环状RNA研究的新进展

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.36.027

中国组织工程研究 ›› 2017, Vol. 21 ›› Issue (36): 5898-5904.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.36.027

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环状RNA研究的新进展

程涵蓉1，2，3，何少茹2，3，吴本清1

1深圳市人民医院儿科，暨南大学第二临床医学院，广东省深圳市 518020；2广东省人民医院儿科(广东省医学科学院)，广东省广州市 510080；3南方医科大学，广东省广州市 510515

收稿日期:2017-07-09 出版日期:2017-12-28 发布日期:2018-01-04
通讯作者: 吴本清，博士，主任医师，深圳市人民医院儿科，暨南大学第二临床医学院，广东省深圳市 518020
作者简介:程涵蓉，1977年生，广东省澄海县人，汉族，南方医科大学在读博士，副主任医师。
基金资助:
深圳市科技计划项目(JCYJ20140416122812046)，项目名称：miRNA和lincRNA在支气管肺发育不良发病机制中的作用

Research advances in circular RNAs

Cheng Han-rong1, 2, 3, He Shao-ru2, 3, Wu Ben-qing1

1Department of Pediatrics, Shenzhen People’s Hospital, the Second Clinical Medical College of Jinan University, Shenzhen 518020, Guangdong Province, China; 2Department of Pediatrics, Guangdong General Hospital & Guangdong Academy of Medical Sciences, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China; 3Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong Province, China

Received:2017-07-09 Online:2017-12-28 Published:2018-01-04
Contact: Wu Ben-qing, M.D., Chief physician, Department of Pediatrics, Shenzhen People’s Hospital, the Second Clinical Medical College of Jinan University, Shenzhen 518020, Guangdong Province, China
About author:Cheng Han-rong, Studying for doctorate, Associate chief physician, Department of Pediatrics, Shenzhen People’s Hospital, the Second Clinical Medical College of Jinan University, Shenzhen 518020, Guangdong Province, China; Department of Pediatrics, Guangdong General Hospital & Guangdong Academy of Medical Sciences, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China; Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong Province, China
Supported by:
the Scientific and Technological Program of Shenzhen, No. JCYJ20140416122812046

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
CircRNA：最近发现的一种特殊的新型内源非编码RNA，circRNA形成没有5’-3’极性也没有聚腺苷酸尾的共价闭合环结构。随着RNA深度测序技术和生物信息学的发展，证明大量的circRNAs在哺乳动物细胞是内源、丰富、保守和稳定的。已经证实，反向互补序列，包括反向重复的Alu配对(IRAlus)和外显子跳跃是circRNA形成的必要条件。此外，RNA结合蛋白也调节circRNA的形成。
CircRNA与疾病：circRNAs可能在疾病的发生和发展中起重要作用，可能成为新的生物标志物。miRNA参与几乎所有方面的细胞功能，并在疾病的发生和进展中起关键作用。鉴于circRNA与miRNA相互作用以调节其靶基因，circRNA可能参与与miRNA相关的疾病。

摘要
背景：环状RNA(circRNA)是一种新型的RNA，与线性RNA不同，它形成共价闭合的连续环，并且在真核转录组中高度表达。它的生物学功能被忽视多年。最近的研究已经在哺乳动物细胞中发现了数千种内源性circRNA。
目的：综述circRNA的形成、性质、功能，以及在疾病中的潜在意义。
方法：第一作者应用计算机检索2000年1月至2016年12月PubMed数据库、中国期刊全文数据库关于circRNA的文章，英文检索词“CircRNA，miRNA，function，mechanision”；中文检索词“CircRNA，microRNA，功能，机制”。对纳入的62 篇文献进行分析讨论。
结果与结论：①CircRNA主要从外显子或内含子序列产生，并且反向互补序列或RNA结合蛋白是circRNA生物发生所必需的；②大多数circRNAs是跨物种保守，对核糖核酸R稳定的和耐，并经常表现出组织/发育阶段特异性表达；③最近的研究表明，circRNAs可以作为微小RNA(miRNA)海绵体，剪接和转录的调节器和亲代基因表达的修饰；④新的证据表明circRNAs可能在动脉粥样硬化血管疾病，神经系统疾病，朊病毒疾病和癌症中发挥重要作用；在结肠直肠癌中异常表达；并用作一些疾病的诊断或预测性生物标志物；⑤类似于miRNA和长非编码RNA，circRNAs成为RNA领域的新研究热点，可以广泛参与生命过程。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0002-5625-6828(程涵蓉)

关键词: 组织构建, 组织工程, CircRNA, miRNA, 外显子, 内含子, 功能, 机制

Abstract:

BACKGROUND: Unlike linear RNAs, circular RNAs (circRNAs) are a novel type of RNA which can form covalently closed circles and are highly expressed in eukaryotic transcriptomes. In the plenitude of naturally occurring RNAs, circRNAs and their biological role are underestimated for years. Recent studies have discovered thousands of endogenous circRNAs in mammalian cells.
OBJECTIVE: To review the formation, properties, and functions of circRNAs, and their potential signi?cance in diseases.
METHODS: A computer-based search for literature in CNKI and PubMed databases published from January 2000 to December 2016 was performed using the keywords of “circRNA, miRNA, function, mechanism” in English and Chinese, respectively. Finally, 62 eligible articles were included for analysis.
RESULTS AND CONCLUSION: CircRNAs are largely generated from exonic or intronic sequences, and reverse complementary sequences or RNA-binding proteins are necessary for circRNA biogenesis. A majority of circRNAs that are conserved across specie are stable and resistant to RNaseR, and often exhibit tissue/developmental-stage-speci?c expression. Recent research has revealed that circRNAs can function as microRNA sponges, regulators of splicing and transcription, and modi?ers of parental gene expression. Emerging evidence indicates that circRNAs might play important roles in atherosclerotic vascular diseases, neurological disorders, prion diseases and cancer; exhibit aberrant expression in colorectal cancer; and serve as diagnostic or predictive biomarkers of some diseases. Similar to microRNAs and long noncoding RNAs, circRNAs are arousing general interest in the field of RNA and widely participate in the life process.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

Key words: MicroRNAs, Exons, Introns, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

程涵蓉，何少茹，吴本清. 环状RNA研究的新进展[J]. 中国组织工程研究, 2017, 21(36): 5898-5904.

Cheng Han-rong1, 2, 3, He Shao-ru2, 3, Wu Ben-qing1. Research advances in circular RNAs[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2017, 21(36): 5898-5904.

图/表（结果） 2

2.1 CircRNAs的多样性 CircRNAs表达水平低，并且最初认为是剪接体介导的剪接错误的副产物或从内含子脱壳脱离的中间体^[29-30]。因此，circRNAs很少受到关注，认为不可能在生物过程中发挥关键作用。到2010年为止，几乎没有发现circRNAs，并且对circRNA生物发生的研究极少。然而，随着高通量测序技术和计算分析的发展，已经发现了从古菌到人类的成千上万的circRNAs^[6-11^，^31]。一些circRNA的表达比其相同基因的经典线性转录物的表达高10倍以上^[7]，见表1。

2.2 circRNAs的生物起源最近的研究表明，通过反向剪接的circRNAs的生物发生不同于线性RNAs的规范剪接^[12]。此外，认识了circRNA生物发生，特别是关于其调控和竞争反向剪接和规范剪接的几个最新进展^[1]。例如Jeck等^[7]提出了2种circRNA形成模型。模型1为“套索驱动的环化”或“外显子跳跃”，模型2为“内含子配对驱动的环化”或“直接后剪切”。Kelly^[16]及其同事还发

现外显子环化很广泛，并且与用肿瘤坏死因子α或肿瘤生长因子β处理的人脐静脉内皮细胞中的外显子跳跃相关。

一些证据表明内含子配对驱动的环化可能比套索驱动的环化发生更频繁^[32]，证据显示：内含子配对驱动的环化模型，指出反向互补序列，包括IRAlus，对circRNA生物发生很重要^[12-15^，^17-19]。Zhang等^[12]发现了一种新型的人类细胞circRNA，来源于内含子，被称为环状内含子RNA(ciRNA)。环状内含子RNA的生物合成依赖于在5'剪接位点附近7 nt富含GU的元件的共有基序和在分支点位点附近的11 nt富含C元件^[9]。最近也发现外显子环化，内含子“保留”在外显子之间，这些称为外显子circRNA或EIciRNA，它们可以通过突变互补序列过表达^[11]。然而，EIciRNA形成的机制仍然未知。这些机制显著增加了人类转录组的调节复杂性。

此外，研究人员已经鉴定出肌肉盲蛋白(MBL)，其可以结合到circMb1侧面的内含子，以激发作为RNA结合蛋白的circRNA的形成，从而将两个内含子桥接在一起^[17]。类似地，研究人员报道了另一种CircRNA生物发生模式，其中RNA结合蛋白之间的相互作用形成了内含子之间的桥梁，这导致剪接供体和剪接受体接近以促进circRNA的形成^[33]。可是，Conn和其他人最近发现RNA结合蛋白 Quaking(QKI)调节circRNA的形成^[20]。相反的，Ivanov^[14]和其他人指出，RNA编辑酶ADAR1可以结合双链RNA，通过融化茎结构拮抗circRNA生物发生。因此，在一些条件下，RNA结合蛋白可以用作circRNA形成的激活剂或抑制剂。

值得注意的是，Zhang等^[12]首次提出了一种类似于可变剪接的替代性环化模型，通过互补序列(重复或非重

复)在单个内含子内部横跨的RNA配对竞争可以显着影响剪接选择和外显子环化。单个内含子内的互补序列可能足以促进线性mRNA的产生。相反，横跨内含子的互补序列可以有利于外显子环化。反向互补序列之间的竞争可导致从单个基因处理多个circRNA转录物。然而，由于物种间互补序列的不同分布，替代性环化可能是物种特异性的。对于外显子环化不足，互补序列的存在是必要的^[12]。这个模型表明替代性环化的机制非常复杂，也可能受其他因素，如RNA结合蛋白的调节^[1]，见图1。

2.3 circRNA的性质 circRNAs通过反向剪接产生。首先，这些circRNA具有没有5’-3’极性和多聚腺苷酸尾的共价闭合环结构，这使得它们比线性RNA更稳定，并且不易被RNA核酸外切酶或RNA酶R降解^[34]。例如，研究人员在来自健康个体的人类无细胞唾液中鉴定了> 400个circRNA。这些数据可在任何类型的细胞外体液中的circRNA的实验得到验证^[27]。第二，circRNAs的多样性^[33]。在一些情况下，环状分子超过相应的线性mRNA10倍以上^[7]。第三，circRNAs主要由外显子组成，主要存在于细胞质中，可能有miRNA反应元件(MREs)^[6-8]。此外，circRNAs预测的miRNA靶位点多态性显著减少^[35]。一些circRNA来自内含子或外显子，主要丰存在于真核生物的核中并且可能调节基因表达^[9^，^11]。第四，circRNAs经常表现出组织/发育阶段特异性表达^[6^，⁸^，^11]。例如，在CD19⁺白细胞中检测到hsa_circRNA_2149，但在CD34⁺白细胞，嗜中性粒细胞或HEK293细胞中检测不到hsa_circRNA_2149。根据测序数据，一些线虫circRNA似乎在卵母细胞中表达但在1或2细胞胚中不存在^[8]。第五，大部分circRNA是内源性非编码RNA，只有一小部分外源环RNA(例如δ型肝炎病毒(HDV)，具有内部核糖体进入位点的工程化circRNA可被翻译^[36-37]。最后，circRNAs在不同物种之间进化保守^[6-7^，^38]；然而，一些环状内含子RNA进化保守性不强^[9]。总之，这些性质表明circRNAs具有在转录和转录后发挥重要作用的潜力，并可能成为诊断疾病的理想生物标志物。

2.4 CircRNA功能

2.4.1 CircRNA起竞争内源性RNA或miRNA海绵的作用竞争性内源性RNA(ceRNA)包含共享的MREs，例如mRNA、假基因和长非编码RNA，可以竞争miRNA结合^[39]。因此，竞争性内源性RNA影响miRNA基因表达的调节。有证据表明，circRNAs可以作为miRNA海绵或有效的竞争性内源性RNA分子^[8^，²¹^，²⁴^，^40]。例如，外显子circRNAs ciRS-7/CDR1as(对于miR-7或小脑变性相关蛋白1反义的环状RNA海绵)和Sry结合miRNA而不被降解，因而为竞争性内源性RNA活性调节的候选物^[32]。 Hansen等^[41]发现小脑变性相关蛋白1基因可以翻译小脑变性相关蛋白1转录物(CDR1as)的天然环状反义转录物。小脑变性相关蛋白1转录物可以与miRNA相互作用并为miR-671切割。

miR-671互补的结合位点在物种间几乎没有变异^[21]。随后的研究揭示，小脑变性相关蛋白1转录物含有超过70种针对miR-7的保守种子匹配，并且通过Argonaute蛋白(即结合miRNA的蛋白质)结合。值得注意的是，种子匹配的互补性保护了小脑变性相关蛋白1免于结合的miR-7的降解^[21]。小脑变性相关蛋白1转录物的沉默或miR-671的过表达降低了miR-7靶基因的表达^[8^，^21]，如SNCA、EGFR和IRS2^[42-43]。相反的，小脑变性相关蛋白1过表达阻止了miR-7靶标的下调^[21]。此外，小脑变性相关蛋白1转录物在神经组织中以表达水平较高。在缺乏小脑变性相关蛋白1基因座的斑马鱼胚胎中，CDR1a的过表达降低了中脑大小。模拟的miR-7功能丧失的表型，导致中脑的形态缺陷^[8]。类似地，鼠性别决定区Y(Sry)是负责哺乳动物性别决定的基因，并且可以产生睾丸特异性的循环转录物^[3]。该单外显子circRNA具有16个miR-138结合位点，并且可以与circRNA Sry表达载体和pJEBB-138共转染的HEK293细胞中的Argonaute 2(AGO2)共沉淀。这些数据表明，环状Sry RNA也可能作为miR-138海绵体^[21]。

然而，CircleSeq鉴定的外显子circRNA的一些分析表明：哺乳动物细胞中极少数circRNAs含有超过10个单个miRNA的结合位点。此外，许多外显子circRNA只包含较小数目的推定的miRNA结合位点^[32]。Guo等^[10]还发现少数circRNAs显示出预期的miRNA海绵的性质。Li等^[11]检测到cir-ITCH跨越E3泛素(Ub)蛋白连接酶(ITCH)的几个外显子，并作为miR-7，miR-17和miR-214的海绵。因此，CircRNA 和miRNA海绵是不是一个普遍的现象？以及网络的circRNA，miRNA和竞争性内源性RNA保持平衡以调节细胞内稳态仍有待解释。

2.4.2 CircRNA调节选择性剪接和转录以前的研究表明circRNAs参与选择性剪接或转录的调控。例如，Ashwal-Fluss等^[17]发现circMbl由剪接因子肌肉盲蛋白的第二外显子产生，与规范的mRNA前体剪接竞争。 circMb1敲除内含子和circMb1本身具有保守的肌肉盲蛋白结合位点，其被肌肉盲蛋白特异性结合。肌肉盲蛋白水平的调节显着影响circMbl形成，并且这种效应取决于突触内含子序列中的肌肉盲蛋白结合位点。这些发现表明，一般剪接因子，如肌肉盲蛋白，可能对调节circRNA生物发生和规范剪接之间的平衡有影响。此外，Chao等^[44]注意到小鼠formin(Fmn)基因可以通过反向剪接产生circRNA。值得注意的是，含有翻译起始位点的circRNA作为“mRNA捕获”，并留下非编码的线性转录物，从而降低Fmn蛋白的表达水平。此外，Jeck等^[32]发现许多单一外显子circRNAs在人类成纤维细胞中含有翻译起始位点。这些发现表明，circRNAs可以作为mRNA陷阱，通过隔离翻译开始点以调节蛋白表达。

2.4.3 CircRNA调节亲本基因的表达最近的研究表明circRNAs可以调节亲本基因的表达。例如，Zhang等^[45]发现，环状内含子RNA的形成取决于关键的RNA元件。这些环状内含子RNA对微小RNA靶位点几乎没有富集，表明它们是功能性的。详细的研究表明，一些环状内含子RNA在核中丰富，并与聚合酶Ⅱ(PolⅡ)机制相互作用，并以顺式作用方式调节宿主转录活性^[9]。随后，研究人员还报道了称为EIciRNA的特殊类型的circRNA，其与人类细胞中的RNA Pol Ⅱ相关。EIciRNA，如circEIF3J和circPAIP2，主要定位于细胞核，与U1小核核糖核蛋白(snRNPs)相互作用，并以顺式作用方式增强其亲本基因的转录^[11]。有人发现ITCH和ITCH的3'非翻译区(UTR)都共享一些miRNA结合位点。进一步研究表明，cir-ITCH与miR-7，miR-17和miR-214的相互作用可能增加ITCH的水平^[24]。推测外显子只有circRNAs可能在细胞质中的监管功能，而内含子circRNAs，如环状内含子RNA和EIciRNAs可能是细胞核的有效转录调节。

2.4.4 CircRNA的其他可能功能少数circRNAs可以翻译。研究人员报道，在蛋白质的起始密码子上游插入IRES的工程化circRNA可以在体外翻译或在体内翻译^[35^，^46]。Perriman等^[37]报道含有简单的绿色荧光蛋白开放阅读框架的工程化循环mRNA可以指导大肠杆菌中的绿色荧光蛋白表达。目前，只有一种天然存在的circRNA在真核细胞中编码单一蛋白质，即HDV，是乙型肝炎病毒的亚病毒卫星病毒。HDV与乙型肝炎病毒病毒颗粒的包封产生了特异性致病性的单一病毒蛋白，但是翻译原理可能与特异性病毒相关^[47-48]。然而，到目前为止，还没有证据表明天然存在的内源性circRNA可以翻译^[7]。此外，研究人员报告了circRNAs其他可能的作用^[49-50]。例如，circRNA可以作为RNA结合蛋白海绵，如肌肉盲蛋白和circMb1之间直接的相互作用^[17]，RNA结合蛋白工厂或其变构调节剂装配中的功能。CircRNA也可以通过部分碱基配对直接靶向mRNA。一些circRNA甚至作为翻译的模板，已发现合成的circRNA可以有效翻译。circRNA需要进一步的研究以明确其潜在的功能。

2.4.5 CircRNA与疾病

(1)CircRNA与朊病毒相关的疾病：最近的研究表明 circRNAs可能在疾病的发生和发展中起重要作用，可能成为新的生物标志物。例如，ciRS-7/小脑变性相关蛋白1转录物的表达是通过朊病毒蛋白在HEK293细胞中的稳定过表达所诱导的^[51]。因此，朊病毒蛋白可能参与小脑变性相关蛋白1转录物的调节。CircMl1及其flanking内含子序列可以与肌肉盲蛋白组合。肌肉盲蛋白水平的改变影响circMbl的生物合成。circRNA的产生与规范肌肉盲蛋白前mRNA剪接竞争^[17]。已知肌肉盲蛋白功能缺陷引起强直性营养不良的严重退行性疾病。因此，推测circMbl可能涉及肌强直性营养不良起始和进展。

(2)CircRNA与miRNA相关的疾病：miRNA参与几乎所有方面的细胞功能^[52]，并在疾病的发生和进展中起关键作用^[53-54]。鉴于circRNA与miRNA相互作用以调节其靶基因，circRNA可能参与与miRNA相关的疾病。例如，小脑变性相关蛋白1在脑中高度表达并且具有超过60个miR-7的结合位点^[8^，²¹^，⁴¹^，^55]。重要的是，miR-7涉及许多途径和疾病，包括其作为α-突触核蛋白和泛素蛋白连接酶A(UBE2A)的直接调节剂的功能。小脑变性相关蛋白1转录物涉及帕金森氏病，阿尔茨海默氏病和脑发育^[8^，²¹^，²³^，^56]。同时，由于miR-7具有致癌性和肿瘤抑制性质^[57-59]，CDR1as/miR-7轴可能参与癌症的发生和进展^[27]。

(3)CircRNA与癌症相关的疾病：已经发现，与成对的相邻组织相比，cir-ITCH表达通常在食管鳞状细胞癌中下调。Cir-ITCH可以在食管鳞状细胞癌中通过与miRNA(例如miR-7，miR-17和miR-214)相互作用而起到抗肿瘤功能，ITCH水平的增加，促进泛素介导的Dvl2降解并降低致癌基因c-myc的表达。因此，该过程抑制经典Wnt信号转导^[24]。此外，研究人员发现，通过分析来自12个匹配的正常结肠黏膜和肿瘤组织的RNA测序数据，circRNA在结肠直肠癌组织中全面减少^[25]。这些发现表明，异常的circRNAs可能参与结肠直肠癌的进展。此外，研究人员还发现，hsa_circ_002059在胃癌中下调，并且可能作为胃癌诊断的生物标志物^[28]。这些发现表明circRNAs可能参与食管鳞状细胞癌、结肠直肠癌、胰腺导管腺癌和胃癌启动和进展。当对circRNAs的研究增殖时，也可以发现circRNA在其他肿瘤中起作用。

(4)CircRNA与动脉粥样硬化性血管疾病：最后，circRNAs是果蝇中的一类衰老生物标志物和人唾液推定的疾病生物标志物^[19，26-27]。Burd^[22]和同事发现，cANRIL(INK4基因座中的环状反义非编码RNA，cANRIL)是来自INK4A-ARF基因座的反义转录物。在动脉粥样硬化性血管疾病风险区间内的INK4/ ARF(CDKN2a/b)基因座附近的染色体9p21.3上的单核苷酸多态性可以调节ANRIL剪接和cANRIL产生。cANRIL的表达与INK4/ARF转录和动脉粥样硬化性血管疾病风险相关。

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引言

材料方法

讨论

3 结论 Conclusion

环状RNA存在于所有生命形式，真核生物、细菌和古细菌，以及类病毒、类病毒样卫星RNA和(辅助)病毒都存在。因此，进化本身证明了环状RNA的自然重要性。 CircRNAs作为RNA加工途径的中间体和/或最终产物出现，它们与功能相关。由于比线性RNA更稳定，环状RNA可能是遗传信息存储在早期生命形式中的候选物，目前仍然存在于类病毒和病毒样颗粒中。以前认为CircRNAs是由RNA剪接的错误引起的。然而，随着高通量测序技术和生物信息学进展的进步，隐藏在多种ncRNA中的circRNA的生物形成和功能已经引起了许多科学家的注意。更重要的是，circRNAs的研究已逐渐成为RNA生物学领域最显著的领域之一^[60]。已经构建了一个circRNA数据库(http://www.circbase.org/)^[61]。这个数据库将有助于进一步研究circRNAs。本综述中，描述了天然circRNA是丰富、稳定、多样和保守的RNA分子类。反向互补序列和RNA结合蛋白在circRNA生物形成中发挥重要作用，但是对于大多数circRNA的降解和定位了解甚少。CircRNA可以充当竞争内源性RNA以结合miRNA或调节转录或影响亲本基因表达，Circ RNA的其它功能将逐步被发现。

此外，一些circRNA可能参与分化或疾病，特别是在癌症中。也已经构建了Circ2Traits中的疾病-circRNA关联的数据库(http://gyanxet-beta. com/circdb/)^[62]。该数据库丰富了环形RNA与人类癌症潜在关联的知识库。CircRNA与癌症相关的miRNA相关，一些circRNA- miRNA轴可能参与癌症相关的途径。Hsa_circ_002059是首先发现可显著下调胃癌，可能是一种潜在的新型和稳定的胃癌诊断生物标志物^[28]。Cir-ITCH表达通常在食管鳞状细胞癌中下调，并且可通过抑制Wnt/β-联蛋白途径而对食管鳞状细胞癌起抑制作用^[24]。此外，通过高通量筛选发现，circRNAs在结肠直肠癌中异常表达。circRNA在癌症中的研究很少，但是癌症相关的circRNA研究正在进行中。circRNA在癌症中的研究和应用是有前景的。因此，可以构建工程化的circRNA作为分子工具或治疗。工程化的circRNA可以有效地螯合miRNA和其他RNA或RNA结合蛋白或通过切割circRNA来释放这些存储的分子。

总而言之，circRNA的功能和相关机制可能相当多样化。CircRNA可能影响生命过程，用作疾病的诊断或预测的生物标志物，并且还提供新的潜在治疗靶点。然而，与编码RNA和miRNA和长非编码RNA相比，目前对circRNA的了解仍然很少。CircRNAs为人类基因组的“暗物质”提供了新的见解。circRNA在疾病的诊断和治疗中的潜在作用可能是巨大的。最近的研究主要集中在circRNA生物发生的机制。circRNA在各种疾病的发展中的生物学和分子机制尚未完全了解。随着技术和研究的发展，将识别更多的circRNAs。此外，进一步的研究将揭示绝大多数circRNAs在生理和病理过程方面的功能。因为circRNA比其他线性RNA更稳定，它在分子生物学，诊断学和医学中将会有更多更好的应用。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

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