槲皮素靶向CCR1、CXCR4促进人骨髓间充质干细胞的迁移

doi:10.12307/2024.707

中国组织工程研究 ›› 2024, Vol. 28 ›› Issue (31): 4945-4950.doi: 10.12307/2024.707

• 骨髓干细胞 bone marrow stem cells • 上一篇下一篇

槲皮素靶向CCR1、CXCR4促进人骨髓间充质干细胞的迁移

陈双，席志鹏，王楠，房晓阳，刘鑫，康然，谢林

南京中医药大学附属中西医结合医院，江苏省南京市 210028

收稿日期:2023-08-28 接受日期:2023-09-28 出版日期:2024-11-08 发布日期:2024-01-22
通讯作者: 席志鹏，博士，副主任中医师，南京中医药大学附属中西医结合医院，江苏省南京市 210028
作者简介:陈双，男，1999年生，南京中医药大学硕士研究生，主要从事中西医结合防治脊柱退行性病变研究。
基金资助:
江苏省干部保健科研课题(BJ19030)，项目负责人：席志鹏；江苏省基础研究计划自然科学基金项目(BK20221420)，项目负责人：谢林

Quercetin targets CCR1 and CXCR4 to promote migration of human bone marrow mesenchymal stem cells

Chen Shuang, Xi Zhipeng, Wang Nan, Fang Xiaoyang, Liu Xin, Kang Ran, Xie Lin

Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, Jiangsu Province, China

Received:2023-08-28 Accepted:2023-09-28 Online:2024-11-08 Published:2024-01-22
Contact: Xi Zhipeng, MD, Associate chief physician, Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, Jiangsu Province, China
About author:Chen Shuang, Master candidate, Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, Jiangsu Province, China
Supported by:
Jiangsu Province Cadre Health Research Project, No. BJ19030 (to XZP); Natural Science Foundation of Jiangsu Basic Research Program, No. BK20221420 (to XL)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：

骨髓间充质干细胞：是一种多潜能干细胞，具有免疫原性低、安全性好的优点，可以通过促进细胞迁移、归巢修复受损部位来治疗多种神经退行性疾病、中枢神经系统损伤和骨关节软骨退变。
CCR1、CXCR4因子：能够有效诱导干细胞增殖、迁移的趋化因子，使干细胞到达受损部位，实现细胞动员和归巢。

背景：槲皮素在骨髓间充质干细胞增殖和分化中起重要作用，但关于其促进骨髓间充质干细胞迁移的机制研究较少。

目的：通过体外实验研究槲皮素对人骨髓间充质干细胞迁移的影响，并探讨CCR1、CXCR4的调控作用。
方法：选取人骨髓间充质干细胞作为实验对象。CCK-8法检测槲皮素对人骨髓间充质干细胞增殖活性的影响；细胞划痕实验和Transwell实验分别检测槲皮素处理后人骨髓间充质干细胞的体外侵袭和迁移能力；借助分子对接技术进一步展示槲皮素与CCR1、CXCR4之间的作用关系；Western blot和实时荧光定量PCR检测槲皮素处理后迁移相关趋化因子的表达。

结果与结论：①5，10 μmol/L槲皮素具有显著促进人骨髓间充质干细胞增殖的作用，且药物浓度在10 μmol/L时，细胞增殖效率最高；②为更好地探索槲皮素影响人骨髓间充质干细胞迁移的量效关系，选取 5，10 μmol/L槲皮素进行后续实验，采用川芎嗪作为阳性对照药物，实验分为空白对照组、5 μmol/L槲皮素组、10 μmol/L槲皮素组和100 μmol/L川芎嗪组；③槲皮素处理后人骨髓间充质干细胞的体外迁移和侵袭能力呈浓度依赖性提升，10 μmol/L槲皮素组的迁移效果优于川芎嗪组；④分子对接结果提示槲皮素与CCR1、CXCR4之间存在强烈的相互作用；⑤槲皮素可以上调CCR1、CXCR4蛋白和mRNA的表达；⑥该研究在细胞水平上证实了槲皮素可以通过靶向CCR1、CXCR4促进人骨髓间充质干细胞的迁移。

https://orcid.org/0009-0003-1344-2203 (陈双)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 骨髓间充质干细胞, 槲皮素, 迁移, 增殖, 分子对接

