三七总皂苷上调浓缩生长因子释放促进大鼠骨折愈合

doi:10.12307/2024.272

中国组织工程研究 ›› 2024, Vol. 28 ›› Issue (11): 1678-1683.doi: 10.12307/2024.272

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三七总皂苷上调浓缩生长因子释放促进大鼠骨折愈合

王钟庆1，熊贤梅1，张严1，李世杰1，马立琼1，卢泽声1，高怡加2

1广州中医药大学第一临床医学院，广东省广州市 510405；2广州中医药大学第一附属医院，广东省广州市 510405

收稿日期:2023-01-30 接受日期:2023-03-21 出版日期:2024-04-18 发布日期:2023-07-26
通讯作者: 高怡加，硕士，副主任医师，广州中医药大学第一附属医院，广东省广州市 510405
作者简介:王钟庆，男，1997年生，四川省巴中市人，汉族，广州中医药大学在读硕士，主要从事中医药防治骨与关节损伤方面的研究。
基金资助:
广东省自然科学基金项目(2018A030313369)，项目负责人：高怡加；国家自然科学基金资助项目(81974575)，项目参与人：张严；黄枫全国名老中医药专家传承工作室建设项目({2022}75号)，项目参与人：高怡加；2022广州中医药大学“双一流”与高水平大学建设学科后备人才培育项目专项经费

Panax notoginseng saponin promotes fracture healing by upregulating concentrated growth factors in rats

Wang Zhongqing1, Xiong Xianmei1, Zhang Yan1, Li Shijie1, Ma Liqiong1, Lu Zesheng1, Gao Yijia2

1First Clinical School of Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, Guangdong Province, China; 2First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, Guangdong Province, China

Received:2023-01-30 Accepted:2023-03-21 Online:2024-04-18 Published:2023-07-26
Contact: Gao Yijia, Master, Associate chief physician, First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, Guangdong Province, China
About author:Wang Zhongqing, Master candidate, First Clinical School of Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405, Guangdong Province, China
Supported by:
the Natural Science Foundation of Guangdong Province, No. 2018A030313369 (to GYJ); National Natural Science Foundation of China, No. 81974575 (to ZY [project participant]); Huang Feng National Famous Old Chinese Medicine Experts Inheritance Studio Construction Project, No. {2022}75 (to GYJ [project participant]); 2022 “Double First Class” and High-level University Construction Discipline Talent Cultivation Project of Guangzhou University of Chinese Medicine

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

浓缩生长因子：由血液样品经特定的离心设备以交替的速度离心制备而来的血小板浓缩物，其富含血小板衍生生长因子BB、转化生长因子β、血管内皮生长因子 A、碱性成纤维细胞生长因子，可促进骨组织的愈合。
三七总皂苷：为中药三七的主要活性成分，研究证实其具有改善细胞能量代谢以及组织血流供应、消除自由基及抗氧化应激、调控细胞凋亡信号通路以及平衡离子代谢紊乱等广泛的药理作用。

背景：研究表明，三七总皂苷和浓缩生长因子均能促进骨折愈合，但是目前关于两者共同干预骨折愈合的研究较少，三七总皂苷可能通过在某段时间内促进浓缩生长因子相关因子的释放来达到加快骨折愈合的目的。

目的：观察三七总皂苷对浓缩生长因子释放，以及对大鼠骨折愈合的影响。
方法：8周龄SD大鼠18只，编号后随机分为三七总皂苷组、模型对照组以及空白组。三七总皂苷组给予三七总皂苷灌胃2周，模型对照组给予生理盐水2 mL灌胃2周，空白组正常饲喂。2周后三七总皂苷组与模型对照组同时采血离心获取浓缩生长因子备用，继续正常饲喂1周，然后对所有大鼠进行股骨骨折造模处理，三七总皂苷组与模型对照组植入自体浓缩生长因子，并用ELISA法检测1 h及1，3，5，7，9，11 d生长因子释放量；通过观察术后2个月X射线片及骨组织苏木精-伊红染色结果，评估骨折愈合情况。

