2.1   分离所得细胞的形态特征和增殖能力   原代细胞培养24 h左右时已开始贴壁生长，3 d时逐渐延展为大小不一的多角形或长梭形的类成纤维细胞状，见图1A；至培养8 d时，细胞汇合度达95%以上，细胞成旋涡状或鱼群状排列，见图1B。MTS实验绘制细胞的生长曲线可见，细胞增殖曲线大致呈“S”形，细胞增殖能力较好，见图1C。



2.2   分离所得细胞的鉴定结果   对P3代细胞进行3项分化鉴定可见：分离所得的细胞经成脂诱导液诱导分化10 d后，使用油红O染色可见细胞内含有的脂滴与油红O结合后被染成红色；用成骨诱导液诱导21 d后，经茜素红染色后可见细胞内出现红色钙盐沉积；用成软骨诱导液诱导分化21 d后，经阿利新蓝染色可见软骨基质中的黏性多糖与阿利新蓝结合，形成蓝色沉淀。经过3项分化实验可初步证实分离的细胞为间充质干细胞，见图2A-C。随后，通过免疫荧光染色，观察到分离所得的细胞高表达CD44，CD90，CD105，低表达CD34，符合国际细胞与基因治疗学会间充质基质细胞委员会对间充质干细胞的标准[17]，从细胞表面标志物层面证实分离得到的细胞为间充质干细胞，即脂肪干细胞，见图2D-I。



2.3   慢病毒转染脂肪干细胞效率观察    慢病毒转染72 h后使用倒置荧光显微镜观察生长激素组和空载组细胞形态及转染效率。镜下可见两组细胞形态均良好，转染效率达90%以上，但由于插入了生长激素基因，生长激素组细胞内绿色荧光蛋白表达降低，荧光信号较空载组稍弱，见图3。



2.4   转染结果的鉴定及ERK1/2通路表达情况   
2.4.1   RT-qPCR结果   生长激素组细胞内生长激素的相对表达量远高于空载组和对照组(P < 0.000 1)；但结果发现，生长激素组和空载组细胞内胰岛素样生长因子1较对照组表达明显上调(P < 0.000 1)，且空载组也高于生长激素组(P < 0.05)。
2.4.2   Western blot结果   生长激素组细胞内生长激素蛋白表达量较高，而空载组和对照组几乎不表达生长激素蛋白。生长激素组内ERK1/2、p-ERK1/2表达均上调。
2.4.3   Elisa实验结果   存在FBS的情况下，实验组上清中的生长激素水平高于空载组和对照组，差异有显著性意义，见图4；3组细胞上清液中胰岛素样生长因子1差异无显著性意义。



2.5   生长激素-脂肪干细胞促进成纤维细胞迁移和增殖   细胞划痕实验可见，24，48，72 h生长激素组成纤维细胞迁移至划痕区域的数量均多于空载组，至72 h基本已愈合。Transwell实验可见：通过五点取样法选择5个视野进行细胞计数，生长激素组成纤维细胞穿过小室的数量多于空载组(P < 0.001)。MTS实验可见：在接种后的第1-6天，生长激素组成纤维细胞增殖能力略好于空载组，其差异有显著性意义，见图5。



2.6   共培养对成纤维细胞基因表达的影响   RT-qPCR结果显示：与空载组成纤维细胞相比，生长激素组成纤维细胞基质金属蛋白酶2表达水平降低，而Ⅰ型胶原蛋白基因表达水平增高，Ⅲ型胶原蛋白基因表达水平未见统计学差异，见图6。



2.7   SCH772984抑制生长激素-脂肪干细胞ERK蛋白后对成纤维细胞基因表达的影响
2.7.1   Western blot结果   9 μmol/L SCH772984可抑制生长激素-脂肪干细胞内ERK1/2蛋白表达。
2.7.2   RT-qPCR结果   生长激素组成纤维细胞内基质金属蛋白酶2 mRNA表达水平低于抑制组和空载组，Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达水平高于抑制组和空载组，其差异均有显著性意义。而抑制组和空载组之间基质金属蛋白酶2和Ⅰ型胶原蛋白mRNA水平差异无显著性意义，见图7。