Abstract: BACKGROUND: Quercetin plays an important role in the proliferation and differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells, but less research has been done on its mechanism of promoting the migration of bone marrow mesenchymal stem cells.
OBJECTIVE: To study the effect of quercetin on the migration of human bone marrow mesenchymal stem cells through in vitro experiments, and to explore the regulatory role of CCR1 and CXCR4.
METHODS: Human bone marrow mesenchymal stem cells were selected as experimental subjects. CCK8 assay was used to detect the effect of quercetin on the proliferative activity of human bone marrow mesenchymal stem cells. Cell scratch assay and Transwell assay were used to detect the in vitro invasive and migratory abilities of human bone marrow mesenchymal stem cells after quercetin treatment, respectively. The role of quercetin in relation to CCR1 and CXCR4 was demonstrated with the help of molecular docking technology. Western blot assay and real-time fluorescence quantitative PCR were used to detect the migration-related chemokine expression after quercetin treatment.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) 5 and 10 μmol/L quercetin could significantly promote the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells, and the drug concentration of 10 μmol/L resulted in the highest cell proliferation efficiency. (2) To better explore the dose-effect relationship of quercetin affecting the migration of human bone marrow mesenchymal stem cells, 5 and 10 μmol/L quercetin were selected for the subsequent experiments, and ligustrazine was used as the positive control drug, and the experiments were divided into blank control group, 5 μmol/L quercetin group, 10 μmol/L quercetin group, and 100 μmol/L ligustrazine group. (3) In vitro migration and invasion ability of human bone marrow mesenchymal stem cells were elevated in a concentration-dependent manner after quercetin treatment, and the migration effect of 10 μmol/L quercetin group was better than that of ligustrazine group. (4) The molecular docking results suggested that there was a strong interaction between quercetin and CCR1 and CXCR4. (5) Quercetin could up-regulate the expression of CCR1 and CXCR4 proteins and mRNA. (6) This study confirmed at the cellular level that quercetin could promote the migration of human bone marrow mesenchymal stem cells by targeting CCR1 and CXCR4.

Key words: bone marrow mesenchymal stem cell, quercetin, migration, proliferation, molecular docking

中图分类号:

陈双, 席志鹏, 王楠, 房晓阳, 刘鑫, 康然, 谢林. 槲皮素靶向CCR1、CXCR4促进人骨髓间充质干细胞的迁移[J]. 中国组织工程研究, 2024, 28(31): 4945-4950.

Chen Shuang, Xi Zhipeng, Wang Nan, Fang Xiaoyang, Liu Xin, Kang Ran, Xie Lin. Quercetin targets CCR1 and CXCR4 to promote migration of human bone marrow mesenchymal stem cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2024, 28(31): 4945-4950.

图/表（结果） 6

2.1 槲皮素对hBMSCs增殖活性的影响槲皮素分子式如图1A所示。通过CCK-8 检测不同浓度槲皮素对hBMSCs增殖的影响，结果发现与0 μmol/L槲皮素组比较，5 μmol/L槲皮素组和10 μmol/L槲皮素组的hBMSCs活力显著增加(P < 0.05)，200，500，1 000 μmol/L槲皮素组的hBMSCs活力显著降低(P < 0.05)，见图1B和C。为更好地探索槲皮素影响hBMSCs迁移的量效关系，因此选择5，10 μmol/L作为后续实验的槲皮素浓度。

2.2 槲皮素对hBMSCs迁移能力的影响细胞划痕实验结果显示，与空白对照组比较，槲皮素各剂量组和100 μmol/L川芎嗪组细胞的划痕愈合率显著增加(P < 0.05)。与100 μmol/L川芎嗪组比较，10 μmol/L槲皮素组细胞的划痕愈合率显著增加(P < 0.05)，说明槲皮素促进hBMSCs划痕愈合能力可能优于川芎嗪，见图2。

通过Transwell实验检测槲皮素处理后hBMSCs的体外迁移能力，与空白对照组比较，5，10 μmol/L槲皮素组和100 μmol/L川芎嗪组穿过小室的细胞数量显著增多，差异有显著性意义(P < 0.05)，见图3。与细胞划痕实验的结果一致，说明槲皮素具有促进hBMSCs迁移的能力。