结果与结论：①生长因子释放情况：三七总皂苷组的血管内皮生长因子A和转化生长因子β在第7，9，11天的释放浓度高于模型对照组(P < 0.05)，血小板衍生生长因子BB在第5，9，11天的释放浓度高于模型对照组(P < 0.05)，碱性成纤维细胞生长因子在1-11天的释放浓度均高于模型对照组(P < 0.05)；②骨折愈合情况：术后2个月行X射线片检查，三七总皂苷组的骨折愈合情况优于模型对照组，两组均优于空白组；取材苏木精-伊红染色发现，三七总皂苷组成骨细胞生成量大于模型对照组，两组均大于空白组；③提示三七总皂苷可以上调浓缩生长因子相关因子的释放浓度，三七总皂苷干预后的浓缩生长因子对促进大鼠骨折愈合更有优势。

https://orcid.org/0000-0003-1547-4279(王钟庆)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 三七总皂苷, 浓缩生长因子, 骨折愈合, 大鼠, 动物模型

Abstract: BACKGROUND: Studies have shown that both Panax notoginseng saponins and concentrated growth factor can promote fracture healing, but there are few studies addressing their combined effects on fracture healing. Panax notoginseng saponins may accelerate fracture healing by promoting the release of concentrated growth factor-related factors over a certain period of time.
OBJECTIVE: To study the effect of Panax notoginseng saponins on concentrated growth factor release and fracture healing in rats.
METHODS: Eighteen 8-week-old Sprague-Dawley rats were numbered and randomly divided into three groups: Panax notoginseng saponins group, model control group and blank group. Panax notoginseng saponins group was fed with Panax notoginseng saponins for 2 weeks. Model control group was given 2 mL of normal saline for 2 weeks and blank group was fed normally. Concentrated growth factor was obtained by the centrifugation method both from the Panax notoginseng saponins group and model control group. After 1 week of normal feeding, all animals underwent modeling for femoral fracture. The Panax notoginseng saponins group and the model control group were implanted with autologous concentrated growth factor, and then the release concentration of growth factors at different time points (1 hour, 1, 3, 5, 7, 9 and 11 days) were measured by ELISA. Fracture healing was assessed based on postoperative X-ray and hematoxylin-eosin staining of bone tissues.
RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the model control group, the Panax notoginseng saponins group had higher release concentrations of vascular endothelial growth factor A and transforming growth factor β at 7, 9, and 11 days, Platelet-derived growth factor BB at 5, 9, and 11 days, and basic fibroblast growth factor at 1-11 days (P < 0.01). X-ray examinations indicated that fracture healing in the Panax notoginseng saponins group was better than that in the model control group, and fracture healing in these two groups was better than that in the blank group at 2 months after surgery. Hematoxylin-eosin staining results found that the constituent osteocyte density in the Panax notoginseng saponins group was greater than that in the model control group, and the constituent osteocyte density in these two groups was better than that in the blank group. These findings indicate that Panax notoginseng saponins can increase the concentration of concentrated growth factor-related factors. After intervention with Panax notoginseng saponins, concentrated growth factors are more advantageous in promoting fracture healing in rats.

Key words: Panax notoginseng saponin, concentrated growth factor, fracture healing, rat, animal model

中图分类号:

王钟庆, 熊贤梅, 张严, 李世杰, 马立琼, 卢泽声, 高怡加. 三七总皂苷上调浓缩生长因子释放促进大鼠骨折愈合[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(11): 1678-1683.

Wang Zhongqing, Xiong Xianmei, Zhang Yan, Li Shijie, Ma Liqiong, Lu Zesheng, Gao Yijia. Panax notoginseng saponin promotes fracture healing by upregulating concentrated growth factors in rats[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2024, 28(11): 1678-1683.

