2.1   参与者数量分析   该研究主要是分析以aGVHD生物标记物可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8在预测和诊断重度aGVHD的特异性灵敏度分析，样本量计算基于灵敏度和特异性分析，利用PASS 11软件计算样本量。假设预测和诊断aGVHD的灵敏度为85%，灵敏度的容许误差为10%；特异度为85%，特异度的容许误差为10%；选取置信度1-α=0.95，假设没有发生aGVHD组和发生重度aGVHD组数量相等，考虑15%的脱落率，需要样本总数量为124例。分析过程中有部分数据未满100 d，或者发生aGVHD时未采集样本，均需要剔除，实际分析流程图，见图1。



2.2   aGVHD发生点分析显示血浆生物标记物水平与aGVHD的相关性   aGVHD发生点数据显示(未发生aGVHD组患者取测量时间接近aGVHD发生时间中位数的生物标记物数据)，可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α与aGVHD有关联，肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8与aGVHD无关联。在127例患者中有100例aGVHD发生点采集血浆标本，按照MAGIC分级标准：无aGVHD组60例、Ⅰ-Ⅳ度aGVHD组40例，无aGVHD组和有aGVHD组可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α蛋白水平有显著差异，肿瘤坏死因子受体1，白细胞介素6和白细胞介素8无显著差异，见图2。无aGVHD组和aGVHD组的可溶性生长刺激表达基因2蛋白水平分别为16 034(5 711-283 236) ng/L和39 018 (8 546-228 114) ng/L(P < 0.05)。无aGVHD组和aGVHD组的胰岛再生衍生因子3α蛋白水平分别为4 078 (1 103-140 949) ng/L和8 109(1 567-116 880) ng/L (P < 0.05)，差异均有显著性意义，见表3。可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α做为可能诊断aGVHD的生物学标记物，ROC曲线下面积分别为0.75和0.67，见图3。当可溶性生长刺激表达基因2水平cut-off值为25 193 ng/L时，发生综合aGVHD的敏感度为70%，特异性为68%。当胰岛再生衍生因子3α水平cut-off值为6 066 ng/L时，发生综合aGVHD的敏感度为68%，特异性为62%。











2.3   肠道aGVHD发生时间点分析可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α与单纯肠道aGVHD的相关性    肠道aGVHD发生时间点分析提示可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α在无肠道aGVHD组和Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD组间差异有显著性意义，肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8在两组内差异无显著性意义，见图4。非肠道aGVHD组(97例)和Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD组(9例)可溶性生长刺激表达基因2蛋白水平分别为18 789 (4 191-135 893) ng/L和77 475 (13 221-189 802) ng/L，差异有显著性意义(P < 0.01)；非肠道aGVHD组和Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD组胰岛再生衍生因子3α蛋白水平分别为4 816(240-26 992) ng/L和9 337 (1 567-116 880) ng/L，差异有显著性意义(P < 0.05)，见表4。可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α做为可能诊断Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD的生物标记物，ROC曲线下面积分别为0.78和0.70。当可溶性生长刺激表达基因2蛋白水平cut-off值为25 968 ng/L时，Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD的敏感度为78%，特异性为67%。当胰岛再生衍生因子3α蛋白水平cut-off值为7 459 ng/L时，Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD的敏感度为78%，特异性为68%，见图5。











2.4   肠炎和肠道aGVHD患者的可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α表达水平   单纯肠道aGVHD组12例，肠炎组4例，两组病例数均较少。肠道aGVHD组和肠炎组的可溶性生长刺激表达基因2水平分别为46 771 (8 546-189 802) ng/L和110 85(8 656-73 793) ng/L，两组无明显差异(P=0.101 6)；肠道aGVHD组和肠炎组的胰岛再生衍生因子3α水平分别为8 744(1 567-116 880) ng/L和8 913(3 212-16 438) ng/L，两组无明显差异(P =0.951 7)，见表5。