2.3 分子对接结果为了证实槲皮素能有效促进干细胞迁移，采用分子对接展示槲皮素与CCR1、CXCR4的直接相互作用。此次对接结果显示槲皮素与CCR1和CXCR4蛋白的对接结合能分别为-31.798 4和-35.145 6 kJ/mol，结合能均小于-29.301 kJ/mol[15]，说明槲皮素与CCR1和CXCR4的结合作用均较为强烈。使用 PyMOL 2.3.0软件和Discovery Studio2019对两组对接结果进行可视化处理，详细对接情况如图4所示。CCR1中quercetin与CCR1中的氨基酸残基GLU-287、TYR-291和LYS-94形成3条常规氢键作用，并与TRP-90形成1条π-π堆积作用。CXCR4中quercetin与CXCR4中的氨基酸残基ASP-97和TYR-45形成2条常规氢键作用，与ALA-98形成1条π-Alkyl作用并与HIS-113、TRP-94形成4条π-π堆积作用，与ASP-97形成1条π-anion作用。上述两组对接的结合作用强烈，形成的作用力类型丰富且键数可观，为槲皮素与CCR1、CXCR4的构效关系提供了有价值的信息。

2.4 槲皮素对hBMSCs中CCR1、CXCR4蛋白表达的影响与空白对照组比较，槲皮素各浓度组hBMSCs中CCR1、CXCR4蛋白表达显著增加(P < 0.05)。与100 μmol/L川芎嗪组比较，10 μmol/L槲皮素组CCR1蛋白表达显著增加(P < 0.05)，5，10 μmol/L槲皮素组CXCR4蛋白表达显著增加(P < 0.05)，见图5。进一步说明槲皮素通过提高CCR1、CXCR4蛋白表达促进hBMSCs迁移。

2.5 槲皮素对hBMSCs中CCR1、CXCL5、CXCR4和CXCL12 mRNA表达的影响如图6所示，与空白对照组比较，槲皮素各浓度组CCR1、CXCL5、CXCR4和CXCL12的mRNA表达显著增加(P < 0.05)。与100 μmol/L川芎嗪组比较，5 μmol/L槲皮素组CXCR4和CXCL12的mRNA表达有所增加，但无明显统计学差异，10 μmol/L槲皮素组CCR1、CXCL5、CXCR4和CXCL12的mRNA表达显著增加(P < 0.05)。

