甲状旁腺激素促进下颌骨髁突骨折游离复位模型兔的骨愈合

doi:10.12307/2022.479

中国组织工程研究 ›› 2022, Vol. 26 ›› Issue (14): 2172-2178.doi: 10.12307/2022.479

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甲状旁腺激素促进下颌骨髁突骨折游离复位模型兔的骨愈合

黄志才，谢柳琴，王光素，张国兴，唐正龙

贵州医科大学口腔医学院/附属口腔医院，贵州省贵阳市 550004

收稿日期:2021-02-22 修回日期:2021-02-25 接受日期:2021-04-19 出版日期:2022-05-18 发布日期:2021-12-21
通讯作者: 唐正龙，博士，教授，主任医师，贵州医科大学口腔医学院/附属口腔医院，贵州省贵阳市 550004
作者简介:黄志才，男，1993年生，汉族，贵州医科大学在读硕士，主要从事口腔颌面部创伤研究。
基金资助:
贵州省教育厅特色领域项目(黔教合KY字[2021]067)，项目负责人：唐正龙；贵州省科技计划项目(黔科合基础[2017]1151)，项目负责人：唐正龙

Parathyroid hormone promotes bone healing in rabbits after free reduction of mandibular condyle fractures

Huang Zhicai, Xie Liuqin, Wang Guangsu, Zhang Guoxing, Tang Zhenglong

Guizhou Medical University School of Stomatology/Affiliated Stomatological Hospital, Guiyang 550004, Guizhou Province, China

Received:2021-02-22 Revised:2021-02-25 Accepted:2021-04-19 Online:2022-05-18 Published:2021-12-21
Contact: Tang Zhenglong, MD, Professor, Chief physician, Guizhou Medical University School of Stomatology/Affiliated Stomatological Hospital, Guiyang 550004, Guizhou Province, China
About author:Huang Zhicai, Master candidate, Guizhou Medical University School of Stomatology/Affiliated Stomatological Hospital, Guiyang 550004, Guizhou Province, China
Supported by:
Special Field Project of Guizhou Provincial Department of Education, No. KY [2021]067 (to TZL); Guizhou Provincial Science and Technology Planning Project, No. [2017] 1151 (to TZL)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
髁突骨折游离复位：下颌骨髁突发生高位骨折伴移位时可导致附着于髁突的肌肉及软组织剥脱而使其成为游离骨块，游离骨块复位固定后可能发生游离骨块延迟愈合甚至出现骨块吸收等情况。
甲状旁腺激素：是一种具有促进骨合成和骨吸收双重效应的激素，已被证明其在间歇性低剂量使用时可有效刺激骨痂的形成与重构过程，从而缩短骨折区域愈合时间，使骨折区域恢复解剖形态及力学稳定性；而在连续性高剂量使用时可加速骨质吸收。

背景：髁突骨折时若骨块严重移位需手术复位及内固定，若附着于髁突前内侧的翼外肌剥脱使骨块游离，术后可能发生髁突骨折块延迟愈合，因此如何促进髁突骨折游离复位后愈合是口腔颌面外科临床医师关注的临床难题。
目的：探讨间歇性皮下注射甲状旁腺激素对兔髁突骨折游离复位后骨愈合的影响及作用机制。
方法：将48只新西兰大耳兔随机分为实验组及对照组，每组24只，建立下颌骨髁突骨折游离复位内固定模型，实验组及对照组造模术后隔日分别经皮下注射甲状旁腺激素 20 μg/kg或生理盐水1 mL。术后第1，2，3，4周时麻醉处死动物，取术区骨标本观察愈合情况，利用免疫组织化学染色及实时荧光定量PCR检测骨折区域骨保护素和核因子κB受体活化因子配体的表达水平。
结果与结论：①实验组骨折区域成骨细胞较多、新生骨痂较快且密度较高；②术后前4周内实验组破骨细胞数量较对照组少(P < 0.05)；③骨保护素的免疫组化平均吸光度值及mRNA表达量结果显示，4周内实验组均高于对照组(P < 0.05)；④核因子κB受体活化因子配体的免疫组化平均吸光度值及mRNA表达量结果显示，4周内实验组均低于对照组(P < 0.05)；⑤提示下颌骨髁突骨折游离复位术后隔日使用甲状旁腺激素，在术后早期可上调骨折区域骨保护素表达、抑制RANKL表达，促进骨折区域的新骨生成。
缩略语：核因子κB受体活化因子配体：receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL；抗酒石酸酸性磷酸酶：tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP

https://orcid.org/0000-0001-6740-6783 (黄志才)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

