人脐带间充质干细胞来源外泌体可调控巨噬细胞的极化

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.1685

中国组织工程研究 ›› 2019, Vol. 23 ›› Issue (13): 2002-2008.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1685

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人脐带间充质干细胞来源外泌体可调控巨噬细胞的极化

宋玉仙¹，张东亚²，许玉君²，侯亚义²，泥艳红¹

¹南京大学医学院附属口腔医院，南京市口腔医院，江苏省南京市 210008；²南京大学医学院免疫学实验室和江苏省医学分子技术重点实验室，江苏省南京市 210093

修回日期:2018-12-24 出版日期:2019-05-08 发布日期:2019-05-08
通讯作者: 宋玉仙，博士，助理研究员，南京大学医学院附属口腔医院，南京市口腔医院，江苏省南京市 210008
作者简介:宋玉仙，女，1986年生，浙江省龙游县人，汉族，2016年南京大学毕业，博士，助理研究员，主要从事肿瘤微环境中巨噬细胞与肿瘤细胞交互对话的相关研究。
基金资助:
国家自然科学基金(81702680)，项目负责人：宋玉仙；南京市医学科技发展项目(YKK17138)，项目负责人：宋玉仙

Regulatory effect of human umbilical cord mesenchymal stem cells-derived exosomes on macrophage polarization

Song Yuxian¹, Zhang Dongya², Xu Yujun², Hou Yayi², Ni Yanhong¹

¹Nanjing Stomatological Hospital, Medical School of Nanjing University, Nanjing 210008, Jiangsu Province, China; ²Immunology Laboratory and Jiangsu Key Laboratory of Molecular Medicine, Medical School of Nanjing University, Nanjing 210093, Jiangsu Province, China

Revised:2018-12-24 Online:2019-05-08 Published:2019-05-08
Contact: Song Yuxian, Nanjing Stomatological Hospital, Medical School of Nanjing University, Nanjing 210008, Jiangsu Province, China
About author:Song Yuxian, PhD, Assistant researcher, Nanjing Stomatological Hospital, Medical School of Nanjing University, Nanjing 210008, Jiangsu Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81702680 (to SYX); Nanjing Medical Science and Technology Development Foundation, No. YKK17138 (to SYX)

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
外泌体：分离纯化人脐带间充质干细胞培养上清的外泌体，具有与母细胞相似的生物学功能。外泌体可在-80 ℃长期保存，溶解后即可使用，避免了间充质干细胞冻存和复苏的不便，以及可能造成细胞活力和功能改变的风险，具有可观的临床应用价值。
极化：巨噬细胞在某些刺激因素诱导下表型和功能发生分化的现象，分化为M1型或M2型，在一定条件下M1型和M2型之间可以相互转化。

摘要
背景：间充质干细胞来源外泌体具有与母细胞类似的修复组织损伤的作用，但机制尚未完全阐明。巨噬细胞在组织损伤修复过程中扮演重要角色。因此，探讨间充质干细胞来源外泌体对巨噬细胞极化的调控作用，将有助于阐明其组织修复的机制。
目的：提取人脐带间充质干细胞来源外泌体，并探讨其对巨噬细胞极化的影响。
方法：采用超速离心法提取人脐带间充质干细胞分泌的外泌体，分别采用透射电镜观察其形态、纳米颗粒追踪法检测粒径、蛋白印迹法检测标志蛋白表达；然后用得到的外泌体处理小鼠骨髓巨噬细胞，探讨其对巨噬细胞极化的调控作用。
结果与结论：①成功提取人脐带间充质干细胞来源外泌体，其形态呈经典的囊泡样结构，直径(92.0±34.1) nm，表达外泌体标志蛋白CD63和Alix；②该外泌体能显著降低脂多糖诱导的巨噬细胞M1型活化标志肿瘤坏死因子α和一氧化氮合酶水平，而提高M2型活化标志白细胞介素10和精氨酸酶1水平；③结果可见，人脐带间充质干细胞来源外泌体具有调控巨噬细胞向M2型极化的作用，进而发挥组织修复的功能。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0002-1509-9803(宋玉仙)

