补骨脂素诱导兔骨内膜间充质干细胞增殖构建细胞支架复合体修复骨不连

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2007

中国组织工程研究 ›› 2020, Vol. 24 ›› Issue (1): 40-44.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2007

• 骨髓干细胞 bone marrow stem cells • 上一篇下一篇

补骨脂素诱导兔骨内膜间充质干细胞增殖构建细胞支架复合体修复骨不连

赖丽金1，莫浩轩2

¹深圳市龙华区人民医院，广东省深圳市 518109；²香港工人联合医疗所，中国香港 810015

收稿日期:2019-03-04 修回日期:2019-03-09 接受日期:2019-04-19 出版日期:2020-01-08 发布日期:2019-12-11
通讯作者: 莫浩轩，医师，香港工人联合医疗所，中国香港 810015
作者简介:赖丽金，女，1989年生，广东省茂名市人，汉族，硕士，医师，主要从事中医全科研究。

Psoralen induces proliferation of rabbit endosteal mesenchymal stem cells and constructs cell-scaffold bone complex in nonunion repair

Lai Lijin¹, Mo Haoxuan²

¹The People’s Hospital of Longhua, Shenzhen 518109, Guangdong Province, China; ²Hong Kong Federation of Trade Unions Workers’ Medical Clinics, Hong Kong Special Administrative Region 810015, China

Received:2019-03-04 Revised:2019-03-09 Accepted:2019-04-19 Online:2020-01-08 Published:2019-12-11
Contact: Mo Haoxuan, Physician, Hong Kong Federation of Trade Unions Workers’ Medical Clinics, Hong Kong Special Administrative Region 810015, China
About author:Lai Lijin, Master, Physician, The People’s Hospital of Longhua, Shenzhen 518109, Guangdong Province, China

摘要/Abstract

摘要：

MTT比色法：是一种检测细胞相对数量的方法，目前被各实验广泛使用。基本原理是活细胞内存在琥珀酸脱氢酶，与MTT可产生生物作用，形成蓝紫色结晶甲瓒。二甲基亚砜溶解结晶甲瓒，通过相互作用后采用酶联免疫检测仪检测吸光度值，间接反映细胞数量。此方法被广泛应用于细胞实验、药物筛查和肿瘤实验中。

补骨脂素：是一种化合物补骨脂的有效成分，来源于豆科植物补骨脂的果实或者伞形科植物珊瑚菜的根茎，为无色针状结晶，熔点189-190 ℃，溶于乙醇、微溶于水和乙醚。补骨脂素具有温肾壮阳、温补脾肾功效，可用于尿频、遗尿、腰膝冷痛、肾虚作喘等，还具有刺激细胞增殖分化的功能。

背景：补骨脂素是属于植物类雌激素，有大量研究证实其具有促进细胞增殖分化的作用。

目的：应用补骨脂素、兔骨内膜间充质干细胞和聚己内酯支架构建人工复合骨，探讨其治疗兔骨不连的效果。

方法：①将第3代兔骨内膜间充质干细胞接种于细胞培养板中，分别加入10^-8，10^-7，10^-6 mol/L补骨脂素、50 mg/L骨形态发生蛋白2进行干预，对照组加入同体积的无菌纯净水。干预第3，5，7天采用MTT法检测细胞增殖情况；②将聚己内酯三维支架加入到细胞培养板底部，兔骨内膜间充质干细胞按1×10³/孔的量接种于支架上，然后加入10^-6 mol/L补骨脂素，联合培养21 d后取出即为人工复合骨；③27只新西兰大白兔随机均分为3组，建立桡骨骨不连模型，实验组植入人工复合骨，支架组单纯植入支架，对照组不植入任何材料。术后2，4，8周行病理学苏木精-伊红染色，观察成骨情况。术后第4周拍摄X射线片，观察骨不连愈合情况。