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引言

近年来，随着组织工程的飞速发展，间充质干细胞移植被认为是极具前景的再生疗法[1]。间充质干细胞是一种多能干细胞，可在一定条件下诱导向成骨、软骨和脂肪细胞分化来靶向归巢受损的组织器官，针对损伤性疾病具有一定的修复作用[2-3]。研究表明，间充质干细胞通过CCR1、CXCR4等多种趋化因子的表达实现动员和迁移，再由细胞黏附分子使间充质干细胞附着于内皮，最后在趋化因子的引导下到达受损部位，这一涵盖间充质干细胞增殖、迁移的过程被称为干细胞归巢[4]。作为间充质干细胞的一种，骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)因其多潜能和增殖活跃的特性被广泛应用于骨组织工程研究[5]。然而，目前研究表明BMSCs移植后在靶组织中的存活率和迁移率较低、安全性差等问题限制了临床应用，极大影响了治疗效果[6]。因此，探究BMSCs增殖和迁移的潜在机制，提高其归巢能力，对干细胞移植的疗效至关重要。
槲皮素(quercetin，QUE)是最常见的黄酮醇类化合物之一，具有多种药理作用，包括抗炎、抗氧化、抗癌和抗凋亡活性，对多种疾病的治疗和预防有重要意义[5]。既往的研究证实，槲皮素在BMSCs的增殖和分化中起重要作用[7-9]，但关于槲皮素促进BMSCs迁移、侵袭的分子生物学机制研究较少。课题组前期研究发现补肾活血舒筋方具有介导CXCR4促进BMSCs迁移的作用[10]，且杜仲、桑寄生等补肾中药中均含有槲皮素。研究表明槲皮素能够调控细胞中CCR1、CXCR4的表达[11-12]。因此，该研究体外观察槲皮素对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells，hBMSCs)迁移的影响，并探讨其与CCR1、CXCR4的关系，为组织损伤的修复治疗提供指导。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计细胞学体外观察实验。不同组间比较采用单因素方差分析。
1.2 时间及地点实验于2023年2-6月在江苏省中医药研究院骨伤科实验室完成。
1.3 材料 hBMSCs(美国ScienCell，15901)；槲皮素(上海源叶生物科技有限公司，货号：B20527，C15H10O7，CAS号：117-39-5，HPLC≥98%)；川芎嗪(上海源叶生物科技有限公司，货号：B20203，C8H12N2，CAS号：1124-11-4，HPLC≥98.0%)；MSCM培养基(美国ScienCell，7501)；DPBS缓冲液(美国HyClone，21-040-CV)；胰蛋白酶(美国Thermo，25200072)；胎牛血清(上海Aladdin，A116563)；二甲基亚砜(美国MP Biomedicals，196055)；CCK-8试剂(中国碧云天，C0038)；Transwell小室(美国Corning，3401)；BCA蛋白定量试剂盒(中国碧云天，P0010S)；Western blot相关试剂(中国碧云天，P0012A)；CCR1抗体(美国Thermo，PA5-78946)；CXCR4抗体(美国Thermo，PA5-19856)；GAPDH抗体(英国Abcam，ab181602)；山羊抗兔IgG二抗(英国Abcam，ab205718)；增强ECL电化学发光试剂(中国Biosharp，BL520A)；反转录试剂盒(德国QIAGEN，205411)；PCR试剂盒(德国QIAGEN，208056)；Trizol(美国Thermo，15596026)；超净工作台(美国Thermo，1374)；倒置显微镜(日本Olyupus，CKX-41)；离心机(德国Eppendorf，5424R)；全自动全波长酶标仪(瑞士Tecan，Infinite M200Pro)；细胞恒温培养箱(美国Thermo，i160)；超声细胞破碎机(中国先欧，XO-1200D)；PCR扩增仪(美国Thermo，veriti 96)；荧光定量PCR仪(美国Thermo，StepOnePlus)；全自动化学发光图像分析系统(中国天能，Tanon-5200)。
1.4 实验方法
1.4.1 CCK-8实验将第3代hBMSCs(5×103个/孔)接种于96孔板，外围用DPBS封闭防止培养基挥发，培养24 h。实验组为不同浓度(0，5，10，25，50，100，200，500，1 000 μmol/L)的槲皮素对hBMSCs进行干预，同时设置仅添加完全培养基作为对照组，每组设置6个复孔。培养24，48 h，每孔加入10 μL CCK-8溶液，然后恒温培养箱孵育1 h，使用酶标仪在450 nm处测量吸光度值。
1.4.2 细胞划痕实验根据LI等[13]的研究结果，该研究采用100 μmol/L川芎嗪作为阳性对照组。将第3代hBMSCs(2×105个/孔)接种于6 孔板，分为空白对照组、5 μmol/L槲皮素组、10 μmol/L槲皮素组、100 μmol/L 川芎嗪组，置于恒温培养箱内，待细胞密度达到约90%时，使用200 μL枪头进行垂直划痕，分别于0 h和24 h在倒置显微镜下进行拍照。用Image Pro Plus 6测量划痕面积。细胞划痕愈合率(%)=
(0 h划痕宽度-24 h划痕宽度)/0 h划痕宽度×100%。每组设3个复孔，实验重复3次。
1.4.3 Transwell实验实验分为空白对照组、5 μmol/L槲皮素组、10 μmol/L槲皮素组、100 μmol/L 川芎嗪组。培养时将Transwell小室置于24孔板，第3代hBMSCs (1×104个/孔)混悬于200 μL含0.1%BSA的DMEM中，加入培养上室内，下室加入 600 μL完全培养基。在恒温培养箱中分组处理24 h，弃去培养基，使用DPBS小心洗涤每个小孔，用棉签擦掉上室的上侧细胞，置于40 g/L多聚甲醛固定15 min，随后DPBS清洗2次，每孔加入结晶紫500 μL染色15 min，弃染色液，充分洗涤后，倒置显微镜下观察小室下侧的细胞，计数细胞的数量，每组设3个小室，实验重复3次。
1.4.4 分子对接从PubChem(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)上获取了槲皮素的3D结构文件，并使用Chem3D进行分子力场优化，最终获得能量最低状态的分子结构。受体蛋白CCR1(PDB ID:7vl9)和CXCR4(PDB ID:3odu)的3D结构从Uniport(https://www.uniprot.org/)和PDB(https://www1.rcsb.org/)数据库获取。使用AutoDock Tools 1.5.6对目标蛋白进行加氢处理，对配体分子进行加氢和判定可扭转键的处理，保存为pdbqt文件。使用Grid板块设置分子对接范围参数，设定对接方式为半柔性对接，对接算法为拉马克遗传算法。运行Auto Dock Vina 1.2.0进行分子对接，结合自由能被用来衡量分子对接的结果。

