盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的缓释效应

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.21.007

中国组织工程研究

• 纳米生物材料 nanobiomaterials • 上一篇下一篇

盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的缓释效应

汤佳明，赵修华，祖元刚

东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室，黑龙江省哈尔滨市 150040

收稿日期:2013-02-18 修回日期:2013-03-02 出版日期:2013-05-21 发布日期:2013-05-21
通讯作者: 祖元刚，教授，东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室，黑龙江省哈尔滨市 150040 zygorl@yahoo.com.cn
作者简介:汤佳明★，女，1985年生，黑龙江省密山市人，汉族，东北林业大学在读硕士，主要从事纳米药物制剂的研究。 tjmorl@yahoo.com.cn
基金资助:
公益性行业科研专项经费项目(201204601)；农业科技成果转化资金项目(2011GB23600016)；黑龙江省博士后基金项目(LBH-10283)。

Release effect of epirubicin hydrochloride nano-targeted delivery

Tang Jia-ming, Zhao Xiu-hua, Zu Yuan-gang

Key Laboratory of Forest Plant Ecology of Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin 150040, Heilongjiang Province, China

Received:2013-02-18 Revised:2013-03-02 Online:2013-05-21 Published:2013-05-21
Contact: Zu Yuan-gang, Professor, Key Laboratory of Forest Plant Ecology of Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin 150040, Heilongjiang Province, China zygorl@yahoo.com.cn
About author:Tang Jia-ming★, Studying for master’s degree, Key Laboratory of Forest Plant Ecology of Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin 150040, Heilongjiang Province, China tjmorl@yahoo.com.cn
Supported by:
Nonprofit Industry Scientific Research Special Projects, No. 201204601*; Agricultural Science and Technology Achievement Transformation Foundation, No. 2011GB23600016*; Postdoctoral Foundation of Heilongjiang Province, No. LBH-10283

摘要/Abstract

摘要：

背景：盐酸表阿霉素是一种广谱抗生素，目前临床使用的不足多为药物释放快、目标组织药物浓度低，静脉给药后广泛分布于体内各种组织器官，不良反应明显。
目的：针对盐酸表阿霉素临床应用的不足，制备盐酸表阿霉素纳米靶向注射制剂。
方法：以叶酸偶联牛血清白蛋白为载体，采用乳化-高压匀质法，制备盐酸表阿霉素纳米靶向注射制剂，以激光粒度分析仪测定纳米颗粒的粒径大小、粒径分布及Zeta电位，扫描电镜观察纳米颗粒的表面形态，高效液相色谱法分析白蛋白负载盐酸表阿霉素纳米制剂的包封率、载药量和释药性能。
结果与结论：制备的盐酸表阿霉素纳米粒外观呈均匀球型，粒径分布较窄，平均粒径为(157.73± 0.40) nm，平均 Zeta 电位为(-30.85±0.43) mV，载药量 22.78%，包封率可达96.24%。体外模拟释药结果表明药物释放曲线分为两个阶段，突释阶段微球释药量在24 h内达42.6%，缓释阶段纳米粒释药持续时间长，在112 h 时释药量达 84.1%，载药纳米粒的药物释放速率持续稳定。结果表明乳化结合高压匀质法制备的盐酸表阿霉素纳米靶向制剂粒径均匀，粒径范围分布窄，载药量和包封率高，具有一定的缓释作用。

关键词: 生物材料, 纳米生物材料, 盐酸表阿霉素, 牛血清白蛋白, 叶酸, 靶向制剂, 纳米粒, 乳化-高压匀质法, 体外释药, 其他基金

Abstract:

BACKGROUND: Epirubicin hydrochloride is a kind of broad-spectrum antibiotics, and the disadvantages in the clinical application are faster drug release and low drug concentrations of target tissue. Epirubicin hydrochloride can widely distribute in various organs after intravenous administration with obvious side effects.
OBJECTIVE: To prepare the epirubicin hydrochloride nano-targeted delivery according to the shortages of epirubicin hydrochloride in the clinical application.
METHODS: The epirubicin hydrochloride nano-targeted delivery was prepared with the carrier of folate-conjugated epirubicin hydrochloride albumin nanoparticles by the method of emulsification-high pressure homogenization. Particles size, distribution and Zeta potential were detected by laser particle size analyzer. The morphology of epirubicin hydrochloride nanoparticles was observed by scanning electron microscope．In addition, encapsulation capability, loading content and drug release of the folate-conjugated epirubicin hydrochloride albumin nanoparticles were analyzed by high-performance liquid chromatography．
RESULTS AND CONCLUSION: The results showed that the nanoparticles were spherical and well distributed. The mean particle size was (157.73±0.4) nm, and mean Zeta potential was (-30.85±0.43) mV. The encapsulation efficiency was 96.24% and the loading content was 22.78%. The results of simulate drug releasing results showed that the drug release curve could be divided into two phases, microspheres release in the burst release phase could reach 42.6% at 24 hours, nanoparticles release could be lasted for a long time in the sustained-release stage, and the drug release could reach to 84.1% at 112 hours. The drug release rate of the drug-loaded nanoparticles remained stable. The epirubicin hydrochloride nano-targeted delivery prepared with emulsification-high pressure homogenization has uniform particle size, narrow size distribution, high encapsulation efficiency and loading content, and has certain release effect.

Key words: biomaterials, nanobiomaterials, epirubicin hydrochloride, bovine serum album, floate, target delivery, nanoparticles, emulsification-high pressure homogenization technique, releasing in vitro, other grants-supported paper

中图分类号:

R318

汤佳明，赵修华，祖元刚. 盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的缓释效应[J]. 中国组织工程研究, doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.21.007.

Tang Jia-ming, Zhao Xiu-hua, Zu Yuan-gang. Release effect of epirubicin hydrochloride nano-targeted delivery[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.21.007.

图/表（结果） 6

2.1 叶酸偶联量的测定叶酸活性酯在281 nm处有最大吸收峰，见图1所示对照组与FA-EPI-BSANPs紫外吸收光谱，其中1，2和3分别为叶酸活性酯标准品、胰蛋白酶水解的FA-EPI-BSANPs样品和未水解的FA-EPI-BSANPs样品。由图1可见，对照组样品3中无游离叶酸存在，从而证明了水解组样品中检测出的叶酸是已与白蛋白相偶联的部分。

根据叶酸活性酯的标准曲线计算，每1 mg 牛血清白蛋白上偶联了16.24 μg的叶酸活性酯，通过分子质量换算可知，白蛋白摩尔数/偶联叶酸摩尔数= 1∶2.65。

2.2 循环次数对盐酸表阿霉素纳米粒载药量和包封率的影响见图2。

随循环次数增加盐酸表阿霉素纳米粒的包封率持续增加，而载药量在循环次数3-7次之间时明显增加，在循环次数7-15次之间，载药量几乎保持不变。因此循环次数最佳选择应在7次或7次以上，当匀质次数为1，3，5，7，9，11，15，17次时，叶酸偶联牛血清白蛋白负载盐酸表阿霉素纳米靶向制剂粒径分别为(157.04±2.61)，(233.92± 2.30)，(219.54±2.27)，(206.12±2.61)，(235.63±1.81)，(314.97±2.92)，(273.12±1.66)，(311.41±2.52) nm，循环次数为7次时粒径最小，所以实验选择7次为最佳循环次数。

2.3 匀质压力对盐酸表阿霉素纳米粒载药量和包封率的影响见图3。

盐酸表阿霉素纳米制剂载药量和包封率随着匀质压力增加逐渐增加。匀质压力20-40 MPa时，包封率显著增加，在40-65 MPa时，缓慢增加后基本恒定。载药量在匀质压力20-30 MPa时增加明显，由20.78%增加到21.63%，在30-60 MPa时缓慢增加至21.88%。当匀质压力为20，30，40，50，60，65 MPa时，FA-EPI- BASNPs粒径分别为(379.72±2.15)，(384.53±2.49)，(258.55±1.80)，(217.26±2.37)，(178.91±1.38)，(173.86±2.46) nm。