关键词: 下颌骨, 髁突骨折, 甲状旁腺激素, 骨保护素, 核因子κB受体活化因子配体

Abstract: BACKGROUND: Surgical reduction and internal fixation are used as the main treatments for severe displacement of condylar fracture. If a bone fragment is disintegrated due to the peeling of the external pterygoid muscle, complications such as delayed healing of condylar fracture block may occur after surgery. Therefore, how to promote bone healing after free reduction of condylar fracture is of concern to clinicians in maxillofacial surgery.
OBJECTIVE: To study the effect of intermittent administration of parathyroid hormone on bone healing after free reduction of condylar fracture in rabbits.
METHODS: Forty-eight New Zealand rabbits were randomly divided into experimental group and control group, 24 rabbits in each group. An experimental model of free reduction and fixation of mandibular condylar fracture was established in rabbits. The experimental group and control group were respectively subcutaneously injected with 20 μg/kg parathyroid hormone and 1 mL of normal saline on the next day after surgery, respectively. The animals were sacrificed 1, 2, 3 and 4 weeks after surgery. Bone samples at the surgical site were taken for bone healing observation. The expression of osteoprotegerin and receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) in the fracture area was detected by immunohistochemical staining and real-time fluorescence quantitative PCR.
RESULTS AND CONCLUSION: There were more osteoblasts and new callus formed faster in the fracture area with a higher density in the experimental group. In the first 4 weeks after surgery, the number of osteoclasts in the experimental group was less than that in the control group (P < 0.05). The mean absorbance value and mRNA expression level of osteoprotegerin were higher in the experimental group than the control group within 4 weeks after surgery. The mean absorbance value and mRNA expression level of RANKL were lower in the experimental group than the control group within 4 weeks after surgery (P < 0.05). All these findings indicate that the application of parathyroid hormone on the second day after free reduction of mandibular condylar fracture could up-regulate osteoprotegerin and inhibit RANKL expression in the fracture area at the early postoperative stage, thereby promoting the formation of new bone in the fracture area.

Key words: mandibular bone, condylar fractures, parathyroid hormone, osteoprotegerin, receptor activator of nuclear factor kappa B ligand

中图分类号:

黄志才, 谢柳琴, 王光素, 张国兴, 唐正龙. 甲状旁腺激素促进下颌骨髁突骨折游离复位模型兔的骨愈合[J]. 中国组织工程研究, 2022, 26(14): 2172-2178.

Huang Zhicai, Xie Liuqin, Wang Guangsu, Zhang Guoxing, Tang Zhenglong. Parathyroid hormone promotes bone healing in rabbits after free reduction of mandibular condyle fractures[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2022, 26(14): 2172-2178.

图/表（结果） 11

2.1 实验动物数量分析 48只新西兰大耳兔实验过程均未发生意外死亡，实验组及对照组各24只，全部进入结果分析。
2.2 大体标本愈合情况观察结果
术后第1周：所有标本骨折线均清晰可见，骨块活动度较大，未发生吸收或坏死，骨折线区域内可见大量纤维结缔组织。
术后第2周：两组标本均可见少量反应性骨组织增生，骨块活动度较术后1周时明显减弱。实验组骨折线处新生软骨样组织覆盖且量多于对照组；对照组见部分骨折线暴露。
术后第3周：两组标本骨折线处进一步融合、连接，游离骨块已与下颌骨融为一体，经细针穿刺发现所有标本骨折线区域新生骨组织已部分钙化。
术后第4周：实验组动物标本骨折线已消失，钙化程度较高；对照组仍隐约可见部分骨折线。
2.3 髁突骨折愈合组织形态学观察结果见图2。

