含血管内皮生长因子缓释微粒显微缝线促进大鼠小血管吻合后的内皮再生

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.0062

中国组织工程研究 ›› 2018, Vol. 22 ›› Issue (6): 877-882.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.0062

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含血管内皮生长因子缓释微粒显微缝线促进大鼠小血管吻合后的内皮再生

张铁慧，梁武，任远飞，董玉金，杨文峰，尚耀华，李巨涛，钟声

大连市中心医院手足外一科，辽宁省大连市 116038

收稿日期:2017-09-14 出版日期:2018-02-28 发布日期:2018-02-28
通讯作者: 钟声，硕士，主治医师，大连市中心医院手足外一科，辽宁省大连市 116038
作者简介:张铁慧，男，1968年生，吉林省梨树县人，汉族，主任医师，教授，主要从事生物材料与显微外科研究。
基金资助:
大连市科技局课题(2015E21SF008)

Application of microsutures with vascular endothelial growth factor to improve vascular endothelial regeneration after small vessel anastomosis in the rats

Zhang Tie-hui, Liang Wu, Ren Yuan-fei, Dong Yu-jin, Yang Wen-feng, Shang Yao-hua, Li Ju-tao, Zhong Sheng

Department of Hands and Feet Microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, Liaoning Province, China

Received:2017-09-14 Online:2018-02-28 Published:2018-02-28
Contact: Zhong Sheng, Master, Attending physician, Department of Hands and Feet Microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, Liaoning Province, China
About author:Zhang Tie-hui, Chief physician, Professor, Department of Hands and Feet Microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, Liaoning Province, China
Supported by:
the Project of Dalian Science and Technology Department, No. 2015E21SF008

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：

血管内皮生长因子：是一种可调节血管内皮细胞功能的活性二聚蛋白信号多肽，具有诱导和刺激内皮细胞生长，调节增殖的生物效应，在细胞、组织和器官的再生及修复中有重要作用，其作用贯穿于人类生殖、发育、组织再生和修复及肿瘤发生等多种生理病理过程。

吻合处血管内皮细胞的来源：可能有3种，直接由吻合口两端正常血管的内皮细胞迁移而来；微小血管经吻合处孔隙向管腔内生长；内皮细胞从流经的血液中经诱导因子沉降到血管吻合口表面。

血管内皮细胞的作用：血管内皮细胞的再生与修复在小血管吻合后起重要作用。内皮细胞位于血管内腔面，呈单层细胞排列，不仅是介于血管壁和血液之间的屏障结构，而且能合成和分泌多种生物活性物质，维持血管收缩与舒张、凝血与抗凝血等平衡，保持血液正常流动和血管长期通畅。

背景：血管内皮生长因子具有成血管作用，目前国内构建血管内皮生长因子缓释微粒缝线预防血管吻合术后并发症方面的报道较少。

目的：合成含血管内皮生长因子的缓释微粒缝线，评估其对大鼠小血管吻合后血管再生的作用。

方法：采用乳化分散法制备包裹血管内皮生长因子的可生物降解高分子聚乳酸/乙醇酸共聚物微粒，将其负载于显微缝线中，制备含血管内皮生长因子缓释微粒显微缝线。取90只SD大鼠，制作尾动脉血管吻合模型，随机分2组，实验组采用含血管内皮生长因子缓释微粒显微缝线进行吻合，对照组采用普通显微缝线进行吻合，吻合后2 h、12 h、1 d、3 d、7 d，观察两组并发症发生情况、外周血血管内皮生长因子水平及血管吻合处苏木精-伊红染色结果。