图/表（结果） 4

2.1 实验动物术后感染状况分析因空白组1只大鼠缝线脱落而致术口红肿，为避免其对骨折愈合的不利影响，予剔除后补做实验，其余大鼠均未出现影响实验结果的术区脓肿、感染、术口不愈合等情况。
2.2 三七总皂苷组和模型对照组生长因子释放浓度差异 1 h及1，3，5，7，9，11 d，三七总皂苷组、模型对照组浓缩生长因子中4种生长因子累计释放量，见表1，2。

在第7，9，11天，VEGF-A和转化生长因子β的释放，三七总皂苷组均高于模型对照组(P < 0.05)；PDGF-BB在第5，9，11天，三七总皂苷组高于模型对照组(P < 0.05)；碱性成纤维细胞生长因子在第1-11天，三七总皂苷组均高于模型对照组(P < 0.05)。其中VEGF-A和PDGF-BB在9 d左右浓度达到峰值，转化生长因子β和碱性成纤维细胞生长因子在7 d左右浓度达到峰值，后均开始进入衰减相，以横坐标为时间点，纵坐标为生长因子释放浓度绘制折线图，见图2。

2.3 大鼠骨折大体观察、X射线片及苏木精-伊红染色结果在术后2个月行X射线片检查，观察骨折的愈合情况，见图3。三七总皂苷组可见大量新生骨组织，骨折线消失，成骨质量较其他两组更好；模型对照组成骨弱于三七总皂苷组，优于空白组；空白组愈合情况较差。

拍片后取材，大体标本显示各组大鼠骨折愈合程度不一，三七总皂苷组、模型对照组成骨情况较好，空白组存在愈合不良的情况。
切片苏木精-伊红染色结果提示：三七总皂苷组镜下可见大量成骨细胞和新生骨组织，成骨质量好；模型对照组含有较多成骨细胞；空白组成骨细胞数量少，含有纤维组织填充，成骨较差。见图4。

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引言

浓缩生长因子概念由Sacco在2006年首次提出[1]，是组织修复再生领域中继富血小板血浆、富血小板纤维蛋白之后的第3代血小板浓缩物，由血液样品经特定的离心设备以交替的速度离心制备而来[2]，其富含更高浓度生长因子，包括血小板衍生生长因子BB(platelet-derived growth factor-BB，PDGF-BB)、转化生长因子β、血管内皮生长因子A (vascular endothelial growth factor A，VEGF-A)和碱性成纤维细胞生长因子等[3]。这些生长因子可以促进组织修复，近年来在伤口愈合、牙科和颌面外科、运动医学、兽医学领域得到了广泛的欢迎[4-5]。相关研究表明，同富血小板血浆、富血小板纤维蛋白一样，浓缩生长因子可以加速骨组织增殖，引导骨形成和骨再生[6-8]。
三七历来被誉为“伤科要药”，有活血化瘀、理气止痛之效，广泛应用于各种跌打损伤，其主要活性成分为三七总皂苷，研究证实三七总皂苷具有改善细胞能量代谢以及组织血流供应、消除自由基及抗氧化应激、调控细胞凋亡信号通路以及平衡离子代谢紊乱等广泛的药理作用[9]。研究报道在骨折修复过程中，三七总皂苷可通过不同的分子蛋白通路促进相关细胞发挥促骨折愈合的作用[10]，主要包括抗血小板凝集、抗炎、促进血管内皮修复、促进成骨细胞分化以及骨痂组织和血管的生成[11-12]。
骨折是骨科最常见的疾病，即便现有的诊疗方案趋于成熟，但远期并发症如骨不愈合、骨缺损、骨髓炎等仍令人头疼。骨折的愈合是一个极其复杂的过程，涉及诸多分子机制以及生物力学、营养血供等因素，需多种因子共同参与，其中包括浓缩生长因子富含的PDGF-BB、转化生长因子β、VEGF-A和碱性成纤维细胞生长因子等[13-14]。
中药有效成分的介入，可显著加速浓缩生长因子促进骨折愈合的过程。在大鼠绝经后骨质疏松骨缺损模型中，余翔等[15]应用补肾中药龟板联合干细胞及浓缩生长因子促进VEGF-A、CD31、形态发生蛋白2、核因子κB等因子的显著表达，从而达到修复骨缺损的作用，其机制可能是通过调节炎症、骨形成、血管形成，提供了中药成分干预浓缩生长因子可进一步促进骨愈合的实践依据。此次实验预先对大鼠进行三七总皂苷灌胃处理，采血制取浓缩生长因子，并将其生长因子的释放与模型对照组进行对比，观察三七总皂苷干预后对浓缩生长因子促进大鼠骨折愈合疗效的影响。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验，采用t检验与单因素方差分析。
1.2 时间及地点实验于2020年8月至2021年1月在广州中医药大学第一附属医院SPF级动物实验中心完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 18只雄性SD大鼠，8周龄，体质量(250±30) g，
由广州中医药大学第一附属医院SPF级动物实验中心提供，许可证号：SYXK(粤)2019-0035。实验方案经广州中医药大学大学动物实验伦理委员会批准，批准号：TCMF1-2019062。实验过程遵循了国际兽医学编辑协会《关于动物伦理与福利的作者指南共识》和本地及国家法规。
1.3.2 实验药物血塞通软胶囊(有效成分为三七总皂苷，含量为60 mg/0.33 g，华润圣火药业有限公司)；青霉素(华北制药股份有限公司，160×104 U/瓶)；戊巴比妥钠溶液(西格玛奥德里奇贸易有限公司，中国)。
1.3.3 实验器材 Medifuge离心机(Thermo 公司，美国)；DMEM培养基(Hyclone公司，美国)；ELISA试剂盒(康凯信生物科技有限公司，中国)；全自动染色机(澜澈生物科技有限公司，中国)；CKX53SF-R光学显微镜(Olympus公司，日本)；4111恒温培养箱(赛默飞世尔科技有限公司，中国)。
1.4 实验方法
1.4.1 实验动物分组将18只实验大鼠编号后按随机数字表发均分为3组，每组6只，即三七总皂苷组、模型对照组以及空白组。三七总皂苷组大鼠予0.12 g/kg血塞通软胶囊+2 mL生理盐水进行灌胃处理[16]，1次/d，持续2周；模型对照组大鼠予2 mL生理盐水灌胃处理，1次/d，持续2周；空白组大鼠正常饲养2周。
1.4.2 浓缩生长因子的制备给药2周后，在遵守无菌操作的条件下，三七总皂苷组和模型对照组大鼠以3%戊巴比妥钠溶液(1 mL/kg)腹腔注射麻醉后，从每只大鼠静脉采血并置于Medifuge离心机中，设置程序为：2 700 r/min 2 min，2 400 r/min 4 min，2 700 r/min 4 min，3 000 r/min 3 min。离心后采血管中血液样品可分为3层，即上层为血清，中间层为浓缩生长因子凝胶，下层为红细胞。无菌条件下分离出浓缩生长因子2份，其中一份置于-80 ℃冰箱保存以测定生长因子释放情况[17]，另一份制成凝胶压成胶膜用于骨折治疗[18]。

