表皮生长因子影响大鼠骨髓间充质干细胞增殖和迁移的信号通路

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.29.008

中国组织工程研究 ›› 2017, Vol. 21 ›› Issue (29): 4635-4641.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.29.008

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表皮生长因子影响大鼠骨髓间充质干细胞增殖和迁移的信号通路

夏荣木¹，江其昌²，杨龙²，谢天宏³，陆红玲¹，蒋正举³

¹遵义医学院生物化学与分子生物学教研室，贵州省遵义市 563000；遵义医学院附属医院，²胸外科，³耳鼻喉科，贵州省遵义市 563000

修回日期:2017-07-18 出版日期:2017-10-18 发布日期:2017-11-08
通讯作者: 蒋正举，主任医师，遵义医学院附属医院耳鼻喉科，贵州省遵义市 563000
作者简介:夏荣木，男，1991年生，贵州省贵定县人，汉族，遵义医学院在读硕士，主要从事肺癌防治与干细胞工程研究。
基金资助:
贵州省科学技术基金(黔科合J字[2012]2360号)

Effects of epidermal growth factors on the proliferation and migration of rat bone marrow mesenchymal stem cells

Xia Rong-mu¹, Jiang Qi-chang², Yang Long², Xie Tian-hong³, Lu Hong-ling¹, Jiang Zheng-ju³

¹Department of Biochemistry and Molecular Biology, Zunyi Medical College, Zunyi 563000, Guizhou Province, China; ²Department of Chest Surgery, ³Ear-Nose-Throat Department, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi 563000, Guizhou Province, China

Revised:2017-07-18 Online:2017-10-18 Published:2017-11-08
Contact: Jiang Zheng-ju, Chief physician, Ear-Nose-Throat Department, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi 563000, Guizhou Province, China
About author:Xia Rong-mu, Studying for master’s degree, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Zunyi Medical College, Zunyi 563000, Guizhou Province, China
Supported by:
the Science and Technology Foundation of Guizhou Province, No. J[2012]2360

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
表皮生长因子：是一种辅助生长因子，能够与细胞表面的表皮生长因子受体结合并激活下游多种信号通路，促进细胞的增殖和迁移等过程。研究表明人羊膜上皮细胞生长所必需的因子，在多种癌症组织中表达水平也显著升高。
Transwell：是一种检测细胞迁移能力的重要装置，分为上下腔，中间隔以聚碳酸酯膜，有小孔，细胞可通过小孔从聚碳酸酯膜上腔面迁移至下腔面，通过检测单位时间内下腔面细胞的数目检测细胞的迁移能力。聚碳酸酯膜孔径有多种规格。本实验采用的是0.8 μm的规格。

摘要
背景：表皮生长因子作为一种辅助生长因子，但是对于骨髓间充质干细胞的生长是否必须尚无定论。
目的：建立大鼠骨髓间充质干细胞分离提取以及鉴定的方法，同时探索表皮生长因子对其增殖能力以及迁移能力的影响，同时探索其潜在机制。
方法：①采用全骨髓贴壁法，分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞，培养至第3代，使用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29，CD45，CD90表达情况。通过成骨和成脂分化诱导，更进一步鉴定骨髓间充质干细胞；②同时通过CCK-8法和克隆形成实验测量表皮生长因子对骨髓间充质干细胞的第3代细胞的增殖能力的影响。同时通过Transwell小室验证表皮生长因子对骨髓间充质干细胞的第3代细胞迁移能力的影响。通过蛋白印迹实验检测PI3K/Akt和核因子κB信号通路相关蛋白表达水平，探索表皮生长因子的作用机制。
结果与结论：①原代骨髓间充质干细胞呈多角形和梭形，随着培养时间增加，逐渐呈梭形为主。流式细胞术检测第3代细胞表面CD29，CD90表达呈阳性，CD45表达成阴性。并且对骨髓间充质干细胞的第3代细胞成功进行了成骨和成脂分化诱导；②表皮生长因子能够促进第3代细胞的增殖，且细胞中PI3K/Akt信号通路关键分子p-Akt表达水平的增加，同时其下游信号分子Bax表达水平降低而Bcl-2表达升高。表皮生长因子能够通过调节核因子κB信号通路分子p 65以及IκB的磷酸化水平，同时也增加了基质金属蛋白酶9的表达水平，从而促进大鼠骨髓间充质干细胞的迁移；③结果表明表皮生长因子促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0003-3842-3132(蒋正举)

关键词: 干细胞, 骨髓干细胞, 表皮生长因子, 骨髓间充质干细胞, 增殖, 迁移, 核因子κB, PI3K/Akt信号通路

Abstract:

BACKGROUND: Epidermal growth factor is an auxiliary growth factor, but its effect on the growth of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) is uncertain.
OBJECTIVE: To establish a mature method for isolation, extraction and identification of rat BMSCs, to investigate the effects of epidermal growth factor (EGF) on the proliferation and migration ability of BMSCs and to explore its potential mechanisms at the same time.
METHODS: Rat BMSCs were isolated and purified using the improved whole bone marrow adherence method. After the cells were subcultured to the third generation, we detected the expression of cells surface antigens CD29, CD45 and CD90 by flow cytometry. BMSCs were further identified by osteogenic and adipogenic differentiation. Meanwhile, the effect of EGF on the proliferation of passage 3 BMSCs was measured by cell counting kit-8 and clonogenic assay. And the migration of P3 cells was verified by Transwell chamber. In addition, we detected the expression of proteins related to PI3K/Akt and nuclear factor-κB signaling pathways by western blot assay.
RESULTS AND CONCLUSION: The primary BMSCs were polygonal and spindle-shaped, and then gradually appeared to be spindle-shaped. The results of flow cytometry demonstrated that the passage 3 cells were positive for CD29 and CD90, but negative for CD45. Furthermore, we successfully induced the osteogenic and adipogenic differentiation of BMSCs in vitro. Additionally, our data demonstrated that EGF promoted the proliferation and migration of passage 3 BMSCs. The relative expression levels of p-Akt and Bcl-2 of PI3K/Akt signaling pathway was up-regulated and the expression of Bax was down-regulated. At the same time, the relative expression level of phosphorylated p65 of nuclear factor-κB signaling pathway was up-regulated and the expression of phosphorylated inhibitor κB was down-regulated. Moreover, the downstream protein of matrix metalloproteinase-9 was up-regulated. Those proteins were related to the migaration of BMSCs. In summary, our results suggest that EGF could promote the proliferation and migration of BMSCs.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

Key words: Epidermal Growth Factor, Mesenchymal Stem Cells, Tissue Engineering

中图分类号:

R394.2

夏荣木，江其昌，杨龙，谢天宏，陆红玲，蒋正举. 表皮生长因子影响大鼠骨髓间充质干细胞增殖和迁移的信号通路[J]. 中国组织工程研究, 2017, 21(29): 4635-4641.

Xia Rong-mu, Jiang Qi-chang, Yang Long, Xie Tian-hong, Lu Hong-ling, Jiang Zheng-ju. Effects of epidermal growth factors on the proliferation and migration of rat bone marrow mesenchymal stem cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2017, 21(29): 4635-4641.

图/表（结果） 2

2.1 大鼠骨髓间充质干细胞的形态变化 如图1所示，原代细胞贴壁后呈多角形、梭形、三角形等，以多角形为主。第1代细胞则以三角形和梭形为主。第2和3代细胞以梭形为主，呈漩涡样生长。

2.2 骨髓间充质干细胞的表型 如图2所示，第3代大鼠骨髓间充质干细胞CD 29的表达率为(96.3±1.25)%，CD90的表达率为(98.1±0.89)%， CD45的表达率为(1.03±0.21)%。

2.3 骨髓间充质干细胞的成骨成脂分化效果 如图3所示，第3代大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化21 d后，茜素红染色可见大片红色骨结节形成，说明成骨诱导分化成功。成脂诱导分化24 d后，油红O染色可见红色脂滴的存在，提示成脂诱导分化成功。

2.4 表皮生长因子对细胞增殖能力的影响 如图4所示，在接种后2 d内，2组细胞的吸光度值差异无显著性意义。培养至第3天后，表皮生长因子组细胞吸光度值明显高于对照组(P < 0.05)。

2.5 表皮生长因子对细胞对克隆形成的影响 克隆形成实验是检测细胞增殖能力的另一个重要的方法^[3^，^22-24]。如图5所示，添加表皮生长因子培养的细胞克隆数量明显高于对照组(P < 0.05)。

2.6 表皮生长因子对细胞迁移能力的影响 如图6所示，添加表皮生长因子培养的细胞迁移数量相对于常规培养的细胞明显增多(P < 0.05)。

2.7 表皮生长因子对增殖和迁移相关蛋白表达水平的影响 结果表明表皮生长因子作用于骨髓间充质干细胞后，PI3K/Akt信号通路关键分子p-Akt表达水平的增加(P < 0.05)，同时其下游信号分子Bax表达水平降低(P < 0.05)，Bcl-2表达增加(P < 0.05；图7A)。同时结果证实表皮生长因子能够上调核因子κB信号通路分子p65磷酸化水平以及降低IκB的磷酸化水平(P < 0.05)，同时也增加了基质金属蛋白酶9的表达水平(P < 0.05；图7B)。

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引言

骨髓间充质干细胞是一种具有自我复制和多项分化潜能的成体干细胞，来源于胚胎发育时期的中胚层^[1-2]。目前已经有大量实验表明其在不同条件下能够分化成为不同的组织细胞，甚至有跨胚层分化的能力^[1^，^3-6]。Choi等^[7]通过分泌蛋白组学分析发现人骨髓间充质干细胞能够高表达某些成骨相关蛋白，这暗示其具有分化成为成骨细胞的潜能。Rydén等^[8]的研究表明来源于间充质干细胞的脂肪前体细胞在形态上与脂肪细胞高度相似，且代谢功能也与之相似。此外，Yan等^[9]通过建立动物模型，证实骨髓间充质干细胞能够在体内诱导修复家兔软骨组织，提示其可以分化成为与软骨功能相似的组织细胞。Tomita等^[10-12]则证实了骨髓来源的细胞能够修复心肌发生梗死的区域，表明骨髓间充质干细胞具有分化成为心肌细胞的潜能。相似的，Lei等^[13]在体内试验中证实骨髓间充质干细胞能够分化成为具有神经样功能的细胞。近年来的研究表明，骨髓间充质干细胞还能够在不同的条件下分化成为如淋巴、血管等组织的细胞，并且对多种组织损伤都有有益作用^[14-15]，是目前组织工程的重点种子细胞。

整合素家族成员CD29和黏附分子CD44是骨髓间充质干细胞的表面标志物^[16]，并且骨髓间充质干细胞不表达白细胞表面标志物CD45以及其他造血系统表面标志物。现在对其鉴定的一般方法已有文献报道，因此此次试验通过鉴定其表面特异阳性分子以及特异阴性分子，同时在诱导条件下判定其多向分化的能力，从而进行反向验证鉴定骨髓间充质干细胞。

表皮生长因子作为一种辅助生长因子，是人羊膜上皮细胞生长所必需的因子^[17-18]，但是对于骨髓间充质干细胞的生长是否必须尚无定论。干细胞在体内进行治疗研究时，必然涉及到其迁移至受损部位，然后才能产生诱导分化^[19-21]，因此迁移能力是其治疗过程中的关键环节。所以实验目的在于建立一套成熟的分离提取和鉴定骨髓间充质干细胞的方法，同时探索表皮生长因子对于骨髓间充质干细胞增殖和迁移能力的影响。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

材料方法

1.1 设计 细胞学水平上的对比观察实验。

1.2 时间及地点 实验于2016年5月至2017年3月在遵义医学院基础实验楼生物化学与分子生物学教研室实验室完成。

1.3 材料

实验动物：清洁级健康SD大鼠2只，雌雄不拘，鼠龄三四周，体质量约125 g。所有大鼠均购于重庆第三军医大学大坪医院实验动物中心，动物许可证号SCXK(渝) 2012-0005。饲养环境为12 h明暗交替，自由饮水进食，实验前适应性喂养小鼠1周。实验经过遵义医学院伦理委员会批准，对动物的处理符合动物伦理学的要求。