结果与结论：①3种浓度补骨脂素均有诱导兔骨内膜间充质干细胞增殖的作用，与对照组比较，10^-6 mol/L补骨脂素对兔骨内膜间充质干细胞刺激作用最强(P < 0.05)，而且10^-6 mol/L补骨脂素组与阳性对照骨形态发生蛋白2组相比差异无显著性意义(P > 0.05)；②新西兰大白兔桡骨中段骨不连组织苏木精-伊红染色结果显示，实验组成骨细胞数目明显多于支架组和对照组(P < 0.05)；③X射线片结果显示，实验组骨不连已经愈合，支架组骨折部分愈合，对照组骨不连未愈合；④结果表明，补骨脂素对兔骨内膜间充质干细胞增殖作用与浓度有一定的相关性。补骨脂素可结合兔骨内膜间充质干细胞及聚己内酯支架形成人工复合骨，通过动物实验证实其治疗骨不连效果较好。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

关键词: 补骨脂素, 兔骨内膜间充质干细胞, 细胞增殖, 细胞支架, 骨不连

Abstract:

BACKGROUND: Psoralen is a plant estrogen, and a large number of studies have confirmed its role in promoting cell proliferation and differentiation.

OBJECTIVE: To construct a cell-scaffold composite bone using psoralen, rabbit endosteal mesenchymal stem cells and polycaprolactone and to explore its effect on the treatment of rabbit nonunion.

METHODS: (1) Rabbit endosteal mesenchymal stem cells were cultured and cultured until the third generation for each experiment. Passage 3 cells were seeded onto culture plates containing 50 mg/L bone morphogenetic protein 2 (positive control), 10^-8, 10^-7 and 10^-6 mol/L psoralen (low-, middle-, and high-concentration psoralen groups) or the same volume of purified water (control group). The cell proliferation of each group was detected on the 3^rd, 5^th and 7^th days after intervention using MTT method. (2) The three-dimensional polycaprolactone scaffold was added to the bottom of the cell culture plate, and rabbit endosteal mesenchymal stem cells were seeded into the scaffold at a density of 1×10³ per well. Then, 10^-6 mol/L of psoralen was added. Cell-scaffold composite bone was taken after 21 days of culture. (3) Animal models of radial nonunion were established in 27 New Zealand white rabbits, and were then randomized into experimental, scaffold and control groups followed by implantation of cell-scaffold composite bone, simple scaffold, and nothing, respectively. Pathological hematoxylin-eosin staining for observation of bone healing was performed at the 2^nd, 4^th, and 8^th weeks after surgery. Healing of nonunion was observed on the X-ray films that were taken at the 4^th week after surgery.

RESULTS AND CONCLUSION: (1) Three concentrations of psoralen could induce the proliferation of rabbit endosteal mesenchymal stem cells. Compared with the control group, 10^-6 mol/L psoralen exerted the strongest stimulation effect on rabbit endosteal mesenchymal stem cells (P < 0.05), whereas there was no significant difference between high-concentration psoralen group positive control group (P > 0.05). (2) Pathological hematoxylin-eosin staining of radial nonunion showed that the number of osteoblasts in the experimental group was higher than that in the scaffold and control groups (P < 0.05). (3) The X-ray films revealed bone healing in the experimental group, partial healing in the scaffold group and non-healing in the control group. Overall findings indicate that psoralen can promote the proliferation of rabbit endostealmesenchymal stem cells, and the effect is certainly related to the concentration of psoralen. Psoralen can be combined with rabbit endosteal mesenchymal stem cells and polycaprolactone scaffold to form composite bone, achieving good outcomes in the treatment of nonunion in animals.

Key words: psoralen, rabbit endosteal mesenchymal stem cells, cell proliferation, cell scaffold, bone nonunion

中图分类号:

赖丽金, 莫浩轩. 补骨脂素诱导兔骨内膜间充质干细胞增殖构建细胞支架复合体修复骨不连[J]. 中国组织工程研究, 2020, 24(1): 40-44.

Lai Lijin, Mo Haoxuan. Psoralen induces proliferation of rabbit endosteal mesenchymal stem cells and constructs cell-scaffold bone complex in nonunion repair[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2020, 24(1): 40-44.

