柚皮甙诱导兔骨髓间充质干细胞的成骨特征

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.14.020

中国组织工程研究 ›› 2013, Vol. 17 ›› Issue (14): 2603-2608.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.14.020

• 干细胞与中医药 stem cells and traditional Chinese medicine • 上一篇下一篇

柚皮甙诱导兔骨髓间充质干细胞的成骨特征

杨渊¹，李小峰¹，罗道明²，温超海²

1广西骨伤医院，广西壮族自治区南宁市 530012
2广西中医学院，广西壮族自治区南宁市 530000

收稿日期:2012-07-24 修回日期:2012-09-14 出版日期:2013-04-02 发布日期:2013-04-02
通讯作者: 李小峰，硕士，医师，广西骨伤医院，广西壮族自治区南宁市 530012 lxfeng2000@126.com
作者简介:杨渊，男，1962年生，广东省湛江市人，汉族，1984年广西医科大学毕业，教授，主要从事脊柱外科及组织工程研究。 yangy062@Sina.com
基金资助:
广西科技厅资助项目(桂科攻 0816004-15)；广西卫生厅资助项目(重 200863)。

Osteogenic characteristics of Naringin-induced rabbit bone marrow mesenchymal stem cells

Yang Yuan¹, Li Xiao-feng¹, Luo Dao-ming², Wen Chao-hai²

1 Guangxi Orthopaedic Traumatology Hospital, Nanning 530012, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China
2 Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530000, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China

Received:2012-07-24 Revised:2012-09-14 Online:2013-04-02 Published:2013-04-02
Contact: Li Xiao-feng, Master, Physician, Guangxi Orthopaedic Traumatology Hospital, Nanning 530012, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China lxfeng2000@126.com
About author:Yang Yuan, Professor, Guangxi Orthopaedic Traumatology Hospital, Nanning 530012, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China yangy062@Sina.com
Supported by:
Department of Science and Technology of Guangxi Zhuang Autonomous Region, No. Guikegong0816004-15; Department of Health of Guangxi Zhuang Autonomous Region, No. Zhong200863

摘要/Abstract

摘要：

背景：骨碎补能在促进骨生长且取得了良好的临床疗效，其主要成分柚皮甙能否诱导骨髓间充质干细胞向成骨方向分化？
目的：用柚皮甙诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨方向分化。并观察柚皮甙诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的能力。
方法：用贴壁筛选法对兔骨髓间充质干细胞进行分离培养。对生长良好的第3代骨髓间充质干细胞分别用50 μg/L的柚皮甙和经典成骨诱导剂向成骨方向进行诱导，分别进行成骨鉴定。
结果与结论：经典成骨诱导液、柚皮甙诱导液都能使骨髓间充质干细胞向成骨方向分化，基质分泌增多，形成钙结节。用酶联免疫检测仪检测柚皮甙诱导组和经典成骨诱导组细胞吸光度值未见明显的差异。同时检测柚皮甙诱导液和L-DMEN细胞培养液的吸光度值发现两者差异无显著性意义(P > 0.05)。证实柚皮甙可成功诱导骨髓间充质干细胞向成骨方向分化，无明显毒性作用。

关键词: 干细胞, 干细胞培养与分化, 柚皮甙, 骨髓间充质干细胞, 成骨细胞, 细胞分化, 成骨诱导, 细胞培养, 碱性磷酸酶, Ⅰ型胶原, 省级基金, 干细胞图片文章

Abstract:

BACKGROUND: Drynaria can promote bone growth and has made good clinical curative effect. Can the main ingredients of Naringin induce bone marrow measenchymal stem cells to differentiation into osteoblasts?
OBJECTIVE: Through the use of Naringin to induce osteogenic differentiation of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells, to observe the osteogenic ability of Naringin-induced rabbit bone marrow mesenchymal stem cells.
METHODS: Adherence screening method was used to separate and culture the rabbit bone marrow mesenchymal stem cells. The well-grown third generation of bone marrow measenchymal stem cells were induced with 50 ug/L Naringin and classic osteogenic inducer respectively to differentiate into the osteoblasts, and the osteogenesis identification was performed.
RESULTS AND CONCLUTION: Both the classic osteogenic inducer and Naringin induced liquid could induce the bone marrow mesenchymal stem cells to differentiation into osteoblasts with increasing matrix secretion and calcium nodules formation. The enzyme-linked immunosorbent assay showed that there was no significant difference in absorbance value of the cells between the Naringin induction group and the classic osteogenic inducer group. There was no significant difference in absorbance value of the cells induced with Naringin induced liquid and L-DMEN culture medium (P > 0.05). The results indicate that Naringin can induce the bone marrow mesenchymal stem cells to differentiate into osteoblasts without obvious toxic effect.

Key words: stem cells, stem cell culture and differentiation, Naringin, bone marrow mesenchymal stem cells, osteoblasts, cell differentiation, osteogenic induction, cell culture, alkaline phosphatase, collagen type Ⅰ, provincial grants-supported paper, stem cell photographs-containing paper

中图分类号:

R394.2

杨渊，李小峰，罗道明，温超海. 柚皮甙诱导兔骨髓间充质干细胞的成骨特征[J]. 中国组织工程研究, 2013, 17(14): 2603-2608.

Yang Yuan, Li Xiao-feng, Luo Dao-ming, Wen Chao-hai. Osteogenic characteristics of Naringin-induced rabbit bone marrow mesenchymal stem cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2013, 17(14): 2603-2608.

图/表（结果） 4

2.1 兔骨髓间充质干细胞原代培养结果 刚接种的细胞镜下呈圆形，大小较均一，24 h后见部分贴壁的细胞呈圆形、椭圆形、立方形、对角形等不规则性^[8-9]，体积较悬浮的圆形细胞大，大小较均一，其核浆分界清楚，折光性强，绝大多数为单核、圆形，位于细胞中央。48 h后全量更换培养液，细胞逐渐铺开，呈成纤维细胞样克隆集落贴壁生长，呈放射状，直径大小不等。细胞轮廓呈长梭形，少量细胞呈星形，胞浆丰富，常有一两个细胞核，居中。随着培养时间的延长，这些贴壁细胞形成集落，集落大小不一，培养液中还有小圆型的细胞极形。细胞增殖迅速，集落之间相互靠进，最终细胞融合成单层，细胞梭形突起变长，排列有明显的方向性，呈漩涡状。

2.2 兔骨髓间充质干细胞传代细胞培养结果 传代细胞接种后6-8 h贴壁，而后逐渐伸展为梭形、多角形。传代后的细胞生长迅速，两三天可基本铺满培养瓶底。原代培养发现局部区域少许小而圆的细胞，经传代后消失。传代后细胞形态上无明显改变，随着传代次数的增加细胞开始老化，表现为细胞碎片的增多，细胞表现出明显的衰老现象，细胞增殖速度明显减慢，细胞形态变为扁平，细胞活力低下，遮光性差，增殖速度明显减慢直至停止^[10]。

2.3 兔骨髓间充质干细胞生长曲线 以时间(天)为横坐标，每天取6孔细胞吸光度值的平均值为纵坐标绘制细胞生长曲线图。传代后细胞生长曲线大致相同，细胞接种后一两天内数量无明显变化，第2天比第1天的细胞数量甚至还稍有减少。第3天起，进入对数增殖期，细胞大量增加，至第7天细胞数量达到高峰，以后细胞增长速度减慢，见图1。细胞倍增时间约为45 h。

2.4 兔骨髓间充质干细胞成骨诱导结果 加入经典成骨诱导液、柚皮甙成骨诱导液后，细胞扩增速度明显减缓甚至停止，1周后可观察到少许干细胞逐渐由梭形变为多角形，随着时间的延长，多角形的细胞增多并聚集成团，细胞周围基质分泌逐渐增多。3周后可观察到较大的钙结节。经Von Kossa染色后，可见较大的黑色钙结节，见图2；Ⅰ型胶原试剂染色后，在钙结节周围可见黄褐色的分泌物，见图3。碱性磷酸酶试剂盒染色后，细胞中的碱性磷酸酶，细胞核呈紫蓝色(苏木精复染)，阳性者胞浆中出现红色至红棕色颗粒，有些为棕褐色或咖啡色颗粒，见图4。细胞茜素红染色呈现橘红色，为强阳性结果，见图5。说明经典成骨诱导液和柚皮甙成骨诱导液都可使骨髓间充质干细胞基质矿盐沉积，形成钙结节。同时说明柚皮甙能起到促进骨髓间充质干细胞增殖、向成骨细胞分化的作用。具有进一步研发成治疗骨折愈合、抗骨质疏松或骨质吸收新药的前景。对照组细胞培养至3周时细胞形态扁平，宽大，遮光性差，增殖速度逐渐减慢。细胞铺满整个瓶底，部分细胞脱落。无钙结节形成，碱性磷酸酶、茜素红染色为阴性结果。

2.5 柚皮甙培养液毒性检测结果 柚皮甙诱导液和L-DMEN细胞培养液的吸光度值分别为0.406 5±0.014 1和0.404 8±0.056 1，差异无显著性意义(P > 0.05)，说明柚皮甙培养液对细胞无毒性。见图6。

2.6 柚皮甙成骨活性检测结果 见图7。

柚皮甙诱导组和经典成骨诱导组吸光度分别为0.429 5±0.056 1和0.429 8± 0.063 5，差异无显著性意义(P > 0.05)，说明柚皮甙培养液能促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向发展。

参考文献

[1] Kassem M,Kristiansen M,Abdallah BM.Mesenchymal StemCells:Cell Biology and Potential Use in Therapy. Basic Clin Pharmacol Toxicol.2004;95(5):209-214.

[2] Wang HS,Huang QX,Xu MS.Zhongyi Zhenggu.2001; 13(5): 6-8.王华松,黄琼霞,许申明.骨碎补对骨折愈合中血生化指标及TGF-β1表达的影响[J].中医正骨,2001,13(5):6-8.

[3] Xie YM,Xu YG,Zhao JN,et al.Zhongguo Zhongyi Jichu Yixue Zazhi.2004;10(1): 34-37.谢雁鸣,许勇钢,赵晋宁,等.骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度和细胞因子IL-6,IL-4,TNFa水平的影响[J].中国中医基础医学杂志, 2004,10(1):34-37.

[4] Liu JG, Xie YM, Zhao JN, et al. Zhongguo Shiyan Fangjixue Zazhi, 2004,10(5):31-34.刘剑刚,谢雁鸣,赵晋宁,等.骨碎补总黄酮胶囊对实验性骨质疏松症和镇痛作用的影响[J].中国实验方剂学杂志,2004,10(5):31- 34.

[5] Yang ZL,Wei YJ,He ZJ,et al.Zhongguo Zhongyao Zazhi. 2001; 26(10):34-36.杨中林,韦英杰,何执静,等.骨碎补不同炮制品中总黄酮及柚皮甙含量测定[J].中国中药杂志,2001,26(10):34-36.

[6] Wang YS, Li JP. Zhongguo Zhongyao Zazhi.1998;23(11): 45-46.王跃生,李计萍.骨碎补中柚皮甙的薄层定性定量方法的研[J].中国中药杂志,1998,23(11):45-46.

[7] Lin CB,Yang Y,Chen WP. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiuyu Linchuang Kangfu, 2011;15(1):12-16.林春博,杨渊,陈维平.低渗结合自然沉降法分离兔骨髓间充质干细胞及其鉴定[J].中国组织工程研究与临床康复, 2011,15(1): 12-16.

[8] Zhang LL,Wang ZY.Jiepou Kexue Jinzhan.2011;17(1):36-39.张丽丽,王稚英.骨膜提取物诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为类成骨细胞[J].解剖科学进展,2011,17(1):36-39.

[9] Wang CJ,Ying GY,Li X, et al.Jiangsu Yiyao.2011;37(11): 1244-1246.王长军,殷国勇,李翔,等.骨髓间充质干细胞与成骨细胞复合培养对成骨细胞增殖的影响[J].江苏医药,2011,37(11):1244-1246.

