胎盘间充质干细胞移植改善阿尔茨海默模型大鼠行为学及脑内的神经递质

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0622

摘要/Abstract

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文题释义：
神经递质：是由细胞实现合成好的转运到前突出前细胞内的突触小泡，动作电位由钙离子通道转换成递质的在末梢处的释放，经突触间隙扩散，特异作用于突触后神经元或效应细胞上的受体，将信息从突触前传递到突触后的一些化学物质。
胎盘间充质干细胞：胎源干细胞是一群来源于胚胎、胎儿及胎儿附属器官的干细胞，包括胚胎源性干细胞、胎儿源性干细胞及胎儿附属器官源性干细胞。其中胎盘间充质干细胞属于胎儿附属器官源性干细胞，与骨髓间充质干细胞有相似的形态、细胞表面表型、趋化因子受体排列、中胚层分化及细胞免疫抑制能力，但较骨髓间充质干细胞具有来源充足、免疫原性低、病毒污染率较低及无社会伦理争议等方面的优点，目前已被广泛应用于临床研究中。

摘要
背景：大量研究已证实，骨髓间充质干细胞移植可促进损伤神经功能的恢复，但其来源有限，并且取材对人体创伤较大，因此寻找更加合适的种子细胞有很重要的意义。
目的：观察胎盘间充质干细胞移植对阿尔茨海默模型大鼠行为学及脑内神经递质的改善作用。
方法：将45只雄性SD大鼠随机分3组，正常组不进行任何干预或处理；模型组与实验组采用皮下注射D-半乳糖联合脑双侧海马注射β淀粉样肽25-35的方法，建立老年阿尔茨海默病模型，每组15只。造模成功后，向实验组大鼠双侧海马内注射胎盘间充质干细胞悬液(细胞浓度1×10⁸ L^-1，每侧5 μL)，模型组不进行细胞移植。细胞移植4周后，进行水迷宫行为学实验、脑组织匀浆神经递质检测及脑海马组织病理观察。
结果与结论：①与正常组相比，模型组大鼠实验不同时间点的逃避潜伏期明显延长(P < 0.05)，在目标象限的活动路程减少(P < 0.05)；与模型组相比，实验组实验不同时间点的逃避潜伏期明显缩短(P < 0.05)，在目标象限的活动路程增多(P < 0.05)；②与正常组比较，模型组大鼠脑组织匀浆乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶水平显著升高(P < 0.05)，胆碱乙酰转移酶水平显著降低(P < 0.05)；与模型组比较，实验组大鼠脑组织匀浆乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶水平显著降低(P < 0.05)，胆碱乙酰转移酶水平显著升高(P < 0.05)；③与正常组比较，模型组神经数量明显减少，细胞间隙增大，胞体发生退化，细胞核出现固缩，核仁不明显，部分细胞出现空泡；与模型组比较，实验组神经形态较为完整，趋于正常，神经细胞数量有所增加；④结果显示，胎盘间充质干细胞移植可改善阿尔茨海默大鼠的学习记忆能力，调节其脑内神经递质水平。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0002-1677-9093(何佳)

关键词: 胎盘间充质干细胞, 阿尔茨海默病, SD大鼠, 海马组织, 神经递质, 水迷宫实验, 组织工程, 干细胞

Abstract:

BACKGROUND: A large number of studies have proved that bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can promote the recovery of injured nerve function, but the cell source is limited. Moreover, cell collection is extremely traumatic to the human body, and it is very important to find more suitable seed cells.
OBJECTIVE: To observe the effect of placental mesenchymal stem cell transplantation on behaviors and neurotransmitters in Alzheimer disease rats.
METHODS: Forty-five male Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups (n=15 per group): normal group without any intervention or treatment, model group and experimental group treated with subcutaneous injection of D-galactose and bilateral hippocampal injection of β-amyloid peptide 25-35. The model of senile Alzheimer disease was established in the latter two groups. After the model was successfully established, placental mesenchymal stem cell suspension (1×10⁸ cells/L, 5 μL) was injected into the hippocampus of the experimental group. The model group did not carry out cell transplantation. Four weeks after transplantation, Morris water maze for behavior observation, brain homogenate neurotransmitter detection and histopathological observation of the hippocampus were carried out.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) Compared with the normal group, the escape latency at different time points in the model group was significantly prolonged (P < 0.05), and the activity path in the target quadrant was decreased (P < 0.05). Compared with the model group, the escape latency at different time points in the experimental group was significantly shortened (P < 0.05), and the activity path in the target quadrant was increased (P < 0.05). (2) Compared with the normal group, the levels of monoamine oxidase and acetylcholinesterase in the brain homogenate increased significantly in the model group (P < 0.05), while the level of choline acetyltransferase decreased significantly(P < 0.05). Compared with the model group, the levels of acetylcholinesterase and monoamine oxidase in the brain homogenate of the experimental group decreased significantly (P < 0.05), and the level of choline acetyltransferase increased significantly (P < 0.05). (3) In the model group, the number of nerves decreased obviously, the cell space increased, the cell body degenerated, the nucleus became pyknosis, the nucleolus was not obvious, and vacuoles appeared in some cells. Compared with the model group, the nerve morphology of the experimental group was relatively complete and tended to be normal. The number of nerves in the experimental group was increased as compared with the model group. To conclude, placental mesenchymal stem cell transplantation can improve the learning and memory abilities of Alzheimer disease rats and regulate the level of neurotransmitters in the rat brain.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Tissue Engineering, Stem Cells, Alzheimer Disease, Placenta, Hippocampus

中图分类号:

R394.2

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图/表（结果） 1

2.1 实验动物数量分析 在造模过程中如有动物死亡，采用相同方法造模补齐数量，保证最终进入结果分析为45只SD大鼠。

2.2 实验动物造模情况 造模2周后，5只大鼠平均逃避潜伏期明显长于造模前[(69.89±7.98) s，vs. (109.63±9.45) s，P < 0.05]，在目标象限的活动路程明显短于造模前[(825.38±49.56) cm，vs. (436.78±52.31) cm，P < 0.05]，说明大鼠造模后学习记忆能力明显下降。

2.3 各组大鼠行为学变化

定位航行实验：与正常组相比，模型组大鼠实验不同时间点的逃避潜伏期明显延长(P < 0.05)，证实造模成功；与模型组相比，实验组不同时间点的逃避潜伏期明显缩短(P < 0.05)，见表1，说明实验组大鼠的空间学习能力有很大的提高。

空间探索实验：与正常组比较，模型组大鼠在目标象限的活动路程减少(P < 0.05)，证实造模成功；与模型组相比，实验组大鼠在目标象限的活动路程增多(P < 0.05)，见图4，说明实验组大鼠学习记忆能力明显增强。

2.4 各组大鼠脑内神经递质水平变化 细胞移植4周后，与正常组比较，模型组大鼠脑组织匀浆乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶水平显著升高(P < 0.05)，胆碱乙酰转移酶水平显著降低(P < 0.05)；与模型组比较，实验组大鼠脑组织匀浆乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶水平显著降低(P < 0.05)，胆碱乙酰转移酶水平显著升高(P < 0.05)，见表2。

2.5 各组大鼠脑海马组织病理改变 细胞移植4周后苏木精-伊红染色观察大鼠脑海马组织形态，结果显示：正常组海马结构完整，神经细胞形态正常，着色均匀，细胞核为圆形或椭圆形；与正常组比较，模型组神经细胞数量明显减少，细胞间隙增大，胞体发生退化，细胞核出现固缩，核仁不明显，部分细胞出现空泡；与模型组比较，实验组神经细胞形态较为完整，趋于正常，偶见空泡变性形成，神经细胞数量有所增加，见图5。

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引言

阿尔茨海默病是以大脑皮质和海马区域出现老年斑、神经原纤维缠结和血管壁淀粉样变并伴随神经元丧失为主要病理改变的神经系统疾病，较多见于老年人^[1-2]。阿尔茨海默病的临床表现为认知功能、记忆功能、语言功能及视空间功能等减退，以及社会生活能力、个人生活能力降低和情感人格等障碍。目前的治疗主要以药物为主，包括胆碱能系统药物^[3-4]、神经生长因子^[5]、抗氧化药物^[6]、抗炎药物^[7]、5-羟色胺受体拮抗药^[8]、钙通道阻滞剂及脑代谢激活剂及中药等^[9-12]，目的是阻止β-淀粉样蛋白形成或促进β-淀粉样蛋白的降解，但是治疗效果不太理想。