主要试剂及仪器：胰蛋白酶、胎牛血清、L-DMEM低糖型培养基购于GIBCO公司。青霉素链霉素混合液购于Hyclone公司。兔抗大鼠CD29-FITC、CD 45-FITC、CD 90-FITC抗体购于美国 Biolegent公司。成骨、成脂诱导分化培养基试剂盒购于赛业(广州)生物科技有限公司。表皮生长因子购于美国Peprotech公司。CCK-8试剂盒购于日本同仁公司。兔抗人Akt、p-Akt、Bax、Bcl-2、p-p65、p65一抗购于美国CST公司。兔抗人基质金属蛋白酶9一抗、羊抗兔二抗购于英国Abcam公司。兔抗人IκB，p-IκB一抗购于美国圣克鲁兹公司。倒置显微镜购自日本OLYMPUS公司。流式细胞仪购自美国贝克曼公司。Transwell板购自Corning公司。

1.4 方法

1.4.1 骨髓间充质干细胞的体外分离与原代培养 颈椎脱臼法处死大鼠后于无菌条件下分离四肢长骨并去除残留组织。含1%青链霉素混合液的PBS冲洗后剪去长骨两端，暴露髓腔，用注射器吸取DMEM低糖型培养基反复冲洗骨髓腔，离心搜集细胞。含体积分数15%胎牛血清的DMEM低糖型培养基重悬细胞，接种于2-4个25 cm²培养瓶中，置于37 ℃、体积分数5%CO₂细胞培养箱内培养。分别于12 h和24 h进行半量换液，以后每2 d或3 d全量换液当贴壁细胞融合度为80%-90%时结束原代培养，同时观察细胞形态并拍照。

1.4.2 骨髓间充质干细胞的纯化 原代细胞培养7-14 d且融合度达80%-90%后进行传代培养。每次传代时用含EDTA的胰蛋白酶消化2 min，严格控制时间。终止消化后1 000 r/min离心5 min收集细胞，重悬后接种于新的培养瓶中。

1.4.3 大鼠骨髓间充质干细胞的表型鉴定 第3代大鼠骨髓间充质干细胞融合度为90%时，用0.25% EDTA-胰酶消化，调整每个样本管细胞浓度大于1×10⁹ L^-¹，PBS洗涤2遍后各加入100 μL的预冷PBS重悬细胞。分别加入CD29-FITC、CD45-FITC、CD90-FITC抗体各2 μL(0.5-1 μg/10⁶细胞)，37 ℃避光孵育30 min，再次使用预冷的PBS洗涤2遍，用0.5 mL质量浓度为10g/L的多聚甲醛重悬固定，用流式细胞仪进行检测。实验重复3次。

1.4.4 大鼠骨髓间充质干细胞成骨成脂分化能力的鉴定取第3代大鼠骨髓间充质干细胞进行成骨诱导分化。在6孔板中使用0.5 mL浓度为0.1%的明胶处理30 min，弃掉明胶后于超净台上晾干，按照每孔2×10⁵个细胞接种至6孔板中，培养融合度至60%-70%，加入成骨诱导分化完全培养基2 mL。每3 d换一次成骨诱导分化完全培养基。诱导21d后，使用体积分数4%中性甲醛溶液2 mL固定30 min，随后用1 mL茜素红染色，于显微镜下观察并拍照。实验设置3个附孔。

取第3代大鼠骨髓间充质干细胞进行成脂诱导分化。以每孔2×10⁵个细胞接种至6孔板中，培养融合度至100%或者过融合，用成脂诱导分化完全培养基A液2 mL处理3d，随后更换成脂诱导分化完全培养基B液，诱导24 h之后，再次更换成A液。A液和B液交替作用3-5次之后，继续使用B液维持诱导4-7 d。使用4%中性甲醛溶液2 mL固定30 min，使用1 mL油红O工作液染色30 min，于显微镜下观察并拍照。实验设置3个附孔。