术后第1周：苏木精-伊红染色见两组标本骨折线两侧均可观察到大量密集的炎性细胞和成纤维细胞浸润骨折，肉芽组织形成，破骨细胞主要在骨折线外正常骨质内出现。实验组可见大量的软骨细胞在形成的纤维肉芽组织中，仅骨折线边缘可见少量成骨细胞聚集；对照组新生骨痂中纤维组织成分多，有散在少量软骨细胞及成骨细胞，对照组骨折线两侧有较多破骨细胞分布。
术后第2周：实验组新生骨组织增多并可见破骨细胞、炎性细胞浸润，成骨细胞数量增多，软骨性骨痂增多并向编织骨转化；对照组骨折线周围破骨细胞数量较多，骨基质生成现象不如实验组明显。
术后第3周：对照组仍可见少量炎细胞浸润，开始出现钙化程度较低的骨小梁，骨折线周围见破骨细胞散在分布；实验组断端已有编织骨形成，骨折断端间多为骨性骨痂，少量区域为软骨性骨痂，新生骨小梁呈网状，钙化程度较高且钙化较为均匀；实验组成骨细胞多于对照组。
术后第4周：实验组新生骨组织钙化区域继续增大，骨小梁排列规则且钙化较为均匀，破骨细胞数量较前明显减少；对照组骨小梁钙化区间隙较实验组大，钙化程度和骨小梁密集程度稍低于实验组。
2.4 破骨细胞计数结果分析光学显微镜观察并统计骨折线周围区域破骨细胞，进行计数统计得出术后1，2，3，4周实验组及对照组中每个样本中破骨细胞个数的平均值，对两组破骨细胞数进行统计学分析，术后1周，两组破骨细胞数量均达到最大值，后数量逐渐减少，术后4周内对照组破骨细胞数量多于实验组，差异有显著性意义(P < 0.05)，见表2及图3，4。

2.5 免疫组织化学及实施荧光定量PCR结果分析
2.5.1 骨保护素免疫组织化学分析免疫组化染色骨保护素阳性表达主要存在于新生骨小梁边缘的成骨细胞及成纤维细胞胞浆中，在破骨细胞中也有表达，但成骨细胞中表达最强，见图5。术后2周内骨保护素表达逐渐增强，可观察到较多的阳性表达细胞，术后3周表达开始减弱。用平均吸光度进行统计比较，对照组于术后各个阶段骨保护素阳性表达均低于实验组且差异有显著性意义(P < 0.05)，见表3。

2.5.2 骨保护素的mRNA结果分析骨保护素的mRNA的相对表达量在术后均出现上升，两组均于术后2周表达量达到较高水平后开始出现下降，术后4周内实验组表达量高于对照组，见表4及图6，且两组各时间点实验数据相比差异均有显著性意义(P < 0.05)。

2.5.3 RANKL免疫组织化学分析免疫组化显示RANKL的阳性表达主要存在于成骨细胞及破骨细胞的胞浆内，用平均吸光度值进行统计分析，见图7及表5，术后1周两组表达量均达到最大值，然后开始逐渐降低，实验组各阶段的表达量均低于对照组且差异有显著性意义(P < 0.05)。

