诱导早期动脉瘤形成模型大鼠血管生长因子的表达

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.49.016

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (49): 7961-7966.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.49.016

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诱导早期动脉瘤形成模型大鼠血管生长因子的表达

李绍山，王增亮，赛力克•对山拜，汪永新，成晓江，周庆九，杜郭佳，王鑫，更•党木仁加甫

新疆医科大学第一附属医院神经外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054

修回日期:2014-09-03 出版日期:2014-11-30 发布日期:2014-11-30
通讯作者: 赛力克?对山拜，主任医师，副教授，新疆医科大学第一附属医院神经外科，新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830054
作者简介:李绍山，男，1982年生，福建省漳浦县人，汉族，2011年新疆医科大学毕业，硕士，现工作于新疆医科大学第一附属医院神经外科，医师，主要从事颅内动脉瘤及颅底肿瘤研究。
基金资助:
新疆维吾尔自治区自然科学基金(2011211A076)

Expression of vascular growth factors during the early phase of induced cerebral aneurysm formation in rats

Li Shao-shan, Wang Zeng-liang, Serick·Duysenbi, Wang Yong-xin, Cheng Xiao-jiang, Zhou Qing-jiu, Du Guo-jia, Wang Xin, Geng·Dangmurenjiafu

Department of Neurosurgery, the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China

Revised:2014-09-03 Online:2014-11-30 Published:2014-11-30
Contact: Serick Duysenbi, Chief physician, Associate professor, Department of Neurosurgery, the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
About author:Li Shao-shan, Master, Physician, Department of Neurosurgery, the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by:
the Natural Science Foundation of Xinjiang Uygur Autonomous Region of China, No, 2011211A076

摘要/Abstract

摘要：

背景：血管内皮细胞生长因子和转化生长因子在胚胎发育、伤口愈合、炎症、肿瘤及缺血缺氧等多种生理和病理过程中发挥重要作用，并参与脑损伤的发生发展过程。

目的：评价血管内皮细胞生长因子和转化生长因子α在大鼠早期动脉瘤形成过程中的表达差异。

方法：取SD大鼠28只，随机分为3组，假手术组(n=8)暴露左侧颈动脉分叉和双侧肾动脉，不进行结扎，于当天处死；15 d组(n=10)与30 d组(n=10)结扎左侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉及双侧肾动脉后支建立动脉瘤大鼠模型，分别于造模后15，30 d处死，取双侧大脑前动脉和嗅动脉分叉处，在光镜下观察其病理变化，同时进行血管内皮生长因子和转化生长因子α免疫组织化学染色。

结果与结论：假手术组和15 d组均未见有动脉瘤，30 d组10只大鼠中发现在右侧大脑前嗅动脉分叉处1个囊性动脉瘤和5个早期动脉瘤样改变。假手术组和15 d组脑动脉标本无血管内皮生长因子表达，30 d组脑动脉标本血管内皮生长因子表达阳性率为80%，提示血管内皮生长因子可能参与动脉瘤形成过程。假手术组和15 d组脑动脉标本转化生长因子α表达较30 d组明显，提示转化生长因子α在动脉瘤形成过程中受损或分泌减少，可能与动脉瘤形成有关。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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关键词: 实验动物, 组织工程, 修复重建, 移植, 大鼠, 脑动脉瘤, 血管内皮生长因子, 转化生长因子α, 新疆维吾尔自治区自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Vascular endothelial growth factor and transforming growth factor play a crucial role in embryonic development, wound healing, inflammation, cancer, ischemic hypoxia and other physiological and pathological processes, and participate in the development and progression of brain damage.

OBJECTIVE: To evaluate the differences in the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-α during the early phase of cerebral aneurysm formation in rats.

