中国组织工程研究 ›› 2019, Vol. 23 ›› Issue (19): 2953-2958.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1239
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骨碎补总黄酮促进骨膜细胞增殖及对兔骨不连的治疗作用
江丽霞，袁瑞娟
- (深圳市龙华区人民医院全科，广东省深圳市 518109)
Osteopractic total flavone promotes periosteal cell proliferation and treats the nonunion in rabbits
Jiang Lixia, Yuan Ruijuan
- (Department of General Medicine, Shenzhen Longhua District People’s Hospital, Shenzhen 518109, Guangdong Province, China)
摘要：
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文题释义：
MTT法：目前常用于检测细胞活性和细胞增殖数量的方法。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在特定波长处测定其吸光度值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT法具有高效、快速、可靠、经济等特点，因而被广泛用于各项细胞实验。
生物总黄酮：是一类广泛存在于植物界的黄酮类化合物，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其他包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。近年来，由于自由基生命科学的进展，使具有抗氧化和消除自由基作用的类黄酮受到空前的重视。类黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。
文题释义：
MTT法：目前常用于检测细胞活性和细胞增殖数量的方法。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在特定波长处测定其吸光度值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT法具有高效、快速、可靠、经济等特点，因而被广泛用于各项细胞实验。
生物总黄酮：是一类广泛存在于植物界的黄酮类化合物，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其他包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。近年来，由于自由基生命科学的进展，使具有抗氧化和消除自由基作用的类黄酮受到空前的重视。类黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。摘要
背景：骨碎补总黄酮是一种传统中药，目前认为其主要具有预防骨质疏松、调节血脂等功效。骨碎补总黄酮对骨膜细胞的相关作用尚无相关研究。
目的：探讨骨碎补总黄酮对兔骨膜细胞增殖的影响，进一步研究其对骨膜细胞治疗兔骨不连的促进作用。
方法：①选取第3代兔骨膜细胞，分别用10-5，10-6，10-7 g/L骨碎补总黄酮及10-8 mol/L雌二醇培养，于第1，2，4，6天检测骨膜细胞增殖情况；②选取第3代兔骨膜细胞，分别用10-5 g/L骨碎补总黄酮、 10-8 mol/L雌二醇、纯净水培养，于第1，5，9，13天检测骨膜细胞中碱性磷酸酶的活性，于第5，10，15，20天用Von Kossa法检测骨膜细胞中钙结节数量；③选取第3代兔骨膜细胞，分别用10-5 g/L骨碎补总黄酮、10-5 g/L骨碎补总黄酮+1 μmol/L雌激素受体拮抗剂ICI182780、PBS培养，于第1，2，4，6天检测骨膜细胞增殖情况；④建立兔桡骨骨不连模型，将10-5 g骨碎补总黄酮和1×103骨膜细胞注入骨不连处，观察其对骨不连愈合的影响。
结果与结论：①各组骨膜细胞吸光度值均随时间增加而增加，以10-5 g/L骨碎补总黄酮组和雌二醇组最明显，并于第6天达最大值；②10-5 g/L骨碎补总黄酮组和雌二醇组骨膜细胞碱性磷酸酶活性均高于对照组 (P < 0.05)，两组碱性磷酸酶活性比较差异无显著性意义(P > 0.05)；③骨碎补总黄酮诱导骨膜细胞的增殖作用被10-8 mol/L雌激素受体拮抗剂ICI182780完全阻断；拮抗剂组与对照组相比，骨膜细胞吸光度值差异无显著性意义(P > 0.05)；④骨碎补总黄酮和骨膜细胞联合治疗能促进骨愈合；⑤结果表明，骨碎补总黄酮能促进骨膜细胞增殖和成骨分化，其促进细胞增殖的作用与雌激素受体有关；骨碎补总黄酮能在体内和骨膜细胞一起共同治愈骨不连。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0003-0036-6435(江丽霞)
中图分类号:
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文题释义：
MTT法：目前常用于检测细胞活性和细胞增殖数量的方法。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在特定波长处测定其吸光度值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT法具有高效、快速、可靠、经济等特点，因而被广泛用于各项细胞实验。
生物总黄酮：是一类广泛存在于植物界的黄酮类化合物，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其他包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。近年来，由于自由基生命科学的进展，使具有抗氧化和消除自由基作用的类黄酮受到空前的重视。类黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。