2.5.4 RANKL的mRNA结果分析两组RANKL mRNA相对表达量均于术后1周时到达最高水平，然后逐渐降低；术后4周内实验组的RANKL mRNA相对表达量均低于对照组，差异有显著性意义(P < 0.05)，见表6及图8。

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引言

髁突为颞下颌关节构成的重要组成部分，是下颌生长发育中心之一。髁突颈部细小薄弱，为髁突骨折的好发部位。临床上将下颌骨髁突骨折分为髁突头部、髁突颈、髁突颈下或髁突基部骨折[1]，影响髁突骨折愈合的因素多种多样，包括髁突损伤类型、是否选择坚强内固定、术区血供情况及愈合过程中药物使用等原因，均可对骨折愈合造成不同影响。对于下颌骨髁突骨折且骨折块严重移位时以手术作为主要治疗手段[2-3]，手术目的主要为恢复患者颌面部形态及颞下颌关节功能[4]。髁突高位骨折伴翼外肌剥脱时髁突骨块游离，内固定术后游离骨块可能发生骨折愈合不良或髁突吸收[5-6]。长期以来，髁状突骨折游离复位内固定术后骨愈合一直是临床医师和患者担忧的问题，因而如何促进髁突游离骨折固定后骨愈合以及防止髁突断端骨吸收成为了急需探索解决的问题。
骨折愈合这一复杂的过程受多种细胞因子调控，其中骨保护素和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL)在骨愈合过程中有重要作用，通过调节成骨细胞及破骨细胞的活性来影响骨痂形成及重塑，动物实验及人血清水平检测发现骨愈合初期骨保护素表达增强、RANKL表达降低[7-9]。甲状旁腺激素为一种具有促进骨合成和骨吸收双重效应的激素，基础和临床研究发现其在间歇性低剂量使用时可有效刺激骨断端骨痂的形成与重构过程[10-12]，从而缩短骨折区域愈合时间，使骨折区域恢复解剖形态及力学稳定性；而在连续性高剂量使用时可加速骨质吸收。作者所在课题组前期研究显示，下颌骨截骨术后间歇性低剂量注射甲状旁腺激素 20 μg/kg可促进骨折断端愈合[13]，但甲状旁腺激素能否促进髁突高位骨折游离复位后骨愈合，其作用机制尚不清楚。故此次实验在髁突骨折游离复位术后间歇性经皮下注射甲状旁腺激素20 μg/kg，观察骨折区域愈合情况，并检测骨折区域骨保护素和RANKL等骨愈合过程中重要因子的表达情况，初步探讨间歇性使用甲状旁腺激素对髁突骨折游离复位术后骨折区愈合的影响，为临床上治疗髁突游离骨折提供新思路，并为后续临床转化应用奠定理论基础。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验，两组数据比较采用t检验。
1.2 时间及地点于2019年9月至2020年12月在贵州医科大学实验动物中心进行动物实验、饲养以及取材，在贵州医科大学附属医院病理科对标本进行石蜡包埋及切片，在贵州医科大学中英联合头颈癌症分子研究实验室及贵州医科大学分子生物学实验室进行实验标本处理及检测。
1.3 材料
1.3.1 动物及分组选取48只五六月龄新西兰大耳兔，雌雄各半，体质量(2.5±0.5) kg，由贵州医科大学实验动物中心统一购买，合格证号：SCXK(渝)2012-0001。按随机数字表法将实验动物分为实验组及对照组，每组24只。实验模型制备参考课题组前期研究[14]，实验组下颌骨髁突骨折游离复位+隔日皮下注射甲状旁腺激素 20 μg/kg，对照组下颌骨髁突骨折游离复位+隔日皮下注射生理盐水1 mL。实验方案经贵州医科大学动物实验伦理委员会批准，批准号：1700456。
1.3.2 实验试剂甲状旁腺激素(Tocris，英国)；苏木精-伊红染色试剂盒(索莱宝，中国)；抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP)染色试剂盒(索莱宝，中国)、反转录试剂盒(Thermo Fermentas，美国)；微型钛钉和钛板(宁波慈北医疗器械有限公司)。一抗抗体来自北京博奥森生物技术有限公司、二抗抗体及免疫组化技术相关试剂来自北京中杉金桥生物技术有限公司。
1.4 实验方法
1.4.1 动物模型的建立兔采用3%戊巴比妥钠溶液按1 mL/kg行耳缘静脉注射麻醉，无菌条件下于左侧下颌骨下缘升支上外侧做一长约2.0 cm纵行切口，逐层剥离软组织，显露左侧颧骨颧弓后切除部分以显露左下颌骨，经髁突行反“L”型截骨术，使暴露下颌骨分离出一前部小骨块，剥离骨块内侧及前部附着的全部肌肉及部分骨膜，使前部骨块游离，模拟下颌骨髁突骨折后骨折块游离状态，微型钛板钛钉将游离骨块复位并固定，见图1。

逐层关闭创口，制备出下颌骨髁突骨折游离复位模型。造模成功后正常分笼单独喂养，术后连续3 d予以肌肉注射(臀部)80×104 U青霉素，连续3 d术区予以生理盐水清洗后碘伏消毒，3 d后创口未发生感染且实验动物恢复正常饮食视为造模成功，所有实验动物术中术后均未发生意外死亡，术后均未发生感染。