2.5   可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α在移植后7 d发生aGVHD显著升高   按照EBMT?NIH?CIBMTR分级标准评估移植后7 d时可溶性生长刺激表达基因2，胰岛再生衍生因子3α是否可预测aGVHD的发生，其中无aGVHD组 55例、Ⅰ-Ⅳ度aGVHD组47例。移植7 d之后从未发生aGVHD组和发生aGVHD组可溶性生长刺激表达基因2蛋白水平分别为12 146(5 324-94 536) ng/L和13 985(4 148-154 341) ng/L，差异有显著性意义(P < 0.05)。移植7 d之后从未发生aGVHD组和发生aGVHD组胰岛再生衍生因子3α蛋白水平分别为4 531(1 330-92 366) ng/L和6 862(1 456-155 113) ng/L，差异无显著性意义(P < 0.1)，但有明显趋势，见表6。可溶性生长刺激表达基因2做为可能预测将来aGVHD发生的生物标记物，ROC曲线下面积为0.62，当可溶性生长刺激表达基因2蛋白水平cut-off值13 758 ng/L时，预测发生综合Ⅰ-Ⅳ度aGVHD的敏感度为63%，特异性为61%，见图6。







2.6   aGVHD患者用药后1，2，4周的血浆生物标记物水平   将36例使用糖皮质激素的aGVHD患者根据治疗疗效标准分为激素有效组(26例)和激素抵抗组(10例)。用药后4周激素抵抗组的可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平较之前高，但目前结果显示每个时间点的激素抵抗组和激素治疗有效组并无显著差异，见表7，但是激素抵抗组治疗后1，2，4周可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α蛋白水平均呈上升趋势，见图7。

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异基因造血干细胞移植是目前治愈一系列良性和恶性血液疾病、遗传性疾病与代谢性疾病的有效手段。移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后常见的严重并发症，其中急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease，aGVHD)发病率为40%-75%，是影响异基因造血干细胞移植总体疗效的重要因素[1-2]，同时也是异基因造血干细胞移植后死亡的最主要原因之一[3]。aGVHD主要累及皮肤、肝脏、胃肠道，目前对于aGVHD的诊断主要靠临床症状，但由于aGVHD早期表现缺乏特异性，如仅有轻微的皮肤瘙痒、皮疹、恶心、腹泻等，易与感染或药物不良反应等相混淆，不易在发病早期明确诊断并给予及时治疗。接受异基因造血干细胞移植的儿童Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的累积发病率为28%-56%[4-6]。虽然儿童的累积发病率较成人低，但是预防及治疗儿童aGVHD存在很多的难点。目前aGVHD一线治疗方案以糖皮质激素为主，首选甲泼尼龙，但近半数患者疗效欠佳，并可能减弱移植物抗白血病效应、增加感染机会，儿童长期使用糖皮质激素还影响生长发育。目前对激素依赖/耐药的aGVHD患者选择单药或联合治疗均无预测指标，故及早甄别出难治性移植物抗宿主病及aGVHD是否向慢性移植物抗宿主病进展非常重要。国际上公认的“金标准”是皮肤活检、结肠镜检查、支气管镜检查、支气管镜肺泡灌洗术等侵入性检查[7]，但是会带来很多并发症，例如：出血、感染、气胸等，因此国内很少开展此项检查。  