[10] Yu LF,Kong LQ,Zhu QS.Disi Junyi Daxue Xuebao.2009; 30(23): 2816-2818.于利峰,孔令擘,朱庆生.骨髓间充质干细胞建立的成骨细胞培养模型的研究[J].第四军医大学学报, 2009, 30(23)2816-2818.

[11] Hu W,Yu X,SU L.Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiuyu Linchuang Kangfu.2009; 13(1):169-172.胡炜,俞兴,徐林.骨髓基质细胞诱导分化成骨方法及相关研究进展[J].中国组织工程研究与临床康复,2009,13(1):169-172.

[12] Xu Y,Ma TC,Zhang GR.Zhongguo Shiyong Kouqiang Zazhi. 2011;4(10):609-701.徐延,马天驰,张桂荣.大鼠骨髓基质干细胞的分离培养及其向成骨细胞分化的研究[J].中国实用口腔科杂志,2011,4(10):609- 701.

[13] Chen GD,Yang HL,Wang LG, et al. Zhongguo Shiyong Kouqiang Zazhi.2010;14 (49):159-163.陈广东,杨惠林,王根林,等.髓间充质干细胞的成骨分化及临床应用[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(49):159-163.

[14] Wang X,Wu W,Li Z, et al.Guangdong Yixue Zazhi. 2011;32(3): 401-404.王瑒,吴文,李正,等.骨髓间充质干细胞向成骨细胞的定向诱导分化[J].广东医学2011;32(3):401-404.

[15] Lu YM,Cheng LM,Pei GX, et al.Shiyong Yixue Zazhi.2012; 28(9):1401-1405.吕玉明,程立明,裴国献,等.骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化的实验研究[J].实用医学杂志,2012,28(9):1401-1405.

[16] Shu XC,Liu JJ,Zhu DH,et al.Zhongguo Bingli Shengli Zazhi. 2010;26(7):1261-1264.舒晓春,刘君静,朱丹华,等.不同浓度的骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响[J].中国病理生理杂志, 2010, 26(7):1261-1264.

[17] Huang XP,Zhou N,Yang YY.Kouqiang Yixue Zazhi.2012; 28(8): 745-748.黄旋平,周诺,杨媛媛,等.兔骨髓间充质干细胞的体外分离培养、鉴定及向成骨细胞分化诱导[J].口腔医学研究,2012,28(8): 745-748.

[18] Zhan GP, Dai KR, Yan SG, et al.Effects of naringin on theproliferation and osteogenic differen tiation of human bone mesenchymal stem cell. Eur J Ph armacol. 2009;607(1-3): 1-5.

引言

材料方法

设计：细胞生物形态学观察。
时间及地点：于2009年10月至2011年10月在广西医科大学医学实验中心完成。
材料：健康SPF级新生兔，雌雄不限。在无菌环境下抽取骨髓，用贴壁筛选法培养骨髓间充质干细胞至第3代进行相关实验研究。所有动物均由广西医科大学动物实验中心提供，实验过程中对动物的处理符合动物伦理学标准。
柚皮甙诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨方向的分化实验主要试剂及仪器：
Main reagents and instruments:

实验方法：
L-DMEM细胞培养液及成骨诱导液的配制：
L-DMEM细胞培养液：含L-DMEM 87 mL，胎牛血清10 mL，100 U/mL青霉素1 mL，0.1 g/L链霉素 1 mL，2 mmol/L的 L-谷氨酰胺1 mL，配成含血清体积分数10%，pH=7.5的细胞培养液。
经典成骨诱导液：含L-DMEM 87 mL，Hyclone胎牛血清10 mL，100 U/mL青霉素1 mL，0.1 g/L链霉素1 mL，2 mmol/L的 L-谷氨酰胺1 mL，10^-7 mmol/L地塞米松；10 mmol/L β-甘油磷酸钠；50 mg/L维生素C。
柚皮甙成骨诱导液：含L-DMEM 87 mL，Hyclone胎牛血清10 mL，100 U/mL青霉素1 mL，0.1 g/L链霉素1 mL，2 mmol/L的L-谷氨酰胺1 mL，5 μg柚皮甙(纯度> 98%)。
兔骨髓间充质干细胞的分离与培养：采用低渗结合自然沉降法分离培养^[7]，脱颈法处死新西兰新生兔，置体积分数75%乙醇中浸泡3 min，无菌条件下取出双侧股骨，剔除股骨附属软组织、无血清L-DMEM冲洗2次，移至超净工作台内将股骨从中间用直剪剪断后，用1 mL注射器抽取骨髓同时尽量抽取髓腔血窦内细胞，移至离心管内，添加适量的无血清培养液用注射器反复冲打制成单细胞悬液。将其以1 000 r/min离心(离心半径15 cm) 5 min，弃上清液，加入L-DMEM细胞培养液重悬静置，最终以10⁵个/cm²的密度将细胞悬液移入培养瓶，置入37 ℃，体积分数5%CO^₂，pH=7.5，20%饱和湿度的培养箱内培养。取第3代的细胞从形态学、细胞功能、表型等多方面进行鉴定^[7]，证实其为骨髓间充质干细胞。
骨髓间充质干细胞的纯化和扩增：利用差异贴壁培养法纯化细胞。第1次于48 h后全量更换新鲜培养液，去除未贴壁细胞，后期待培养液变色时及时半量换液。原代培养有75%融合时可传代，移除培养液，加入0.25%胰蛋白酶1 mL 0.02% EDTA 1 mL于培养瓶中，刚好铺满瓶底，移至倒置显微镜下待大多数细胞核回缩，呈圆形，漂浮时即可加入胰蛋白酶3倍的培养液轻轻吹打终止消化，将消化后的细胞悬液移入离心管内以1 000 r /min离心(离心半径15 cm )5 min，弃上清液，加入L-DMEM细胞培养液重悬，静置1 min后，将上清液以2.0× 10⁵/cm²的浓度移入培养瓶内，置37 ℃，体积分数5%CO₂，pH=7.5，20%饱和湿度的培养箱内培养。按 1∶2比例传代。
骨髓间充质干细胞生长曲线的绘制：取生长良好的第3代细胞，消化制备成单细胞悬液，计数，调整细胞浓度为5×10⁷ L^-1，以每孔200 μL细胞悬液接种于96孔培养板，每板接种60孔，从第2天起，每天选6孔收获前4 h每孔加20 μL质量浓度为5 g/L的MTT。测定前吸干上清液，加150 μL二甲基亚砜。振荡5 min后，于490 nm波长，在酶联免疫检测仪上测定每个孔吸光度值。以时间天(d)为横坐标，每天以6孔细胞吸光度值的平均值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
成骨诱导及鉴定：将第3代生长稳定的细胞消化成单细胞悬液，以4.0×10⁴ /cm²细胞浓度接种于预先置有盖玻片的6孔培养板内以制备爬片，每孔加入1.5 mL左右的培养液，48 h后全量换液，对照组加入经典成骨诱导液，实验组加柚皮甙成骨诱导液，空白组加L-DMEM培养液。镜下观察细胞形态的变化和生长情况，培养至21 d后行Ⅰ型胶原检测和Von Kossa、茜素红、碱性磷酸酶染色检测(以上染色按试剂盒说明操作)。
主要观察指标：原代细胞生长情况，成骨活性检测，柚皮甙毒性检测，柚皮甙成骨活性检测。
统计学分析：实验数据采用SPSS 18.0统计学软件进行处理，计量资料采用x±s表示，组间比用t 检验。P < 0.05 差异有显著性意义。

