骨髓来源未成熟树突状细胞干预大鼠原位肝移植的排斥反应

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.3509

中国组织工程研究 ›› 2021, Vol. 25 ›› Issue (13): 2025-2029.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.3509

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骨髓来源未成熟树突状细胞干预大鼠原位肝移植的排斥反应

李立强1 ，焦龙杏1，张武 2，闫文涛1，李健3，李明皓4

1宁夏医科大学，宁夏回族自治区银川市 750004；2吴忠市人民医院，宁夏回族自治区吴忠市 751100；3合肥长荣医院，安徽省合肥市 230001； 4宁夏回族自治区人民医院肝胆外科，宁夏回族自治区银川市 750002

收稿日期:2020-06-15 修回日期:2020-06-19 接受日期:2020-07-11 出版日期:2021-05-08 发布日期:2020-12-28
通讯作者: 李明皓，博士，主任医师，教授，硕士研究生导师，宁夏回族自治区人民医院肝胆外科，宁夏回族自治区银川市 750002
作者简介:李明皓，博士，主任医师，教授，硕士研究生导师，宁夏回族自治区人民医院肝胆外科，宁夏回族自治区银川市 750002
基金资助:
国家自然科学基金地区科学基金项目(81560114)，项目负责人：李明皓；宁夏重点研发项目(2019BEG03039)，项目负责人：李明皓

Effect of immature dendritic cells derived from bone marrow on rejection of orthotopic liver transplantation in rats

Li Liqiang1, Jiao Longxing1, Zhang Wu2, Yan Wentao1, Li Jian3, Li Minghao4

1Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia Hui Autonomous Region, China; 2Wuzhong People’s Hospital, Wuzhong 751100, Ningxia Hui Autonomous Region, China; 3Hefei Changrong Hospital, Hefei 230001, Anhui Province, China; 4Department of Hepatobiliary Surgery, People’s Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Yinchuan 750002, Ningxia Hui Autonomous Region, China

Received:2020-06-15 Revised:2020-06-19 Accepted:2020-07-11 Online:2021-05-08 Published:2020-12-28
Contact: Li Minghao, MD, Chief physician, Professor, Master’s supervisor, Department of Hepatobiliary Surgery, People’s Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Yinchuan 750002, Ningxia Hui Autonomous Region, China
About author:Li Liqiang, Master candidate, Physician, Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, Ningxia Hui Autonomous Region, China
Supported by:
the Regional Science Fund Project of National Natural Science Foundation of China, No. 81560114 (to LMH); the Key Research & Development Project in Ningxia, No. 2019BEG03039 (to LMH)

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
树突状细胞：已知机体内功能最强的抗原提呈细胞，能诱导免疫应答的产生，同时在诱导免疫耐受和参与免疫应答的调节中也起着重要生物学作用，目前认为不同发育阶段有着不同的细胞表型，并与其功能密切相关，未成熟状态几乎不表达CD40、CD80/CD86、MHC-Ⅱ等协同刺激分子和黏附分子，不能使初始细胞活化、增殖产生免疫应答，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。
肝移植：是治疗终末期肝病的有效方法，肝脏是移植“免疫特惠”器官，移植后排斥反应虽然没有其他器官如心、肺、胰和肾等严重，但移植肝的排斥问题，仍然是目前有待解决的一大难题。未成熟树突状细胞诱导免疫耐受或免疫低反应被普遍认为是一种有效的方法。