目前关于阿尔茨海默病的发病机制尚未完全明确，因此制备一种较为理想的动物模型是研究其发病理机制的关键。目前制备阿尔茨海默病动物模型的方法主要有：①损伤模型^[13-14]，包括化学损伤模型(乙酰胆碱M受体阻断剂所致的动物模型、兴奋性毒素所致的动物模型、选择性胆碱能神经毒素所致的动物模型、免疫毒素所致的动物模型、β-淀粉样多肽模型及铝损伤模型)、机械损伤模型与病理损伤模型；②衰老痴呆模型^[15-16]，包括自然衰老模型、快速老化小鼠模型、D-半乳糖衰老模型；③转基因动物模型^[17-19]，包括APP转基因模型、tau转基因小鼠、PS-21突变小鼠；④缺氧动物模型^[20]；⑤复合动物模型^[21]。但是上述模型均不能全面再现与模拟阿尔茨海默病病理、生化、行为等方面的全部特征。D-半乳糖衰老模型是获得大众认可的老年痴呆模型，可以模拟人类自然衰老过程中出现的认知障碍、行为学改变、细胞退行性改变等；而β淀粉样肽是阿尔茨海默病形成与发展的主要原因，也是诱发老年痴呆的通路；实验将两者结合用于制备阿尔茨海默病动物模型，以期更好地模拟阿尔茨海默病的病理与生化过程。

近年来，随着干细胞生物学的发展，干细胞移植治疗为神经系统系统疾病治疗带来了希望。间充质干细胞来源于发育早期中胚层的多能干细胞，存在于骨髓、脂肪、胎盘、脐带或脐血等组织中，无论是体外还是体内，在特定诱导条件下其可分化为神经、脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、肝、心肌及内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复^[22-24]。大量研究已证实，间充质干细胞移植可促进损伤神经功能的恢复^[25-27]，目前应用较多的为骨髓间充质干细胞，但其来源有限，并且取材对人体创伤较大，因此寻找更加合适的种子细胞有很重要的意义。

相较于其他间充质干细胞，胎盘间充质干细胞具有来源方便，细胞数量充足，易于分离、培养、扩增和纯化，免疫原性低及无伦理限制等优点^[28]，因此实验选择胎盘间充质干细胞为种子细胞，观察其移植对阿尔茨海默大鼠行为学及脑内神经递质的改善作用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计 随机对照动物实验。

1.2 时间及地点 于2016年9月至2017年8月在三六三医院完成。

1.3 材料

胎盘组织：获取三六三医院临床正常剖宫产足月健康产妇自愿捐献胎盘组织，要求产妇身体健康，无传染性疾病及妊娠并发症史。产妇及其家属对实验知情同意，此次实验获得三六三医院伦理委员会批准。

实验动物：清洁级健康雄性SD大鼠50只，体质量(180±40) g。实验过程中对动物的处置严格按照动物伦理学要求进行。

实验用主要试剂与仪器：D-半乳糖(CAS号59-23-4，上海联硕宝为生物科技有限公司)；β淀粉样肽25-35(规格0.5 mg，上海胜隆实业有限公司)；小鼠抗人 PE 标记抗体 CD73、CD90、CD45、CD106(上海将来实业股份有限公司)；成骨细胞诱导培养基(行知生物科技有限公司)；成脂诱导培养基(无锡菩禾生物医药技术有限公司)；DMEM/F12培养基、低糖DMEM培养基、DMEM培养基(赛默飞世尔科技(中国)有限公司)；Ⅰ型胶原酶、胰蛋白酶(上海第一生化药业有限公司)；胎牛血清(北京泽平科技有限责任公司)；淋巴细胞分离液(北京华越洋生物科技有限公司)；水合氯醛(扬州市奥鑫助剂厂)；ELISA试剂盒(上海酶联生物科技有限公司)；流式细胞仪(贝克曼库尔特商贸中国有限公司)；显微镜(北京世纪科信科学仪器有限公司)；CO₂培养箱(山东博科生物产业有限公司)；离心机(江苏赛德力制药机械制造有限公司)；Morris水迷宫系统(型号S220，江苏赛昂斯生物科技有限公司)；脑立体定位仪(型号DD053，北京智鼠多宝生物科技有限责任公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 胎盘间充质干细胞的分离与培养 采用以往文献介绍的方法分离培养胎盘间充质干细胞^[29]。取胎盘组织约50 g，剪取胎儿侧绒毛膜层组织，PBS反复冲洗，以眼科手术剪剪成1 mm×1 mm×1 mm的碎片，用0.05 g/L胰蛋白酶在37 ℃下消化30 min，随后再次消化30 min，消化后用含体积分数5%胎牛血清的DMEM培养基终止消化，采用200目细胞筛过滤，采用PBS冲洗筛中组织，装入培养皿中，在37 ℃下以1 g/LⅠ型胶原酶消化60 min，用含体积分数5%胎牛血清的DMEM培养基终止消化，采用200目细胞筛过滤，1 500 r/min离心5 min滤液，去上清液，更换为DMEM/F12培养基混悬细胞。