图/表（结果） 6

2.1 兔骨内膜间充质干细胞增殖情况各组兔骨内膜间充质干细胞增殖见表1，图1。各组吸光度值总体均随时间延长而增加，以第7天吸光度值最大。与对照组相比，不同浓度补骨脂素组及骨形态发生蛋白2组各时间点吸光度值均升高(P < 0.05)；与骨形态发生蛋白2组相比，补骨脂素高浓度组吸光度值差异无显著性意义(P > 0.05)，补骨脂素中浓度组及补骨脂素低浓度组吸光度值均小于骨形态发生蛋白2组(P < 0.05)。

2.2 实验动物数量分析 27只新西兰大白兔参加实验，中途无脱落，均进入结果分析。 2.3 苏木精-伊红染色切片成骨细胞计数情况各组切片苏木精-伊红染色后成骨细胞计数见表2，图2。支架组及实验组在第2，4，8周成骨细胞逐渐增多，对照组仅第4周有所增多，第8周比第4周减少。与对照组相比，支架组和实验组在各个时间点成骨细胞数量均增多(P < 0.05)；与支架组相比，实验组在各个时间点成骨细胞数量均增多(P < 0.05)。

2.4 各组桡骨中段骨不连组织病理形态术后4周，实验组见大量新生的骨质，呈编织样，少量微血管，骨细胞散在各处骨质端，见图3A；支架组新生骨及骨细胞比实验组少，有比较多的细血管，骨折端不完全被骨质代替，见图3B；对照组显微镜下可见大量的细小血管和肉芽组织，骨细胞少，有多处钙化点，见图3C。

2.5 各组术后4周影像学观察骨愈合情况实验组骨不连已经愈合，未见骨折线，骨皮质致密，骨髓腔已经贯通，骨小梁呈网格状排列，见图4A；支架组骨皮质未完全相连，髓腔部分贯通，骨折部分愈合，骨小梁存在，见图4B；对照组骨不连未愈合，骨间隙清晰存在，见图4C。

参考文献

[1] 霍力为,王广伟,黄红,等.补骨脂素对酒精诱导的成骨细胞增殖的影响[J].广州中医药大学学报, 2017,34(4):555-559.
[2] LI R, CHEN KL, WANG Y, et al. Establishment of a 3D printing system for bone tissue engineering scaffold fabrication and the evaluation of its controllability over macro and micro structure precision. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2019;51(1):115-119.
[3] 陈苏平,李平. ESW对兔成骨细胞增殖影响的实验研究[J].当代医学, 2012,18(4):150-152.
[4] HUANG K, WU G, ZOU J, et al. Combination therapy with BMP-2 and psoralen enhances fracture healing in ovariectomized mice. Exp Ther Med. 2018;16(3):1655-1662.
[5] ZHANG T, HAN W, ZHAO K, et al. Psoralen accelerates bone fracture healing by activating both osteoclasts and osteoblasts. FASEB J. 2019;33(4):5399-5410.
[6] LIN J, ZHU J, WANG Y, et al. Chinese single herbs and active ingredients for postmenopausal osteoporosis: From preclinical evidence to action mechanism. Biosci Trends. 2017;11(5):496-506.
[7] AN J, YANG H, ZHANG Q, et al. Natural products for treatment of osteoporosis: The effects and mechanisms on promoting osteoblast-mediated bone formation. Life Sci. 2016;147:46-58.
[8] YUAN X, BI Y, YAN Z, et al. Psoralen and Isopsoralen Ameliorate Sex Hormone Deficiency-Induced Osteoporosis in Female and Male Mice. Biomed Res Int. 2016;2016:6869452.
[9] 黄奎,伍国锋,邹季.补骨脂素对骨质疏松小鼠骨折修复的影响[J].生物骨科材料与临床研究, 2018,15(5):1-4.
[10] 杨伊姝,刘占东,张树成,等.补骨脂素抗抑郁作用及机制研究[J].神经疾病与精神卫生,2018,18(5):308-311.
[11] 邢贞武.补骨脂素对绝经后骨质疏松患者骨髓间充质干细胞Notch信号通路的影响[J].中医学报,2017,32(11):2181-2184.
[12] 李少鹏,蔡建通,翁铭芳,等.补骨脂素对前列腺癌LNCaP-AI细胞增殖和周期调控及雌激素受体β表达的影响[J].中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2018,8(1):1-5.
[13] 霍力为,王广伟,黄红,等.补骨脂素对酒精诱导的成骨细胞增殖的影响[J].广州中医药大学学报,2017,34(4):555-559.
[14] CHEN S, WANG Y, YANG Y, et al. Psoralen Inhibited Apoptosis of Osteoporotic Osteoblasts by Modulating IRE1-ASK1-JNK Pathway. Biomed Res Int. 2017;2017:3524307.
[15] LI F, LI Q, HUANG X, et al. Psoralen stimulates osteoblast proliferation through the activation of nuclear factor-κB-mitogen- activated protein kinase signaling. Exp Ther Med. 2017;14(3): 2385-2391.
[16] MALININ GI, VORNBERGER WJ, HORNICEK FJ, et al. Effects of psoralen on the structural integrity of cultured osteoblasts. Phase contrast, immunofluorescent, and electronmicroscopic evaluation. Arch Toxicol. 1996;70(3-4):182-188.
[17] TANG DZ, YANG F, YANG Z, et al. Psoralen stimulates osteoblast differentiation through activation of BMP signaling. Biochem Biophys Res Commun. 2011;405(2):256-261.
[18] 廖世波,赖琛,张志雄,等.骨修复复合材料及其相关问题的研究进展[J].中国生物医学工程学报, 2012,31(5):755-761.
[19] 于斌,申长虹.骨组织工程材料的研究进展[J].医学综述, 2006,12(11): 643-645.
[20] SODUPE ORTEGA E, SANZ-GARCIA A, PERNIA-ESPINOZA A, et al. Efficient Fabrication of Polycaprolactone Scaffolds for Printing Hybrid Tissue-Engineered Constructs. Materials (Basel). 2019;12(4): E613.
[21] LINDHOLM RV, LINDHOLM TS. Mast cells in endosteal and periosteal bone repair. A quantitative study on callus tissue of healing fractures in rabbits. Acta Orthop Scand.1970;41(2): 129-133.
[22] PAZZAGLIA UE, CONGIU T, SIBILIA V, et al. Osteoblast-osteocyte transformation. A SEM densitometric analysis of endosteal apposition in rabbit femur. J Anat. 2014;224(2):132-141.
[23] YEE JA. Properties of osteoblast-like cells isolated from the cortical endosteal bone surface of adult rabbits. Calcif Tissue Int. 1983;35(4-5): 571-577.
[24] 陈书尚,翁铭芳,王水良,等.补骨脂素对前列腺癌LNCap-AD细胞增殖的影响及其分子机制研究[J].中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2017, 7(4):219-223.
[25] 章文娟,谢保平,李伟娟,等.补骨脂素抑制破骨细胞形成及其机制的实验研究[J].第三军医大学学报, 2017,39(7):641-645.
[26] 殷杰,邱素均,高浚淮,等. FGF-2/PELA/BMP-2微囊支架促进大鼠骨膜来源干细胞的成骨分化[J].南方医科大学学报,2017, 37(7):641-645.
[27] 应志敏. PDGF-bb联合BMP-2生长因子对骨膜来源干细胞在二维培养和可注射水凝胶GelatiN-Hpa中增殖及成骨分化能力的影响研究[D].杭州:浙江大学,2015.
[28] 李启活.补骨脂素激活MAPK-NF-κB信号通路促进成骨细胞增殖的研究[D].广州:广州中医药大学, 2016.
[29] 张可丽.中药植物雌激素对人晶状体上皮细胞雌激素受体表达的影响及其信号转导机制的研究[D].福州:福建中医药大学;福建中医学院, 2009.

引言

材料方法

1.1 设计细胞学体外实验和随机对照动物实验。

1.2 时间及地点实验于2018年6至12月在广州中医药大学分子生物实验室完成。

1.3 材料补骨脂素(上海士锋生物科技有限公司)；胰蛋白酶(上海嵘崴达实业有限公司)；兔骨内膜间充质干细胞(武汉巴菲尔生物技术服务有限公司)；四甲基偶氮唑蓝(MTT)(Sigma，美国)；二甲基亚砜(北京百奥莱博科技有限公司)；DMEM-F12培养基(Gibco，美国)；聚己内酯三维支架(上海研谨生物科技有限公司)；抗坏血酸、地塞米松(上海嵘崴达实业有限公司)；倒置相差显微镜(Olympus，日本)；二氧化碳恒温培养箱(Thermo，美国)；自动酶标分析仪(北京科瑞美科技有限公司)；细胞培养板(上海嵘崴达实业有限公司)；超净工作台(北京佳源兴业科技有限公司)。

