中国组织工程研究 ›› 2018, Vol. 22 ›› Issue (28): 4537-4543.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.0836
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抑制高迁移率族蛋白1减轻大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后的损伤
宋君来1，李 满2，孙 麟1，马 迅1，吕 聪1，贺亚军1
- 1山西医科大学附属大医院骨科，山西省太原市 030032；2山西医科大学第二医院神经内科，山西省太原市 030001
Inhibition of high mobility group protein attenuates spinal astrocyte injury in rats after oxygen glucose deprivation/reoxygenation
Song Jun-lai1, Li Man2, Sun Lin1, Ma Xun1, Lü Cong1, He Ya-jun1
- 1Department of Orthopedics, Shanxi Dayi Hospital Affiliated to Shanxi Medical University, Taiyuan 030032, Shanxi Province, China; 2Department of Neurology, Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
摘要：
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文题释义：
高迁移率族蛋白1：HMGB1是一种广泛存在于真核生物细胞核内，结合于DNA的非组蛋白。当细胞损伤或坏死后，HMGB1会被动释放到细胞外，而胞外的HMGB1具有较强的促炎作用，它能和多种受体结合，引起等多种炎症因子的大量释放，从而在多种炎性疾病中发挥着重要作用。
氧糖剥夺/复氧：体外培养大鼠脊髓星形胶质细胞，首先，细胞在含有体积分数10%的胎牛血清星形胶质细胞培养基中培养，氧糖剥夺时细胞加入到无血清的DMEM无糖培养基，并置于体积分数1%O2、5%CO2、94%N2的三气培养箱中孵育，复氧时，再换回原来的培养基及培养条件下进行培养。
文题释义：
高迁移率族蛋白1：HMGB1是一种广泛存在于真核生物细胞核内，结合于DNA的非组蛋白。当细胞损伤或坏死后，HMGB1会被动释放到细胞外，而胞外的HMGB1具有较强的促炎作用，它能和多种受体结合，引起等多种炎症因子的大量释放，从而在多种炎性疾病中发挥着重要作用。
氧糖剥夺/复氧：体外培养大鼠脊髓星形胶质细胞，首先，细胞在含有体积分数10%的胎牛血清星形胶质细胞培养基中培养，氧糖剥夺时细胞加入到无血清的DMEM无糖培养基，并置于体积分数1%O2、5%CO2、94%N2的三气培养箱中孵育，复氧时，再换回原来的培养基及培养条件下进行培养。摘要
背景：既往对于抑制大鼠体内高迁移率族蛋白1(high mobility group protein，HMGB1)的释放改善脊髓功能的恢复较多，但对于体外培养脊髓星形胶质细胞，抑制HMGB1改善细胞氧糖剥夺/复氧的损伤研究尚少。
目的：探讨抑制大鼠脊髓星形胶质细胞HMGB1后减轻细胞氧糖剥夺/复氧的损伤作用。
方法：星形胶质细胞从新生SD大鼠脊髓提取，分离，培养鉴定。实验分两部分：第一部分实验，体外培养大鼠脊髓原代星形胶质细胞，对细胞行氧糖剥夺/复氧处理，实验分组：对照组，正常培养；氧糖剥夺6 h/复氧6，12，24 h组。第二部分实验，星形胶质细胞分组：对照组，正常培养；氧糖剥夺6 h/复氧24 h组；特异性RNA干扰组；非特异性RNA干扰组；丙酮酸乙酯组。利用Western blot和ELISA法检测各部分实验各组星形胶质细胞HMGB1的表达和释放量，利用乳酸脱氢酶的漏出率和MTT法检测细胞的损伤和存活率，光镜下观察细胞损伤后细胞形态结构的变化。
结果与结论：①脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后，HMGB1蛋白表达及分泌升高(P < 0.01)，且复氧至24 h时达到最高值(P < 0.01)；特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组HMGB1的表达量明显降低，提示特异的HMGB1 shRNA和丙酮酸乙酯能有效抑制HMGB1表达；②细胞氧糖剥夺/复氧后，乳酸脱氢酶漏出率均明显增加，细胞存活率降低(P < 0.01)，复氧至24 h时损伤最为严重(P < 0.01)。与氧糖剥夺6 h/复氧24 h组相比，特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组细胞的乳酸脱氢酶漏出率明显下降；③光镜下观察细胞在氧糖剥夺/复氧后，细胞出现肿胀，分解等损伤变化，而特异RNA干扰和丙酮酸乙酯组细胞损伤明显减轻；④结果提示，HMGB1在脊髓星形胶质细胞损伤发生与发展中起到关键性的作用，且抑制HMGB1后能减轻氧糖剥夺/复氧对大鼠脊髓星形胶质细胞的损伤作用。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0002-5545-2376(宋君来)
中图分类号:
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文题释义：
高迁移率族蛋白1：HMGB1是一种广泛存在于真核生物细胞核内，结合于DNA的非组蛋白。当细胞损伤或坏死后，HMGB1会被动释放到细胞外，而胞外的HMGB1具有较强的促炎作用，它能和多种受体结合，引起等多种炎症因子的大量释放，从而在多种炎性疾病中发挥着重要作用。
氧糖剥夺/复氧：体外培养大鼠脊髓星形胶质细胞，首先，细胞在含有体积分数10%的胎牛血清星形胶质细胞培养基中培养，氧糖剥夺时细胞加入到无血清的DMEM无糖培养基，并置于体积分数1%O2、5%CO2、94%N2的三气培养箱中孵育，复氧时，再换回原来的培养基及培养条件下进行培养。