1.4.5 Western blot实验实验分为空白对照组、5 μmol/L槲皮素组、10 μmol/L槲皮素组、100 μmol/L 川芎嗪组。将第3代hBMSCs接种至6孔板中(5×105个/孔)，按照分组处理48 h，吸去上清液，DPBS漂洗3次，每孔加入200 μL预冷的含蛋白酶抑制剂混合物的RIPA裂解液，充分裂解细胞后15 000 r/min离心10 min，取上清液，BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。取各组蛋白200 μL，加入5×SDS上样缓冲液，于沸水中煮5 min使蛋白变性。根据SDS-PAGE凝胶配制试剂盒说明书配胶，用夹板夹紧后放入电泳槽中，上样后进行电泳和转膜。将膜移至含快速封闭液的平皿中，室温摇床上摇动封闭20 min，加入CCR1抗体(1∶1 000)、CXCR4抗体(1∶1 000)、GAPDH抗体(1∶5 000)，4 ℃摇床上孵育过夜，TBST室温清洗3次，每次5 min，加入二抗(1∶2 000)，室温摇床上孵育1 h，TBST清洗3次后，加入ECL发光液，化学发光图像分析系统上显影并拍照。以CCR1/GAPDH和CXCR4/GAPDH灰度比值为统计结果。

1.4.6 实时荧光定量PCR实验实验分为空白对照组、5 μmol/L槲皮素组、10 μmol/L槲皮素组、100 μmol/L 川芎嗪组。将第3代hBMSCs接种至6孔板中(5×105个/孔)，按照分组处理48 h，吸去上清液，DPBS漂洗3次，采用Trizol法提取细胞总RNA，酶标仪对RNA溶液进行定量并检测纯度，以反转录获得的cDNA为模板进行扩增，实时荧光定量PCR检测CCR1、CXCL5、CXCR4和CXCL12的mRNA表达。以GAPDH为内参，采用2-ΔΔCt法计算靶基因的mRNA相对表达水平[14]。引物序列信息见表1。

1.5 主要观察指标槲皮素处理后hBMSCs的侵袭、迁移能力。
1.6 统计学分析所有数据结果使用GraphPad Prism 9.5.0软件进行分析，计量资料以x±s表示。组间数据比较采用单因素方差分析。P < 0.05为差异有显著性意义。该文统计学方法已经通过南京中医药大学生物统计学专家审核。