METHODS:Twenty-eight healthy Sprague-Dawley rats were randomized into three groups. Sham operation group (n=8): the left carotid artery bifurcation and bilateral renal artery were only exposed, without ligation, and rats were killed that day. 15 days group (n=10) and 30 days group (n=10): the left common carotid artery, internal carotid artery, external carotid artery and bilateral renal artery were ligated, to establish aneurysm model, and rats were killed at 15 and 30 days, respectively. The bilateral sides of the anterior cerebral artery/olfactory artery bifurcations were harvested and observed under light microscopy for pathological changes. Immunohistological staining was performed to detect the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-α.

RESULTS AND CONCLUSION: The results showed that, no aneurysm formed in the sham operation group and 15 days group. In the 30 days group, one saccular aneurysm and five early aneurysm-like changes were found in the right anterior cerebral artery/olfactory artery bifurcations. In the sham operation group and 15 days group, no vascular endothelial growth factor was expressed. In the 30 days group, the positive rate of vascular endothelial growth factor was up to 80%, indicating that vascular endothelial growth factor is possibly involved in the formation of aneurysm. Transforming growth factor-α expression in the sham operation group and 15 days group was more apparent than that in the 30 days group, indicating that transforming growth factor-α is damaged or secretion is reduced in this process, which was possibly related to the formation of aneurysm.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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Key words: intracranial aneurysm, vascular endothelial growth factors, transforming growth factor-α

中图分类号:

R318

李绍山，王增亮，赛力克•对山拜，汪永新，成晓江，周庆九，杜郭佳，王鑫，更•党木仁加甫. 诱导早期动脉瘤形成模型大鼠血管生长因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(49): 7961-7966.

Li Shao-shan, Wang Zeng-liang, Serick•Duysenbi, Wang Yong-xin, Cheng Xiao-jiang, Zhou Qing-jiu, . Expression of vascular growth factors during the early phase of induced cerebral aneurysm formation in rats [J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(49): 7961-7966.

图/表（结果） 1

2.1 各组动脉瘤形成位置、常规染色和血压变化 各组大鼠术后无死亡。假手术组8只和15 d组10只大鼠双侧大脑前动脉和嗅动脉分叉处均未见有动脉瘤。30 d组10只大鼠中发现在右侧大脑前嗅动脉分叉处1个囊性动脉瘤和5个早期动脉瘤样改变(图1A)，其中囊性动脉瘤为进展期动脉瘤，在高倍光镜下都可见到内弹力层的断裂、肌肉层的变薄及动脉壁的往外膨出；早期动脉瘤性改变5只，表现为内弹力层的不连续性，没有明显的动脉壁的往外膨出(图1B，C)。

假手术组血压为(93.05±4.45) mm Hg (1 mm Hg= 0.133 kPa)。15 d组和30 d组手术当天血压分别为(94.28±6.95)，(101.10±4.56) mm Hg，造模15 d时的血压分别为(128.58±4.54)，(130.76±6.89) mm Hg，较假手术组血压显著升高(P = 0.005)，2周后两组血压稳步上升(P = 0.05)；1个月后30 d组血压(186.89±6.78) mm Hg，明显上升(P = 0.05)。

2.2 各组大鼠血管因子的表达结果

血管内皮生长因子表达：血管内皮生长因子在正常血管壁(图2A)和诱导动脉瘤形成15 d时(图2B)无表达，血管内皮生长因子免疫组织化学染色均无染色；到30 d时，在10个脑动脉标本中8个为血管内皮生长因子阳性(80%)(图2C)，平均染色分级为0.5±0.1，主要分布在内皮下层，3组间平均染分级比较差异有显著性意义(F=11.2，P=0.005)。