关键词: 人脐带间充质干细胞, 外泌体, 巨噬细胞, 极化, M1型, M2型, 干细胞外泌体, 囊泡样结构, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Accumulating evidence has suggested that mesenchymal stem cells-derived exosomes have the similar tissue repair activity compared to the mother cells. However, the underlying mechanisms are not yet illuminated. Since macrophages play pivotal roles during tissue repair process, we investigated the regulatory effect of mesenchymal stem cells-derived exosomes on macrophages, aiming to better elucidate its mechanism involved in tissue repair.
OBJECTIVE: To isolate exosomes from human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells, and to evaluate their regulatory effect on macrophage polarization.
METHODS: Exosomes were isolated from the culture supernatants of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells by the differential centrifugation method, and then characterized by their morphology, size distribution and protein markers using transmission electron microscopy, nanoparticle tracking analysis and western blot assay, respectively. Furthermore, their regulatory effects on M1/M2 macrophage polarization were evaluated in mouse bone marrow-derived macrophages.
RESULTS AND CONCLUSION: Exosomes were successfully isolated from human umbilical cord-derived mesenchymal stem cell supernatants with a cup-shaped canonical morphology, (92.0±34.1) nm in diameter, and protein markers of CD63 and Alix. We determined that these exosomes could significantly reduce lipopolysaccharide-induced activation of M1 markers tumor necrosis factor-α and inducible nitric oxide, while upregulating M2 markers interleukin-10 andarginase-1. These findings suggest that exosomes from human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells can regulate macrophage polarization to M2 phenotype, benefiting tissue repairing.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Umbilical Cord, Mesenchymal Stem Cells, Exosomes, Macrophages, Tissue Engineering

中图分类号:

宋玉仙，张东亚，许玉君，侯亚义，泥艳红. 人脐带间充质干细胞来源外泌体可调控巨噬细胞的极化[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(13): 2002-2008.

Song Yuxian, Zhang Dongya, Xu Yujun, Hou Yayi, Ni Yanhong. Regulatory effect of human umbilical cord mesenchymal stem cells-derived exosomes on macrophage polarization[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2019, 23(13): 2002-2008.

图/表（结果） 2

2.1 人脐带间充质干细胞的形态及表型鉴定 用酶消化法获取人脐带间充质干细胞，在显微镜下观察细胞形态，可见细胞贴壁良好，呈现长梭形，见图1A；当细胞密度较大时呈涡漩状排列，见图1B。用流式细胞术检测细胞表面标志物，结果显示细胞阳性表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105，阴性表达CD11b、CD14、CD19、CD31和HLA-DR，见图1C，与文献报道的的间充质干细胞标准相符^[20]。

2.2 外泌体的提取与鉴定 收集人脐带间充质干细胞培养上清，采用经典的差速-超速离心方法提取外泌体^[18]。采用Western blot检测外泌体常见标志物CD63和Alix的表达，其中CD63是一种四次跨膜蛋白，Alix是一种参与多泡体发生的蛋白，这两种蛋白在不同来源的外泌体中都有富集。结果显示CD63和Alix在人脐带间充质干细胞来源外泌体中有表达，而在人脐带间充质干细胞中则几乎检测不到，见图2A；透射电子显微镜观察外泌体形态，可见囊泡样结构，见图2B；粒径分析检测得知人脐带间充质干细胞来源外泌体的粒径为(92.0±34.1) nm，符合外泌体的基本特征^[21-22]。

2.3 外泌体被巨噬细胞摄取 用荧光标记物(PKH67-绿色)对外泌体进行标记后加入培养的巨噬细胞中，外泌体终质量浓度为10 mg/L，同时用脂多糖刺激，4 h后在荧光显微镜下可以看到大量外泌体被巨噬细胞摄取，见图3。

2.4 外泌体不影响巨噬细胞增殖活力和周期 采用CCK-8实验检测细胞增殖活力，结果显示，10 mg/L外泌体对静息状态巨噬细胞、脂多糖活化状态巨噬细胞的增殖活力都没有影响，见图4A。细胞周期实验结果表明，该浓度的外泌体也不会影响细胞周期，见图4B，分别比较静息和活化状态下细胞周期G₀/G₁、S和G₂/M期的百分比，发现外泌体处理组与不处理组差异均无显著性意义，见图4C。