将细胞悬液缓慢加至淋巴细胞分离液中，4℃ 1 500 r/min离心20 min，离心后可见白膜层，小心吸取该区域细胞，并加入4 倍于该体积的PBS稀释，常温下1 000 r/min离心5 min。重复1次，弃上清。加入含体积分数为10%胎牛血清、1%双抗的低糖DMEM完全培养基，以5×10⁸ L^-1的细胞浓度接种至细胞培养瓶中，置于37 ℃、含体积分数5%CO₂饱和湿度的培养箱中培养，培养48 h后半量换液，去除未贴壁细胞，以后每三四天换液1次，待原代培养的贴壁细胞生长至70%-90%融合时，用质量浓度2.5 g/L胰酶消化，按1∶2或1∶3比例传代。实验选择第3代胎盘间充质干细胞进行动物实验(图1)。

1.4.2 胎盘间充质干细胞的鉴定

细胞表面抗原检测：取生长状态良好的第3代胎盘间充质干细胞，经胰酶消化后，用含体积分数0.5%BSA的PBS冲洗，采用流式细胞仪检测细胞表面标志物CD73，CD90，CD105呈阳性表达^[30]，CD34，CD45呈阴性表达(图2)，说明细胞表达间充质干细胞表面抗原。

间充质干细胞的成骨分化能力：取生长良好的第3代胎盘间充质干细胞，以1×10⁷ L^-1的细胞浓度接种至6孔板，成骨诱导(成骨细胞诱导培养基：含10 μmol/L地塞米松、50 μmol/L维生素C、10 mmol/L β-磷酸甘油钠、含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基)培养21 d，进行茜素红染色，可见钙结节形成^[31](图3A)，说明胎盘间充质干细胞具有向成骨细胞分化的能力。

间充质干细胞的成脂分化能力：取生长良好的第3代胎盘间充质干细胞，以1×10⁷ L^-1的细胞浓度接种至6孔板，成脂诱导(成脂细胞诱导培养基：含1 μmol/L地塞米松，200 μmol/L吲哚美辛、0.5 μmol/L IBMX，10 mg/L胰岛素，含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基)培养10 d，进行油红O染色，可见脂滴形成^[32](图3B)，说明胎盘间充质干细胞具有向脂肪细胞分化的能力。表明胎盘间充质干细胞具有多向分化能力。

1.4.3 建立阿尔茨海默病大鼠模型 D-半乳糖致老年阿尔茨海默病已是一种很成熟的老年阿尔茨海默病模型，大量研究证实这种模型方法能很好地模拟人类阿尔茨海默病情况。将5只SD大鼠在标准环境适应性饲养1 周后，连续6周皮下注射D-半乳糖150 mg/(kg•d)，第7周双侧海马注射4 nmol/L的β淀粉样肽25-35^[33]，复制老年阿尔茨海默病模型。造模前及造模后2周，采用Morris水迷宫实验方法大鼠的学习记忆改变情况，证实造模成功^[33]。