在目前的aGVHD诊疗研究中，血清生物学标志物筛查是一种较病理活检更简便的早期诊断手段。理想的生物学标记物不仅应具备敏感性、特异性、无创性及标准化等特点，还应该能够预测疾病预后并对治疗效果进行评估[8]。许多移植中心都在进行方便、快速、无损伤的生物标志物研究，也取得了一定的进步。在过去的10年中，VANDER LUGT等[9-12]对异基因造血干细胞移植后aGVHD的生物标志物研究有了突破性进展，目前被认为比较有临床应用价值的aGVHD生物标记物有可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子受体1等。FERRARA等[10]逐渐提出了aGVHD生物标记物的临床应用价值，2015年提出3个aGVHD 生物标记物：肿瘤坏死因子受体1、可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α的6个月非复发死亡率模型。前瞻性收集2个中心792例诊断为aGVHD的异基因造血干细胞移植患者，随机分为训练组(n=328)、测试组(n=164)、验证组(n=300)，在所有3个数据集中，随着aGVHD生物标记物模型评分的增加，6个月非复发死亡率的累积发生率显著增加(8%，27%，46%，P < 0.000 1)；相反，随着aGVHD 生物标记物模型评分的增加，对aGVHD治疗的反应率降低(86%，67%，46%，
P < 0.000 1)，重复体现了aGVHD生物标记物在aGVHD发生后的预后价值[13]。最新研究结果也显示aGVHD生物标记物模型能有效预测激素治疗患者的预后情况[14]，507例患者随机分成试验组和验证组，试验组激素抵抗的患者12个月非复发性死亡率明显高于激素敏感的患者(63%，22%，P < 0.001)，且无病生存率降低(34%，68%，P < 0.001)。aGVHD标记物模型(ROC曲线下面积=0.82)预测激素抵抗的预后价值明显高于临床评价标准(ROC曲线下面积=0.68)。唐伦等[15]通过探讨异基因造血干细胞移植受者不同时间点血清生物标志物水平变化和aGVHD的关系，发现aGVHD 受者的血清生长刺激表达基因2水平明显高于未发生aGVHD者，且移植后7，56 d发生aGVHD患者的血清生长刺激表达基因2水平较未发生aGVHD者明显升高，差异有显著性意义。李桂芳[16]报道发生aGVHD的患者在脐血移植后第14天，血清中生长刺激表达基因2水平较未发生aGVHD者明显升高，同时脐血移植后第14天和第30天发生重度aGVHD者生长刺激表达基因2水平显著高于轻度aGVHD者，且生长刺激表达基因2升高患者发生非复发死亡率的风险明显增加。

目前aGVHD与相关细胞因子的研究对象几乎都是成人，婴幼儿时期肠道免疫功能不完善，对预处理、输注干细胞、运用免疫抑制剂及抗生素等反应有别于成人，发生aGVHD后血浆生物标记物的变化有其自身特点。该研究在上述研究进展的基础上，选取了在多个研究中得到较为一致结论的5个生物标志物：可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子受体1，以期为儿童aGVHD的早期诊断、预测治疗效果和预后提供可靠的检测指标。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

1.1    设计   前瞻队列研究。
1.2   时间及地点   2019年3月至2020年12月在南方医科大学儿科移植中心行异基因造血干细胞移植共计127例患者，细胞因子测定实验在北京博福瑞基因诊断技术有限公司实验室完成。

1.3   对象   南方医院儿科2019年3月至2020年12月行异基因造血干细胞移植共计127例患者，疾病类型包括恶性和非恶性疾病，移植类型包括亲缘干细胞移植、非亲缘造血干细移植、单倍体造血干细胞移植，造血干细胞来源包括骨髓、外周血、脐血，见表1。所有患者通过了伦理审查，并且监护人签订了知情同意书。研究方案经南方医科大学南方医院医学伦理委员会批准([2012]伦审字(034)号)，南方医科大学南方医院具备造血干细胞移植资质。

试剂：R&D(Catalog No.LXSAHM-05)五因子试剂盒，检测因子有可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8。各因子参数见表2。