背景：未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受，同时未成熟树突状细胞可诱导同种异体抗原特异性T细胞的低反应性，从而延长移植器官的存活时间。
目的：探讨未成熟树突状细胞对大鼠原位肝移植术后肝脏排斥反应的影响及相关机制。
方法：根据DA和Lewis大鼠体质量成对随机分配成3组，均利用“二袖套”方法建立DA→Lewis大鼠肝移植模型。对照组不给予任何处理；环孢素组术后第2天开始给予10 mg/kg环孢素A，1次/d，共7 d；未成熟树突状细胞组术前1 d经阴茎背静脉注射DA大鼠骨髓来源未成熟树突状细胞(1×106/只)，连续注射2次，间隔10 min。术后7 d取大鼠肝脏，苏木精-伊红染色观察病理改变，qRT-PCR和Western blot检测SHIP、AKT、IKK、IKβ mRNA以及蛋白的表达。
结果与结论：①与对照组相比较，环孢素组和未成熟树突状细胞组生存时间较长，差异有显著性意义(P < 0.05)；②环孢素组和未成熟树突状细胞组大鼠肝组织汇管区单核细胞和淋巴细胞浸润较少，肝小叶结构未被明显破坏，肝动脉、门静脉和胆管的炎性细胞明显少于对照组，未达到重急性排斥反应水平；③对照组比较，环孢素组和未成熟树突状细胞组IKβ mRNA表达升高，SHIP、AKT、IKK mRNA表达下降，差异均有显著性意义(P < 0.05)；④与对照组比较，未成熟树突状细胞组SHIP、IKβ蛋白表达升高，IKK、AKT蛋白表达下降，差异有显著性意义(P < 0.05)；与对照组比较，环孢素组SHIP、IKK蛋白表达下降，AKT、IKβ蛋白表达升高，差异有显著性意义(P < 0.05)；⑤结果表明，未成熟树突状细胞有减缓急性排斥反应的功能，延迟肝脏成活时间，降低同种异体肝脏移植的T细胞免疫应答能力。

https://orcid.org/0000-0001-8856-1387(李立强)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 肝移植, 免疫排斥, 未成熟树突状细胞, 排斥反应, T细胞, 免疫应答, 大鼠

Abstract: BACKGROUND: Immature dendritic cells have strong antigen uptake and processing ability, but the lack of a variety of costimulatory molecules cannot activate and proliferate initial T cells to produce immune response, which can lead to T cell anergy, thus inducing low immune response or antigen immune specific tolerance. Simultaneously, immature dendritic cells can induce hyporeactivity of allogeneic antigen-specific T cells, thus prolonging the survival time of transplanted organs.
OBJECTIVE: To investigate the effect of immature dendritic cells on liver rejection after orthotopic liver transplantation in rats and its mechanism.
METHODS: According to the weight of DA and Lewis rats, the rats were randomly divided into three groups, and the liver transplantation model of DA-Lewis rats was established by “two-cuff” method. The rats of control group received no measures. The rats of cyclosporine group were treated with 10 mg/kg
cyclosporine from the second day after operation, once a day, for 7 days. The rats of the immature dendritic cell group were injected with 1×106 immature dendritic cells from bone marrow of DA rats one day before operation through dorsal penile vein; the injection was repeated twice with an interval of 10 minutes. The livers of all these rats were removed 7 days after operation. Hematoxylin-eosin staining was used to observe the pathological changes. The mRNA and protein expressions of SHIP, AKT, IKK and IKβ in these three groups were detected by qRT-PCR and western blot assay.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) Compared with the control group, the survival time of cyclosporine group and immature dendritic cell group was significantly longer (P < 0.05). (2) In cyclosporine group and immature dendritic cell group, the number of infiltrating mononuclear cells and lymphocytes in the portal area of liver tissue was less, the structure of hepatic lobule was not significantly damaged, and the inflammatory cells in hepatic artery, portal vein and bile duct were significantly less than those in control group, which did not reach the level of severe acute rejection. (3) Compared with the control group, the mRNA expression of IKβ in the cyclosporine group and immature dendritic cell group was increased, while the mRNA expression of SHIP, AKT and IKK significantly decreased (P < 0.05). (4) Compared with the control group, the expression of SHIP and IKβ protein significantly increased, IKK and AKT protein significantly decreased in the immature dendritic cell group (P < 0.05). Compared with the control group, the expression of SHIP and IKK protein significantly decreased, AKT and IKβ protein expression significantly increased in the cyclosporine group (P < 0.05). (5) Results confirm that immature dendritic cells can slow down the severe acute rejection, delay the survival time of liver and reduce the T cell immune response ability of allogeneic liver transplantation.