实验动物：新西兰大白兔27只，体质量约1.5 kg，雌雄不限，由广州中医药大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK(粤)2018-0149。

1.4 实验方法

1.4.1 兔骨内膜间充质干细胞培养兔骨内膜间充质干细胞购买自武汉巴菲尔生物技术服务有限公司，购买后接种于含DMEM-F12培养基的细胞培养皿中常规培养，每3 d换液1次，显微镜下观察细胞增殖情况，当细胞增殖到铺满培养皿底部时，即用0.25%胰蛋白酶消化，传代继续培养，第3代细胞用于后续实验。

1.4.2 补骨脂素诱导兔骨内膜间充质干细胞增殖将第3代兔骨内膜间充质干细胞接种于细胞培养板中，调整细胞浓度为1×10³/孔。实验分5组，每组5个复孔，分别为补骨脂素低、中、高浓度组(10^-8，10^-7，10^-6 mol/L)、骨形态发生蛋白2组、对照组。骨形态发生蛋白2组仅加入骨形态发生蛋白2 (50 mg/L)，对照组加入同体积的无菌纯净水。干预第3，5，7天检测吸光度值，简略步骤：加入MTT(5 g/L) 20 µL，置于37 ℃，体积分数为5%CO₂恒温培养箱中培养4 h，加入0.15 mL二甲基亚砜，结晶溶解后检测各组吸光度值，每次重复检测3次，取均值。

1.4.3 兔骨内膜间充质干细胞与聚己内酯三维支架构建人工复合骨将兔骨内膜间充质干细胞以1×10⁷ L^-1细胞浓度接种于细胞培养板内，然后将聚己内酯三维支架放于细胞培养孔中，加入含有10^-6 mol/L补骨脂素的DMEM-F12培养液，每3 d更换细胞培养液1次，第14天取出细胞支架复合物用于后续实验。

1.4.4 动物骨不连模型的建立及人工复合骨的植入取27只1.5 kg左右的新西兰大白兔，随机分为3组，每组9只。首先刮除下肢毛发，戊巴比妥钠麻醉至大白兔活动无力，用手术刀分离右前肢桡骨中段的皮肤组织，暴露出骨质后，剪除一整段约1.5 cm的骨质，实验组植入人工复合骨，支架组单纯植入聚己内酯三维支架，对照组无植入物，术后在同一饲养环境下饲养。

1.4.5 苏木精-伊红染色术后第2，4，8周，各组分别处死3只新西兰大白兔，剔除毛发，切开皮肤，分离暴露骨不连处骨质，截取0.8 cm组织块，先用40 g/L多聚甲醛浸润，然后用脱钙液和乙醇分别处理，脱去钙质和水分，石蜡包埋后进行苏木精-伊红染色，显微镜下观察成骨细胞数量^[3]。

1.4.6 X射线摄片检测骨不连术后第4周，处死之前用X射线机拍片检测骨不连愈合情况(型号：warian RAD-14)，拍片设定为：管电流80 mA，管电压50 kV，焦距90 cm，曝光时间0.3 s。

1.5 主要观察指标 ①兔骨内膜间充质干细胞增殖情况；②骨不连处病理切片形态和成骨细胞计数；③骨不连处大体X射线片观察骨愈合情况。

1.6 统计学分析统计学软件用SPSS 17.0，数据以x(_)±s表示，组内比较采用方差分析，组间差异用最小显著差异法(LSD法)，P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