1.4.3 动物造模与浓缩生长因子植入浓缩生长因子制备完成后，正常饲养3组大鼠1周，再行骨折造模。在无菌操作下，用3%戊巴比妥钠溶液(1 mL/kg)腹腔注射麻醉大鼠，取右后肢剃毛消毒皮肤，于股骨前上1/2处作长约1.5 cm纵行切口，钝性分离组织、筋膜，横行锯断股骨，骨折端复位后予医用无菌1.0 mm克氏针2枚穿髓腔固定骨折端。造模完成后，将自体浓缩生长因子膜均匀覆盖在三七总皂苷组、模型对照组大鼠股骨骨折处，空白组大鼠的骨折处不予干预。3组大鼠行伤口缝合，再次皮肤消毒，小纱布绷带简单包扎。术后予分笼饲养，常规活动，肌注青霉素8×104 U预防感染，1次/d，共3 d[19]。

1.4.4 浓缩生长因子相关生长因子的质量浓度测定取三七总皂苷组与模型对照组的浓缩生长因子加DMEM培养基，置于37 ℃恒温培养箱中，分别在第1小时及1，3，5，7，9，11 d吸取浸出液，离心滤菌后转入新鲜的无菌EP管中，于-80 ℃冰箱保存备用，弃掉2，4，6，8，10 d的浸出液，并立即注入新鲜DMEM。待取完最后一天，所有样品采用ELISA法测定VEGF-A、PDGF-BB、转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子的释放浓度。

