2.1   大鼠股骨大体观察及远端病理切片苏木精-伊红染色结果
2.1.1   大体观察   正常对照组股骨髁表面软骨光滑，呈乳白色，色泽光亮，软骨周围无增生及软化灶；骨关节炎组4周时股骨髁表面软骨有轻度磨损，呈白色，色泽稍暗，软骨边缘整齐，有轻度软化灶；6周时股骨髁表面软骨粗糙，色泽灰暗，可见部分软骨缺损，且周围骨赘形成；8周时股骨髁表面严重磨损，软骨大面积缺损，边缘有骨赘形成，见图1。




2.1.2   苏木精-伊红染色结果   正常对照组软骨细胞排列整齐，软骨结构层次清晰，潮线完整。骨关节炎组4周时软骨表面不规则，软骨细胞排列紊乱，苏木精-伊红染色基质略减退，关节面可见纤维形成，潮线出现轻微紊乱；6周时软骨表层出现部分裂缝，软骨细胞明显收缩，细胞核染色变小，软骨基质染色减退，潮线模糊；8周时软骨结构紊乱，表面有纤维覆盖，软骨细胞数量明显减少，软骨基质失染，潮线严重紊乱，见图2。



2.2   lncRNA HOTAIR在骨关节炎软骨细胞中表达增高   RT-PCR分别检测骨关节炎患者膝关节软骨与人正常软骨、骨关节炎大鼠模型与正常大鼠膝关节软骨中HOTAIR的mRNA表达。结果显示，骨关节炎患者膝关节软骨中的HOTAIR mRNA呈现高表达状态，与人正常关节软骨相比差异有显著性意义(P < 0.000 1)，见图3。结果发现患有骨关节炎的大鼠膝关节软骨中HOTAIR的mRNA表达相对于正常对照组大鼠明显增高，4，6，8周随造模时间的延长大鼠模型骨关节炎软骨细胞中HOTAIR的表达呈上升趋势，见图4。







2.3   白细胞介素1β降低大鼠膝关节软骨细胞活力且促进HOTAIR的表达增加    通过对大鼠膝关节软骨细胞加入不同质量浓度的白细胞介素1β后，可见到软骨细胞活力均有不同程度下降，且随着白细胞介素1β剂量的增加细胞活力逐渐下降，并在达到质量浓度10 μg/L以上出现明显下降(P < 0.05)，见图5。为了保持白细胞介素1β对软骨细胞的干扰，并尽可能的保持细胞活力，故选取10 μg/L的白细胞介素1β加入培养皿中模拟骨关节炎环境，同时构建并选取适宜的siRNA抑制HOTAIR的表达，结果发现加入白细胞介素1β的软骨细胞中HOTAIR的表达较对照组明显增加(P < 0.05)，见图6。







2.4   HOTAIR抑制大鼠膝关节软骨细胞活力及Ⅱ型胶原蛋白的表达   通过检测各组的软骨细胞活力，发现同时加入siRNA、白细胞介素1β的软骨细胞较单纯加入白细胞介素1β的软骨细胞活力明显增强，见图7。运用Westen bolt检测各组大鼠膝关节软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达，发现同时加入siRNA及白细胞介素1β的软骨细胞较加入白细胞介素1β的软骨细胞中Ⅱ型胶原蛋白的表达明显增加，见图8。







2.5  HOTAIR的表达促进软骨细胞凋亡  通过流式细胞仪检测各组软骨细胞凋亡情况，发现对照组、白细胞介素1β组、siRNA组及白细胞介素1β+siRNA组细胞凋亡水平分别为2.1%，44.4%，2.2%，17%，见图9。

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骨关节炎是老年人中最常见的关节疾病，在65岁以上的老年人群体中，大约有1/3患有骨关节炎[1]，且女性患骨关节炎的概率明显高于男性。有研究表明，随着现代医学技术的发展和进步，人民生活水平逐渐的升高，平均寿命及预期寿命的不断增加，受年龄、性别、肥胖、创伤等致病因素的影响，骨关节炎的发病率越来越高，而且随年龄增长，病情会逐渐进展，最终导致关节疼痛、活动受限、畸形，严重影响了患者的生活质量[2]。在骨关节炎的发生发展过程中，其病理特征在于关节软骨局灶性缺如、骨赘形成、软骨下骨改变及关节滑膜增生[3]，其中软骨的异常改变又是当今研究的主要方向。关节软骨由细胞聚集密度相对较低的软骨细胞(仅占总组织体积约1%)和丰富的高度特异性细胞外基质组成[4]。细胞外基质由软骨细胞产生，主要由Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖组成，且其产生及成熟周转速度异常缓慢[5]。目前对骨关节炎发病机制的了解仍不完全，给患者提供的治疗选择还具有一定的局限性[6]，往往无法有效遏制骨关节炎的发展。