豆科植物提取物补骨脂素用于骨组织工程的研究较少，以往研究骨组织工程治疗骨不连常常选用注射成骨因子、植入自体骨髓等方法，该研究体外培养兔骨内膜间充质干细胞，用聚己内酯支架为载体，补骨脂素为诱导刺激剂，成功构建了内含活细胞的复合人工骨。实验建立标准的动物骨不连模型，植入复合人工骨后通过切片和影像学观察其实际效果，为补骨脂素运用于骨组织工程提供一种新的思路。
补骨脂素提取自补骨脂、珊瑚菜、芸香等植物，属于香豆素类，是一种植物雌激素，有多种生物活性作用，如抗骨质疏松、抗白血病、抗子宫出血、抗哮喘、治疗骨折、促进细胞增殖等^[4-5]。多位学者证实，补骨脂素有抗骨质疏松的作用^[6-8]，黄奎等^[9]建立大鼠骨质疏松模型，采用补骨脂素灌胃，并通过钼靶X射线及生物力学等方法证实补骨脂素能有效改善骨折愈合质量和生物学功能。杨伊姝等^[10]建立了大鼠强迫游泳及悬尾等抑郁模型，用不同剂量的补骨脂素干预，发现补骨脂素有抗抑郁的效应。还有研究建立骨髓间充质干细胞培养体系，发现补骨脂素能影响Notch信号通路，从而有抗骨质疏松的作用^[11]。李少鹏等^[12]采用CCK-8、Western blot、流式细胞术等方法证实补骨脂素对前列腺癌细胞的抑制作用具有剂量依赖性，说明补骨脂素有抗肿瘤作用。霍力为等^[13]从乳鼠头盖骨获得骨细胞并进行体外培养，MTT法检测发现补骨脂素对乙醇诱导的成骨细胞有明显的促增殖功效。另外还有研究认为补骨脂素有抑制成骨细胞凋亡、促进成骨细胞增殖的功能^[14-17]。
细胞支架要满足多个条件^[18-19]：①机体能耐受，无毒性，有良好生物相容性；②可被机体自然降解，并且降解后能被机体吸收；③有合适细胞增殖的三维空间；④有良好的可塑性，能塑形为不同的形态结构；⑤支架表面和细胞膜能有效接触，细胞可有效附着在上面。目前组织工程支架包括生物类、异种材料类、人工复合物类。生物类取材机体自身，如自体髂骨，无免疫排斥性，但对机体有明显的损伤，且无法大量获得；异种材料类包括胶原海藻、羟基磷灰石等，但有生物相容性差、无法降解、免疫排斥等缺点；聚己内酯细胞支架有可吸收降解、能塑形、细胞容易在内增殖等优点，是组织工程中有潜力的一种支架材料^[2，20]。课题组通过补骨脂素持续刺激聚己内酯支架中的兔骨内膜间充质干细胞，成功构建了人工复合骨，并通过动物模型验证其性能，苏木精-伊红染色发现，实验组见大量新生的骨质，呈编织样，少量微血管，骨细胞散在各处骨质端，而纯支架组无论是骨质矿化，还是骨细胞数量均较少。说明该人工复合骨治疗骨不连，能够缩短骨愈合时间，提高成骨质量，同时也说明补骨脂素诱导兔骨内膜间充质干细胞增殖是有效获得骨组织工程种子细胞的方案。通过X射线摄片，进一步证实了组织学的结论，术后4周复合骨能完全治愈骨不连，而支架组只能使部分骨缺损愈合。
兔骨内膜间充质干细胞一般分离自四肢管状骨的骨内膜，骨内膜是一层组织膜，含有成骨细胞前体细胞、血管、神经、结缔组织等，是修复骨重要的解剖结构^[21-23]。骨内膜内的间质干细胞有高度增殖、分化和更新的能力，可向骨及软骨定向分化，因此可作为良好的种子细胞。补骨脂素是一种植物类雌激素，因其对成骨细胞、癌细胞、平滑肌细胞、骨髓间充质干细胞均有影响而被越来越多的学者关注^[24-25]。
实验用补骨脂素诱导兔骨内膜间充质干细胞，发现10^-6 mol/L补骨脂素组骨内膜间充质干细胞增殖的吸光度值最高，说明10^-6mol/L补骨脂素有最大的诱导细胞增殖的作用。骨形态发生蛋白2是骨形态发生蛋白家族中有明确诱导成骨作用的因子^[26-27]，实验选用骨形态发生蛋白2作为阳性对照物进一步说明了补骨脂素对细胞的促进分化作用。实验发现补骨脂素组与骨形态发生蛋白2组细胞吸光度值差异无显著性意义，说明10^-6 mol/L补骨脂素具有和骨形态发生蛋白2同等效力的促进骨内膜间充质干细胞增殖的生物学效应。
应用补骨脂素、兔骨内膜间充质干细胞和聚己内酯三维支架构建人工复合骨，并通过动物实验证实其可治愈骨不连。补骨脂素对骨膜细胞的作用机制可能与植物类雌激素类似，其作用机制可能和细胞表面雌激素受体及MAPK通路相关^[28-29]，但其详细机制尚需要进一步的研究。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