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创面愈合的过程极为复杂，涉及以下几个相互重叠的步骤：炎性细胞聚集、细胞增殖迁移、细胞外基质的沉积及重塑。当创面修复过程中的一个或多个环节停滞时，便导致创面迁延不愈转为慢性创面[1]。目前，皮肤组织工程是创面愈合研究的重要内容之一。已有表皮干细胞[2-3]、脂肪干细胞(adipose-derived stem cells，ADSC)[4-5]、脐带间充质干细胞[6-7]、骨髓间充质干细胞等多种种子细胞运用到皮肤组织工程的研究中[8-9]，其中脂肪干细胞具有来源丰富、取材方便等优点，这使其具有很高的临床应用前景[10]。生长激素具有免疫调节、促进细胞增殖和血管新生、促进蛋白合成等重要生理作用，已被多项研究证实可以促进烧伤[11]、糖尿病溃疡[12]、压力性损伤等急慢性创面的愈合[13]。由于蛋白类激素体内半衰期短，因此需频繁给药；此外，为保证创面局部药物浓度，常全身大量应用而导致糖代谢紊乱[14]。因此如何在创面局部持续合成生长激素是一个有待解决的难题。

在此背景下，该研究通过从大面积烧伤术后丢弃的脂肪组织中分离脂肪干细胞，并通过慢病毒转染法将生长激素基因转入脂肪干细胞中，构建生长激素-脂肪干细胞细胞系，检测细胞中生长激素基因表达及分泌情况，并探究了过表达生长激素对细胞外信号调节激酶(extracellular-signalregu-latedkinase，ERK1/2)通路的影响。此后，进一步探究了该细胞系对成纤维细胞增殖和迁移、基质金属蛋白酶2及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平的影响，为后续体内实验奠定基础。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

1.1   设计   随机对照细胞实验。2组间比较行独立样本t检验，3组组间总体比较行单因素方差分析，当总体均值间有显著差异时，进行SNK 法多重检验。
1.2   时间及地点   实验于2020年8月至2021年12月在内蒙古包钢医院、中国医学科学院整形外科医院完成。
1.3   材料
1.3.1   实验组织与细胞   脂肪组织来自于2020年9月内蒙古包钢医院烧伤外科收治的双下肢Ⅲ度烧伤患者，在行双下肢切削痂术前已告知该患者及其家属收集其术后废弃脂肪组织进行该研究，患者已签署知情同意书。成纤维细胞来自内蒙古包钢医院实验中心先前冻存的P1代细胞[15]。研究方案的实施符合内蒙古包钢医院的相关伦理审核要求(2020MER-031，审核日期2020年7月9日)。

1.3.2   实验主要试剂和仪器   过表达生长激素慢病毒(HBLV-h-GH1-GFP-3xflag-GFP-PURO)由上海汉恒生物科技有限公司合成；实验所需引物由北京六合华大基因科技有限公司合成；DMEM/F12培养基(美国 Hyclone公司)；胎牛血清、青霉素-链霉素溶液(美国 Gibco公司)；0.25%胰蛋白酶溶液、Ⅰ型胶原酶、胰岛素、吲哚美辛、IBMX、油红O、茜素红染液、抗坏血酸、结晶紫、DAPI(美国 Sigma-Aldrich公司)；阿利新蓝(上海如吉生物科技公司)；反转录试剂盒(日本 TaKaRa公司)；SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)；兔抗人CD34、CD44、CD90、CD105、生长激素、ERK1/2、p-ERK1/2多克隆一抗、山羊抗兔IgG二抗(美国 Abcam公司)；嘌呤霉素、hoechst(美国 Thermo Scientific公司)；MTS 增殖试剂盒(美国 SAB公司)；人生长激素、人胰岛素样生长因子1 ELISA试剂盒(上海仁捷生物有限公司)；SCH772984(Selleck中国)；层流生物安全柜、超微量分光光度计、恒温CO2培养箱、Transwell小室(美国 Thermo Scientific公司)，电热恒温水浴箱(上海一恒科技有限公司)，荧光显微镜(德国 Leica公司)，实时定量PCR仪(美国ABI Stepone Plus)，高速冷冻离心机(德国 Eppendorf公司)，酶标仪(美国 BioTek公司)，凝胶电泳仪(美国 Bio Rad公司)。
1.4   实验方法   
1.4.1   脂肪干细胞的分离培养   将手术后的废弃脂肪组织转入50 mL无菌注射器中，并加入适量生理盐水浸润，迅速将脂肪组织转至实验室进行脂肪干细胞分离。将脂肪组织中大体可见的毛细血管及结缔组织用显微镊小心地从中剥离去除，仅保留黄色脂肪颗粒，并将所获得的脂肪颗粒剪成乳糜状，加入含1%青霉素-链霉素溶液的PBS重悬组织后离心，取上层脂肪组织后加入等体积的0.1%Ⅰ型胶原酶于37 ℃恒温消化1 h。将消化成糊状的脂肪过筛后再次离心，此时可见离心管底部有细胞团块，弃上清液后用含1%青霉素-链霉素溶液和10% FBS的DMEM培养基重悬，接种于T 25培养瓶，每日观察，隔日换液。当细胞汇合度达80%时进行传代培养用于后续实验。MTS实验检测P3代分离所得细胞的增殖能力。
1.4.2   脂肪干细胞成脂、成骨、成软骨能力鉴定   取P3代生长状态良好的细胞接种至3个6孔板中，每孔接种细胞量约为1×105个。24 h后，分别更换成脂、成骨、成软骨诱导培养液，诱导培养液按配方配置[16]。成脂诱导3 d后更换为维持培养基，后与成骨和软骨诱导一致，每3 d换1次培养液。诱导9 d后，成脂分化组使用油红O染液避光染色1 h，在光学显微镜下观察脂滴形成情况。诱导21 d后，成骨分化组用茜素红染液染色30 min，在光学显微镜下观察钙沉积情况，成软骨分化组细胞用阿利新蓝冰醋酸染液染色30 min，在光学显微镜下观察细胞中黏性多糖的形成情况。
1.4.3   脂肪干细胞表面标志物鉴定   取P3代生长状态良好的细胞，消化后接种与24孔板，24 h后当细胞汇合度达60%左右时吸去培养基，用PBS清洗后加入40 g/L甲醛溶液固定30 min。吸去甲醛固定液，用PBS清洗3次，加入2% BSA细胞封闭液室温孵育约30 min。吸去BSA封闭液，用PBS清洗3次，加入300 μL已用2% BSA稀释为说明书工作浓度的兔抗人CD34，CD44，CD90，CD105多克隆一抗，4 ℃孵育过夜。吸去一抗，在摇床上用PBS清洗细胞3次，每次时长5 min，按说明书加入已用2% BSA稀释为工作浓度的山羊抗兔二抗，室温避光孵育1 h。吸去二抗，用PBS避光清洗细胞3次，每次5 min，用加入浓度为5 mg/L的DAPI染色液，避光染色5 min。吸去DAPI，用PBS清洗细胞3次，每孔加入适量PBS覆盖细胞。置于荧光显微镜下观察和拍照。

1.4.4   脂肪干细胞的转染和筛选   提前通过预实验确定适宜的感染复数(multiplicity of infection，MOI)。经课题组前期实验证实，MOI=3时，过表达生长激素的慢病毒转染脂肪干细胞即可有较好的转染效果，且使用病毒量较小，对细胞活性影响较低。将P3代生长状态良好的脂肪干细胞消化后接种于3个6孔板中，分别标记为生长激素组、空载组、对照组，37 ℃培养过夜。当细胞汇合度达60%左右时，吸去细胞原有培养基。6孔板内每孔加入含5 mg/L的polybrene的新鲜培养基1 mL，3组细胞分别加入适量携带生长激素基因的慢病毒、空载慢病毒、培养基，充分混合均匀后培养4 h。4 h后，向每孔中加入含有浓度为5 mg/L的polybrene的新鲜培养基1 mL，继续培养20 h。于转染24 h后，吸去含有慢病毒的培养基，更换为普通培养基继续培养72 h，观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)表达情况。随后培养基内加入终浓度为4 mg/L的嘌呤霉素筛选稳定转染株7 d。
1.4.5   转染效果的鉴定及ERK1/2通路相关基因表达情况