讨论

BMSCs具有免疫原性低、安全性好的优点[16]，是干细胞移植疗法的理想细胞来源[17-18]。多项研究发现BMSCs移植可通过促进细胞迁移、归巢修复受损部位来治疗多种神经退行性疾病、中枢神经系统损伤和骨关节软骨退变[19-22]。另外，BMSCs能够减轻炎症反应，支持局部血管生成、细胞存活和分化，在促进骨组织再生、软骨修复方面具有显著效果[23-24]。但BMSCs移植的低效存活率和迁移率导致靶向受损组织的细胞数量较少，降低了干细胞疗法的有效性，限制了临床应用[25]。因此，迫切需要对BMSCs进行预处理来促进其增殖和迁移[26]。
最新研究表明联合中药干预能够促进BMSCs迁移、增殖、分化，减轻不良反应，有助于提高干细胞移植的治疗效果[27-28]。槲皮素作为研究较为广泛的黄酮醇类化合物，已被证实具有显著的骨诱导性和促进BMSCs成骨分化的作用[29-30]。
如今槲皮素抑制肿瘤细胞迁移能力的研究较多，然而其是否促进BMSCs增殖和迁移尚不明确。SADEGHI等[31]研究观察到槲皮素可以通过调节PI3K和ERK1/2信号传导来降低多环芳烃对大鼠胚胎间充质干细胞造成的细胞毒性，促进其增殖和分化为成骨细胞和脂肪细胞。ZHAO等[32]提供的证据表明槲皮素通过 miR-34a/SIRT1信号通路部分逆转氧化应激诱导的大鼠间充质干细胞衰老，说明槲皮素可能是治疗椎间盘退行性变的潜在药物。体外实验发现槲皮素通过雌激素受体增强骨形态发生蛋白信号通路激活并上调OSX、RUNX2 和OPN的表达，促进BMSCs增殖和成骨分化[9]。另有一项体内实验研究表明，与不含有槲皮素的复合材料相比较，含槲皮素的半水硫酸钙/纳米羟基磷灰浸提液能够显著上调骨形态发生蛋白2、碱性磷酸酶表达，促进大鼠BMSCs迁移，发挥其成骨分化作用，这从侧面说明槲皮素可能增强了BMSCs增殖、迁移、成骨分化的能力[33]。CCR1、CXCR4等多种趋化因子的表达与BMSCs迁移密切相关，并参与机体免疫应答和炎症反应等生理病理过程[34-35]。HUANG等[36]研究发现通过上调CCR1的表达，间充质干细胞在靶组织中的迁移数目增加，且间充质干细胞凋亡受到显著抑制，进而有效提高间充质干细胞的存活效率。AZIZ等[37]进行体内实验发现CCR1通过 CCL15参与促进局部血管生成和细胞迁移，而抑制CCR1会严重影响微血管的形成。CXCR4是趋化因子CXCL12的唯一受体，两者耦合可以激活细胞中特定的信号通路，影响BMSCs归巢和迁移[38-39]。朱磊等[40]总结得出 BMSCs表达CXCR4受体沿CXCL12/CXCR4信号轴迁移至受损区域并分化为特定的细胞实现修复、再生的功能。该团队运用健脾补肾方可上调CXCL12/CXCR4信号轴，促进BMSCs的增殖和趋化能力。此外，课题组前期研究发现补肾活血舒筋方具有促进间充质干细胞迁移能力的作用[10]，且杜仲、桑寄生等补肾中药中均含有槲皮素[41]。因此，作者推测槲皮素可能调控CCR1、CXCR4等趋化因子，对hBMSCs的迁移能力具有一定的影响。
该研究采用CCK-8实验检测槲皮素对hBMSCs增殖活性的影响，结果表明5，10 μmol/L槲皮素组具有显著促进hBMSCs 增殖的作用，且药物浓度在10 μmol/L时，细胞增殖效率最高，与既往研究结果相符[7]。结合CCK-8的实验结果，选取 5，10 μmol/L槲皮素进行后续实验。细胞划痕实验和Transwell实验结果显示，槲皮素处理后hBMSCs的体外迁移和侵袭能力呈浓度依赖性提升，10 μmol/L槲皮素组的迁移效果可能优于川芎嗪组。Western blot和实时荧光定量PCR结果表明不同浓度槲皮素均可以上调CCR1、CXCR4表达，同样也具有浓度依赖性。最后，借助分子对接技术，进一步揭示槲皮素与CCR1、CXCR4之间强烈的相互作用。
综上所述，该研究在细胞水平上证实了槲皮素可能通过靶向CCR1、CXCR4促进hBMSCs迁移。但是BMSCs迁移的影响因素繁杂，与多种趋化因子相互调节密切相关，仍需完善体内实验进一步深入探讨，为组织损伤修复提供新的治疗策略。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

槲皮素靶向CCR1、CXCR4促进人骨髓间充质干细胞的迁移

Quercetin targets CCR1 and CXCR4 to promote migration of human bone marrow mesenchymal stem cells

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