补骨脂素诱导兔骨内膜间充质干细胞增殖构建细胞支架复合体修复骨不连

Psoralen induces proliferation of rabbit endosteal mesenchymal stem cells and constructs cell-scaffold bone complex in nonunion repair

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 6

参考文献

相关文章 15

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	李偲, 赵婷, 谭戈, 郑雨林, 张若男, 吴艳, 唐俊明. 血小板源生长因子BB可促进骨骼肌成肌细胞增殖、分化与迁移[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1050-1055.
[2]	刘聪, 刘肃. miR-17-5p调控低氧诱导因子1α介导脂肪细胞分化及血管生成的分子机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1069-1074.
[3]	袁新平, 邵艳波, 吴超, 汪剑龄, 童梁成, 李颖. 骨折端CT扫描参数个性化微分建模仿真目标骨段的准确性[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(6): 912-916.
[4]	马泽涛, 曾晖, 王德利, 翁鉴, 冯松. 微小RNA-138-5p与软骨细胞增殖和自噬的关系[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 674-678.
[5]	王玉姣, 刘丹, 孙嵩, 孙勇. 改良型富血小板纤维蛋白复合双相磷酸钙可促进兔骨髓间充质干细胞的活性[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 504-509.
[6]	周继辉, 姚猛, 王岩松, 李新志, 周游, 黄卫, 陈文瑶. 新型纳米支架对神经干细胞生物行为及相关基因表达的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 532-536.
[7]	陈扬, 黄邓高, 高元慧, 王顺兰, 曹卉, 郑琳麟, 何浩伟, 罗思琴, 肖敬川, 张应爱, 张淑芳. 低强度脉冲场超声促进人脂肪间充质干细胞的增殖和黏附[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(25): 3949-3955.
[8]	朱云, 陈渝, 邱皓, 刘盾, 靳国荣, 陈诗谋, 翁政. 对侧皮质锁定螺钉治疗骨质疏松股骨骨折的有限元分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(24): 3832-3837.
[9]	刘金伟, 陈允震, 万春友. 应力作用下骨不连断端组织中成骨因子的变化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3619-3624.
[10]	周武, 王彬娉, 王雅雯, 程亚楠, 黄谢山. 转化生长因子β和骨形成蛋白2联合诱导小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞的增殖与分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3630-3635.
[11]	王皓, 陈明学, 李俊康, 罗旭江, 彭礼庆, 李获, 黄波, 田广招, 刘舒云, 眭翔, 黄靖香, 郭全义, 鲁晓波. 脱细胞猪皮基质构建组织工程半月板支架[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(22): 3473-3478.
[12]	余成帅, 杜刚, 庞慎宁, 劳山. 促炎脂肪因子Chemerin促进一氧化氮表达调节软骨细胞的增殖与代谢[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(2): 258-263.
[13]	戴雅玲, 陈乐文, 何肖君, 林华伟, 贾微微, 陈立典, 陶静, 柳维林. miR-146b过表达慢病毒载体构建及对海马神经干细胞增殖的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(19): 3024-3030.
[14]	艾力麦尔旦•艾尼瓦尔, 王玲, 古丽, 迪丽达尔•塔西甫拉提, 王珊, 尹宏斌. 转化生长因子β3对成骨细胞增殖和成骨能力的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(17): 2664-2669.
[15]	王任先, 曹晶晶, 王宏刚, 万奔, 刘巍峰. 几种分散剂对纳米羟基磷灰石团聚、细胞内分布和细胞增殖的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(16): 2500-2505.