2.4 盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的形态图4为牛血清白蛋白、盐酸表阿霉素和盐酸表阿霉素纳米粒的扫描电子显微镜检测结果。图4A所示盐酸表阿霉素为颗粒状晶体，图4B所示牛血清白蛋白不规则薄片形的晶体，图4C所示FA-EPI-BSANPs为球形颗粒，大小相近，分散较为均匀。

2.5 盐酸表阿霉素纳米粒的粒径及Zeta电位用 Zeta 激光粒度分析仪进行粒径测定, 图5为FA-EPI-BSANPs的粒度分布，平均粒径为(157.73±0.40) nm，其Zeta平均电位为(-30.85±0.43) mV。

2.6 盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的载药量和包封率根据盐酸表阿霉素标准曲线，分别取3批最优条件下制备的FA-EPI-BSANPs，依照前述方法测定各批样品的载药量与包封率，结果包封率平均为96.24%，载药量平均为22.78%。

2.7 盐酸表阿霉素纳米粒体外释放度测定结果将FA-EPI-BSANPs冻干粉复溶后做体外释放实验。所用FA-EPI-BSANPs冻干粉的药物平均包封率为96.24%，平均载药量为22.78%。见图6所示，在最初的24 h内药物传递系统出现突释，之后缓慢释放至112 h，分别释放出所含盐酸表阿霉素的42.6%和82.1%。

图6的释放曲线表明，实验制备的药物释放曲线具有缓释性质。同时，用Originpro Version 8.0 software 对释放曲线进行拟合，分别用0级动力学方程、一级动力学方程、Higuchi方程和双相动力学方程对 FA-EPI-BSANPs 释放曲线进行拟合，并以R值对拟合度进行判断，结果见表1。

由表1 可知，在PBS中，FA-EPI-BSANPs 释放符合双相动力学方程，方程为Q=94.65(1 661.74e-5.93t+ 82.06e-0.02t)，相关系数R2=0.997 6，这更进一步证明了FA -EPI-BSANPs的缓释特性。

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引言

盐酸表阿霉素是一种高效、广谱的抗肿瘤药，作为一种抗癌药物已被应用于临床^[1]。但在应用盐酸表阿霉素的过程中可能发生严重的不良反应，如骨髓抑制、心脏毒性和过敏反应等，特别是心脏毒性^[2]。针对这种情况，近年来已经开发出多种降低其不良反应的方法，如乳剂、微球、脂质体等。但仍存在一些问题，如盐酸表阿霉素脂质体粒径较大，载药量较低，不方便工业化生产^[3]。因此迫切需要研究和开发针对肿瘤细胞进行精准定向攻击的、粒径小载药量高的盐酸表阿霉素相关制备技术。

纳米制剂具有选择性、降低药物毒性及改善药物体内外的稳定性等性能，所以实验制备一种盐酸表阿霉素纳米制剂。白蛋白是一种安全无毒、无免疫原性、生物可降解的药物载体，对亲水性药物有较高的负载能力，与其他载体相比，白蛋白和癌细胞有很好的亲和性，而且白蛋白纳米粒系统具有靶向性保护药物作用，降低了癌细胞对药物的耐药性，增加了癌细胞对药物的吸收，可以降低用药量，降低不良反应^[4]。叶酸受体是一种细胞表面蛋白，被验明是一种瘤标示物，在正常组织中的表达高度保守，但在大部分恶性肿瘤中表达有时可比正常组织高出100-300倍^[5-6]。Luten等^[7]利用叶酸、聚乙二醇和聚(N, N-二甲基乙胺共聚二氨基丁烷)环邻腈制备了一种叶酸靶向载体，报告基因pCMVLacZ被包裹进入该叶酸靶向载体。对其进行的人卵巢癌OVCAR3细胞体外转染实验结果显示，该叶酸复合物的转染效率是无叶酸复合物的3倍，说明这是一种具有潜在开发价值的靶向性基因载体。Liang等^[8]为了减小基因载体的毒性并优化其功能，利用聚乙二醇和聚乙烯亚胺既能克服转染率较低的缺点，又能高效地将质粒DNA(pDNA)浓聚到纳米粒内部的优点，制成了叶酸-聚乙二醇-聚乙烯亚胺/ pDNA复合物，将异硫氰酸荧光素结合到这种复合物的氨基上后，与叶酸受体阳性的人胚肾上皮细胞HEK293和人脑胶质瘤C6细胞共孵育，结果显示肿瘤细胞显著吞噬荧光物质。细胞实验显示该叶酸复合物毒性较低，叶酸复合物组转染效率是无叶酸组的15倍，故叶酸是较为理想的基因治疗靶向载药系统。