1.4.5 骨折模型观察指标造模后2个月对3组大鼠股骨骨折处进行X射线片检查，评估其愈合情况。拍片后予所有大鼠静脉注射过量3%戊巴比妥钠溶液处死。大体观察后行标本取材，经固定、脱钙脱水、包埋，以骨折为中心纵行连续切片，厚度约为4 μm，经苏木精-伊红染色，制成切片，光镜下观察，详见图1。

1.5 主要观察指标 ①三七总皂苷组和模型对照组大鼠浓缩生长因子相关生长因子的释放情况；②大鼠骨折X射线片及苏木精-伊红染色结果。
1.6 统计学分析实验数据由SPSS 23.0软件处理，以x±s表示，经t检验与单因素方差分析，P < 0.05 表示差异有显著性意义。

讨论

组织修复再生是当下医学领域研究的热点之一，继MARX[20]在2001年首次提出富血小板血浆概念之后，一系列血小板浓缩提取物相继问世并越来越多地被应用于包括齿颌修复、外科美容、骨折、骨缺损等在内的组织修复。尽管可能因为提取方法的多样而备受质疑[21]，但因其富含的生长因子和独特的纤维网状支架结构，不断地在临床试验中得到验证。浓缩生长因子作为第3代血小板浓缩物，相比于第1代和第2代，含有更高浓度的碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β、PDGF-BB以及VEGF-A。生长因子大多以化学键的形式紧密结合，随着浓缩生长因子纤维蛋白的降解而缓慢释放，发挥协同作用，通过刺激间充质细胞分化为成骨细胞，促进软骨、骨组织的修复和再生以及血管、纤维的生成[22]。其中碱性成纤维细胞生长因子是一种多肽，具有广泛的体外生物活性，如刺激细胞有丝分裂和趋化等，在体内已被证明是新生血管形成和最终胶原蛋白合成的有效刺激物[23]。细胞因子转化生长因子β功能丰富，可调节细胞的生长、黏附、增殖以及凋亡，同时还可以刺激成骨细胞的有丝分裂和趋化，并指导Ⅰ型胶原纤维和纤维连接蛋白的大量合成。PDGF-BB是一种碱性的蛋白质，可以刺激多种相关骨组织细胞的增殖进而促进人体骨组织愈合的过程[24]。VEGF-A能够调节血管内皮细胞的迁移、增殖和分化，对新骨的形成大有帮助[25]。
国内相关动物实验表明，在兔颅骨缺损模型中，浓缩生长因子能激活MAPK-ERK信号途径促进Runx2 mRNA与蛋白表达，发挥促进骨愈合的功能[26]。同时，浓缩生长因子的介入能够促进大鼠骨髓间充质干细胞的体外增殖、分化及迁移，从而促进成骨[27]。此外，浓缩生长因子可以通过上调相关生长因子的释放，从而促进兔髁突全层软骨损伤的早期修复[28]。综上所述，在不同类型、因素的骨损伤中，浓缩生长因子的介入均能加速骨组织愈合。然而，目前研究大多仅局限于单一的浓缩生长因子对骨折愈合或成骨方面的影响，鲜有在浓缩生长因子中加入中药有效成分对骨愈合进行干预的报道。
药用三七为五加科植物三七的干燥根茎，具有化瘀止血、消肿止痛的功效，用于治疗骨折、金创类伤科疾患在国内有着悠久的历史。现代研究已证实其具有抗凝抗炎、修复生成血管内皮、促进骨细胞骨痂组织的生成等作用[9-12]。三七总皂苷为三七的主要有效成分，其中活性物质包括三七皂苷R1，人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd等[29]。研究表明，三七皂苷R1能通过抑制RANKL介导的MAPK和核因子κB信号通路从而有效抑制钛颗粒诱导的骨溶解，以及通过RANKL调控破骨细胞生成和骨吸收；还可以通过抑制JNK信号通路、激活Wnt/βcatenin通路，显著减轻氧化应激诱导的线粒体损伤，恢复成骨细胞的分化[30-32]。而人参皂苷可促进骨形成和抑制骨吸收[33-34]，其中人参皂苷Rh1可以提高BMP-2/Runx2信号调节的成骨标志物如碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白和骨钙素的表达水平[35]。人参皂苷Rg1可通过激活GR/BMP-2信号通路促进成骨分化，增强骨钙化，并最终加速大鼠骨折愈合[36]。人参皂苷Re可通过影响碱性磷酸酶活性，激活MC3T3-E1细胞中的成骨细胞标志物来刺激成骨细胞分化，并抑制破骨细胞分化[37]。人参皂苷Rb1同样可以增强Runx2蛋白的表达进而调节Wnt/β-catenin信号通路来促进成骨细胞分化[38]。因此，三七总皂苷同样对骨折愈合发挥着显著的促进作用。
