，在40 ℃水浴内用氮气将二氯甲烷溶液吹干，残渣加1 mL乙腈-水(3∶10)溶解，取20 µL进样。
标准曲线的配制：于空白血浆、空白骨与骨髓匀浆液中加入加替沙星标准品，使质量浓度分别为5.376，2.688，1.344，0.672，0.336，0.168，0.084，0.042 mg/L的标准血浆样品，按上述“样品预处理”方法操作进行，分别以对照品峰面积与内标峰面积比值(Y)对加替沙星浓度(C)进行回归计算，求其直线回归方程。
回收率实验：配制血浆、骨与骨髓组织匀浆液样品5.376，0.672，0.042 mg/L 3种不同质量浓度各5份，按照“样品预处理”方法进行，以实测浓度与理论浓度之比计算相对回收率。取加替沙星标准品溶液适量于试管内，用乙腈-水(3∶10)配成5.376，0.672，0.042 mg/L工作液，每种质量浓度做5份，取20 µL进样分析，记录加替沙星峰面积，计算绝对回收率。
精密度实验：分别配制血浆、骨与骨髓组织匀浆液样品5.376，0.672，0.042 mg/L 3种不同质量浓度，进行日内和日间精密度考察。①日内精密度：日内配置高中低3种不同质量浓度样品，每种浓度做5份，每份样品测定2次，求其日内差。②日间精密度：每天配置高中低3种不同质量浓度样品，一次进行测定，连续配制测定5 d，求其日间差。根据公式计算日间差。
电镜观察加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂的表面及内部结构变化：将降解剩余的药棒常规方法制样，经过冷冻干燥、喷金，用JSM-6360LV扫描电镜观察加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂的表面和内部变化。
主要观察指标：①测定各组织内加替沙星浓度。②加替沙星-聚癸二酸酐缓释制剂植入前后的结构变化。
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