2.5 外泌体促进巨噬细胞向M2型极化 脂多糖刺激后巨噬细胞M1型活化标志肿瘤坏死因子α和一氧化氮合成酶的mRNA水平显著升高，而脂多糖+外泌体处理组与单独脂多糖组相比M1活化水平显著降低，见图5A，B；另外，M2型活化标志白细胞介素10和精氨酸酶1在脂多糖的作用下略有升高，而外泌体能显著上调M2的活化水平，见图5C，D。外泌体对M1和M2型活化标志蛋白水平的影响趋势与mRNA水平基本一致，即抑制M1而增强M2，见图6。

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引言

间充质干细胞是一群具有多向分化潜能的干细胞，几乎存在于所有组织中^[1]。由于其独有的特性，包括多分化潜能、免疫调节特性、低免疫原性、易于在体外分离培养和迅速扩增等^[2-3]，间充质干细胞被认为是具有前景的以细胞为基础的治疗手段，也是组织工程领域常用的细胞类型。然而，诸多的临床与实验室研究已经证实，无论是局部或全身给药，被输注入体内的间充质干细胞只有一小部分真正募集到损伤部位^[4-5]，且间充质干细胞在体内存活的时间有限，说明间充质干细胞在组织修复和再生中的有益效果更可能是间接的，主要依赖于间充质干细胞的旁分泌活性^[6]；近年来的研究也证实，间充质干细胞参与组织修复的主要机制与其旁分泌活性有关^[7-8]。

外泌体是一群直径在30-150 nm之间、密度在1.13-1.19 g/mL之间的脂质双分子层结构囊泡，它们选择性地包裹脂质、蛋白质及RNA等多种生物活性物质，参与细胞间的通讯^[9-10]。间充质干细胞产生的外泌体作为其旁分泌的重要物质保持着与亲代间充质干细胞相似的生物活性，也逐渐被证实能促进组织修复^[11-13]，可作为无细胞治疗的新载体，因此具有广泛的应用前景^[14]。

巨噬细胞是一类非常重要的天然免疫细胞，它们通过吞噬并产生细胞因子发挥抗菌、清除感染和组织修复等功能。巨噬细胞具有异质性，根据其不同活化状态和功能可分为经典活化的M1型和替代活化的M2型，而且在不同的环境下M1和M2型之间可以相互转化^[15-16]。M1型巨噬细胞是机体在应对感染或损伤时形成的炎性巨噬细胞，以较强的杀菌能力为特点，高表达一氧化氮合成酶，分泌高水平肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和白细胞介素12等炎性细胞因子^[17]；而 M2型为抗炎巨噬细胞，产生低水平的炎性细胞因子，而高表达精氨酸酶1、甘露糖受体和抗炎因子白细胞介素10，发挥清除感染和组织修复等功能^[18]。由此可见，调控巨噬细胞由M1型向M2型的及时转化将有利于组织修复和再生。

实验选用人脐带间充质干细胞为研究材料，提取其外泌体，进而探讨外泌体对巨噬细胞极化的调控作用，这将有助于阐明其组织修复的机制。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计 细胞学体外观察实验。

1.2 时间及地点 实验于2016年8月至2017年9月在南京大学医学院附属口腔医院完成。

1.3 材料 从南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科收集正常足月妊娠剖宫产胎儿的脐带，确保无菌、无微生物污染，用于提取间充质干细胞。所用材料均严格遵守医学伦理道德，并经南京大学医学院附属鼓楼医院医学伦理委员会批准。