目前已有多种纳米制剂的制备方法，其中高压匀质法较传统的去溶剂、乳化-交联法等制备的纳米制剂具有粒径较小、粒度分布均匀和稳定性好的特点[9]。所以实验采用乳化-高压匀质法制备盐酸表阿霉素纳米靶向注射制剂。利用叶酸偶联牛血清白蛋白为载体制备盐酸表阿霉素纳米靶向制剂，以粒径、包封率和载药量为质量指标，考察匀质次数和匀质压力对盐酸表阿霉素纳米粒质量指标的影响。运用微观检测手段激光粒度分析仪测定盐酸表阿霉素纳米制剂的粒径大小、粒径分布及Zeta电位，扫描电镜观察纳米颗粒的表面形态，高效液相色谱法分析白蛋白负载盐酸表阿霉素纳米制剂的包封率、载药量和释药性能，以此获得具有优良稳定性、高生物利用度、肿瘤靶向性的盐酸表阿霉素纳米注射制剂及其相应的制备工艺和质量控制标准。

材料方法

设计：单因素实验。
时间及地点：于2010年12月至2012年3月在东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验完成。
材料：
盐酸表阿霉素纳米靶向制剂制备、表征及体外释放实验的主要试剂及仪器：
Main reagents and instruments:

实验方法：
叶酸活性酯的制备：称取一定量叶酸，溶解于 DMSO(含三乙胺0.5 mL)，20 ℃搅拌条件下加入一定量二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，避光反应一定时间，反应结束后抽滤去除沉淀，剩余液中加入2倍体积的乙醚并不断搅拌，反应产生沉淀，抽滤，并用乙醚洗涤所得沉淀，干燥即为叶酸活性酯[10]。
叶酸偶联牛血清白蛋白的制备：在碱性条件下，叶酸活性酯上的羧基可以与牛血清白蛋白表面氨基酸残基上的氨基反应而偶联。称取叶酸活性酯3 mg，溶于      1 mol/L的Na2CO3/NaHCO3缓冲溶液调pH=10中，另取6 mg的牛血清白蛋白溶解于2 mL去离子水中。将二者混合不断搅拌反应45 min，反应结束后，将反应物转移到相对分子质量为3 500的透析袋中，用pH=10的Na2CO3/NaHCO3溶液1 L做透析液。透析过程中用UV-2550全波长分光光度计监测直到透析液中叶酸浓度不再增加，收集透析袋内溶液，冻干得叶酸偶联牛血清白蛋白冻干粉[11]。
盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的制备：通过单因素实验，采用乳化-高压匀质法制备盐酸表阿霉素纳米靶向制剂。称取叶酸偶联牛血清白蛋白适量，溶于去离子水，置于烧杯中，调节溶液 pH值为9。将盐酸表阿霉素溶于70∶30 的氯仿和乙醇混合溶液中，将叶酸偶联牛血清白蛋白溶液置于乳化机中5 000 r/min乳化3 min，期间逐滴滴入盐酸表阿霉素溶液，形成稳定的O/W型乳剂，所得乳液于高压匀质机中，在一定压力和循环数次后得到盐酸表阿霉素纳米粒。将所得溶液置于40 ℃旋转蒸发仪上旋转蒸发除去有机溶剂，得到盐酸表阿霉素纳米粒混悬液，将混悬液10 000 r/min离心20 min，离心半径为5 cm，去上清，除去未被包裹上的盐酸表阿霉素，去离子水复溶得到均匀的叶酸偶联牛血清白蛋白负载盐酸表阿霉素纳米靶向制剂(Folate-conjugated Epirubicin hydrochloride albumin nanoparticles, FA-EPI-BSANPs)混悬液。实验还考察制备条件循环次数和匀质压力对制备FA-EPI-BSANPs质量指标的影响，以粒径、载药量和包封率为质量指标，分别设置循环次数1，3，5，7，9，11，15，19 次，匀质压力为20，30，40，50，60，70 MPa。