1.4.4 实验分组及干预情况 取45只SD大鼠，随机选择其中15只作为正常组，不进行任何干预或处理；取另外30只按照上面介绍方法制作阿尔茨海默病模型，造模成功(即造模2周后)后即刻随机分2组干预，每组15只，模型组不干预，实验组移植胎盘间充质干细胞，大鼠用体积分数10%水合氯醛腹腔注射麻醉，麻醉生效后固定在立体定位仪上，备皮、消毒，在头皮正中线做切口，观察骨缝，找到囟点，根据动物脑立体定位图谱，确定双侧海马齿状回位置为细胞移植点，将5 μL胎盘间充质干细胞悬液(细胞浓度1×10⁸ L^-1，每个移植点5 μL)通过微量进样器注射至移植点，进针速度控制在0.5 μL/min，注射结束后留针10 min，然后缓慢退出针头，缝合头皮，术后连续7 d腹腔注射青霉素预防感染。实验结束后，实验动物单笼饲养。

如果造模过程中有动物死亡，采用上述相同方法造模补充，保证实验动物数量。

1.5 主要观察指标

1.5.1 行为学检测 细胞移植4周后，进行水迷宫实验^[34]。

定位航行实验：将SD大鼠面向池壁，置于水池内进行实验，记录大鼠找到平台的时间，以逃避潜伏期作为反映大鼠学习记忆障碍的指标，分别于每天上午和下午进行实验，每次实验时间1 min，历时4 d，记录动物逃避潜伏期；逃避潜伏期越短说明大鼠学习记忆能力越好。

空间探索实验：定位航行实验结束后，撤去平台，将大鼠头向池壁置于池内，使其在池内游泳1 min，记录动物在目标象限的活动路程；在目标象限的活动路程越长说明大鼠学习记忆能力越好。

1.5.2 脑内神经递质检测 细胞移植4周迷宫实验结束后，麻醉处死所有大鼠，取双侧海马组织，称质量，采用冰冷生理盐水冲洗脑组织，滤纸滤干后，准确称取质量。采用脑组织与9倍脑组织质量的生理盐水放入匀浆机研碎，制成10%脑组织匀浆液，4 ℃条件下3 000 r/min离心10 min，取上清液，保存于4 ℃冰箱中。严格按照ELISA试剂盒说明书进行操作，检测上清液中乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶和单胺氧化酶水平^[35]。

1.5.3 组织病理检查 细胞移植4周，迅速取双侧海马组织，以体积分数10%中性甲醛固定24 h，流水冲洗24 h，石蜡包埋、切片。切片常规采用二甲苯脱蜡，经乙醇梯度脱水。体积分数0.5%苏木精37 ℃染10 min，体积分数1%盐酸乙醇分色，蒸馏水洗，氨水促蓝，蒸馏水洗，体积分数1%伊红染色5 min，蒸馏水洗，乙醇梯度脱水，透明封固，光学显微镜下观察。

1.6 统计学分析 应用SPSS 20.0统计软件进行统计学处理，实验中获取的数据均用x(_)±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间均数两两之间比较用LSD-t 检验，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

β-淀粉样多肽脑内海马注射建立的动物模型，可较好地模拟阿尔茨海默病的行为学与病理损伤特征。衰老因素在阿尔茨海默病发病中有很重要的作用，将β-淀粉样多肽与D-半乳糖联合造模，集衰老、β-淀粉样多肽沉积及学习记忆功能损伤等阿尔茨海默病病理特征于一体，为研究阿尔茨海默病发病机制与治疗方法提供了异种较转基因模型经济的有效可行造模方法，实验行为学及病理组织观察结果证实了两者联合造模的可行性。

Morris水迷宫实验分析系统是进行学习记忆测试的经典实验，被广泛应用于阿尔茨海默等疾病的研究中^[36-37]。实验中，Morris水迷宫实验结果显示，经过皮下注射D-半乳糖联合脑双侧海马注射β淀粉样肽25-35建立老年阿尔茨海默病模型后，大鼠的空间学习能力明显下降；但是胎盘间充质干细胞移植治疗4周后，大鼠空间学习能力明显改善，此与以往研究一致^[38-39]，证实胎盘间充质干细胞与其他来源间充质干细胞一样，可显著改善阿尔茨海默动物模型的学习空间记忆能力。