Key words: liver transplantation, immune rejection, immature dendritic cells, rejection, T cell, immune response, rat

中图分类号:

李立强, 焦龙杏, 张武 , 闫文涛, 李健, 李明皓. 骨髓来源未成熟树突状细胞干预大鼠原位肝移植的排斥反应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(13): 2025-2029.

Li Liqiang, Jiao Longxing, Zhang Wu, Yan Wentao, Li Jian, Li Minghao. Effect of immature dendritic cells derived from bone marrow on rejection of orthotopic liver transplantation in rats[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2021, 25(13): 2025-2029.

图/表（结果） 6

2.1 大鼠骨髓来源树突状细胞的培养和鉴定大鼠骨髓来源树突状细胞经培养4 h后，大部分细胞都已经贴壁，经隔天半量换液后，悬浮细胞数逐渐增多，细胞出现突起；第7天时收集悬浮细胞进行OX-62免疫磁珠分选阳性未成熟树突状细胞，倒置光学显微镜下观察细胞有数个短小的突起，见图1。

2.2 流式细胞术鉴定未成熟树突状细胞表型流式细胞术鉴定未成熟树突状细胞表面CD40、CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，分别为21%，14.8%，23.6%，24.5%，符合未成熟树突状细胞的表型表达，见图2。

2.3 各组大鼠生存时间对照组5只大鼠生存时间分别为7，10，10，12，12 d，建模成功率为60%；环孢素组5只大鼠生存时间为33，45，60，83，98 d，建模成功率为75%；未成熟树突状细胞组5只大鼠存活时间为30，36，58，65，82 d，建模成功率为70%。根据生存时间绘制生存曲线，见图3，与对照组相比较，环孢素组和未成熟树突状细胞组生存时间较长，差异有显著性意义(P < 0.05)。
移植后大鼠皮毛蓬松和晦暗、眼神呆滞、饮食差以及对外界的刺激反应不灵敏。移植后数天，生存下来的大鼠毛色恢复如初，眼睛对外界刺激敏感，活动好。

2.4 肝移植后肝脏的病理变化光镜下观察各组病理切片，见图4。对照组肝组织显示重急性排斥反应，大量的淋巴细胞聚集于汇管区，难以看见明显的肝小叶结构，可见明显的出血、坏死。环孢素组汇管区出现为数不多的单核细胞浸润，但未侵及肝实质，未累及血管和胆管，肝动脉、门静脉和胆管炎细胞浸润未达到急性排斥的诊断标准。未成熟树突状细胞组的汇管区三体(肝动脉、门静脉和胆管)炎性单核细胞较少，也未侵及肝实质，同样也未达到重急性排斥标准。

2.5 各组肝组织SHIP、AKT、IKK、IKβ mRNA和蛋白的表达见图5，6。与对照组比较，环孢素组和未成熟树突状细胞组IKβ的mRNA表达升高，差异有显著性意义(P < 0.05)；与对照组比较，环孢素组、未成熟树突状细胞组SHIP、AKT、IKK的mRNA表达下降，差异有显著性意义(P < 0.05)。环孢素组SHIP、IKK、IKβ mRNA表达低于未成熟树突状细胞组，但差异无显著性意义(P > 0.05)；环孢素组AKT mRNA表达高于未成熟树突状细胞组，但差异无显著性意义(P > 0.05)。

与对照组比较，未成熟树突状细胞组SHIP、IKβ蛋白表达升高，IKK、AKT蛋白表达下降，差异有显著性意义(P < 0.05)。与对照组比较，环孢素组SHIP、IKK蛋白表达下降，AKT、IKβ蛋白表达升高，差异有显著性意义(P < 0.05)。环孢素组SHIP、IKK、IKβ蛋白表达低于未成熟树突状细胞组，但差异无显著性意义(P > 0.05)；环孢素组AKT蛋白表达高于成熟树突状细胞组，但差异无显著性意义(P > 0.05)。