结果与结论：①并发症情况：实验组术后皮肤坏死发生率明显小于对照组(P < 0.05)；②血管内皮生长因子水平：实验组术后不同时间点的外周血血管内皮生长因子水平均高于对照组(P < 0.05)；③苏木精-伊红染色：实验组血管吻合后1 d，吻合口缝线附近可见增生的内皮细胞；吻合后3 d，小血管吻合口两端缝线附近可见大量增生的内皮细胞和内皮下组织，完成覆盖缝线；吻合后1周，内皮细胞及内弹性膜修复完全，平滑肌细胞进一步增生，外膜恢复正常。对照组血管吻合后1 d，吻合口缝线附近表现为创伤后细胞变性坏死，仅外膜层细胞浸润并呈创伤性增生反应；吻合后3 d，内皮细胞脱落区出现新生内皮细胞，并出现生长移行，吻合口开始有少量内皮细胞覆盖；吻合后5-7 d，新生的内皮细胞爬过吻合口裂隙并覆盖缝线；④结果表明：含血管内皮生长因子缓释微粒显微缝线可促进大鼠小血管吻合内皮的再生。

ORCID: 0000-0002-8191-5223(钟声)
中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

关键词: 小血管吻合, 血管再生, 术后并发症, 血栓形成, 血管内皮生长因子, 人工材料, 小血管修复, 显微缝线, 生物材料, 聚乳酸/乙醇酸共聚物

Abstract:

BACKGROUND: The vascular endothelial growth factor (VEGF) plays an important role in the development and formation of blood vessels. Up to now, there are few reports about the treatment of postoperative complications of vascular anastomosis surgery by mcrosutures with VEGF in China.

OBJECTIVE: To synthesiize microsutures with VEGF and to evaluate its effect in revascularization following small vessel anastomosis.

METHODS: The method of emulsification-diffusion was use to produce biodegradable polymer polylactic acid/glycolic acid (PLGA) copolymer microparticles containing VEGF, and then, the microparticles were added into microsutures to prepare microsutures with VEGF. Ninety Sprague-Dawley rats were enrolled to make animal models of caudal artery anastomosis using microsutures with VEGF in experimental group and microsutures alone in control group. Complications and VEGF level in the peripheral blood were detected and hematoxylin-eosin staining at the anastomotic site was performed at 2, 12 hours, 1, 3, 7 days after anastomosis.

RESULTS AND CONCLUSION: (1) Postoperative complications: The postoperative incidence of skin necrosis was significantly lower in the experimental group than the control group (P < 0.05). (2) VEGF level: Compared with the control group, the peripheral blood VEGF level was significantly higher in the experimental group at each time point after operation (P < 0.05). (3) Hematoxylin-eosin staining: In the experimental group, proliferated endothelial cells were seen near the anastomotic site at 1 day after anastomosis; there were a large number of proliferated endothelial cells and subcutaneous tissues covering the sutures completely at 3 days after anastomosis; and endothelial cells and internal elastic lamina were completely repaired, smooth muscle cells proliferated further, and the outer membrane returned to normal at 1 week after anastomosis. In the control group, cell degeneration and necrosis were seen near the anastomotic suture, and only adventitial cells infiltrated and exhibited a traumatic proliferative response at 1 day after anastomosis; neonatal endothelial cells appeared in the exfoliated area of the endothelial cells, grew and migrated, and there was a few endothelial cells covering the anastomotic site at 3 days after anastomosis; and newborn endothelial cells got over the anastomotic crack and covered the suture. To conclude, microsutures with sustained-release VEGF microparticles can promote endothelial cell regeneration in rats at the anastomotic site.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

Key words: Vascular Endothelial Growth Factors, Microsurgery, Microsomes, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

张铁慧，梁武，任远飞，董玉金，杨文峰，尚耀华，李巨涛，钟声. 含血管内皮生长因子缓释微粒显微缝线促进大鼠小血管吻合后的内皮再生[J]. 中国组织工程研究, 2018, 22(6): 877-882.

Zhang Tie-hui, Liang Wu, Ren Yuan-fei, Dong Yu-jin, Yang Wen-feng, Shang Yao-hua, Li Ju-tao, Zhong Sheng. Application of microsutures with vascular endothelial growth factor to improve vascular endothelial regeneration after small vessel anastomosis in the rats[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2018, 22(6): 877-882.

