中国组织工程研究 ›› 2012, Vol. 16 ›› Issue (53): 10005-10009.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.53.024
• 移植与基因 transplantation and gene • 上一篇 下一篇
罗文奇1,袁 衡1, 2,吴长初1,赵 品1,李双容1,程德华3,邹海燕4
Luo Wen-qi1, Yuan Heng1, 2, Wu Chang-chu1, Zhao Pin1, Li Shuang-rong1, Cheng De-hua3, Zou Hai-yan4
摘要:
背景:课题前期研究已证实100 μg/L胰岛素样生长因子1能拮抗体外30 mmol/L高糖毒性引起的凋亡,可改善高糖环境对孕母/胎儿的危害。但这一改善胚胎早期发育的营养环境的发生机制和分子机制却不甚清楚。 目的:结合前期工作基础,从表观遗传学角度入手,观察胰岛素样生长因子1拮抗早期高糖环境对小鼠胚胎印迹基因H19/Igf-2甲基化水平和表达的影响。 方法:通过建立孕娠糖尿病小鼠模型,取小鼠2细胞胚胎等分为实验组和对照组;对照组置于含30 mmol/L葡萄糖的KSOM培养基内进行体外高糖逆境培养,实验组额外添加100 μg/L胰岛素样生长因子1处理。体外发育至囊胚期,检测胚胎印迹基因H19,Igf-2的表达和印迹控制区DNA甲基化水平。 结果与结论:实时定量PCR分析表明,实验组桑椹胚H19,Igf-2的表达分别是对照组的5.9和5.2倍(P < 0.01);实验组囊胚H19,Igf-2的表达分别是对照组的2.4和1.8倍(P < 0.01)。BSP测序法分析H19,Igf-2印迹控制区的甲基化水平发现,实验组桑椹胚、囊胚的甲基化率分别比对照组下降27.9%和20.9%(P < 0.01)。结果可见在高糖环境下胰岛素样生长因子1可部分降低H19/Igf-2印迹控制区DNA甲基化水平,使 Igf-2和H19基因表达增高,能拮抗高糖环境对小鼠早期胚胎发育的损伤。
中图分类号: