保留与不保留残端重建前交叉韧带后移植物腱骨愈合的比较

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2373

中国组织工程研究 ›› 2021, Vol. 25 ›› Issue (4): 582-587.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2373

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保留与不保留残端重建前交叉韧带后移植物腱骨愈合的比较

马子越1，巨啸晨1，张磊2，孙荣鑫1

1新疆医科大学第六附属医院关节外一科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830002；2武警兵团总队医院外一科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830061

收稿日期:2020-03-31 修回日期:2020-04-03 接受日期:2020-05-20 出版日期:2021-02-08 发布日期:2020-11-21
通讯作者: 孙荣鑫，博士，副主任医师/副教授，新疆医科大学第六附属医院关节外一科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830002
作者简介:马子越，男，1992年生，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市人，2020年新疆医科大学毕业，硕士，主要从事外科学运动医学方向研究。
基金资助:
新疆维吾尔自治区高校科研计划科学研究重点项目(XJEDU2016I027)

Tendon-bone healing in anterior cruciate ligament reconstruction with and without remnant preservation

Ma Ziyue1, Ju Xiaochen1, Zhang Lei2, Sun Rongxin1

1First Department of Joint Surgery, Sixth Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830002, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China; 2First Department of Surgery, Armed Police Corps Hospital, Urumqi 830061, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Received:2020-03-31 Revised:2020-04-03 Accepted:2020-05-20 Online:2021-02-08 Published:2020-11-21
Contact: Sun Rongxin, MD, Associate chief physician, Associate professor, First Department of Joint Surgery, Sixth Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830002, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Ma Ziyue, Master, First Department of Joint Surgery, Sixth Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830002, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by:
the Scientific Research Program of the Higher Education Institution of Xinjiang Uygur Autonomous Region, No. XJEDU2016I027

摘要/Abstract

摘要：

文题释义：
血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)：又称血管通透因子(vascular permeability factor，VPF)。是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，具有促进血管通透性增加、细胞外基质变性、血管内皮细胞迁移、增殖和血管形成等作用。
缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)：也称低氧诱导因子1α，普遍存在于人和哺乳动物细胞内，在缺氧条件下可稳定表达，当持续在缺氧条件下时，可正向调节多种基因以能在低含氧量的情况下生存，参与机体多种组织的修复与保护。

背景：保残重建前交叉韧带是否可以促进移植物腱骨愈合目前尚有争议，设计实验通过组织学和影像学评估保留残端是否具有促进腱骨愈合的生物学优势。
目的：探讨前交叉韧带重建术中保留或不保留韧带残端对移植物腱骨愈合的影响。
方法：选取新西兰兔40只随机分为不保残重建组与保残重建组，每组20只。选取跟腱作为移植物，分别将所有标本兔的双侧前交叉韧带切断，不保残重建组完全切除前交叉韧带残端，保残重建组由股骨止点处切断，保留胫骨残端，按照正常兔前交叉韧带解剖结构，选取胫骨与股骨骨道进行重建。并于术后6，12周应用免疫组织化学染色检测移植物血管内皮生长因子、缺氧诱导因子1α的表达强度，CD34免疫组化染色标记移植物微血管密度，MRI、CT观察移植腱信号强度并测量骨隧道宽度。
结果与结论：①术后6周，保残重建组中血管内皮生长因子与缺氧诱导因子1α阳性细胞百分比明显高于不保残重建组(P < 0.05)，微血管密度也明显高于不保残重建组(P < 0.05)；术后12周，两组中血管内皮生长因子与缺氧诱导因子1α阳性细胞百分比与同手术方式6周组对比均下降(P < 0.05)，微血管密度较同手术方式6周组均显著升高(P < 0.05)，但组间比较差异无统计学意义(P > 0.05)；②术后6周，保残重建组骨隧道扩大程度明显低于不保残重建组，移植腱信号强度低于不保残重建组(P < 0.05)；12周两组骨隧道扩大程度均减小，移植腱信号强度均减低，组内比较差异显著(P < 0.05)，组间比较差异无统计学意义(P > 0.05)；③在该实验条件下，在韧带重建早期，保残重建在移植物再血管化、减少骨隧道扩大等方面明显优于不保残组，展现了一定的生物学优势。
https://orcid.org/0000-0001-7416-9886 (马子越)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

关键词: 前交叉韧带, 保留残端, 腱骨愈合, 因子, 跟腱, 微血管密度, 骨隧道, 实验

Abstract: BACKGROUND: Whether remnant preservation can improve tendon-bone healing remains a controversy. Experiments were designed to evaluate whether remnant preservation has the biological advantage of promoting tendon-bone healing by histology and imaging.
OBJECTIVE: To investigate the effect of preservation of ligament stump on tendon-bone healing in anterior cruciate ligament reconstruction.
METHODS: Forty New Zealand rabbits were randomly divided into two groups: anterior cruciate ligament reconstruction group without remnant preservation (group A) and anterior cruciate ligament reconstruction group with remnant preservation (group B), with 20 rabbits in each group. Achilles tendon was selected as the graft, and the bilateral anterior cruciate ligaments of all the rabbits were cut off. In group A, the anterior cruciate ligament stump was completely removed. In group B, the tibia stump was cut off from the femoral stop, and the tibia stump was retained. According to the position of the anterior cruciate ligament of the normal rabbits, the tibia and the femoral canal were selected for reconstruction. At 6 and 12 weeks after surgery, the expression of vascular endothelial growth factor and hypoxia inducible factor-1α was detected by immunohistochemistry. Graft microvessel density was detected by CD34 immunohistochemical staining. The signal intensity of tendon and the width of bone tunnel were observed by MRI and CT.
RESULTS AND CONCLUSION: (1) The percentage of hypoxia inducible factor-1α and vascular endothelial growth factor positive cells in group B was significantly higher than that in group A at 6 weeks after operation (P < 0.05). The microvessel density in group B was significantly higher than that in group A (P < 0.05). At 12 weeks after operation, the percentage of hypoxia inducible factor-1α and vascular endothelial growth factor positive cells in the two groups decreased 12 weeks after operation compared with that in the same 6-week group (P < 0.05). The microvessel density in the two groups increased 12 weeks after operation compared with that in the same 6-week group (P < 0.05), and there was no significant difference between the two groups (P > 0.05). (2) At 6 weeks after operation, the expansion of bone tunnel in group B was significantly lower than that in group A, and the signal intensity of tendon graft was lower in group B than that in group A (P < 0.05). After 12 weeks, the expansion degree of bone tunnel and the signal intensity of tendon were decreased in both groups (in the same group P < 0.05, between the two groups P > 0.05). (3) In this experiment, in the early stage of ligament reconstruction, the anterior cruciate ligament reconstruction with remnant preservation is superior to the anterior cruciate ligament reconstruction without remnant preservation in terms of graft revascularization and reduction of bone tunnel expansion, showing some biological advantages.

Key words: anterior cruciate ligament, remnant preservation, tendon-bone healing, factor, microvessel density, bone tunnel, experiment

中图分类号:

马子越, 巨啸晨, 张磊, 孙荣鑫. 保留与不保留残端重建前交叉韧带后移植物腱骨愈合的比较[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 582-587.

Ma Ziyue, Ju Xiaochen, Zhang Lei, Sun Rongxin. Tendon-bone healing in anterior cruciate ligament reconstruction with and without remnant preservation[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2021, 25(4): 582-587.

图/表（结果） 9

2.1 实验动物数量分析实验选取新西兰大白兔40只，随机分为不保残重建组与保残重建组2组，每组20只，实验过程中不保残重建组有1只因术后感染被淘汰，1只不明原因死亡；保残重建组1只因腹泻死亡。最终37只新西兰兔进入结果分析。
2.2 免疫组织化学结果
2.2.1 两组移植物HIF-1α表达比较术后6周保残重建组中HIF-1α阳性表达率明显高于不保残重建组，差异有统计学意义(P < 0.05)；术后12周保残重建组中HIF-1α阳性表达量下降明显，两组差异无统计学意义(P > 0.05)，见表1，图2。

2.2.2 两组移植物VEGF表达比较术后6周保残重建组中VEGF阳性表达率明显高于不保残重建组，差异有统计学意义(P < 0.05)；术后12周保残重建组中VEGF阳性表达量下降明显，两组差异无统计学意义(P > 0.05)，见表2，图3。

2.2.3 两组移植物微血管密度比较 CD34标记的微血管密度在术后6周保残重建组显著高于不保残重建组，差异有统计学意义(P < 0.05)，见图4；两组微血管密度的增生情况均随时间而增加，术后12周显著高于同手术方式6周(P < 0.05)，但12周时组间比较差异无统计学意义(P > 0.05)，见表3。

2.3 影像学结果术后6周，保残重建组骨隧道扩大程度明显低于不保残重建组，保残重建组移植腱信号强度评分低于不保残重建组(P < 0.05)。术后12周，两组骨隧道扩大程度及移植物信号强度差异不大(P > 0.05)。两组不同时间段组内对比，骨隧道扩大程度12周相对6周均显著减小，移植物信号强度评分均明显下降(P < 0.05)，见表4，5及图5。

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引言

前交叉韧带是膝关节最重要的稳定结构之一，美国研究数据显示前交叉韧带损伤的发病率为1 184/100 000，而80%的膝关节韧带手术与前交叉韧带损伤相关[1]。前交叉韧带损伤后通常难以自愈，从而引起膝关节相关并发症，如半月板损伤、关节软骨退行性变等[2] 。由于韧带再生能力较差，对韧带断裂处进行缝合通常难以愈合[3]。当前临床多采取自体股薄肌肌腱与自体半腱肌开展重建手术，该种方法对周边造成的损伤较小，且不会引发伸膝装置的抑制作用，已受到国内外骨科医师的广泛认可。该项手术的疗效及术后康复进程依赖于移植物的有效愈合[4]。前交叉韧带重建失败的原因之中，移植腱与骨隧道的愈合(腱骨愈合)不佳或不愈合是重要的因素[5]。由于移植物重塑的好坏是前交叉韧带重建术成功与否的关键，因此如何促进移植物在体内愈合，使移植物能够替代原前交叉韧带的生物学功能是目前运动医学的主要研究方向之一。AHN等[6]指出，前交叉韧带损伤后超过半数的患者在其胫骨或(和)股骨端止点处会遗留部分残端，这就为临床上保残治疗提供了物质基础。TENSHO等[7]的研究认为，保留残端重建前交叉韧带有利于提高本体感觉恢复，促进移植物的再血管化，更好地维持膝关节稳定性。SACCOMANNO等[8]的研究证明，保留前交叉韧带胫骨残端有利于移植物与骨隧道的愈合。但另一些学者对保留残端重建前交叉韧带的生物学优势持怀疑态度，他们认为保残重建对膝关节功能恢复并无促进作用[9-10]。因此，保残重建是否可以促进腱骨愈合目前尚有争议，从组织学和影像学层面进行两种术式对比的研究也较少。因此，该研究通过开展相关动物实验，建立两种术式的手术模型，经过免疫组化染色法观察保残重建前交叉韧带与不保残重建模型移植物腱骨愈合情况，MRI、CT检测重建术后移植腱信号强度变化及骨隧道扩大程度的变化，从组织学和影像学两个方面论证保留残端重建前交叉韧带在腱骨愈合方面是否具有生物学优势。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

材料方法

1.1 设计随机对照动物实验
1.2 时间及地点手术建模于2018年10月至2019年2月在新疆医科大学动物实验中心完成，MRI、CT检测和免疫组化染色于2018年12月至2019年5月在新疆医科大学第六附属医院完成。
1.3 材料雄性新西兰大白兔40只，6月龄，体质量3.0-3.5 kg，新疆医科大学动物实验中心提供，普通级、封闭群，许可证号：SCXK(新)2018-0002。
实验主要试剂： Rabbit Anti-HIF-1 Alpha antibody(博奥森，货号：bs-20398R)；Rabbit Anti-VEGF antibody(博奥森，货号：bs-1313R)；免疫组化染色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司，货号SP9000)；苏木素染液(福州迈新生物技术开发有限公司，货号：CTS-1097)；伊红染液(北京中杉金桥生物技术有限公司，货号：ZLI-9613)；浓缩型鼠抗兔CD34单克隆抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司)；舒泰麻醉药(法国维克公司)；速眠新动物麻醉药(吉林圣达动物药品有限公司)；免疫组化染色孵育盒(福州迈新生物技术开发有限公司，型号：BOX-1001)。
实验主要设备：显微镜(Nikon生物显微镜，型号：E200)；超级免疫组化油笔(福州迈新生物技术开发有限公司，型号：PEN-0002)；染色缸(福州迈新生物技术开发有限公司，内径为15 cm的带盖玻璃缸)。
1.4 方法
1.4.1 实验动物分组采用随机数字法将40只新西兰兔分为2组：不保残重建组及保残重建组，每组20只。两组实验兔均行双后肢急性期前交叉韧带重建(术前行双侧膝关节前抽屉实验及lachman试验，均呈阴性)。
1.4.2 手术建模兔称质量后，舒泰7 mg/kg+速眠新 0.15 mL/kg肌肉注射麻醉，备皮、消毒铺巾。取同侧跟腱中1/3作为移植腱，长3.0-4.0 cm，直径2 mm。取髌旁内侧入路，将髌骨向外脱位，不保残重建组重建时将原前交叉韧带完全清理，分别在原股骨、胫骨止点印迹处钻取骨隧道，用尼龙线编织移植腱后沿骨隧道穿入并固定(图1A)；保残重建组在前交叉韧带股骨止点处予以切断，保留前交叉韧带胫骨残端，同样方法钻取股骨隧道，在原前交叉韧带胫骨止点偏后约1 mm位置钻取胫骨隧道，穿入移植腱，把前交叉韧带残端尽量向股骨方向牵拉，与移植腱缝合，给予残端一定张力(图1B)；术后各组兔双下肢不制动，切口不包扎，肌肉注射青霉素40×104 U/kg，连续5 d，每天伤口消毒，10 d后拆线[11]。

1.4.3 标本采集及处理两组分别于6周各随机选取9只标本兔，行双侧膝关节CT和MRI检测，记录骨隧道变化情况及移植腱信号强度。随后将标本兔用空气栓塞法处死，将膝关节腔成功打开，利用生理盐水清洗后，切除前交叉韧带内的移植物。标本分别应用多聚甲醛与乙二胺四乙酸进行固定和脱钙，然后给予脱水、浸蜡和包埋等处理。采用纵向切片，免疫组织化学检测，最后用显微镜观察，并记录相关组织学结果。剩余标本兔于12周时同上述方法检测。
1.4.4 免疫组织化学检测免疫组织化学检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)的表达强度，以阳性细胞百分比作为依据。CD34免疫组化EnVision二步染色法标记微血管密度(MVD)，微血管密度计数采用Weidner校正法[11]。
1.4.5 影像学检测
CT三维重建：采用64排螺旋CT行双下肢断层扫描(SOMATOM，Siemens，德国)。标本兔麻醉后处于仰卧位，双下肢呈屈曲20°，扫描范围包括股骨近端至胫骨远端，分别行矢状位、冠状位及横断位扫描，在系统内进行骨隧道直径的测量。骨隧道扩大程度为测量骨道最宽处直径与重建时的骨隧道直径之差所占重建时骨隧道直径的百分比表示，以大于30%为骨隧道扩大标准。
MRI检测：采用3.0T MR扫描(MAGNETOM Verio, Siemens，德国)进行扫描。标本兔处于仰卧位，接受检测的膝关节处于放伸直位。由于腱骨结合界面为一细长条状区域，较难采用定量的方法进行信号度的测量，因此采用分级方法进行测量，按照信号强度分为5个等级：1分，与髌腱相同；2分，大于髌腱小于肌肉；3分，与肌肉相同；4分，大于肌肉小于积液；5分，与积液相同。信号强度越低、等级越低、腱骨愈合程度越高。由2位医生分别对每个数值重复测量3次，取测量结果的平均值进行统计分析。
1.5 主要观察指标移植物HIF-1α和VEGF免疫组化染色的阳性细胞百分比；CD34免疫组化染色检测移植物微血管密度；MRI、CT观察移植腱信号强度及测量骨隧道宽度。
1.6 统计学分析采用SPSS 20.0软件进行统计学分析处理，计量资料以x±s表示，并检验是否符合正态分布。各组比较采用方差分析，组内比较采用t 检验。P < 0.05为差异有显著性意义。

讨论

前交叉韧带损伤是最为常见的膝关节韧带损伤，由于膝关节腔的低氧环境，以及其不丰富的血运，导致前交叉韧带一旦断裂很难自行修复，目前临床上多采用关节镜下前交叉韧带重建术来治疗前交叉韧带损伤，重建的移植物包括自体移植物、同种异体移植物和人工合成移植物3种主要类型。无论选取何种移植物，前交叉韧带重建都有不低的失败率(2%-3%)，究其原因，腱骨愈合欠佳，进而导致移植物在骨隧道内的松动是很重要的影响因素之一。
VEGF拥有较强的血管生成诱导作用，能够促进损伤组织的血管再生，激活NO合酶，使毛细血管的通透性增加[12]。CHENG等[13]的研究证明，VEGF在腱骨愈合过程中可以促进移植肌腱的再血管化，提高重建韧带的强度，且不会增加韧带与周围组织的粘连。NTOULIA等[14]也证实，再血管化程度的提高可以明显提升腱骨界面间重建组织的愈合程度和生物力学性能。VEGF对血管新生具有重要的促进作用。
氧是机体新陈代谢的重要物质，低氧是人体生长发育过程中常见的生理状态，且参与某些疾病的发生和发展[15-16]。正常膝关节腔内氧含量较低，为生理性低氧状态[17]，前后交叉韧带获取氧和营养物质主要依靠关节内滑液，前交叉韧带重建后，此低氧环境限制了重建肌腱的自我修复能力[18]。HIF-1α是机体维持氧平衡的重要细胞因子之一，可通过VEGF、血管生成素(ANG)、血小板生长因子(PGDF)、转化生长因子(TGF)等诱导新生血管和骨组织形成，也可直接作用于成骨细胞和破骨细胞，增强骨吸收，治疗骨缺损等疾病具有良好应用前景[19-20]。王国祥等[21]利用跳跃运动法制造鼠跟腱炎模型，发现HIF-1α在损伤跟腱周围表达较对照组明显增高(P < 0.05)，表明HIF-1α参与机体肌腱损伤的修复过程。同时，VEGF也是HIF-1α的作用靶点之一，二者呈正相关[22-23]，PALEOLOG等[24]的研究指出，HIF-1α可能在其他辅助激活因子作用下，启动VEGF转录，增强缺氧时VEGF mRNA的稳定性，从而对VEGF RNA转录进行上调，以加强其生物学效应。在重建后6周，保残重建组HIF-1α与VEGF的阳性细胞百分比评分均高于不保残重建组(P < 0.05)，可能与以下因素有关：①前交叉韧带残端与移植物融为一体，残端内的新生血管内皮细胞长入移植腱，从而增加了移植腱VEGF mRNA的表达；②保残与不保残虽然都造成了韧带损伤，两者HIF-1α表达均增高，但保留的残端可能起到封闭作用，使移植物缺氧程度更明显，HIF-1α的表达较不保残重建组更高，同时在低氧环境中，HIF-1α对VEGF的调控增强，间接增加 VEGF mRNA的表达；③有学者认为，关节滑液可以抑制腱骨愈合[25]，保留残端可以限制一部分滑液渗入重建的骨隧道，有利于移植物的腱骨愈合。另外，此次研究中术后6周保残重建组微血管密度增加显著高于不保残组，可能也是由于保残重建增加了VEGF mRNA的表达，而VEGF又对CD34蛋白具有较强的诱导作用，因此提高VEGF含量间接增加微血管密度[26]，也有研究表明，HIF-1α与高微血管密度具有显著正相关性[27]。KIRIZUKI等[28]的一项关于前交叉韧带胫骨残端的超微结构和组织学研究中发现，保留前交叉韧带残端的患者在术后早期行PCR检测CD34阳性细胞明显多于不保留残端组，在成骨和内皮分化潜能方面展现了明显的生物学优势，与此次研究的结果一致。
在重建后12周，保残重建组与不保残重建组的HIF-1α和VEGF的阳性细胞百分比无明显差异(P > 0.05)；同时与各自6周组进行组内比较，无论保残与否，12周组的VEGF与HIF-1α的表达均明显下降(P < 0.05)。分析其原因可能有以下几点：①随着术后时间的延长，移植物再生血管数量不断增加，VEGF的表达也随之下降。YOSHIKAWA等[29]曾在一项试验研究中证实，兔重建前交叉韧带后，腱骨界面的VEGF表达水平在两三周达到最高，随后不断下降，重建后12周，无论是否保残，再血管化过程已基本完成，VEGF表达水平都在较低的层面，因此差异不大。②随着重建韧带腱骨愈合程度逐渐提高，更接近于正常组织，移植物中HIF-1α的表达水平相对损伤初期明显降低。③李明等[30]研究发现，家兔滑膜组织中HIF-1α与VEGF的含量成正相关，进一步证实了VEGF是HIF-1α的作用靶点之一。随着移植物再血管化完成，VEGF表达水平下降，也可逆反馈HIF-1α的表达。在CD34标记的微血管密度对比方面，两组较同手术方式6周组微血管密度均显著升高，大量研究证实微血管密度与成纤维细胞密度呈正相关[31-32]，随着术后时间延长，腱骨愈合程度不断提高，腱骨结合处的成纤维细胞也相应增加，因此微血管密度均显著升高。INOKUCHI等[33]的研究发现，在损伤早期CD34阳性细胞具有更强大的高增殖和分化潜能，可以有效促进腱骨愈合，而损伤后期或者慢性损伤中，这种优势则不明显，此次研究中两组在术后12周微血管密度差异不再具有显著性可能与CD34阳性细胞的表达有关，另一方面重建后期两组标本VEGF和HIF-1α水平趋于一致，对微血管密度的影响逐渐减小也是造成该结果的因素之一。
前交叉韧带重建术后常发生骨隧道扩大的现象，该现象可导致移植腱松弛，影响腱骨愈合。AGA等[34]研究发现，骨隧道扩大使关节滑液更易进入骨隧道，破坏移植物重塑过程，从而导致腱骨愈合不良及移植物血管化程度差。此外，骨隧道扩大还可能与手术固定的方式、骨隧道的定位以及康复训练方法有关。目前临床上尚无明确预防骨隧道扩大的方法。有学者建立保残与不保残重建前交叉韧带的动物模型，CT结果显示保残组骨隧道扩大程度低于不保残组[35]。此次研究采用CT测量骨隧道宽度变化情况，同时通过MRI检测腱骨结合点的信号对比，更加综合评估保残与不保残重建前交叉韧带的腱骨愈合影响。结果证实术后6周时两组骨隧道直径明显扩大，不保残组扩大更为明显，不保残组移植物的信号强度更高(P < 0.05)，分析其原因可能在于：①保残重建组将残端与移植腱缝合，加强了移植腱的固定，可在一定程度上减少“雨刷效应”(移植物在骨道垂直方向的微动)和“蹦极效应”(移植物在骨道水平方向的微动)；②由于术后不制动，早期的康复活动易使滑液产生增多，产生“滑液浸泡效应”，过多的滑液进入骨隧道从而影响腱骨愈合，保残重建残端起到一定保护作用，阻止滑液进入骨道从而减少骨道的扩大；③不保残重建组更多的滑液进入骨道，引起局部无菌性炎症及水肿，MRI的信号强度与水分含量有关，不保残重建组水肿相对更明显，因而移植腱MRI信号强度更高。术后12周两组骨隧道宽度均呈下降趋势，两组移植物信号强度差异不大，组间比较差异无统计学意义(P > 0.05)；与同手术方式的6周组比较，骨隧道宽度及移植物信号强度均明显下降 (P < 0.05)。刘书芳等[36]研究发现，前交叉韧带重建术后6个月内患者均会发生不同程度的骨隧道扩大，之后此类现象趋于稳定。推测实验动物术后12周时，腱骨愈合过程基本完成，在处死动物采集标本时也发现部分标本腱骨结合界面已经形成了末端结构，这种猜测的真实性仍有待进一步实验验证。
此次研究存在的不足：①移植肌腱的固定主要依靠骨皮质悬吊固定，相比人类手术的Endobutton袢钢板与Rigidfix横穿钉固定，强度上略显欠佳，无法完全避免移植腱的微动；②动物术后未限制行动，与人类术后石膏、肢具等固定相比较，过多的活动可能使腱骨愈合受到一定程度的影响。虽然研究存在不足，作者仍认为在韧带重建修复的早期，保残重建在移植物再血管化、减少骨隧道扩大等方面明显优于不保残组，展现了一定生物学优势，有利于腱骨愈合。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

保留与不保留残端重建前交叉韧带后移植物腱骨愈合的比较

Tendon-bone healing in anterior cruciate ligament reconstruction with and without remnant preservation

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