图/表（结果） 5

2.1 检测血管内皮因子缓释微粒大小激光粒度分析仪测量测试15份微粒的粒径范围为83-121 nm，平均粒径为(104.25±17.03)nm。其中1份样本测量直径为53.27 μm，考虑原因为多个微粒聚合而成，予以排除该样本。

2.2 微粒中血管内皮因子的体外释放检测孵育1 d时，微粒中的血管内皮生长因子释放量为15.54%，表现为爆发性释放，随后释放速度有所减慢，在第5天后又有一个快速释放期，但速度小于第一个快速释放期，第8天以后呈持续缓慢释放，第13天开始每日释放量明显减少并波动不大，第20天开始无明显释放量，后连续监测10 d 维持于43.71%，连续监测30 d最大累积值为43.71%(图2)。

2.3 实验动物数量分析 90只大鼠均造模成功，其中4只在实验过程中死于建模后感染，予以剔除，并补充重新制作动物模型，最终90只大鼠进入结果分析。

2.4 两组大鼠术后尾部大体观察分析正常大鼠鼠尾颜色红润，皮温暖，活动度良好。血管吻合后，若血管再通正常表现大鼠颜色、温度没有变化。实验组大鼠共有8只发生术后并发症：术后2 h，仅有5只鼠尾发生动脉缺血表现，鼠尾远端苍白，皮温凉；术后3 d，有3只鼠尾发生动脉缺血表现；至术后7 d时，上述8只鼠尾中，6只部分坏死，2只未见明显坏死，但皮温始终较正常凉。对照组大鼠共有21只发生术后并发症：术后2 h，16只动脉缺血表现；术后3 d时，新添5只发生动脉缺血表现；至术后7 d时，上述鼠尾完全坏死12只，部分坏死8只，1只未见明显坏死，但皮温始终较正常凉。实验组术后并发症发生率明显小于对照组(P < 0.05)，病情程度也明显轻于对照组，见图3、表1。

2.5 两组大鼠术后小动脉内皮细胞变化情况 ①对照组：血管吻合术后1 d，内皮细胞肿胀，部分脱落，内皮下层呈细胞浸润及创伤性增生反应，内弹性膜层消失，平滑肌细胞发生变性坏死，外膜层细胞浸润并呈创伤性增生反应；术后3 d，内皮细胞脱落区出现新生内皮细胞并出现生长移行，使吻合口开始有内皮细胞覆盖；术后5-7 d，新生的内皮细胞爬过吻合口裂隙并覆盖缝线；②实验组：血管吻合术后1 d，吻合口缝线附近可见增生的内皮细胞。术后3 d，小血管吻合口两端缝线附近可见大量增生的内皮细胞和内皮下组织并向管腔突出，形成突起，并完成覆盖缝线；术后7 d，内皮细胞及内弹性膜修复完全恢复正常，平滑肌细胞进一步增生，外膜恢复正常，实验组小血管内皮增生时间明显早于对照组，增生强度明显好于对照组(图4)。

2.6 大鼠外周血血管内皮生长因子测定实验组术后各时间点外周血血管内皮生长因子水平均高于对照组(P < 0.05)；实验组术后1 d为爆发性释放，随后释放速度有所减慢，在第7天左右又有一个快速释放期，但速度小于第一个快速释放期并波动不大，与体外缓释微粒释放情况大致一致；对照组术后1 d外周血血管内皮生长因子水平也有所增加，但其增加量明显小于实验组，且随着时间点延长，血管内皮生长因子水平逐渐减少，见表2。

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引言

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验。

1.2 时间及地点实验于2016年3月至2017年3月在辽宁省大连市大连医科大学附属大连市中心医院中心实验室完成。

1.3 材料

实验动物：健康7周龄SD大鼠90只，体质量(200±20)g，雌雄各半，购自大连医科大学实验动物中心，许可证号：SCXK2013-0003。动物饲养环境：12 h光照，12 h黑夜，在标准鼠笼内饲养，空间足够动物自由活动，室温控制在22 ℃，湿度40%-60%。

实验用主要材料、试剂：聚乳酸/乙醇酸共聚物(大连医科大学附属大连市中心医院中心实验室提供)；兔抗人血管内皮生长因子多克隆抗体、血管内皮生长因子-ELISA试剂盒(武汉华美生物工程有限公司)；丝蛋白(苏州丝美特生物技术有限公司)；显微缝线(美国强生爱惜康)；二氯甲烷、丙酮、聚乙烯醇(沈阳化学试剂厂)。