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引言

原发性肝癌是临床上比较常见的恶性肿瘤，其病死率居高不下[1]。目前针对原发性肝癌最常见的治疗方法是部分肝切除或者全部肝切除甚至可以进行换肝治疗[2-3]。肝切除患者的5年生存率较低，换肝治疗患者的生存满意度较高[4]，但是换肝后需要使用免疫抑制剂，长期大量使用免疫抑制剂存在机会性感染以及恶性肿瘤发生率增加的风险。诱导受者对移植物形成免疫耐受是解决移植排斥反应的关键，也是移植免疫学领域的研究热点[5]。因此，学者们一直都在寻找一种有效的方法，使移植器官能在不应用免疫抑制剂的情况下长期、有功能的存活。器官移植细胞免疫的基础是受者T细胞对供者抗原的免疫识别、活化和增殖。抗原的识别需要抗原提呈细胞的参与，其中树突状细胞是目前已知抗原提呈功能最强的细胞，它在固有免疫及特有免疫方面具有重要的作用。研究证实树突状细胞具有激活Treg细胞的作用[6-10]。事实上在Treg细胞之前，树突状细胞就因为在肝移植中被发现具有诱导耐受作用而被引入移植耐受研究中[11-12]。研究认为供肝大量存在的树突状细胞在移植后迁移入受者体内诱导了免疫耐受。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物以及CD40、CD80等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答[13-14]；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐
受[14]。已有证据表明，小鼠骨髓来源树突状细胞可以降低共刺激分子的表达，进而减弱抗原提呈能力[15]。抗原呈递细胞表面共刺激分子与T细胞表面的有关受体相结合，使T细胞活化，其中CD80/CD86是最重要、研究较多的一条共刺激通路。该实验通过探讨供体骨髓源性未成熟树突状细胞对大鼠原位肝移植术后排斥反应的影响，从而寻找一种可以诱导肝移植受者对供肝产生免疫耐受的方法。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计细胞学与动物模型实验。
1.2 时间及地点实验于2019年3月至2020年1月在宁夏医科大学基础医学院厚生楼实验室完成。
1.3 材料
1.3.1 实验动物 SPF级雄性DA大鼠和Lewis大鼠各40只，8-10周龄，体质量250-300 g，均购买于南京卡文斯生物技术有限公司。
1.3.2 实验试剂实时荧光定量 PCR (qRT-PCR)试剂(TaKaRa公司)；SHIP、AKT、IKK、IKβ等抗体(美国Abcam公司)；重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、重组大鼠白细胞介素 4(PEPROTECH公司)；RPMI1640培养液、PBS、胎牛血清(Biological Industries公司)；红细胞裂解液(天津市灏洋生物科技有限公司)；PE标记的抗大鼠CD80抗体(CD80-PE)、
PE标记的抗大鼠CD86抗体(CD86-PE)、PE标记的抗大鼠CD40抗体(CD40-PE)、抗大鼠MHCⅡ抗体(MHC Ⅱ-APC)(美国Becton Dickinson公司)；提取RNA和蛋白的试剂盒(美国Omega公司)；免疫磁珠OX-62抗体、MiniMACS分离器、MS柱(德国Miltenyi Biotec有限公司)。
1.4 实验方法