1.4.5 表皮生长因子对细胞增殖能力的影响 取第3代大鼠骨髓间充质干细胞，以2×10³个/孔的细胞密度接种至96孔板中，置于体积分数5%CO₂、饱和湿度、37 ℃培养箱中培养。分别加入0，10 μg/L的表皮生长因子。接种后在0-8 d每天的同一时间，每组取6个孔，加入总体积10%的CCK-8试剂，作用3 h后，使用酶标仪在450 nm波长处检测吸光度值，建立生长曲线。

1.4.6 表皮生长因子对细胞对克隆形成的影响 取第3代大鼠骨髓间充质干细胞，以1×10³个/孔的细胞密度接种至6孔板中，置于体积分数5%CO₂、饱和湿度、37 ℃培养箱中培养。分别加入0，10 μg/L的表皮生长因子，一两天进行换液。一两周后视细胞生长情况终止培养，使用PBS清洗细胞3次，40 g/L多聚甲醛固定30 min，0.1%结晶紫染色15 min，PBS清洗干净，拍照以及镜下计数细胞克隆数。

1.4.7 表皮生长因子对细胞迁移能力的影响 取第3代大鼠骨髓间充质干细胞，以1×10⁴个/孔的细胞密度接种至24孔板中，置于体积分数5%CO₂、饱和湿度、37 ℃培养箱中培养。细胞分为2组，分别加入0，10 μg/L的表皮生长因子，每组设置3个附孔。培养48 h后，分别收集细胞，使用0.2 mL无血清培养基重悬细胞，将之加入孔径为8 μm的transwell孔上腔，同时下腔加入常规培养细胞的完全培养基，上下腔组装完整后继续培养24 h，取出上腔，用棉签擦拭碳酸酯膜上壁未迁移的细胞。晾干后使用0.1%结晶紫对碳酸酯膜下壁已经迁移的细胞进行染色15 min，取出后于倒置显微镜下观察拍照，计数每个视野中细胞数目进行统计。

1.4.8 Western blot检测增殖和迁移相关蛋白表达水平 取第3代大鼠骨髓间充质干细胞，以2×10⁵个/孔的细胞密度接种至6孔板中，置于体积分数5%CO₂、饱和湿度、37 ℃培养箱中培养。细胞分为2组，分别加入0，10 μg/L的表皮生长因子，培养48 h后，收集蛋白，使用BCA试剂盒测定蛋白浓度。配制SDS-PAGE凝胶，蛋白上样量每孔30 μg。转蛋白至PVDF膜上后体积分数5%胎牛血清封闭2 h，相应的一抗4 ℃孵育过夜，TBST清洗3次后，常温孵育相应二抗2-3 h。再次清洗后检测吸光度值。

1.5 主要观察指标 ①骨髓间充质干细胞的提取与鉴定结果；②表皮生长因子对大鼠骨髓间充质干细胞生长的影响；③表皮生长因子对大鼠骨髓间充质干细胞迁移能力的影响；④表皮生长因子影响大鼠骨髓间充质干细胞生长和迁移能力的机制。

1.6 统计学分析 使用SPSS 13.0统计软件分析数据，所有数据均使用x(_)±s表示，组间差异选用t 检验进行分析，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

骨髓间充质干细胞由于具有安全性高，来源广泛等特点，近年来逐渐成为细胞治疗的重点细胞。在先前的研究中，已经证明其能够在不同条件下定向分化成为软骨细胞^[9]、脂肪细胞^[8^，^16]、心肌细胞^[10]、神经细胞等^[13]，并能够改善动物模型心肌梗死的状况^[11]。这些研究表明骨髓间充质干细胞是一种有前景的治疗性干细胞。目前鉴定骨髓间充质干细胞的方法主要是通过某些特异的阳性表达的表面抗原分子和特异的阴性表达的表面抗原分子来进行筛选和排除^[17]，从而进行初步的鉴定，其次则通过诱导其多向分化而反证^[16]。

作者在培养过程中严格控制消化时间，利用骨髓间充质干细胞与淋巴细胞、单核细胞贴壁能力的差异使骨髓间充质干细胞得到初步的纯化^[25]。在随后的传代过程中，亦遵循此规则。培养至第3代细胞后，使用骨髓间充质干细胞表面特异阳性表达的CD 29-FITC、CD90-FITC抗体进行鉴定，同时使用特异阴性表达的CD45-FITC抗体进行排除，结果初步证明作者培养的细胞是骨髓间充质干细胞^[17]。随后使用成骨成脂诱导分化培养基诱导该细胞，经过为期 21 d的诱导培养后，通过油红O和茜素红染色可发现细胞有脂滴和骨结节形成，该结果更进一步证明实验提取的是骨髓间充质干细胞。至此，作者已经初步建立了是骨髓间充质干细胞分离提取以及鉴定的流程，为后续进一步探索骨髓间充质干细胞的生物学效应奠定了基础。

为了让后续实验能够更好的进行，实验对骨髓间充质干细胞的培养条件进行了优化。表皮生长因子是一种细胞生长因子，能够通过促进Cyclin D的表达以及调节CDK4/6的活性等通路促进多种细胞增殖，并对神经胶质细胞和其他的细胞生长具有正向调节作用^[26-29]。实验结果证明表皮生长因子虽然不是骨髓间充质干细胞生长必须的因子，但是在表皮生长因子存在的条件下，骨髓间充质干细胞的增殖更加快速，生长曲线和克隆形成的结果都证实了这个推测。Bax家族成员是细胞存活负相关因子，Bcl家族成员是细胞存活正相关因子^[4^，^30-31]。Silva等^[32]证实，在细胞内Bax与Bcl-2的平衡对于细胞的存活具有决定性作用，另外的研究者也证实在多种肿瘤细胞内，Bax与Bcl-2之间存在明确的对应关系^[33-35]。当Bax家族分子以及其下游信号分子表达升高，细胞存活受到阻碍；当Bcl-2家族分子以及其下游信号分子表达升高，则细胞死亡过程发生障碍。实验通过Western blot实验证实表皮生长因子处理后骨髓间充质干细胞的Bax表达水平降低，Bcl-2表达升高。同时也检测到其上游信号分子Akt磷酸化的改变。提示表皮生长因子可能通过PI3K/Akt信号通路调节细胞的存活和增殖，因而在将来的细胞培养过程中，可以通过添加表皮生长因子使之生长更加迅速，缩短细胞培养周期。此外，结果证实表皮生长因子同样能够促进骨髓间充质干细胞的迁移。Ramsey等^[36]的研究表明，Akt磷酸化之后能够激活后续信号分子，从而促进细胞迁移。在肿瘤细胞中也发现Akt磷酸化之后细胞迁移和侵袭力都显著提升，导致肿瘤侵袭力增强^[37-38]。在动物实验中，研究者也通过多水平实验证实PI3K/Akt通路与细胞的迁移能力高度相关。Western blot发现表皮生长因子能够改变NF-κB信号通路的相关蛋白p65以及IκB的磷酸化水平。该通路激活之后，下游的包括细胞迁移相关分子基质金属蛋白酶9在内的靶基因的表达水平将会发生改变^[39-40]，同时细胞的迁移也会发生改变^[36-37^，^41]。因此实验结果证实表皮生长因子能够通过激活NF-κB信号通路从而调节基质金属蛋白酶9的表达以及细胞的迁移。这提示在之后的细胞培养中添加表皮生长因子可能提升骨髓间充质干细胞的体内迁移能力，有益于提升治疗效果。

总之，实验成功建立了大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和鉴定的一套行之有效的方法，同时表明表皮生长因子能够通过激活PI3K/Akt信号通路以及核因子κB信号通路促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移。

表皮生长因子影响大鼠骨髓间充质干细胞增殖和迁移的信号通路

Effects of epidermal growth factors on the proliferation and migration of rat bone marrow mesenchymal stem cells

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