1.4 实验方法

1.4.1 微粒的合成与制备称取1 g聚乳酸/乙醇酸共聚物，置于三口瓶中，加入20 mL二氯甲烷和2mL丙酮，在800 r/min的机械搅拌下，滴加10 mL兔抗人血管内皮生长因子多克隆抗体工作液，均匀乳化数分钟后，加入30 mL含2%聚乙烯醇乳化剂的水溶液，搅拌2.0-3.0 h。然后，在500 mL烧杯中，将上述乳化溶液倒入100 mL 0.3%的聚乙烯醇水溶液中，以500 r/min的速度搅拌24 h，挥发除去二氯甲烷溶剂。

检测血管内皮因子缓释微粒大小：在旋转蒸发器中除尽有机溶剂，将所得微粒在滤器上抽滤收集，使用激光粒度分析仪测量微粒的平均粒径。

微粒中血管内皮因子的体外释放检测：随机称取相同质量的15个微粒样品(50 mg)，分别混悬在10 mL PBS(pH=7.4)的降解介质中，在湿度100%、37 ℃恒温箱中孵育，同时开始计时。计时后每日分别吸取200 µL上清液，同时补充等量释放介质。上清液行血管内皮生长因子水平检测定量分析，并以时间为横坐标、血管内皮生长因子累计释放量为纵坐标，描绘血管内皮生长因子的释放曲线。直至计时后30 d。

1.4.2 血管缝线的制备将10 μg血管内皮生长因子缓释微粒溶解于500 pL的30 g/L丝蛋白溶液中，混匀备用。将显微缝线浸泡于上述溶液中，在4 ℃，40 r/min的恒温摇床上持续浸泡4 h；用清洁显微器械取出缝线，用4 ℃超纯水清洗5 min，再次用显微器械取出缝线，浸入4 ℃体积分数70%乙醇溶液中10 min；再次取出缝线，用4 ℃超纯水清洗3次，每次5 min；用滤纸吸干缝线表面水分后重新浸入30 g/L的丝蛋白溶液中浸泡；反复上述步骤共计3次，制备负载血管内皮生长因子缓释微粒缝线，保存在-80 ℃备用。

1.4.3 实验动物分组及建模取90只SD大鼠，用10%水合氯醛溶液按3.5 mL/kg腹腔注射麻醉，电动剃须刀备皮，仰卧位，四肢、头、尾用橡皮筋、大头针固定于手术台，常规消毒铺巾，在距尾根2 cm处于尾腹正中纵形切开 2 cm，于10倍骨科手术显微镜(SXP-1)下暴露游离正中沟内的尾动脉，远近端上血管夹后剪断，分级分2组，对照组使用9-0普通显微缝线端端内膜外翻吻合，实验组使用9-0无创含血管内皮生长因子缓释微粒缝线端端内膜外翻吻合，每个吻合口8针(图1)。切口涂红霉素软膏，单笼喂养，所有伤口隔日换药，肌注青霉素10×10⁴ U，2次/d。

大体和超声观察：术后2 h、12 h、1 d、3 d、7 d，观察鼠尾体温、颜色，切口愈合情况，并使用血管超声对吻合血管进行检测，明确是否有血栓形成等并发症。

光镜标本制作：术后1，3，5，7 d，每个时间点随机选择每组5只大鼠，于吻合口上下各0.5 cm处切取血管壁做标本。之后放入40 g/L多聚甲醛中固定，乙醇逐级脱水，石蜡包埋。以血管纵轴为标准做连续组织切片，切片厚度约5 μm，苏木精-伊红染色后在光镜下观察。

免疫吸附法(ELISA)测定大鼠外周血血管内皮生长因子：术后1，3，5，7 d，将大鼠腹主动脉取血于室温下静置2 h，3 500 r/min离心20 min，分离血清，将血清分装。大鼠外周血血管内皮生长因子的水平稀释标准品后，室温温育2 h，洗涤4次，加入抗-VEGF抗体100 μL室温温育1 h，加链酶亲和素100 μL。后加底物100 μL，37 ℃避光显色 15 min。加终止液100 μL，终止反应。450 nm波长依序测量各孔的吸光度(A值)。根据标准品的浓度及对应的A值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的A值在回归方程上计算出对应的样品浓度。