大量研究发现，脑内神经递质改变是导致阿尔茨海默病患者认知功能障碍的主要原因，包括乙酰胆碱系统、单胺系统、氨基酸类和神经肽递质，表现较为明显的是前脑基底核内胆碱能神经元的变性与丢失，因此阿尔茨海默病的发病与胆碱能神经递质(胆碱乙酰转移酶及乙酰胆碱)失衡密切相关^[40-42]。在20世纪70年代初，就已经有学者发现胆碱能系统与学习记忆能力有重要的关系。在中枢胆碱能神经递质中，乙酰胆碱是非常重要的神经递质，其可能通过边缘系统或大脑皮质在学习与记忆形成中发挥重要作用^[43-44]。当发生阿尔茨海默病时，乙酰胆碱的合成、储存与释放均明显减少，导致认知功能记忆障碍，乙酰胆碱代谢水平直接影响海马的学习记忆能力。实验通过检测大鼠脑海马组织匀浆乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶和单胺氧化酶水平来反映乙酰胆碱代谢情况。实验结果显示，模型组大鼠脑组织匀浆乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶水平较正常组显著升高，胆碱乙酰转移酶水平较正常组显著降低，说明阿尔茨海默病大鼠乙酰胆碱代谢水平明显失衡；经过胎盘间充质干细胞移植治疗4周后，大鼠脑组织匀浆乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶水平显著降低，胆碱乙酰转移酶水平显著升高，说明胎盘间充质干细胞可明显调节阿尔茨海默病大鼠乙酰胆碱代谢水平，发挥治疗作用，与以往研究结果一致^[45-46]。对于实验胎盘间充质干细胞移植后，阿尔茨海默病大鼠模型脑内乙酰胆碱神经递质增加的原因，分析可能存在以下可能：第一，可能是移植的胎盘间充质干细胞在脑内合成释放神经递质，发挥治疗作用；第二，可能是移植的胎盘间充质干细胞在脑内分泌一些神经营养因子，如：神经生长因子、神经营养因子3及脑源性神经营养因子等生物活性物质，促进了内源性神经元的活化，增加乙酰胆碱神经递质的分泌；第三，上述两种情况同时存在，共同促进乙酰胆碱神经递质的分泌，明显改善阿尔茨海默大鼠的学习记忆能力。进一步的实验将针对3种可能的情况进行，分析胎盘间充质干细胞移植治疗阿尔茨海默病的具体途径。

胎源干细胞是一群来源于胚胎、胎儿及胎儿附属器官的干细胞，包括胚胎源性干细胞、胎儿源性干细胞及胎儿附属器官源性干细胞。其中胎盘间充质干细胞属于胎儿附属器官源性干细胞，与骨髓间充质干细胞有相似的形态、细胞表面表型、趋化因子受体排列、中胚层分化及细胞免疫抑制能力，但较骨髓间充质干细胞具有来源充足、免疫原性低、病毒污染率较低、无社会伦理争议等方面的优点，目前已被广泛应用于临床研究中，在神经系统疾病、心血管系统疾病、血液系统疾病、免疫系统疾病及代谢性疾病等的治疗中具有广阔的应用前景。因此，实验以胎盘间充质干细胞作为研究对象，观察其对阿尔茨海默病的治疗作用。实验采用海马病理改变再次验证胎盘间充质干细胞的治疗作用，结果显示，与正常组比较，模型组神经数量明显减少，细胞间隙增大，胞体发生退化，细胞核出现固缩，核仁不明显，部分细胞出现空泡，证实此实验造模方法可行；与模型组比较，实验组神经形态较为完整，趋于正常，神经细胞数量显著增加，证实胎盘间充质干细胞移植可改善阿尔茨海默病大鼠的脑海马组织结构。实验实验周期较短，未来将继续延长实验周期，进一步观察胎盘间充质干细胞在阿尔茨海默病大鼠脑内的定植与分化情况，观察与其他来源间充质干细胞治疗阿尔茨海默病的差异。

综上所述，胎盘间充质干细胞移植治疗阿尔茨海默病模型大鼠，可通过改善脑组织神经递质水平提高大鼠的空间学习能力，抑制脑组织病理改变，发挥治疗作用。但是关于胎盘间充质干细胞移植阿尔茨海默病的具体机制需要更细致的研究。

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