仪器：采用美国luminex公司的LUMINEX 200TM检测系统，采用xMAP(multi-Analyte Profiling)技术，即基于流式荧光技术的液相悬浮微珠多重检测技术，具有高通量、高速度、多功能性、灵活性高、灵敏度高、重复性好、准确性高的特点。单孔最多可同时检测100个指标，线性范围：3.5 logs；单孔加入样本体积：20-200 μL，检测低限可达0.01 ng/L，系统有配套分析软件，具有对系统控制、验证、校正、数据采集和数据分析的基本功能；并具备自动生成最优曲线的曲线拟合算法。该检测仪器具有中国临床注册证，可用于医学检验实验室。该研究Biomarker检测基于免疫学原理，采用双抗体夹心法。抗原抗体结合后，荧光标记二抗，仪器识别微球及读取荧光，根据荧光强度及标准曲线，换算成Biomarker浓度，分析软件为versionXponent_4.2。
1.4   方法   
1.4.1   aGVHD诊断分级及疗效   所有aGVHD患者主要根据临床症状、胆红素、转氨酶、大便常规检查、大便细菌培养、大便真菌检查及巨细胞病毒检测结合免疫抑制治疗效果进行诊断，对适合肠镜的患者做肠道镜检。分级分度参照EBMT−NIH−CIBMTR标准[17]。完全缓解(CR)：指该器官aGVHD的所有表现完全消失；部分缓解(PR)：器官分级评分降低1级；进展(PD)：指胃肠道和肝脏在起始治疗后48 h、皮疹在起始治疗后72 h评估时，脏器分级评分升高1级；无反应(NR)：起始治疗皮肤移植物抗宿主病7 d、肝脏和胃肠道移植物抗宿主病治疗72 h后评估时，不属于完全缓解、部分缓解、进展中的任何一种情况。
1.4.2   预处理方案   所有患者均接受清髓预处理方案，但不同的疾病类型预处理方案不一样。重型地中海贫血、再生障碍性贫血、原发性免疫缺陷病及遗传代谢病一系列良性病以环磷酰胺/白消安/氟达拉滨方案进行预处理，急性淋系、髓系白血病及幼年性粒单核细胞白血病等恶性血液病以白消安/氟达拉滨/阿糖胞苷为主的预处理方案。
1.4.3   aGVHD预防   根据干细胞来源及供者类型，aGVHD预防方案也不同。①亲缘全相合异基因造血干细胞移植采用环孢素+霉酚酸酯方案[环孢素，3 mg/(kg·d)，移植前1 d起；霉酚酸酯，30 mg/(kg·d)，干细胞输注6 h后起]；②非亲缘全相合异基因造血干细胞移植采用环孢素+霉酚酸酯+甲氨蝶呤方案[环孢素3 mg/(kg·d)，移植前1 d起；霉酚酸酯45 mg/(kg·d)，干细胞输注6 h后起；甲氨蝶呤15 mg/kg，移植后1 d，10 mg /kg，移植后3，6 d]；③单倍体半相合移植采用环磷酰胺后置+霉酚酸酯+他克莫司方案[环磷酰胺后置，50 mg/(kg·d)，移植后3，4 d；霉酚酸酯45 mg/(kg·d)，干细胞输注6 h后起；他克莫司0.03 mg/(kg·d)，移植后6 d]。
兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白用于重型地中海贫血、再生障碍性贫血等良性疾病预防移植物抗宿主病，恶性血液病及脐血移植未使用兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白。所有患者若移植后90 d无aGVHD开始减量免疫抑制剂。
1.4.4   临床样本的采集   根据是否发生aGVHD以及发生aGVHD的时间，临床样本的采集有所不同。对于100 d内未发生aGVHD的患者，样本采集时间点为-10，0，+7，+14，+28，+90 d。对于在移植后100 d内发生了aGVHD的患者，在未发生aGVHD时按上述固定时间点采集，一旦发生了aGVHD，采样方案改为aGVHD发生点、aGVHD治疗后1，2，4周采集时间点。Onset样本为发生aGVHD点，且未用药干预或者干预时间在48 h内。临床信息随访至1年。
1.5   主要观察指标   移植过程中不同时间点血浆可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、肿瘤坏死因子受体1，白细胞介素6和白细胞介素8水平，时间点分别为移植前10 d、移植时当天(0 d)、移植后7 d、移植后14 d、移植后28 d、移植后90 d、腹泻时、aGVHD发生点、aGVHD 治疗后1周(T1)、aGVHD治疗后2周(T2)、aGVHD治疗4周(T4)。
1.6   统计学分析   根据是否发生aGVHD将患者分为2组。使用箱型图可视化可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8水平。采用Mann-Whitney-U 检验评估两组可溶性生长刺激表达基因2、胰岛再生衍生因子3α、肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8水平之间的差异，P < 0.05为差异有显著性意义。根据ROC曲线确定用于分层患者的各标记物水平的最佳临界值。文章统计学方法已经通过南方医科大学生物统计学专家审核。