1.4.2 取材两组动物分别在术后第1，2，3，4周麻醉处死，取术区下颌骨骨块并观察其愈合情况，共收集得到48个标本，取出内固定钛网钛钉，将其中24个标本放入RNA保存液中置于-80 ℃冰箱冻存备用(每组12个标本，每个时间点3个)。余下24个标本(每组12个标本，每个时间点3个)放入40 g/L多聚甲醛中固定24 h后，将标本置于10%EDTA脱钙液中于室温下脱钙约5周，并隔日更换脱钙液，至探针能刺穿骨块。待脱钙完成后行石蜡包埋、切片，切片行染色处理和免疫组织化学处理。
1.4.3 苏木精-伊红染色
(1)实验步骤：将石蜡切片烤片后经二甲苯脱蜡，不同浓度梯度乙醇下入水，苏木精液染色后流水洗3 s去除多余染料，体积分数1%盐酸乙醇浸泡3 s后立即水洗30 s，促蓝液返蓝浸泡30 s，流动水及蒸馏水分别过洗，0.5%曙红液染色，蒸馏水洗，不同浓度梯度乙醇脱水，二甲苯透明处理，中性树胶封固，风干。
(2)观察内容：显微镜下观察和评估骨折区域早期炎症细胞浸润和新生骨质形成情况。
1.4.4 TRAP染色将石蜡切片温箱烤片后经二甲苯脱蜡 5-10 min，重复1次。无水乙醇 5 min，入体积分数90%乙醇和70%乙醇各2 min，水洗2 min，自然晾干，TRAP固定液固定30 s即可，水洗去除多余染料，稍微晾干水分，加TRAP孵育液置后于37 ℃温箱，浸染45 min，水洗，苏木精染色液染色复染5-8 min，水洗，乙醇脱水，二甲苯透明处理，中性树胶封固，风干，镜检。观察切片骨折区域周围破骨细胞表达。
1.4.5 免疫组化检测骨保护素/RANKL表达石蜡切片经温箱烤片，二甲苯脱蜡，乙醇下入水，抗原修复(使用pH 6.0枸橼酸钠缓冲液)，体积分数3%H2O2封闭切片中内源性过氧化物酶，5%新鲜配制牛血清封闭，滴加一抗(骨保护素抗体1∶100稀释，RANKL抗体1∶200)，4 ℃冰箱中孵育过夜，室温放置30 min后37 ℃恒温箱复温30 min，PBS荡洗2次，3 min/次，滴加二抗试剂，然后放置于37 ℃恒温箱中孵育30 min。PBS荡洗2次，3 min/次，配制DAB显色液，调节好显微镜，向组织中滴加DAB显色液，镜下观察，待镜下出现棕黄色颗粒时，立即终止染色。双蒸水冲洗，苏木精复染90 s，双蒸水冲洗，稍风干，乙醇梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封固后镜检。
1.4.6 实时荧光定量PCR检测髁突骨折区骨保护素/RANKL mRNA的表达利用Trizol法提取骨组织中总mRNA，核酸定量仪测浓度及纯度(纯度范围1.8-2.2)。实时荧光定量PCR，Takara反转录试剂盒反转录，反应条件为：45 ℃ 1 h，70 ℃5 min，生成得到 cDNA ，使用TakaRa试剂盒反应体系行Real-time PCR，反应条件：95 ℃预变性30 s；PCR反应95 ℃ 3 s，60 ℃ 30 s，循环40 次。利用相对定量2-∆∆Ct法检测标本中目的基因相对内参基因的表达量。实时荧光定量PCR引物由上海生工生物工程技术服务有限公司设计及合成，见表1。

1.5 主要观察指标在骨块标本上观察骨折线区域愈合情况；光镜下观察苏木精-伊红染色切片中骨折线周围组织生长情况；TRAP染色观察骨折线周围破骨细胞数量；免疫组织化学染色观察骨折区域骨组织中RANKL及骨保护素表达情况；PCR检测骨折区域骨组织中RANKL及骨保护素的mRNA相对表达量。
1.6 统计学分析各组实验数据计量资料采用x±s表示，用ImageProplus 6.0软件测量后收集免疫组化切片中的平均吸光度值，使用Excel软件整理汇总数据资料，Photoshop软件处理图片，Graph Pad软件做图分析，采用SPSS 23.0软件对数据进行统计分析。对两组结果数据进行t检验，P < 0.05表示差异有显著性意义。