盐酸表阿霉素纳米靶向制剂冻干：量取FA-EPI- BSANPs混悬液(4 mL)于8 mL的棕色冻干瓶内，在   -40 ℃的冰箱预冻8 h后，在置于冻干机中-40 ℃冻干 48 h，即得红色冻干粉。
叶酸偶联量的测定：①叶酸活性酯标准曲线测定：精确称取定量的叶酸活性酯，用容量瓶定量配置成     40 mg/L的溶液，并用容量瓶定量稀释质量浓度分别为40，20，10，8，2 mg/L。全波长分光光度计检测，制定叶酸活性酯标准曲线。将 FA-EPI-BSANPs (50 μg叶酸∶1 mg牛血清白蛋白)用胰蛋白酶在37 ℃摇床内水解4 h, 参照叶酸活性酯标准曲线计算不同牛血清白蛋白上偶联的叶酸量。②设置对照组，即未加胰蛋白酶水解的FA-EPI-BSANPs，其他反应条件均相同。用全波长分光光度计检测这个样品内叶酸含量。
盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的形态：利用扫描电子显微镜对牛血清白蛋白、盐酸表阿霉素、盐酸表阿霉素纳米粒FA-EPI-BSANPs进行形貌观察。
盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的粒径分布和Zeta电位：取适量纳米粒，用去离子水稀释后，激光粒度仪90°角进行测定，记录平均粒径及Zeta电位。
盐酸表阿霉素纳米粒载药量和包封率的HPLC测定：
色谱条件：流动相为乙腈-水(32∶68)，用85%磷酸调节pH值至2.4；检测波长为233 nm；流速为       1 mL/min；柱温：室温；定量进样10 μL。利用间接法测定FA-EPI-BSANPs的包封率和载药量。

其中m为投入盐酸表阿霉素总质量；m1为复溶、离心步骤中收集上清中盐酸表阿霉素质量；m2为冻干后得到FA-EPI-BSANPs的质量。
盐酸表阿霉素纳米粒体外释放的测定：精密称取 17.6 mg盐酸表阿霉素纳米粒FA-EPI-BSANPs，溶于 5 mL PBS (pH值7.4)，置于相对分子质量为3 500透析袋中悬浮在200 mL 的PBS中，测定载药体系的释放动力学。整个透析装置置于37 ℃恒温水浴中且100转持续振动。在预定的时间点取3 mL透析液并补充等体积新鲜PBS。用HPLC测定每个取样点样品中盐酸表阿霉素的浓度。并分别用0级动力学方程、一级动力学方程、Higuchi方程和双相动力学方程对FA-EPI-BSANPs释放曲线进行拟合，并以r值对拟合进行评价。累计释放百分数用下式计算。

Ci为每个取样点样品中的盐酸表阿霉素浓度；Ci′是每个时间间隔中盐酸表阿霉素浓度增加的量；V为透析液的总体积；V0为每次取样的体积；M为加载在盐酸表阿霉素纳米粒中盐酸表阿霉素的质量；Qi为每个取样点上的累计释放百分率。
主要观察指标：FA-EPI-BSANPs粒径大小、粒径分布及Zeta电位，纳米颗粒的表面形态，包封率、载药和释药性能。
统计学分析：由第一作者采用SPSS 11.5软件完成统计处理，实验数据以

表示。

讨论

目前在中国由肿瘤引起的死亡率居所有病因中第2位。手术治疗、药物化疗和放射治疗是目前主要的治疗手段。由于癌症的转移性，往往使手术治疗的效果降低。而放射治疗的不良反应给患者造成了精神和肉体上的双重伤害。因此药物化疗在临床上发挥着重要作用。抗肿瘤药物随着分子肿瘤学、高分子聚合物和纳米技术的迅速发展，正在从传统的细胞毒性药物向肿瘤靶向给药的新型抗肿瘤药物发展。盐酸表阿霉素作为一种抗癌药物已经被广泛应用于临床，但其剂量毒性成为限制其应用的因素。因此迫切需要研究和开发针对肿瘤细胞进行精准定向攻击的盐酸表阿霉素纳米靶向注射剂制备技术。

白蛋白是一种已应用于临床的生物可降解高分子聚合物，其在体内的最终代谢产物对人体无毒性，生物相容性极佳，无免疫原性。白蛋白分子中赖氨酸数目众多(约占残基数的10% )，暴露于表面的赖氨酸氨基及末端氨基，即表面活性氨基，是对其进行化学修饰的有效连接部位。所以白蛋白在药物传递载体方面有很好的应用前景。

叶酸受体具有在多种肿瘤细胞膜表面上活性和数量显著高于一般正常细胞并高表达的特点，使纳米药物表面偶联的叶酸分子可以和肿瘤细胞膜表面高表达并能通过细胞膜上的叶酸受体介导内吞入胞，可显著靶向于叶酸受体丰富的肿瘤细胞，有效地将药物输送到肿瘤细胞，许多研究者利用纳米药物加载上叶酸增加药物在目标部位或器官的蓄积。张良珂等[12]制备了叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒，并用荷瘤裸鼠实验纳米粒在裸鼠体内的分布特征及抑瘤情况[12-13]。结果表明尾静脉给予的叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒组荷瘤裸鼠肿瘤生长最为缓慢，抑瘤率最高。体内分布实验结果表明叶酸偶联组纳米粒在肿瘤的分布高于对照组。因此，实验先利用叶酸活性酯与牛血清白蛋白表面的活性氨基进行偶联反应制备叶酸-牛血清白蛋白，测得每1 mg牛血清白蛋白上偶联了16.24 μg的叶酸, 通过分子质量换算可知，白蛋白偶联叶酸的摩尔数比= 1∶2.65。再以叶酸-牛血清白蛋白为载体负载盐酸表阿霉素制备盐酸表阿霉素纳米靶向制剂，从而提高盐酸表阿霉素定位靶向攻击力，增加目标组织的药物浓度，提高药效。

载药量是衡量纳米制剂的重要指标之一，提高药物的载药量，从而提高药物生物利用度，增加目标组织的药物浓度，提高药效。郭莉媛等[14]以牛血清白蛋白为载体，用去溶剂化-化学交联法制备白藜芦醇白蛋白纳米粒。获得白藜芦醇白蛋白纳米粒的平均粒径为400- 500 nm，表面光滑，包封率33.97%，24 h内的稳定性好，生物利用度较白藜芦醇原料药显著提高。杨莹[15]采用乳化-交联固化法制备白蛋白包裹硫鸟嘌呤纳米粒，并通过纳米球的形态、载药量、包封率等考察纳米球的质量。制得硫鸟嘌呤白蛋白纳米球外观呈米黄色、粉末状，球形圆整，粒径分布在189-205 nm，载药量为7.31%，包封率为62.40%。伍三兰等[16]采用均匀设计法及单因素试验设计法筛选优化氟尿嘧啶白蛋白磁亚微球的最佳制备工艺，并进一步采用体外动态释药法评价其释药特征。制得的磁亚微球形态良好，平均粒径为(330±21) nm，载药量为(9.5±1.2)%，包封率为(68.3±2.0)%，磁响应性能良好。磁亚微球体外释药规律符合Higuchi方程，具有一定的缓释作用。实验制备的盐酸表阿霉素纳米粒外观呈均匀球型，粒径分布较窄，载药量高达22.78%，包封率可达96.24%，提高了盐酸表阿霉素的生物利用度，进而使其成为更有效的抗癌药物。