1.5 主要观察指标血管内皮生长因子缓释微粒大小和形态、微粒中血管内皮因子的体外释放量；大鼠术后吻合血管通畅情况、光镜形态学改变及大鼠体内血血管内皮生长因子水平测定。

1.6 统计学分析用等级资料的两样本比较的t检验。率之间比较使用χ²检验，采用SPSS 16.0统计软件进行统计学分析，数据资料以x(_)±s表示，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

讨论

小血管吻合是显微外科常见术式之一，术后吻合口处的血栓形成是目前血管吻合、皮瓣修复、组织移植最严重的术后并发症^[6]。顾玉东等认为即使是最佳的术前设计、术中精细操作及术后严密处理，其总体失败率仍然在10%左右^[7]。很多学者研究其发生机制，力求突破这一临床难题。目前可能的机制主要是小血管吻合口处针孔处有内皮细胞的损伤或缺失，吸附聚集大量红细胞、血小板等^[8]。当吻合口周围内皮细胞受机械性损伤、缺血性损伤等原因损伤过大，必然会引起过多的血小板吸附与充填，导致血栓形成。小血管吻合口处的血栓形成是引起血管吻合后血液循环危象，甚至远端坏死的主要病理机制之一^[9]。吻合后血管与正常血管的最主要区别是吻合线暴露，缺乏内皮细胞覆盖。曾有学者试图减少吻合线的针数，探求吻合缝线的刺激作用，这种做法虽然减少了吻合线的管腔内面积，但增加了血液外漏的风险^[10]。有效的内皮细胞覆盖可防止移植血管内血栓形成，维持血管通畅，因此吻合处能否实现内皮化显得非常重要^[11]。

血管内皮细胞的再生与修复在小血管吻合后起重要作用^[12]。内皮细胞位于血管内腔面，呈单层细胞排列，不仅是介于血管壁和血液之间的屏障结构，而且能合成和分泌多种生物活性物质，维持血管收缩与舒张、凝血与抗凝血等平衡，保持血液正常流动和血管长期通畅。吻合处血管内皮细胞的来源可能有3种^[13]：直接由吻合口两端正常血管的内皮细胞迁移而来；微小血管经吻合处孔隙向管腔内生长；内皮细胞从流经的血液中经诱导因子沉降到血管吻合口表面。当血管壁发生损伤，内皮下组织暴露，带负电荷的内皮下胶原纤维与凝血因子接触，启动凝血途径。顾玉东等将内皮细胞的愈合过程分为3个阶段，并提出在血管吻合术后最初2 h内，血小板在针孔及缝线处吸附充填达到高峰，是吻合口形成血栓的好发期^[14]。

目前对于血管吻合后血栓形成的预防和治疗，临床上主要是术后使用抗凝药物，干预凝血途径，抑制血小板在受损伤内皮细胞的集聚。虽然药物治疗能干预凝血，但无法处置内皮受损的内皮细胞。故血管吻合后血栓形成很难完全控制和预防。此次实验依据组织工程学方法，采用可降解的高分子聚乳酸/乙醇酸共聚物微粒包裹血管内皮生长因子，制备成血管内皮生长因子缓释微粒，负载于显微缝线^[15]。血管吻合时细胞因子对内皮细胞进行诱导再生，加速术后早期内皮细胞的修复，从根本上极大减少血栓的形成。内皮再生后，可减少血栓形成并有效防止血管外漏。以求解决术后并发症，提高血管通畅度^[16-20]。

血管内皮生长因子是一种可调节血管内皮细胞功能的活性二聚蛋白信号多肽，具有诱导和刺激内皮细胞生长，调节增殖的生物效应，在细胞、组织和器官的再生、修复有重要作用^[21-25]。目前研究显示，其作用贯穿于人类生殖、发育、组织再生和修复及肿瘤发生等多种生理病理过程。在组织工程学，血管生成与修复中血管内皮生长因子具有重要的应用价值。血管内皮生长因子曾经被称为血管调理素、血管渗透因子等，能促使损伤血管内皮细胞的增生、迁移并改变其基因表达，同时可调节血管通透性，促使血浆蛋白的渗出，形成大量含纤维素等细胞外基质，利于新血管形成。临床研究证实，血管内皮生长因子同时也是缺氧活化的转录因子，在调节氧稳态、氧输送及肿瘤细胞的缺氧适应方面具有重要作用^[19]。血管内皮生长因子作为低氧压反应的主控开关，在缺氧条件下调节红细胞生成素和血小板衍生生长因子等多种基因的转录。