讨论

下颌骨髁突骨折是口腔颌面在临床上常见的骨折类型，针对髁突骨折有切开内固定复位及保守治疗两种治疗方法，其中切开复位内固定术达解剖复位后可降低颞下颌关节紊乱及骨吸收发生率[15-16]。外力将翼外肌撕裂剥脱而使骨折块成为游离骨块时，手术复位可较好地重建颞下颌关节结构，有效恢复咀嚼功能。
研究证实间歇性、小剂量应用甲状旁腺激素可提高骨形成率、改善骨微结构、增加骨皮质骨量、促进骨折愈合，提高骨折愈合区域机械强度，降低术后骨折概率[17-18]。骨折早期使用甲状旁腺激素可促进去卵巢大鼠及健康大鼠的骨折愈合且对全身无不良影响[19]。动物实验证实甲状旁腺激素分别于拔牙术前给药或术后给药均可促进拔牙创的愈合[20-21]；Liu等[22]的研究指出小剂量连续使用甲状旁腺激素也可促进兔胫骨骨折愈合过程；有研究指出间歇性低剂量甲状旁腺激素(1-34)治疗骨折主要通过早期刺激骨祖细胞的增殖和分化，增加骨基质蛋白的产生，在骨折愈合的整个重建阶段产生持续的合成代谢作用，由此来增加骨矿物质含量及骨密度[23]，并在骨痂重建阶段调节破骨细胞的形成[24]。作者所在课题组前期动物实验结果显示，间歇皮下注射重组人甲状旁腺激素可促进下颌骨牵张成骨愈合过程中的新骨形成 [25]。此次实验通过建立下颌骨髁突骨折游离复位动物模型，发现间歇性皮下注射甲状旁腺激素可加快骨折区域新骨形成速度，术后1周时各标本均可观察到大量密集的炎性细胞和成纤维细胞浸润；术后2周实验组炎性细胞浸润减少，成骨细胞数量增多，软骨性骨痂增多并开始改建成骨，对照组骨折线周围破骨细胞数量较多但骨基质生成现象不如实验组；术后3周均开始出现钙化程度较低的骨小梁，对照组仍可见少量炎细胞浸润；术后第4周时两组标本均已达到初期愈合，实验组新生骨组织钙化区域继续增大，骨小梁排列规则且钙化较为均匀。此次实验中TRAP染色显示术后4周内实验组骨折线周围破骨细胞数量均少于对照组(P < 0.05)，说明下颌骨髁突骨折游离复位后间歇性注射甲状旁腺激素可抑制破骨细胞活化，增强成骨细胞生成，加快骨折区域新基质的形成及钙化过程，对骨愈合起促进作用。
骨折愈合是多因子共同调节的复杂过程，研究显示破骨细胞是甲状旁腺激素发挥局部作用的重要靶细胞，骨保护素和RANKL是破骨细胞调控骨重塑的关键蛋白，当核因子κB受体激活因子与由成骨细胞和其他基质细胞产生的RANKL结合时，破骨细胞活化[26]，骨保护素作为RANKL的诱饵受体可与RANKL结合，有实验证实骨保护素通过阻断RANKL/核因子κB受体活化因子相互作用，可抑制体外破骨细胞形成[27-28]，所以干扰RANKL/核因子κB受体活化因子通路是一种很有前景的骨类疾病治疗策略[29-30]。HOU等[31]的动物实验表明，骨折后经骨保护素处理可增加骨折间隙内新骨合成速度及骨小梁密度，骨折区域形成的总骨痂量及新生骨体积明显增加。以成骨样细胞系进行的体外实验表明，骨保护素可增加成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性以及基质合成和矿化；而动物体内研究表明，骨保护素可促进骨形成、增加骨小梁密度和骨折愈合[32]。而当内源性甲状旁腺激素缺乏时可通过降低成骨细胞RANKL表达影响破骨细胞活性，减弱骨吸收能力[33]，甲状旁腺功能亢进时可增强RANKL的产生，并通过激活体外成骨蛋白激酶A抑制骨保护素的分泌，从而促进破骨细胞活性的增加[34]。
此次实验结果显示，髁突骨折游离复位术后骨保护素的表达量及骨折区域的mRNA相对表达量上升，于术后2周达到较高水平后开始出现下降，对照组在术后4周内各阶段的相对表达量均低于实验组(P < 0.05)；而RANKL的表达量及骨折区域的mRNA相对表达量在术后1周时均达到较高水平，之后开始逐渐降低，其中实验组各阶段的表达量均低于对照组(P < 0.05)。安宁等[13]的研究指出截骨术后间歇性皮下注射甲状旁腺激素可上调骨保护素，抑制RANKL的表达，加速骨代谢，促进下颌骨截骨区新骨形成。此次实验在使用甲状旁腺激素后，可通过上调骨保护素的表达、减弱RANKL的表达来降低破骨细胞活化，并促进髁突高位骨折游离复位后新骨形成及钙化，加快骨愈合过程。研究结果初步反映了间歇性、小剂量皮下注射甲状旁腺激素，对下颌骨髁突骨折游离复位术后愈合有积极的成骨作用。由于术后观察时间较短，且未设立甲状旁腺激素使用的不同剂量组，故甲状旁腺激素最适宜剂量、疗程及后期疗效等问题仍需进一步研究。下一步将继续深入研究甲状旁腺激素对髁突骨折愈合的影响及分子机制，以加深对甲状旁腺激素促进骨愈合的机制探索，为临床治疗提供新的思路。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

甲状旁腺激素促进下颌骨髁突骨折游离复位模型兔的骨愈合

Parathyroid hormone promotes bone healing in rabbits after free reduction of mandibular condyle fractures

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