现大多数学者认为白细胞分泌的白细胞介素1β在软骨损伤的机制中是非常重要的因素，白细胞介素1β通过多种途径和机制参与软骨损伤过程的发生和发展[7-8]，其中包括：①通过核因子κB通路，白细胞介素1β刺激基质金属蛋白酶合成增加，从而导致Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白多糖在内的软骨基质的过度降解；②使环氧化酶2和前列腺素E2过表达，加重软骨损伤的级联反应；③白细胞介素1β使一氧化氮的表达增加，从而诱导软骨细胞的凋亡；④白细胞介素1β刺激细胞分泌大量的致炎因子，使得关节腔内的炎症加剧。凋亡是细胞自然生长中的一种程序性死亡，目的是清除体内不必要和受损的细胞使机体保持健康状态。有研究发现，软骨细胞的死亡和细胞外基质的降解存在一个正反馈的相互作用，这使得软骨损伤逐渐加重，骨关节炎持续发展，形成了一个恶性循环[9]。同时有文献报道，软骨的损伤与细胞凋亡之间有明确的关系[10-11]，然而现有的研究对于软骨细胞凋亡是诱导软骨损伤的原因还是软骨损伤导致的细胞凋亡仍不清楚。因此，目前还没有有效的办法来逆转或减缓膝骨关节炎的进展。所以，寻找能有效缓解甚至逆转软骨细胞凋亡，从而缓解患者疾病的进展和痛苦的方法是非常必要的[12]。

长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA) HOTAIR是从HOXC基因簇的反义链转录而来的，在多种恶性肿瘤中过表达。XING等[13]在对骨关节炎患者关节软骨及正常人关节软骨进行研究后发现，lncRNA HOTAIR较对照组明显上调，可能与骨关节炎的发生有一定关系。目前对于lncRNA HOTAIR在人类膝关节骨关节炎发病中的作用方面的研究较少。2016年ZHANG等[14]通过对下颌关节骨关节炎进行研究后发现，在人类下颌关节骨关节炎滑液中及动物模型软骨中lncRNA HOTAIR表达均明显升高，白细胞介素1β可以增加软骨细胞中lncRNA HOTAIR的表达，而对lncRNA HOTAIR行基因敲除后，可以明显下调基质金属蛋白酶1，3，9的表达，起到保护软骨的作用。有学者通过RT-PCR方法对非创伤性股骨头坏死来源的骨髓间充质干细胞进行研究，发现lncRNA HOTAIR较骨关节炎组表达升高，通过对lncRNA HOTAIR行基因敲除，成骨分化和增殖相关的分子标志物如RUNX2、COL1A1的mRNA表达明显升高，表明lncRNA HOTAIR可以促进成骨分化与增殖[15]。

此次研究旨在通过观测骨关节炎患者切除区软骨细胞和非骨关节炎患者软骨细胞及大鼠膝关节软骨细胞中lncRNA HOTAIR的表达及软骨细胞活力来探讨lncRNA HOTAIR在软骨细胞凋亡过程中的作用机制。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

1.1   设计   细胞分子生物学实验，动物对照实验，多组比较采用方差分析，组间比较采用独立样本t检验。
1.2   时间及地点   实验于2019年10月至2020年10月在济宁医学院附属医院医学研究中心实验室完成。
1.3   材料
1.3.1   临床样本   于济宁医学院附属医院选取20例关节炎行全膝关节表面置换患者的内侧髁软骨作为骨关节炎组；同时选取7例行下肢截肢术或因股骨颈骨折行全髋关节置换患者 的关节软骨作为正常对照组，术中收集股骨头关节软骨及膝关节软骨。