生物因子治疗是指把生物因子导入人体，使其在体内发挥生物学效应，从而达到治疗疾病、降低术后并发症等目的的技术方法^[26-31]。血管吻合后，因吻合血管解剖位置较深，常规静脉用药所达到靶器官血药浓度太低，局部持续应用虽然能够提供有效药物浓度，直接作用靶器官，易于受损血管早期再生，但生物因子治疗存在的最大问题是维持转入一定量的生物因子。生物因子类物质在细胞内迅速被降解，因此只能短暂的促进新生血管进程，从而导致新生血管复发。为了获得长期基因表达或药效，必须在较长的一段时期内反复给予局部注射，可能导致某些并发症，如出血、静脉炎。因此，为了达到治疗效果最大化和最小的不良反应，合理的药物递送系统(DDS)成为治疗的首要考虑^[32]。

实验所合成的聚乳酸/乙醇酸共聚物微粒大小为80- 120 nm。文献报道，纳米载体具有高吸附性，进入人体后释放时，可短时间达到有效浓度并持续较长时间，缓释微粒能直接作用于细胞。此次体外释放实验发现，缓释微粒具有2个快速释放血管内皮生长因子的时段，第1个快速上升相发生在第1-5天，第2个快速上升相持续时间为5-8 d，第8天以后呈持续缓慢释放，第13天开始每日释放量明显减少并波动不大，以后呈缓慢持续释放达20 d。其可能的机制^[33-35]：是聚乳酸/乙醇酸共聚物纳米载体的第一个快速释放阶段，是由开始时表面吸附药物的高速释放导致的“暴释”阶段所形成，随后在扩散路径不断变长和高分子降解共同作用下，产生一个缓慢持续释放阶段，最后随着载体机械强度逐渐变弱并最终溶蚀，产生第2个快速释放阶段。该实验结果显示血管内皮生长因子缓释微粒体外良好的释放和缓释功能。

丝蛋白作为一种来源自然界、具有良好生物相容性、可降解性的生物材料，常被用于组织工程研究。丝蛋白具有被诱导发生13晶型转变的特性，使其在水溶液中的溶解性能发生改变，由可溶变为不可溶。利用丝蛋白的这一特性，将丝蛋白作为传输体系固定于缝线表面，通过丝蛋白溶解性能的改变，实现缓释血管内皮生长因子的目的。

研究表明与普通缝线相比，负载血管内皮生长因子的血管显微缝线在大鼠体内具有很好的生物相容性，可明显降低血管吻合后并发症，极大提高血管通畅率^[36-37]。血管内皮生长因子缓释微粒在大鼠体内释放浓度水平明显高于正常大鼠外周血浓度，且释放频率与体外相似。从组织学观察，内皮细胞早期明显修复增生，血管再通，极大程度地预防血栓形成。

生物缝线是目前组织生物材料研究的热点，此次实验已成功构建富含血管内皮生长因子缓释微粒缝线，并在动物体内测试其效果。但高浓度血管内皮生长因子持续长期在体内释放的安全性，诱导修复内皮细胞的来源机制，还有待进一步观察和研究。同时，动物实验存在不足：大鼠血管吻合后难以制动及操作者小血管吻合能力不一。另外，血管吻合后血栓形成原因复杂，单一提高血管内皮生长因子浓度是否对血管内皮再生起明显的决定性因素，尚需要大样本和长期实验观察。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

含血管内皮生长因子缓释微粒显微缝线促进大鼠小血管吻合后的内皮再生

Application of microsutures with vascular endothelial growth factor to improve vascular endothelial regeneration after small vessel anastomosis in the rats

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