C57BL/6小鼠12只，雄性，6-8周龄，体质量(20±2) g，购于南京大学模式动物研究所。

1.4 实验方法

1.4.1 分离培养人脐带间充质干细胞 采用实验室建立的酶消化法分离脐带间充质干细胞。

在超净工作台内，将脐带剪成5 cm左右的小段，用PBS洗净脐带表面残余的血液；剥离脐动脉和脐静脉后，置于0.01%青霉素和链霉素的DMEM/F12培养基中，用手术剪刀剪成2 mm³左右的组织块；将剪碎的组织转移到50 mL离心管中，4 ℃、300×g离心，小心弃去上层培养基，加入与组织等体积的混合消化酶，置于37 ℃摇床中，200 r/min振荡消化1.5-2.0 h；混合消化酶含Ⅱ型胶原酶2 g/L、中性蛋白酶0.8 g/L、透明质酸酶0.03 g/L，用DMEM/F12培养基配置；将消化后的组织液于4 ℃、400×g离心10 min，小心弃去上清；PBS洗2次，每次4 ℃、400×g离心10 min，弃上清；最后将沉淀重悬于含体积分数为12%胎牛血清的DMEM/F12培养基中，铺入T25培养瓶，在37 ℃、体积分数为5%CO₂培养箱中培养；3 d后，弃去未贴壁的细胞与组织，加入新鲜的含有体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基；待细胞长至80%融合度时，用0.25%胰酶消化，传代至10 cm培养皿中继续扩增培养，并记为第1代，以后每三四天换液或消化后传代培养。

1.4.2 人脐带间充质干细胞表型鉴定 显微镜下观察人脐带间充质干细胞的形态及贴壁性。取第3代人脐带间充质干细胞分装到流式管中，每管约2×10⁵个细胞，分别加入CD29-PE、CD44-PE、CD73-FITC、CD90-PE、CD105-PE、CD11b-PE、CD14-PE、CD19-APC、CD31-PE和HLA-DR-PE抗体，4 ℃避光孵育30 min，PBS洗2次，用流式细胞仪检测。

1.4.3 外泌体提取 外泌体提取方法参照经典的差速-超速离心法^[19]。取第3-9代生长良好的人脐带间充质干细胞铺于10 cm细胞培养皿中，贴壁过夜后移去原有含血清的DMEM/F12培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基，培养2 d后收集培养上清于50 mL离心管中。收集的培养上清于4 ℃、2 000×g离心10 min，以去除死细胞和大的碎片；小心将上清液转移到新的无菌离心管中，于4 ℃、10 000×g离心30 min，以去除细胞器及小颗粒；小心将上清液转移到无菌超速离心管中，于4 ℃、110 000×g超速离心70 min，小心弃去上清，加入注射用生理盐水清洗1次，于4 ℃、110 000×g超速离心70 min，得到的沉淀即为外泌体。

1.4.4 外泌体鉴定

(1)Western blot法检测外泌体的标志性蛋白：加适量的蛋白裂解液裂解外泌体沉淀，充分漩涡震荡；测定蛋白质浓度后取20 μg，加5×SDS上样缓冲液，99 ℃金属浴中加热15 min；12 000×g离心5 min；上样，进行10% SDS-PAGE；100 V转膜70 min，5%脱脂牛奶封闭1 h；分别加入抗CD63和Alix的一抗(用TBS按1∶500稀释，购于Santa Cruz公司)，4 ℃孵育过夜；TBST洗膜5 min×4次，加相应二抗，室温孵育1.5 h；TBST洗膜5 min×4次，加ECL发光液(购于Millipore公司)，通过化学发光凝胶成像系统成像拍照。

(2)透射电镜观察外泌体的形态：将外泌体充分混匀，吸取20 μL滴到直径2 mm的载样铜网上，室温静置5 min，用滤纸小心吸掉多余液体，滴加醋酸双氧铀负染2 min，用滤纸吸掉多余液体，在白炽灯下烘干；透射电镜80-120 kV成像并拍照。

(3)外泌体粒径检测：将外泌体送徐州埃维赛特纳米科技有限公司检测粒径分布，所用仪器为qNano(新西兰Izon science公司)。

1.4.5 小鼠骨髓巨噬细胞诱导及处理 提取C57BL/6小鼠胫骨和腓骨的骨髓细胞，用含体积分数为10%胎牛血清、25 μg/L巨噬细胞集落刺激因子(PeproTech公司)的1640培养基(Gibco公司)重悬，调整细胞浓度至1×10¹⁰ L^-1，铺于12孔板内，隔天换液，诱导5 d即为巨噬细胞。