体外释放实验证明，所得盐酸表阿霉素纳米制剂在体外释放分为两个过程：最初的24 h内药物传递系统出现突释，之后缓慢释放至112 h。出现突释现象的原因是药物通过一定方式分散于纳米粒内部或吸附于表面形成纳米控释系统，吸附于表面的药物释放较快，在 24 h内出现突释现象，而分散于内部的药物会通过纳米材料的小孔或随着纳米材料的降解达到缓慢释放。实验对盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的体外释放进行了评价，结果表明盐酸表阿霉素纳米靶向制剂符合双相动力学方程，证明其具有一定的缓释作用，为盐酸表阿霉素纳米靶向制剂在定位给药方面奠定了基础。但进入体内后，由于体内酶的存在，可能会在一定程度上促进药物的释放，因此其体内情况有待于进一步研究。

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载药量是衡量纳米制剂的重要指标之一，提高药物的载药量，从而提高药物生物利用度，增加目标组织的药物浓度，从而提高药效。郭莉媛等以牛血清白蛋白为载体，用去溶剂化-化学交联法制备白藜芦醇白蛋白纳米粒。获得的白藜芦醇白蛋白纳米粒的平均粒径为400-500 nm，表面光滑，包封率33.97%，24 h内的稳定性好，生物利用度较白藜芦醇原料药显著提高。杨莹采用乳化-交联固化法制备白蛋白包裹硫鸟嘌呤纳米粒，并通过纳米球的形态、载药量、包封率等考察纳米球的质量。制得硫鸟嘌呤白蛋白纳米球外观呈米黄色、粉末状、球形圆整、粒径分布在189-205 nm。载药量为7.31%，包封率为62.40%。伍三兰等采用均匀设计法及单因素试验设计法筛选优化氟尿嘧啶白蛋白磁亚微球的最佳制备工艺，并进一步采用体外动态释药法评价其释药特征。制得的磁亚微球形态良好，平均粒径为(330±21)nm，载药量为(9.5±1.2)%，包封率为(68.3±2.0)%，磁响应性能良好。磁亚微球体外释药规律符合Higuchi方程，具有一定的缓释作用。实验制备的盐酸表阿霉素纳米粒外观呈均匀球型，粒径分布较窄，载药量高达22.78％，包封率可达96.24％，提高盐酸表阿霉素的生物利用度，进而使其成为更有效的抗癌药物。
纳米药物的粒径和表面电荷是纳米药物重要的特征，直接关系到药物作用时间的长短、作用部位、静电作用力及机体的摄取量。制备长效纳米药物理想的粒径范围在50-200 nm 之间，粒径过大时容易造成血管堵塞，既不利于药物吸收，同时也会对机体带来危险。某些粒径小的纳米药物更容易通过毛细血管而达到靶器官，在此积累而达到靶向治疗的效果，此外，还能够避免网状内皮系统的吞噬而实现在体内长时间循环。纳米药物的表面电荷通常以Zeta 电位来度量，电荷的量会影响纳米粒子的稳定性、与体内物质的静电作用力以及在细胞中的转运与摄取。实验结果显示制备的盐酸表阿霉素纳米靶向制剂平均粒径小，表面带有负电荷。使得纳米粒能进入血液循环系统，能到达肿瘤细胞，并避免纳米药物的聚集，有利于其在体内的长时间循环及靶向治疗。

盐酸表阿霉素纳米靶向制剂的缓释效应

Release effect of epirubicin hydrochloride nano-targeted delivery

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