1.4.1 DA大鼠骨髓来源未成熟树突状细胞的培养取1只DA大鼠，腹腔注射1.0 mL 10%水合氯醛致死，用体积分数为75%乙醇浸泡约10 min，取出双侧股骨，在超净台中用无菌剪刀剪断两端骨骺，显露骨髓腔，用5 mL注射器吸取适量PBS反复冲洗骨髓腔，直至骨髓腔发白。收集冲洗下来的骨髓细胞冲洗液，1 000×g 离心15 min，弃上清，用RPMI1640培养液重悬细胞并调整细胞数为2×106，接种于6孔板中，加入20 μg/L重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、10 μg/L
重组大鼠白细胞介素 4，隔日半量换液，适时补充细胞因子，至第7天收集悬浮细胞，离心重悬后加入免疫磁珠 OX-62 并特异性结合大鼠未成熟树突状细胞表面特异性分子OX-62，
4 ℃孵育30 min，将MS柱放入磁珠分选器中，磁珠buffer 湿润柱子后，细胞悬液通过分选柱，收集OX-62阳性细胞即为未成熟树突状细胞，倒置显微镜观察细胞形态以及流式细胞术鉴定。
1.4.2 动物分组及造模 DA大鼠和Lewis大鼠根据体质量成对随机分为3组，每组20只，供体是DA大鼠，受体是Lewis大鼠。对照组术前未做任何处理，术后向腹腔内喷洒含0.1 g氨苄青霉素乳酸林格氏液约1 mL，以及从阴茎背静脉注入生理盐水和碳酸氢钠液共1 mL进行补液，以补充血容量；环孢素组术后第2天开始注射环孢素A，每只10 mg/kg，1次/d，连续注射1周；未成熟树突状细胞组术前1 d经阴茎背静脉注射从DA大鼠骨髓中分离出的未成熟树突状细胞悬液500 μL
(PBS重悬，含1×106细胞)[16-17]，连续注射2次，间隔10 min，
共1 mL，注射时间约30 min。
采用经过改良的Kamada“二袖套管”方法建立稳定的DA→Lewis大鼠原位肝移植急性排斥反应模型[18]。以术后大鼠存活72 h为大鼠建模成功标准，72 h内死亡的大鼠给予及时补充，每组留取5只移植大鼠观察其生存时间。
1.4.3 肝组织病理检测移植后7 d，取3组Lewis大鼠肝组织进行苏木精-伊红染色，光学显微镜下观察肝脏组织病理变化。根据Banff系统评估急性免疫排斥病理改变，其中排斥活动指数是根据汇管区、胆管和静脉内皮炎症损伤的轻、中、重度来评分，总分为9分，0-2分为无排斥，3分为交界性改变，4-5分为轻度排斥，6-7分为中度排斥，8-9分为重度排斥。
1.4.4 Western blot检测SHIP、AKT、IKK、IKβ的蛋白表达提取各组肝组织蛋白，采用BCA法测定蛋白浓度， 100 ℃煮沸5 min使蛋白变性。取变性后的蛋白40 μg加入上样孔中，80 V电压电泳2 h，直至溴酚蓝跑至底部停止电泳，然后250 mA恒压电流转膜至PVDF膜上，5%脱脂奶粉室温摇床封闭2 h，PBST清洗3次×10 min，再加入1∶1 000稀释的SHIP、AKT、IKK、IKβ一抗，4 ℃孵育过夜，PBST清洗3次×
10 min，加入1∶5 000稀释的二抗，室温孵育90 min，PBST清洗3次×10 min，加入ECL发光液进行曝光，使用凝胶成像系统分析灰度值。
1.4.5 qRT-PCR检测SHIP、AKT、IKK、IKβ的mRNA表达采用Trizol方法从肝组织中提取SHIP、AKT、IKK、IKβ全RNA，反转录后通过qRT-PCR技术检测SHIP、AKT、IKK、IKβ的mRNA表达水平，以β-actin为内参。反应条件为：94 ℃ 10 min，