讨论

间充质干细胞在骨髓中含量稀少，只有少于0.05% 的骨髓干细胞表现出间充质干细胞的特性，所以对其进行分离纯化就显得尤为重要。实验选取新生兔的间充质干细胞作为种子细胞，无菌条件下获取股骨，进入骨髓腔得到细胞，将其离心后直接加入培养瓶中，而未先进行分离。由于间充质干细胞贴壁生长，而造血细胞悬浮生长，尽管也有较多造血细胞沉淀于培养瓶底部，但早期连续换液后，基本能去除未贴壁细胞。步骤简单，易于操作，纯化效果好。所培养的细胞的形态均呈梭形，成纤维样细胞，呈集落生长，与文献报道一致^[11]，符合基质干细胞的形态^[12]。但随着传代次数的增加，细胞表现出明显的衰老现象，细胞增殖速度明显减慢，细胞形态变为扁平，细胞活力低下^[10]。

实验结果证实经典成骨诱导液和柚皮甙成骨诱导液都可使间充质干细胞基质矿盐沉积，形成多个结节，并逐渐融合。通过形态学观察、Von-Kossa染色、茜素红、碱性磷酸酶染色等方法间接证实了柚皮甙能起到促进间充质干细胞增殖、向成骨细胞分化的作用^[13]。目前普遍认为碱性磷酸酶活性、Ⅰ型胶原、骨钙素的表达及矿化结节的检测是鉴定成骨细胞的主要方法[^14]，培养细胞的形状不能作为鉴别细胞类型的主要特征标志^[15]。柚皮甙诱导组和空白对照组的吸光度值比较结果说明柚皮甙培养液对细胞无毒性。柚皮甙诱导组和经典成骨诱导组成骨活性比较说明柚皮甙培养液能促进细胞向成骨方向发展，并与经典成骨诱导液无明显的差异。

碱性磷酸酶是细胞向成骨细胞分化的重要标志酶，是成骨细胞早期和中期分化的标志物，也是评价机体成骨活性和组织分化能力的特异性指标。对柚皮甙诱导的间充质干细胞高表达碱性磷酸酶活性和阳性染色率研究表明骨碎补能提高骨折愈合中血清碱性磷酸酶的活性，证实该细胞具有很强的分泌碱性磷酸酶的能力，符合成骨细胞的生物学特征^[16]。柚皮甙可以促进培养体系中的间充质干细胞向成骨细胞分化，并能提高反映成骨细胞功能的碱性磷酸酶的分泌。

综上所述，柚皮甙诱导骨髓间充质干细胞向成骨分化，显示获得的目的细胞纯度较高，诱导成骨鉴定结果显示获得的骨髓间充质干细胞具有典型的干细胞细胞特性^[17]，柚皮苷具有明显促进兔骨髓间充质干细胞增殖并分化为成骨细胞的作用^[18]。实验经柚皮甙诱导后的成骨细胞富含碱性磷酸酶，能合成Ⅰ型胶原，表达素和骨桥蛋白，并可形成钙化结节，证明柚皮甙确有诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的功能，其诱导能力与经典的成骨诱导剂没有明显的区别。

柚皮甙诱导兔骨髓间充质干细胞的成骨特征

Osteogenic characteristics of Naringin-induced rabbit bone marrow mesenchymal stem cells

PDF

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 4

参考文献

相关文章 15

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[2]	张秀梅, 翟运开, 赵杰, 赵萌. 类器官模型国内外数据库近10年文献研究热点分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1249-1255.
[3]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.
[4]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[5]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[6]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[7]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[8]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
[9]	焦慧, 张一宁, 宋雨晴, 林宇, 王秀丽. 乳腺癌类器官研究进展及临床应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1122-1128.
[10]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
[11]	曾燕华, 郝延磊. 许旺细胞体外培养及纯化的系统性综述[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1135-1141.
[12]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.
[13]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.
[14]	史洋洋, 秦英飞, 吴福玲, 何潇, 张雪静. 胎盘间充质干细胞预处理预防小鼠毛细支气管炎[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 991-995.
[15]	梁学奇, 郭黎姣, 陈贺捷, 武杰, 孙雅琪, 邢稚坤, 邹海亮, 陈雪玲, 吴向未. 泡状棘球绦虫原头蚴抑制骨髓间充质干细胞向成纤维细胞的分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 996-1001.