1.4.6 外泌体荧光标记 将溶于PBS中的外泌体加入到0.3 mL Diluent C中稀释；加入4 μL PKH67染色液(Sigma公司)37 ℃下孵育5 min；加入2 mL含0.1%BSA的PBS溶液终止染色；转移到超离管中，4 ℃、110 000×g离心1 h；小心除尽上清，加适量培养基重悬；将标记好的外泌体加入培养的巨噬细胞中，终质量浓度10 mg/L，同时加脂多糖刺激(100 μg/L)；4 h后用荧光显微镜观察荧光标记的外泌体被巨噬细胞摄取的情况。

1.4.7 CCK-8法检测细胞增殖活力 将小鼠骨髓巨噬细胞以每孔5 000个密度接种于96孔板中，100 μL/孔，设PBS对照组、单独外泌体(10 mg/L)处理组、脂多糖(100 μg/L)刺激组、脂多糖(100 μg/L)+外泌体(10 mg/L)处理组，每组各5个重复孔。细胞贴壁24 h后开始干预，加外泌体或等体积PBS，同时加或不加脂多糖处理24 h，每孔加CCK-8 10 μL，孵育1.5 h，用酶标仪检测450 nm处吸光度值(A_{450 nm})。

1.4.8 流式细胞仪检测细胞周期 小鼠骨髓巨噬细胞接种于12孔板中，分组同1.4.7，细胞贴壁过夜换无血清培养基饥饿12 h后开始干预，方法同上，每组3个重复。胰酶消化收集细胞，用体积分数为70%乙醇固定过夜，PBS洗2次后加RNaseA 37 ℃孵育30 min(用含0.2% Triton-X100的PBS配制，终质量浓度20 mg/L)，加入终质量浓度50 mg/L碘化丙啶孵育5 min后上机检测，收集20 000个细胞，用ModFit软件进行分析。

1.4.9 总RNA提取和荧光定量PCR检测 小鼠骨髓巨噬细胞接种于12孔板中，分为对照组、脂多糖(100 μg/L)刺激组、脂多糖(100 μg/L)+外泌体(10 mg/L)处理组，每组3个重复。细胞贴壁过夜后开始干预，外泌体和脂多糖同时加入，干预24 h后收集细胞。采用Trizol法提取总RNA，用核酸蛋白检测仪测量RNA浓度和纯度，取1 μg RNA反转录成cDNA，随后采用荧光定量PCR试剂盒(BIO-RAD公司)进行扩增，结果按2^-ΔΔCt公式计算，得到目的基因与内参GAPDH的相对量。荧光定量PCR所用的引物序列见表1。

1.4.10 ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素10水平 收集1.4.9中处理24 h的细胞培养上清，3 000 r/min离心10 min，吸取上清液进行ELISA检测，按照小鼠肿瘤坏死因子α和白细胞介素10 ELISA试剂盒(Biolegend)说明书进行。

1.4.11 Western blot检测一氧化氮合成酶和精氨酸酶1的蛋白水平 小鼠骨髓巨噬细胞接种于6孔板中，分组和干预方法同1.4.8。收集细胞，加100 μL蛋白裂解液于冰上裂解30 min，120 000×g离心15 min，吸取上清液测蛋白浓度后加入上样缓冲液煮沸10 min。Western blot步骤同1.4.4，一氧化氮合成酶(Cell signaling Technology公司)和精氨酸酶1(Bioworld公司)抗体分别按1∶1 000稀释。

1.5 主要观察指标 ①人脐带间充质干细胞的形态和表型；②人脐带间充质干细胞来源外泌体的形态、粒径和蛋白标志；③巨噬细胞活力、细胞周期和M1/M2表型。

1.6 统计学分析 所有数据以mean±S.E.M表示，用GraphPad软件进行统计分析并作图，组间比较采用单因素方差分析，两组比较采用t 检验，P < 0.05为差异有显著性意义。实验结果均重复3次以上。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