(1) RT-qPCR实验对比3组细胞内生长激素基因及ERK通路相关基因的表达水平：Trizol法分别提取生长激素组、空载组、对照组细胞中的总RNA，去除DNA组，反转录合成cDNA，然后使用SYBR Green Master Mix试剂盒进行实时定量聚合酶链反应，反应条件：95 ℃预变性10 min，95 ℃变性30 s，59 ℃退火30 s，进行40个循环。以GAPDH作为内参基因，采用2-ΔΔCT法计算目的基因相对表达水平。基因引物序列见表1。

(2) Western blot实验对比3组细胞内生长激素蛋白及ERK/p-ERK的表达情况：向培养板内加入适量RIPA裂解液，冰上裂解10 min，BCA法蛋白定量，加入SDS PAGE Loading Buffer，99 ℃，10 min蛋白变性。取等量蛋白上样，经SDS-PAGE电泳后转膜至PVDF膜上，然后将其浸于5%脱脂奶粉中室温封闭2 h，封闭后分别加入兔生长激素多克隆一抗(1∶10 000)，兔ERK1/2多克隆一抗(1∶10 000)，兔磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)多克隆一抗(1∶1 000)，兔GAPDH多克隆一抗(1∶10 000)，4 ℃孵育过夜。TBST洗膜3次，每次10 min之后加入山羊抗兔IgG二抗(1∶10 000)室温孵育2 h，TBST洗膜3次，每次10 min，洗膜后于暗室滴加ECL显影并用胶片定影。

(3) Elisa试剂盒测定各组上清液中的生长激素、人胰岛素样生长因子1水平：分别收集生长激素组、空载组、对照组细胞的培养上清液，设置空白孔、标准品孔和样本孔，每孔加标准品或样品50 μL，每孔加入酶标试剂 100 μL，用封板膜封板后置 37 ℃温育 60 min。弃去液体，洗涤液洗涤5次。每孔加入显色液，37 ℃避光显色 15 min。每孔加终止液50 μL，终止反应，以空白孔调零，450 nm 波长依序测量各孔的吸光度。绘制标准曲线，计算出各样品生长激素、人胰岛素样生长因子1的水平。
1.4.6   细胞划痕实验和Transwell实验   使用含2% FBS的DMEM/F12培养基培养生长激素组、空载组细胞24 h，收集细胞培养上清。将P3代成纤维细胞接种到6孔板中，待细胞长满后，使用200 μL移液器枪头在孔内划线，使用PBS将刮起的细胞漂洗3次，分别加入收集得到的两种培养上清液，每24 h对划痕部位进行拍照，对划痕区域内的细胞计数。将Transwell小室置于生长激素组和空载组的6孔板上，在Transwell小室内加入1.5 mL的成纤维细胞悬液，细胞量约为1×105个。共培养20 h后，进行甲醛固定、结晶紫染色，观察外侧膜上的细胞数量，并使用五点计数法计算每个视野内的细胞平均数。
1.4.7   MTS实验   分别收集生长激素组、空载组培养24 h时的上清液。将2.5×107 L-1的P3代成纤维细胞悬液接种至8个96孔板中，每孔加入100 μL细胞悬液。分别使用上述两种上清液培养成纤维细胞，于第8 小时，第1，2，3，4，5，6天换液，并取出一板细胞每孔加入MTS溶液20 μL，继续培养3 h后检测吸光度值。记录每日两组细胞的吸光度值，绘制折线图并做统计分析。
1.4.8   RT-qPCR实验   重复章节1.4.6共培养体系，培养至第3天时，将Transwell小室取出，提取膜两侧成纤维细胞内的总RNA，RT-qPCR法检测基质金属蛋白酶2、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的mRNA相对表达水平。
1.4.9   ERK蛋白抑制剂SCH772984预处理生长激素-脂肪干细胞   通过查阅文献及预实验确定浓度为9 μmol/L的SCH772984对生长激素-脂肪干细胞内ERK蛋白有抑制效果，同时此浓度对细胞生长增殖影响不明显。使用该浓度的SCH772984预处理生长激素-脂肪干细胞24 h，记为抑制组，提取细胞内蛋白使用Western blot检测抑制效果。
1.4.10   RT-qPCR法检测基质金属蛋白酶2、Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达水平   将生长激素组、空载组、抑制组细胞分别与成纤维细胞共培养，再次用RT-qPCR法检测基质金属蛋白酶2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA相对表达水平，观察抑制ERK蛋白后成纤维细胞分泌功能变化。
1.5   主要观察指标   ①成脂、成骨、成软骨分化实验、免疫荧光染色鉴定所分离细胞是否为脂肪干细胞；②脂肪干细胞过表达生长激素后生长激素合成和分泌水平；③过表达生长激素对细胞内ERK1/2通路的影响；④生长激素-脂肪干细胞对成纤维细胞增殖、迁移、胰岛素样生长因子1、基质金属蛋白酶2、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白基因表达的影响；⑤抑制生长激素-脂肪干细胞ERK蛋白对成纤维细胞因子分泌的影响。
1.6   统计学分析   采用SPSS 25.0、Prism GraphPad 8.0统计软件进行数据分析和统计图制作。计量资料数据均符合正态分布，2组间比较行独立样本t检验，3组组间总体比较行单因素方差分析，当总体均值间有显著差异时，进行SNK 法多重检验。P < 0.05为差异有显著性意义。文章统计学方法已经通过内蒙古包钢医院生物统计学专家审核。

组织工程是将细胞生物学和材料科学相结合，在体外或体内重建受损组织或器官的新兴学科。组织工程学的三要素是种子细胞、三维支架材料以及二者与体内微环境的有机整合[18]。对于多数急慢性创面来说，由于皮肤全层损伤，创面难以自行愈合，往往需要通过皮肤移植或皮瓣转移封闭创面，因此迫切需要发展皮肤组织工程解决当前“拆东墙、补西墙”的困境。而在深度创面的手术中，往往会切除大量脂肪组织，故脂肪干细胞是皮肤组织工程良好的种子细胞。慢病毒是一种转染高效、靶基因表达稳定与持久的基因工程载体，具有广泛的应用前景[19]。此次实验通过将生长激素基因转入种子细胞脂肪干细胞内，使得脂肪干细胞可以持续地合成并分泌生长激素，为后续体内实验奠定了基础。

目前临床上已有一些生长因子类药物用于治疗创面，如表皮生长因子[20]、碱性成纤维细胞生长因子[21]、血管内皮生长因子等[22]。但生长激素相比于上述生长因子基因长度更小，更易于转染，具有更广泛的生理作用。由于生长激素可以直接促进创面部位多种细胞增殖和血管新生、抑制炎症反应，还可促进白蛋白合成[23]，因此生长激素不但可促进创面局部愈合，也可改善大面积烧伤患者的全身营养状态。然而，全身大量应用生长激素存在糖代谢紊乱的风险，这对急慢性创面治疗极为不利，也是亟待解决的难题[24]。通过将过表达生长激素的脂肪干细胞移植到创面局部，可以避免生长激素全身大剂量应用的不良反应。ERK通路具有促进细胞生长、增殖、迁移、分化等重要生理功能。ERK1/2是该通路的下游组分，其调节机制、作用模式及其对各种生物体的发育和稳态的影响一直是人们关注的焦点[25]。此次研究发现过表达生长激素可上调ERK1/2表达、促进ERK1/2磷酸化，并能对其他细胞的功能产生一定影响。而当使用ERK1/2抑制剂预处理生长激素-脂肪干细胞后，其对成纤维细胞的积极影响消失，因此推测过表达生长激素是通过ERK通路促进了成纤维细胞的生物学功能。生长激素可通过上调ERK1/2通路促进胰岛素样生长因子1合成[26]。胰岛素样生长因子1具有降血糖、促进细胞生长、促进创面修复的作用[27]。但是RT-qPCR结果显示空载组细胞内胰岛素样生长因子1 mRNA表达较生长激素组和对照组都高，这不能用过表达生长激素解释。经查阅文献可知多种病毒感染后可引起细胞内胰岛素样生长因子1表达升高[28]。为了排除因胰岛素样生长因子1分泌水平不同对成纤维细胞功能的影响，进行ELISA实验检测3组细胞培养上清胰岛素样生长因子1蛋白水平差异，发现3组上清液中胰岛素样生长因子1质量浓度无显著差异，可能的原因是生长激素主要作用于肝细胞合成分泌胰岛素样生长因子1[12]，脂肪干细胞并不是胰岛素样生长因子1的主要分泌细胞，因此过表达生长激素对胰岛素样生长因子1合成和分泌的实际影响还需体内实验进一步观察。