在此次实验中，使用三七总皂苷对浓缩生长因子促进骨折愈合的效应过程进行干预。经过测定后，发现在部分时间节点内三七总皂苷组的VEGF-A、PDGF-BB、转化生长因子β以及碱性成纤维细胞生长因子释放浓度均高于模型对照组，其中碱性成纤维细胞生长因子的浓度释放效能尤其显著，这与前人实验研究结果相符合[39]。同时，VEGF-A和转化生长因子β的浓度波峰在三七总皂苷的干预下伴有显著的后移，这表明三七总皂苷对相关因子释放的影响是多元化的。
关于生长因子的释放特性，一项研究表明，未发现性别或年龄对血小板计数或生长因子浓度的影响，虽然浓缩生长因子含量存在显著差异，但其影响因素仍值得进一步研究[40]。浓缩生长因子和富血小板纤维蛋白中的碱性成纤维细胞生长因子水平显著高于激活的血小板血浆。一方面，考虑与血小板合成分泌机制特殊、活性广泛有关，也可能是此次实验样本数据量少所致；另一方面，浓缩生长因子制备过程中的差异离心步骤可能使血小板不断发生碰撞和破裂，这也将提高生长因子的释放水平[41]。衰减相方面，曲线与模型对照组大致相符，这可能与中药的介入、离心的程序以及冻融法有关[42]。
造模后2个月进行X射线片检查发现，三七总皂苷组的骨折线情况、骨痂的生长、肢体的对位对线均优于模型对照组和空白组；取材行苏木精-伊红染色后发现三七总皂苷组的成骨效能同样优于模型对照组和空白组。这表明除了生长因子外，三七总皂苷促进浓缩生长因子影响骨折愈合的过程中，在系统影像学和微观组织学上同样具有相关性。
由于受时间、实验设计等条件限制，作者仅对大鼠进行了一次影像学检查，对远期预后的情况未能纳入此次实验。在兔骨缺损的动物实验中，对第6周的影像学进行分析，灰阶、骨量、骨密度方面，浓缩生长因子的介入显著优于模型对照组，但第12周的结果没有统计学意义[7]，即浓缩生长因子的远期影响有待研究。此外，各个生长因子对骨折愈合的最适浓度、效应时间窗及相互协同作用目前尚无定论。另外有研究发现，体积分数10%的浓缩生长因子相较于5%和20%[27]，表现出更快的促进细胞迁移能力，这也是此次实验设计未能考虑的地方。关于中药干预浓缩生长因子对骨折的治疗仍需要大样本数据以及更长时间的深入研究，例如中药复方、药对等配伍方式对浓缩生长因子的释放浓度、衰减相以及相互作用是否会优于单药，这些都是未来所需要关注的。
总之，浓缩生长因子作为生长因子的储存和释放载体，是组织修复和再生的一种新应用，具有取材安全方便、感染风险小等优势。基于此次实验结果，有理由相信，与以三七总皂苷为代表的中药有效成分共同作用的浓缩生长因子作为骨折治疗辅助手段有着广阔的前景，同时也需要更多研究来提供坚实的证据。
结论：三七总皂苷可以升高浓缩生长因子相关因子的释放浓度，三七总皂苷干预后的浓缩生长因子对促进大鼠骨折愈合更有优势。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

三七总皂苷上调浓缩生长因子释放促进大鼠骨折愈合

Panax notoginseng saponin promotes fracture healing by upregulating concentrated growth factors in rats

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