间充质干细胞具有特殊的低免疫原性，因为它们不表达MHC-Ⅱ(HLA-DR)，低表达MHC-Ⅰ(HAL-A、B、C)；不表达共刺激分子CD80、CD86和CD40等^[3-4]。因此，间充质干细胞无论是自体移植还是同种异基因移植，甚至异种移植都不会出现显著的免疫排斥反应。有许多实验研究采用人来源间充质干细胞用于动物疾病模型的治疗，或者直接作用于动物细胞，均显示出良好的效果且与种属差异无关^[22-31]。该研究选择人脐带间充质干细胞为研究材料，因为人脐带华通胶是很好的间充质干细胞来源，且获得的细胞活力和功能强，应用性好。通过经典的差速-超速离心方法获取人脐带间充质干细胞培养上清中的外泌体，经鉴定其形态、大小及蛋白标志物均符合外泌体的特征。接着，用得到的外泌体处理小鼠骨髓细胞诱导的巨噬细胞，探讨其对巨噬细胞极化的调控作用。结果显示人源外泌体能被小鼠巨噬细胞吞噬，且对细胞增殖活力和周期都没有影响，但能显著抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1型活化，而促进M2型活化。

目前的研究普遍认为，间充质干细胞能促进巨噬细胞由M1型向M2型转变。Nemeth等^[32]在用人骨髓来源间充质干细胞治疗小鼠脓毒症模型中发现，内毒素刺激巨噬细胞活化后产生肿瘤坏死因子α，通过间充质干细胞的TNFR-1受体激活间充质干细胞的NF-κB通路，进而上调COX-2，促进前列腺素E2的分泌，前列腺素E2反过来诱导巨噬细胞向调节型的M2型极化，产生高水平的白细胞介素10；随后，Kim等^[33]报道了人骨髓来源间充质干细胞与人单核细胞诱导的巨噬细胞在体外共培养，使巨噬细胞高表达CD206、白细胞介素10和白细胞介素6，而低表达肿瘤坏死因子α和白细胞介素12。此后陆续有报道称间充质干细胞在体外或体内炎症环境中，促进活化的巨噬细胞向M2型转化^[34-40]。间充质干细胞产生的外泌体是否也能促进巨噬细胞极化值得探讨。该实验结果证实，间充质干细胞产生的外泌体能下调脂多糖活化的巨噬细胞中肿瘤坏死因子α和一氧化氮合成酶(M1型主要标志)水平而上调白细胞介素10和精氨酸酶1(M2型主要标志)水平，提示它具有与母细胞类似的调控巨噬细胞向M2型极化的作用。

长期以来，细胞产生并分泌的细胞外囊泡(包括外泌体)被认为是一些无意义的细胞残骸。近年来随着对外泌体研究的深入，研究者们认识到外泌体发挥功能主要取决于其内包含的功能性物质，包括蛋白质、信使RNAs、微小RNAs(miRNAs)和长链非编码RNAs(LncRNA)等。尤其是miRNAs被认为是外泌体的重要内容物，它们会被选择性地包裹进外泌体^[1-2]，并随外泌体被转移到附近或远端的靶细胞，进而调控细胞功能^[3-4]。在该研究中发现外泌体被巨噬细胞吞噬后细胞的表型发生变化，推测外泌体中携带的生物活性物质调控了巨噬细胞的极化过程，然而外泌体中具体是什么物质发挥了作用，还有待于进一步研究。

综上所述，研究结果初步证实人脐带间充质干细胞来源外泌体能调控巨噬细胞向M2型活化，这可能是其发挥组织修复作用的重要原因。增强对人脐带间充质干细胞来源外泌体基本特征及其对巨噬细胞调控作用的了解，将有助于今后更好地阐明其在组织损伤修复中的作用及机制，为其临床应用奠定理论基础。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

人脐带间充质干细胞来源外泌体可调控巨噬细胞的极化

Regulatory effect of human umbilical cord mesenchymal stem cells-derived exosomes on macrophage polarization

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