另外，此次实验观察到生长激素-脂肪干细胞可促进成纤维细胞的增殖、迁移、调节创面愈合相关基因的转录。李金玺等[29]发现低浓重组人生长激素可促进成纤维细胞的增殖，而高浓度重组人生长激素没有此作用。此次实验虽然观察到生长激素-脂肪干细胞上清具有一定促进成纤维细胞增殖的作用，但该效果是由于分泌的生长激素直接作用于成纤维细胞，还是过表达生长激素间接导致其他细胞因子表达改变，还有待进一步探究。Ⅰ、Ⅲ型胶原是细胞外基质的重要组分，参与了从凝血到重塑的创面愈合全部阶段[30]。将生长激素-脂肪干细胞与成纤维细胞共培养，可提高Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达，而对Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达无显著影响。而AZIMI等[31]实验发现生长激素可促进成纤维细胞迁移并促进Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原基因的表达。此次研究的结论与之存在一定差异，可能是由于此次实验共培养体系中液体过多，导致分泌的生长激素被稀释，因此生长激素-脂肪干细胞的实际效果还需体内实验进一步验证。基质金属蛋白酶2是由间充质细胞、免疫细胞、内皮细胞等合成和分泌的一种蛋白酶，在创面愈合过程早期，主要由成纤维细胞分泌，可以分解细胞外基质破坏基膜，加重炎症反应[32]。生长激素-脂肪干细胞与成纤维细胞共培养后，基质金属蛋白酶2 mRNA表达水平显著降低，这可能是生长激素免疫调节的机制之一。

此次实验存在一定局限性。首先，该研究仅探究了生长激素-脂肪干细胞对成纤维细胞活性的影响，而生长激素生理作用广泛，除了对创面局部的血管内皮细胞、成纤维细胞、炎性细胞产生影响外，还可作用于肝细胞促进白蛋白合成改善全身营养，因此，后续还需体内研究进一步证实生长激素-脂肪干细胞的实际临床价值。其次，实验未能对Ras/ERK通路上的其他蛋白进行检测，未来需进一步深入研究。最后，生长激素-脂肪干细胞作为种子细胞，其移植方式、移植密度、在创面的存活时间、有无远处器官迁移等问题也有待摸索和观察。故下一步尝试将生长激素-脂肪干细胞与支架材料共培养，复合移植至全层皮肤缺损裸鼠模型的创面局部，探究生长激素-脂肪干细胞对创面修复的有效性及安全性。

综上所述，该研究通过慢病毒转染法构建能够持续分泌生长激素的种子细胞，并初步探究了其促进成纤维细胞增殖迁移的分子机制，以期解决目前生长激素在创面治疗中面临的难题，并为组织工程学在创面修复中的研究和应用提供了新的思路。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

文题释义：
脂肪干细胞(adipose-derived stem cells，ADSC)：是一群从脂肪组织中获取的中胚层来源的多能成体干细胞，具有自我更新及多向分化潜能，并可分泌多种生长因子和细胞因子，在免疫调节和细胞增殖迁移方面具有多种重要作用。
ERK1/2：是细胞外调节蛋白激酶。其主要被各种生长因子、离子射线、过氧化氢等磷酸化而激活，进入细胞核作用于E1k-1、c-myc、c-fos、c-jun、ATF、NF-kB和AP-1等转录因子，促进某些基因的转录与表达，和细胞的增殖与分化密切相关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

目前临床上已有一些生长因子类药物用于治疗创面，如表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子等。但生长激素相比于上述生长因子基因长度更小，更易于转染，具有更广泛的生理作用。由于生长激素可以直接促进创面部位多种细胞增殖和血管新生、抑制炎症反应，还可促进白蛋白合成，因此生长激素不但可促进创面局部愈合，也可改善大面积烧伤患者的全身营养状态。然而，全身大量应用生长激素存在糖代谢紊乱的风险，这对急慢性创面治疗极为不利，也是亟待解决的难题。通过将过表达生长激素的脂肪干细胞移植到创面局部，可以避免生长激素全身大剂量应用的不良反应。ERK通路具有促进细胞生长、增殖、迁移、分化等重要生理功能。ERK1/2是该通路的下游组分，其调节机制、作用模式及其对各种生物体的发育和稳态的影响一直是人们关注的焦点。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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