纳入标准：骨关节炎组为因骨关节炎初次行全膝关节置换患者；正常对照组为行下肢截肢术或因股骨颈骨折行全髋关节置换患者。

排除标准：骨关节炎组排除类风湿性关节炎患者；正常对照组排除患有骨关节炎或类风湿性关节炎患者。

研究方案经济宁医学院附属医院伦理学委员会批准。参与试验的患病个体及其家属对试验过程完全知情同意，所有患者及家属均签署知情同意书。
1.3.2   主要仪器及试剂   倒置相差显微镜(日本，奥林巴斯CKX53)；多功能酶标仪(中国，赛默飞世尔 Multiskan SkyHigh)；PCR仪(中国，赛默飞世尔 Applied Biosystems)；RT-PCR仪(美国，伯乐CFX96)；Westblot 电泳仪(中国，韦克斯WIX-EP300)；凝胶成像仪(中国，Tanon5800)；TRIzol(中国，Life Technologies)；RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(中国，赛默飞世尔)；SYBR Green Master(中国，莫奈生物)；si-Hotair(中国，锐博公司)；转染试剂(中国，碧云天Lipo8000)；胰蛋白酶-EDTA(美国，Gibco)；磷酸盐缓冲液(美国，Gibco)；白细胞介素1β(中国，Stemcll)；CCK-8(中国，碧云天)；PVDF膜(中国，赛默飞世尔)；Ⅱ型胶原蛋白一抗(中国，Abcam)；Ⅱ型胶原蛋白二抗(中国，碧云天)。
1.3.3   实验动物   SPF级SD大鼠48只购于济南朋悦实验动物繁育有限公司，雄性，6周龄，体质量(200±10) g，许可证号：SCXK(鲁)20190003。大鼠饲养环境为屏蔽环境，自然昼夜条件，明暗周期12 h，温度(25±2) ℃，自由饮水，湿度40%-50%。分为骨关节炎组和正常对照组，骨关节炎组根据取材时间分为4，6，8周组，每组12只，最后每组存活9只。
1.3.4   软骨细胞   大鼠关节软骨细胞(RCCs-1)由苏州酷赛生物科技有限公司提供。
1.4   实验方法   
1.4.1   骨关节炎大鼠模型构建   SD大鼠称质量后，使用1 mL注射器抽取2%的戊巴比妥钠对大鼠行腹腔注射(2 mL/kg)，使用电子剃毛刀剃除大鼠左下肢所有毛发，将大鼠仰卧位固定于无菌操作台，爱尔碘消毒左下肢3遍，铺无菌洞巾。屈曲大鼠左膝关节，取内侧髌骨旁入路，切开股四头肌后外翻髌骨，使用针刀切断内侧副韧带及前后交叉韧带，行外翻应力试验及前后抽屉试验确认韧带已被切断，同时行前抽屉试验显露半月板并切除内侧半月板。手术完成后使用碘伏冲洗关节腔3次，无菌纱布擦干后使用4-0外科慕丝线缝合关节腔、股四头肌及皮肤，缝合完成后使用碘伏消毒并进行无菌纱布包扎。 

1.4.2   大鼠标本获取   分别于造模后4，6，8周麻醉后处死大鼠，切开关节囊暴露膝关节后使用手术刀及组织剪切断股骨周围肌腱并剥离剩余软组织，咬骨钳取下股骨，放入DEPC水中清洗。
1.4.3   大鼠股骨远端病理切片苏木精-伊红染色   获取大鼠股骨后取约1.0 mm×2.0 mm股骨内侧髁软骨放入40 g/L多聚甲醛中固定2周，EDTA 37℃下脱钙2周。按照脱水机程序进行脱水处理，脱水后将软骨放入比例为1∶1的二甲苯-无水乙醇中浸泡1 h，转入二甲苯溶液中浸泡1 h。将处理过后的软骨组织放入二甲苯-石蜡液体中进行包埋，置于制冷剂上进行凝固，将蜡块放于切片机上，调整切片厚度为4 mm，进行切片，将切片展平后置入45℃的纯水中，使用防脱载玻片将切片捞起，使切片均匀贴附于载玻片中央，然后将载玻片放于烘烤机中于65℃中烘烤45 min，最后放入染色机中进行程序染色。
1.4.4   细胞培养及传代   接收大鼠关节软骨细胞(RCCS-1)后，弃1/2 原培养基。于CO2培养箱中静置3 h，弃去全部培养基，加入2 mL PBS清洗，弃去PBS，加入Trypsin-EDTA 1 mL，室温消化，显微镜下观察，待大部分贴壁细胞悬浮(大约2 min)，加入新鲜DMEM培养基终止消化并吹打剩余细胞脱落形成细胞悬液高速离心5 min(1 000 r/min)，弃上清液，加入新鲜培养基重悬，平均移至 2 个 60 mm 培养皿中，继续培养。 

培养液消化后，吸弃胰蛋白酶液，加入新培养液。将己消化适度的贴壁细胞吹打成细胞悬液后以1 000 r/min离心5 min。弃去上清液，加入2 mL新培养液，制成细胞悬液分装至3个培养皿中，加入适量培养基。

1.4.5   白细胞介素1β处理大鼠膝关节软骨细胞活力检测   取对数生长期软骨细胞，稀释细胞浓度至5×107 L-1，接种至96孔板，每孔100 μL，分别加入质量浓度为1，5，10，50，100 μg/L的白细胞介素1β溶液，吹打混匀后放入培养箱内培养24 h，然后加入CCK-8试剂，使用酶标仪进行检测，根据A450计算细胞活力值。为保证细胞活力及白细胞介素1β干扰效果，经过筛选用10 μg/L的白细胞介素1β溶液进行后续实验。
1.4.6   RT-PCR检测

(1)骨关节炎患者膝关节软骨与人正常软骨、骨关节炎大鼠模型膝关节软骨与正常大鼠关节软骨中HOTAIR的mRNA表达：通过Trizol法提取总RNA后使用分光光度计检测RNA浓度，然后按照反转录试剂盒说明书合成cDNA，PCR体系：上游引物、下游引物各1 μL，cDNA样本2 μL，8 μL qPCR混合物，8 μL无菌去离子水。反应条件：95 ℃下预变性10 min，95 ℃下变性15 s，60 ℃退火60 s，循环40次。检测HOTAIR的表达量，以循环阈值(Ct)表示，其相对表达量用2-ΔΔCt值表示：2-ΔΔCt=2-ΔCT(OA)-ΔCT(Nor)，ΔCT(OA)=CT(目的基因)- CT(内标基因)；ΔCT(Nor)=CT(目的基因)-CT(内标基因)。

(2)白细胞介素1β处理的RCCs-1细胞中lncRNA HOTAIR的mRNA表达：将RCCs-1细胞浓度稀释至5×107L-1，接种至6孔板，每孔100 μL，实验分为对照组及白细胞介素1β组，白细胞介素1β组加入质量浓度为10 μg/L的白细胞介素1β溶液培养24 h，按照RT-PCR法检测HOTAIR的表达。

实验目的基因LncRNA HOTAIR及内参基因GAPDH序列的引物均由江苏金唯智公司设计制作。各引物信息见表1。

1.4.7   siRNA干扰   选取10 μg/L的白细胞介素1β加入培养皿中模拟骨关节炎环境，同时构建并选取适宜的siRNA抑制HOTAIR的表达。将RCCs-1细胞分为对照组、白细胞介素1β组、siRNA组、白细胞介素1β+siRNA组，细胞浓度为5×107 L-1接种至6孔板，每孔1 mL；白细胞介素1β组加入1 mL 10 μg/L的白细胞介素1β溶液模拟骨关节炎环境；siRNA组加入10 μL浓度为20 μmol/L的siRNA溶液；白细胞介素1β+siRNA组同时加入1 mL 10 μg/L的白细胞介素1β溶液及10 μL浓度为20 μmol/L的siRNA溶液，按照试剂说明书进行细胞转染，培养细胞48 h后提取总RNA进行RT-PCR检测HOTAIR表达量。si-Hotair干扰序列由锐博公司合成，其靶序列为CCA CGA AGC TAG AGA GAG A。