aGVHD是异基因造血干细胞移植后发病率、致死率最高的并发症，尤其是肠道aGVHD临床症状重，对全身状况影响大，相对于其他靶器官的aGVHD治疗反应差，成为阻碍移植成功的关键因素之一。aGVHD早期诊断和有效治疗直接关系到疾病的预后，但目前对aGVHD的诊断主要依靠临床症状，缺乏早期、敏感、特异的诊断指标，很难与感染、预处理相关毒性等其他原因导致的症状相区别，且常用的aGVHD分级系统存在观察者主观差异、初始分级并不能完全反映疾病严重程度等缺陷。寻找aGVHD特异性生物学标记物对于疾病的早期诊断及精准治疗显得尤为重要。随着蛋白质组学技术的发展，近年来研究人员发现很多蛋白类生物学标记物由终末靶器官组织释放或分泌，因此具有更高的器官或组织特异性，有助于更好地针对不同的临床表现预测aGVHD的发生。

白细胞介素6可以通过增强Th17和Th1亚群活化，减少调节T细胞或直接细胞毒性导致移植物抗宿主病。MALONE等[18]测定了147例接受异基因造血干细胞移植患者的细胞因子水平，其中96例患者出现不同程度的aGVHD，临床aGVHD发生前白细胞介素6水平突然升高，且与aGVHD呈正比。有研究显示白细胞介素6可作为aGVHD发展变化的检测指标，术后21 d白细胞介素6水平与患者发生aGVHD相关[19]。该研究显示不同时间点的白细胞介素6水平与aGVHD无相关性，可能因aGVHD发生前仅一次标本作为基础水平，且白细胞介素6干扰因素较多，在输注干细胞后、感染时均可出现不同程度升高。白细胞介素8是由某些类型细胞如巨噬细胞和上皮细胞受炎症刺激后释放的因子，通过对中性粒细胞有趋化作用实现对GVHD的调节，PACZESNY等[20]报道了通过抗体微阵列和ELISA检测血浆白细胞介素8水平升高与aGVHD相关。肿瘤坏死因子受体1即肿瘤坏死因子可溶性受体，BERGER等[21]报道肿瘤坏死因子较高时则预示发生移植物抗宿主病的风险率增高。CHOI等[22]测量438例采用清髓预处理患者移植后第7天肿瘤坏死因子受体1水平增加超过原来的2.5倍，与Ⅱ-Ⅳ度aGVHD发生存在相关性，增加了移植相关死亡率。该研究对3种因子进行了检测分析，发生aGVHD组和未发生aGVHD组均未发现差异显著，肿瘤坏死因子受体1、白细胞介素6和白细胞介素8也是造血干细胞移植初期因子风暴的重要因子，联合其他两因子有望提高预测和诊断aGVHD的灵敏度，能更早地预测aGVHD的发生和诊断aGVHD，能指导临床更科学地治疗aGVHD。