94 ℃ 30 s，56 ℃ 40 s，72 ℃ 40 s，循环40次。每个样本设 3个复孔，根据各组 Ct 值计算2-ΔΔCt值。引物由上海生工代为设计以及合成。引物序列见表1。

1.5 主要观察指标 ①各组大鼠术后的精神状态、饮食情况等；②移植后7 d进行肝脏苏木精-伊红染色，光学显微镜下观察肝脏组织病理变化；③Western blot 和qRT-PCR检测SHIP、AKT、IKK、IKβ的蛋白和mRNA表达。
1.6 统计学分析采用SPSS 21.0软件进行统计分析，计量资料采用x±s表示，组间比较采用t 检验，P ≤ 0.05为差异有统计学意义。生存分析用乘积极限法(Kaplan-Meier法)制作生存曲线。

讨论

肝脏一直被认为是免疫特惠器官，相比心、肺、肾移植，肝移植后的急性排斥反应较小，但肝移植术后严重的排斥反应目前仍然需要解决[19-20]。在排斥反应发生过程中，首先是树突状细胞在同种异体移植物的免疫应答过程中提呈抗原，进而激活受体的T细胞，然后是受体的免疫系统(主要是T细胞)对同种移植物的识别和活化，由T细胞介导的同种异体移植物的免疫应答通过多种机制直接或者间接激活受体的免疫系统，从而导致炎症的发生、发展，进而使外来的移植物被排斥[21]。目前大多数研究通过影响直接和间接识别过程来达到低反应免疫性甚至是免疫耐受。未成熟树突状细胞低表达MHC分子、缺乏共刺激分子CD40以及其他分子表达，进而干扰了间接识别途径，使其不能激活T细胞[19，22-24]。
T 细胞的识别能力受主要组织相容性复合体(MHC)的类型限制，只能识别与其对应的供者 MHC(直接识别)或受者MHC(间接识别)[19，22-24]。供者MHC限制性CD4+和CD8+ T细胞足以对同种异体移植物产生排斥反应，它们是经T细胞受体(TCR)介导直接(“同源”)相互作用从而产生一系列效应分子来完成的[25]。相反，“非同源”受者MHC限制性CD4+ T细胞必须与中介的受者APC相互作用[26-27]。目前大部分研究都是使用供体来源的未成熟树突状细胞通过直接识别途径诱导肝移植免疫耐受甚至是免疫低下。由于供者来源未成熟树突状细胞低表达MHC分子、缺乏共刺激分子的表达，干扰了直接识别途径，故不能激活T细胞[28]。受体来源未成熟树突状细胞是通过间接识别途径诱导肝移植免疫低反应性，但是间接识别后的 CD4+ T 细胞可调控B细胞并激活巨噬细胞，进而增强移植排斥反应[29]。OH等[30]也已经证实了经过白细胞介素10处理过的树突状细胞能通过诱导外周免疫耐受来延长移植物的生存时间。TAKAYAMA等[31]采用反转录病毒转导小鼠树突状细胞产生白细胞介素10，诱导树突状细胞表面协同刺激分子和黏附分子下调，输注入供体的未成熟树突状细胞，明显削弱异体刺激活性，并诱导T细胞的低反应性[32]。
前期体外实验显示，未成熟树突状细胞只能轻度刺激同种异型T细胞增殖，未成熟树突状细胞可以在体外降低T细胞的免疫耐受作用。该实验术前给予供体骨髓来源未成熟树突状细胞，其发挥的肝脏保护作用非常接近环孢素组；苏木精-伊红染色显示未成熟树突状细胞组能够减缓肝脏的重急性排斥反应；qRT-PCR和Western blot也证实了未成熟树突状细胞组可以抑制重急性排斥反应。
综上所述，大鼠骨髓来源未成熟树突状细胞对于大鼠原位肝移植术后生存时间以及肝脏病理排斥反应均有明显的改善作用，但是所有移植大鼠并不能长期存活，说明在体内微环境的作用下，有可能使未成熟树突状细胞逐渐成熟，使已经形成的免疫低反应性进一步减弱。未成熟树突状细胞通过吞噬作用的内吞途径连续吞噬组织和抗原，从而导致树突状细胞活化。激活的树突状细胞通过下调内吞作用和上调表面蛋白来控制其向淋巴组织迁移，从而经历成熟过程，进而树突状细胞介导的抗原呈递可启动适应性免疫反应[33]。因此，这种方法如何长期维持免疫低反应性以及诱导抗原特异性免疫耐受需进一步探索。未成熟树突状细胞在诱导肝移植免疫耐受方面起着重要作用，但是由于其诱导特异性免疫耐受仅仅在大鼠模型中获得成功，在灵长类等大型动物实验模型中诱导免疫耐受仍有巨大挑战。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

骨髓来源未成熟树突状细胞干预大鼠原位肝移植的排斥反应

Effect of immature dendritic cells derived from bone marrow on rejection of orthotopic liver transplantation in rats

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