1.4.8   流式细胞技术检测细胞凋亡   按照1.4.7分组及步骤处理细胞后，培养皿内加入1 mL胰酶混匀，将细胞悬液高速离心后弃上清，加入适量PBS吹打使细胞悬浮，计数3次，取平均值。根据计数结果，取大约10×104细胞，加至1.5 mL无菌离心管，高速离心机1 000×g下离心5 min，弃上清液，依次加入195 µL结合液、5 µL凋亡检测试剂、碘化丙啶染液10 µL并混匀。室温避光孵育20 min后，每5 min重悬细胞1次后，随即冰浴转运，中途注意避光，使用流式细胞仪进行凋亡检测。
1.4.9   Western blot检测各组RCCs-1细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达   按照1.4.7分组及步骤处理细胞后，均使用PBS冲洗软骨细胞，加入RIPA裂解液，提取总蛋白。使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。按照 4∶1 的比例加入蛋白溶液和蛋白上样缓冲液，95 ℃水浴变性15 min。样品经四甲基乙二胺凝胶电泳后转移到聚偏二氟乙烯膜上，在TBST 5%脱脂牛奶中封闭1 h。进行一抗稀释，4 ℃孵育摇床过夜。用TBST洗涤后用TBST按照1∶3 000的比例稀释二抗，然后加入孵育槽中。最后加入混合好的 ECL 溶液充分反应，1.0-2.0 min 后利用凝胶成像仪成像并分析。 
1.5   主要观察指标   ①大鼠股骨大体观察及远端病理切片苏木精-伊红染色结果；②lnc HOTAIR在人和大鼠骨关节炎软骨细胞中的表达；③白细胞介素1β处理大鼠膝关节软骨细胞活力及HOTAIR的表达；④软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白表达；⑤软骨细胞凋亡情况。
1.6   统计学分析   实验所有数据均使用SPSS 24.0 统计软件进行统计学处理，计量资料用x±s表示，进行正态分布检验(P > 0.05)和方差齐性检验(P > 0.05)，多组比较采用方差分析，组间比较采用独立样本t检验，以 P < 0.05 为差异有显著性意义。文章统计学方法已经济宁医学院附属医院生物统计学专家审核。

骨关节炎是临床上最常见的慢性退行性疾病之一，其特征是进行性的软骨退行性变和软骨下骨重塑[17]。软骨由软骨细胞和多种细胞外基质构成，软骨在细胞外基质的合成和降解平衡中形成，在降解的过程中，软骨细胞产生基质金属蛋白酶，各类的去整合素和带有血栓反应蛋白基序的金属蛋白酶降解细胞外基质，从而使细胞外基质合成过程被抑制并降解[18]。lncRNA是由超过200个核苷酸组成的，具有很少或没有编码蛋白能力的RNA片段[19-20]。近些年来，lncRNA因为被发现参与细胞凋亡、免疫调节、细胞分化等过程而受到越来越多的研究和关注[21]。微阵列分析表明，骨关节炎软骨细胞中有121个lncRNA表达量增加，其中包括HOTAIR、H19、GAS5、CTD-2574D22.4等73个lncRNA表达显著增加[22]，其中又以HOTAIR表达差异最大。所以lncRNA被认为可能是治疗骨关节炎的新方向，目前关于lncRNA HOTAIR的研究主要集中在许多人类的恶性肿瘤方面，如肝细胞癌[23]、肺癌[24]、胃癌[25]、结直肠癌[26]、乳腺癌[27]、宫颈癌等恶性肿瘤中lncRNA HOTAIR均呈现出高表达状态[28]。

很多研究表明，HOTAIR可以通过多种通路调节肿瘤的多步发展，例如在乳腺癌中，HOTAIR通过miR-20A-5P/HMGA2轴促进细胞的生长、侵袭、迁移和凋亡等过程[29]。除此之外，有研究发现在经过脂多糖治疗的类风湿性关节炎小鼠模型中HOTAIR表达量显著增加且抑制核因子κB的激活，从而导致白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的下调[30]。有学者认为Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路可能是骨关节炎中组织纤维化和修复过程中的重要通路[31]。同时有实验证明HOTAIR在Wnt/β-catenin通路在降低WIF-1(Wnt inhibitory factor 1)的表达中起重大作用，除此之外，Wnt/β-catenin通路还是调节基质金属蛋白酶13表达的一条重要通路，而基质金属蛋白酶13的表达是关节软骨细胞外基质中Ⅱ型胶原蛋白降解的重要因素[32]。孙强等[33]在使用慢病毒作为载体转染骨关节炎软骨细胞使其HOTAIR过表达后，发现转染后的骨关节炎软骨细胞的增殖明显降低。实验证明HOTAIR能够靶向结合miR-130a-3p，所以在骨关节炎软骨细胞miR-130a-3p的表达水平明显低于正常软骨细胞。此外还有研究者发现miR-17-3P和miR-138在类风湿性关节炎软骨细胞中同样可以结合HOTAIR并参与骨分化的调控[34-35]。