生长刺激表达基因2是白细胞介素1受体家族的成员之一，其特异性配体为白细胞介素33。生长刺激表达基因2/白细胞介素33途径在Th2细胞介导的疾病中发挥着关键的作用；可溶性生长刺激表达基因2可以作为白细胞介素33的诱骗性受体，使Th2细胞向Th1细胞漂移[23]，考虑生长刺激表达基因2/白细胞介素33传导通路在移植物抗宿主病发生、发展及治疗上有一定的作用。研究发现，可溶性生长刺激表达基因2是移植后aGVHD及植入综合征的预后指标，是目前最有前景用于预测aGVHD发生率、是否对激素耐药及无复发死亡率的指标[24]。VANDER LUGT等[9]发现在移植物抗宿主病治疗初始时生长刺激表达基因2水平高的患者发生难治性移植物抗宿主病的风险、6个月内死亡率均明显增高；移植后14 d血浆生长刺激表达基因2水平与6个月无复发死亡率呈正相关。此外，研究证实血浆生长刺激表达基因2水平可预测移植后1年内的非复发死亡率[25]。REICHENBACH等[26]发现生长刺激表达基因2基因敲除小鼠移植后胃肠道组织病理学改变减轻，移植物抗宿主病致死率显著降低，白细胞介素18受体及干扰素γ生成均减少，移植小鼠模型中回输外源性生长刺激表达基因2受体可显著降低移植物抗宿主病致死率，提示阻断生长刺激表达基因2表达可减轻炎性细胞因子作用，可能对aGVHD起到负向调控的作用。该研究通过比较127例患者移植前后血浆可溶性生长刺激表达基因2水平，发现aGVHD患者血浆中可溶性生长刺激表达基因2水平显著增高，可以做为诊断和术后7 d预测aGVHD的辅助诊断手段。可溶性生长刺激表达基因2与Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD的严重程度呈正相关。

胰岛再生衍生因子3α是由小肠潘氏细胞分泌的一种C型凝集素，主要由肠道微隐窝中的Paneth细胞、部分肠内分泌细胞和杯状细胞分泌，作为抑菌蛋白能够保护肠道隐窝干细胞微环境免受细菌侵害，对肠道干细胞起到保护作用，同时还能调节肠道菌群[13]。许多研究表明，肠道干细胞是肠道aGVHD作用的靶细胞，随着aGVHD症状的进展，肠道干细胞对于结缔组织的更新和上皮黏膜损伤修复作用受到抑制，导致了肠道黏膜不可逆性损伤，最终糜烂脱落，同时肠道菌群也能加重aGVHD的损伤程度[27]。胰岛再生衍生因子3α蛋白则可通过损伤的肠道黏膜中的微小裂隙进入血液循环，因此血浆中胰岛再生衍生因子3α蛋白水平的高低与黏膜脱落严重程度具有一定相关性。TAKASHIMA等[28]应用质谱分析方法在10例明确诊断肠道aGVHD患者血浆中发现胰岛再生衍生因子3α蛋白水平较对照组明显升高，进一步对871例患者进行验证性试验，发现在肠道aGVHD患者发病时胰岛再生衍生因子3α蛋白水平较其他患者升高3倍以上，同时其对于预测治疗4周的效果及1年非复发死亡率有一定的价值，更重要的是，他们通过绘制ROC曲线发现胰岛再生衍生因子3α诊断肠道aGVHD的ROC曲线下面积值为0.81，而其他因子结合在一起的ROC曲线下面积值为0.8，认为胰岛再生衍生因子3α是诊断肠道aGVHD很好的单一标志物。该研究发现胰岛再生衍生因子3α与aGVHD存在相关性，可以做为诊断aGVHD的标志物，7 d样本显示发生aGVHD明显高于未发生组，但无显著差异，可增加样本量继续研究。胰岛再生衍生因子3α也和肠道aGVHD存在关联，无肠道aGVHD和Ⅱ-Ⅳ度肠道aGVHD有显著差异。FERRARA等[10]也发现治疗4周无效患者血浆胰岛再生衍生因子3α蛋白水平是有效患者3倍以上。根据血浆胰岛再生衍生因子3α蛋白水平及时更换免疫抑制剂有利于提高生存率。通过分析用药后1，2，4周的血浆生物标记物水平，4周激素抵抗组的可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平较之前高，结果显示aGVHD患者治疗后血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平不降低可能与预后不良相关，但目前结果显示每个时间点的激素抵抗组和激素有效组并无显著差异，这和整体样本量较少有关系。临床上也常常遇到肠炎患者和肠道aGVHD患者难以辨别的情况，导致医生选择了错误的治疗方案，故此分析了几例肠炎患者和发生肠道aGVHD患者是否可以用可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α做为生物学生物标记物加以鉴别，目前分析结果显示两组的可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α蛋白水平并无显著差异，但是肠道aGVHD患者可溶性生长刺激表达基因2水平明显高于肠炎患者。该研究由于发生肠炎患者的样本量较少，分析结果两组无明显差异，可追加前瞻性样本进行继续研究。

激素抵抗是目前一线药治疗aGVHD失败的主要原因，该研究通过分析用药后1，2，4周的血浆生物标记物水平，4周激素抵抗组的可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平较之前高，结果显示aGVHD患者治疗后血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平不降低可能与预后不良相关，但目前结果显示每个时间点的激素抵抗组和激素有效组并无显著差异，这和整体样本量较少有关系，需后期进一步扩大样本量。对于可溶性生长刺激表达基因2高水平并有激素耐药的患者也可以使用靶向药物的治疗方案，提高治愈率和生存率[29]。因此对造血干细胞移植后早期进行可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平监测，可有效评估aGVHD发生风险、预测aGVHD严重程度、激素疗效及预后，有助于尽早诊断aGVHD并甄别出激素耐药的高危患者，指导其个体化抢先治疗及改善预后。

综上所述，移植后急性移植物抗宿主病发生点的血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平升高提示aGVHD的发生，早期可以通过可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平提示aGVHD发生风险概率，通过分析用药后1，2，4周的血浆生物标记物水平，aGVHD患者治疗后血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α水平不降低可能与预后不良相关。血浆可溶性生长刺激表达基因2和胰岛再生衍生因子3α结合可作为提示aGVHD尤其是肠道aGVHD的生物学标志物，单独因子灵敏度有限，可增加样本量继续研究，有望使用多因子组合的生物学标记物提高检测的灵敏度和特异性，更好地指导临床进行提前干预治疗和针对性治疗。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

文题释义：
异基因造血干细胞移植：供者的骨髓、外周血或脐血中的造血干细胞移植入异体患者，促其造血和免疫重建的方法。异基因造血干细胞移植又按照供者与患者有无血缘关系分为：血缘关系供者异基因造血干细胞移植和无关供者异基因造血干细胞移植(即无关移植)；按移植物种类分为外周血造血干细胞移植、骨髓移植和脐血造血干细胞移植。
急性移植物抗宿主病：移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后常见并发症，指异基因造血干细胞移植患者在重建供者免疫过程中，来源于供者的淋巴细胞攻击受者脏器产生的临床病理综合征，分为急性移植物抗宿主病、慢性移植物抗宿主病。NIH共识将急性移植物抗宿主病分为2种：①经典急性移植物抗宿主病(临床表现为急性移植物抗宿主病，发生在移植后或供者淋巴细胞输注后100 d之内)；②持续性、复发性或迟发性急性移植物抗宿主病(临床表现与经典急性移植物抗宿主病相同，但发生在移植后或供者淋巴细胞输注后100 d之后，经常与减停免疫抑制剂有关)。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

急性移植物抗宿主病是造血干细胞移植最主要的并发症之一，也是影响移植成败的关键，寻找急性移植物抗宿主病特异性生物学标记物对于疾病的早期诊断及精准治疗显得尤为重要，也是目前造血干细胞移植领域的研究热点。相关研究报道造血干细胞移植后细胞因子水平的升高程度与供者类型、干细胞来源、预处理方案等有关，细胞因子检测方法的标准化、不同移植类型中基础值的设定等方面仍有待于进一步研究探索。目前急性移植物抗宿主病与相关细胞因子的研究对象几乎都是成人，该研究通过收集接受造血干细胞移植儿童的外周血标本，测定不同时间点血浆5种细胞因子水平，分析它们与急性移植物抗宿主病的临床诊断及预测治疗效果的相关性，以填补国内对儿童急性移植物抗宿主病这方面研究的空白，以期帮助临床医生有效评估急性移植物抗宿主病的发生风险、预测其严重程度、疗效及预后，指导其个体化抢先治疗及改善预后。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

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