此次研究首先通过检测骨关节炎患者软骨细胞及正常软骨细胞中HOTAIR的表达，证明了HOTAIR在骨关节炎软骨细胞中表达增加。然而在骨关节炎患者的关节中HOTAIR的表达并未随病程的延长而增高，这可能是由于所检测患者均为晚期关节炎，或患者所述病程与实际有偏差，且患者术前所行其他治疗可能对HOTAIR的表达也有所影响；并且，由于实验样本容量较小，可能需要进一步扩大样本容量进行分析。之后进行大鼠关节软骨细胞培养并使用白细胞介素1β诱导正常软骨细胞模拟骨关节炎环境，同时进行大鼠骨关节炎模型的建立，取材后分别以CCK-8法检测细胞活力、流式细胞学技术检测细胞凋亡、Western blot技术检测Ⅱ型胶原蛋白的表达；同时使用RT-PCR技术检测各组软骨细胞中HOTAIR的表达情况。结果证明了HOTAIR的高表达存在于骨关节炎患者的关节软骨，并证明了这种高表达的现象还存在于大鼠关节软骨中，故实验采用大鼠关节软骨细胞(RCCS-1)进行后续的细胞活性、凋亡及Ⅱ型胶原蛋白的测定。每一项实验均分为对照组，白细胞介素1β组，siRNA组以及白细胞介素1β+siRNA，通过比较各组间HOTAIR的表达证明了白细胞介素1β能够通过HOTAIR高表达，从而降低软骨细胞的活力，使得软骨细胞凋亡增加，Ⅱ型胶原蛋白合成分泌减少。这表明白细胞介素1β促进软骨细胞凋亡，而干扰HOTAIR的表达后，细胞凋亡水平得到了抑制，说明白细胞介素1β介导的大鼠膝关节软骨细胞凋亡可能是通过促进HOTAIR的过表达实现的，所以干扰HOTAIR的表达抑制了白细胞介素1β介导的大鼠膝关节软骨细胞凋亡。因此，实验的结果提示，抑制HOTAIR介导的软骨细胞凋亡可能是膝骨关节炎基因治疗的潜在机制，可能为将来治疗膝骨关节炎提供一个精确的靶点。然而实验结果显示干扰HOTAIR的表达后虽然可以逆转白细胞介素1β导致的软细胞凋亡及Ⅱ型胶原蛋白降解，但这种差异却不能完全逆转这种关节炎进展趋势，所以白细胞介素1β导致的关节炎可能还有其他的的通路协同HOTAIR表达完成的，而并非单独由HOTAIR基因的表达完成的。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

文题释义：
LncRNA HOTAIR：长链非编码RNA(LncNRA)是一类转录本长度超过200 nt的RNA分子，它们并不编码蛋白，而是以RNA的形式在多种层面上调控基因的表达水平。而LncRNA HOTAIR 是一个长约2 158 nt的反义RNA，反式调控不同染色体上的HOX基因簇。
小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)：有时称为短干扰RNA(short interfering RNA)或沉默RNA(silencing RNA)，是一个长20-25个核苷酸的双股RNA，在生物学上有许多不同的用途。目前已知siRNA主要参与RNA干扰(RNAi)现象，以带有专一性的方式调节基因的表达。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

骨关节炎又称退行性骨关节病、退行性关节炎、老年性关节炎等是一种退行性病变，是由老龄化、肥胖、劳损、创伤、先天异常、畸形等因素引起的关节软骨退变、关节边缘和软骨下骨反应性增生。 近些年来，lncRNA因为被发现参与细胞凋亡、免疫调节、细胞分化等过程而受到越来越多的研究和关注。微阵列分析表明，骨关节炎软骨细胞中由121个lncRNA表达量增加，其中包括HOTAIR、H19、GAS5、CTD-2574D22.4等73个lncRNA表达显著增加，其中又以HOTAIR表达差异最大。所以lncRNA被认为可能是治疗骨关节炎的新方向。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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