转化生长因子α表达：转化生长因子α在正常血管壁中有表达(图3A)，在检测的8个正常脑动脉标本中转化生长因子α呈全阳性(100%)，其中4个标本中呈强染色，另外4个标本中呈明显染色，平均染色分级为2.3±0.4；到诱导动脉瘤形成15 d时，在检测的10个脑动脉标本中转化生长因子α呈全阳性(图3B)，其中7个标本中染色清晰，3个标本中染色弱，平均染色分级为2.1±0.2；到30 d时，在检测的10个脑动脉标本中表达阳性率为90%(图3C)，6个标本染色弱，3个标本染色清晰，另外1个标本无染色，平均染色分级1.5±0.1，3组间平均染色分级比较差异有显著性意义(F=11.2，P=0.005)。

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引言

脑动脉瘤是一种常见的出血性脑血管病，在一般人群中发病率为1%-5%。一旦出血，脑动脉瘤即可导致死亡或残废，但其发病机制目前尚不清楚。越来越多的研究表明血流动力学变化、炎症、动脉硬化和外伤等引起的血管壁结构损伤，可能是导致动脉瘤发生的主要机制^[1-2]。

细胞外基质是构成血管壁必不可少的重要成分，基底膜为血管提供结构支持，脑动脉结构的完整性取决于组织破坏与修复之间的平衡，动脉瘤形成过程中血管壁上的基质结构蛋白和血管生长因子发生动态变化。脑动脉壁基质金属蛋白酶过度表达导致的脑动脉壁胶原纤维及内弹力层破坏是脑动脉瘤形成的主要原因之一^[3]。血管生长因子在动脉瘤形成与修复过程中发挥重要作用，血管内皮生长因子和转化生长因子α在胚胎发育、伤口愈合、炎症、肿瘤及缺血缺氧等多种生理和病理过程中发挥重要作用，参与脑损伤的发生发展过程^[4-5]。血管内皮生长因子的促血管生成作用、神经保护作用、神经再生作用贯穿脑缺血的整个过程，急性期直接的神经保护作用可以减轻缺血性损害^[6]，而神经再生和血管生成则有利于脑损伤的长期修复^[7]。因动脉瘤的形成属于动脉壁的局限性破坏，此过程中血管内皮生长因子对破坏过程中的血管壁修复起重要作用。有研究通过免疫组织化学方法研究活检动脉瘤标本及尸检动脉瘤标本上血管内皮生长因子和转化生长因子α的表达水平和分布，发现所有动脉瘤壁的血管内皮生长因子均出现病理性高表达，而转化生长因子α有不同程度减少；研究发现与未破裂和正常血管壁比较，破裂的动脉瘤壁上血管内皮生长因子表达的强度高，而且主要表达在内皮和内皮下层，提示血管内皮生长因子是动脉瘤形成的相关分子因素；动脉瘤形成过程中动脉壁的破坏可能同时破坏了正常情况下起作用的血管生长因子，如转化生长因子α，同时可能启动修复机制如血管内皮生长因子的表达。伴随着结构蛋白的降解，通过传递一些有生物活性的物质(血管内皮生长因子、转化生长因子α)可增强动脉壁的自身修复机制，抑制结构蛋白降解，延缓或阻止动脉瘤壁的病理过程。本实验着重于实验性诱导大鼠脑动脉瘤形成过程中血管内皮生长因子和转化生长因子α的表达差异来探讨动脉瘤形成的相关可能因素。

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材料方法

设计：随机分组对照动物实验。

时间及地点：于2012年6月至2013年9月在新疆医科大学动物实验室完成。

材料：

实验动物：6-8周龄健康雄性SD大鼠28只，体质量180-250 g，购自新疆医科大学动物实验室。将28只大鼠随机分为3组，即假手术组(n=8)、15 d组(n=10)、30 d组(n=10)。

实验中应用的主要试剂：兔抗人血管内皮生长因子单克隆抗体IgG、兔抗人转化生长因子a多克隆抗体(北京中杉金桥公司)；3%戊巴比妥钠、OCT冰冻切片包埋剂及染色剂(日本京都东方生物实验室)；莱卡CM1850冰冻切片机(北京三博脑科医院和新疆医科大学第一附属医院配备)；IITC Life Science无创测血压系统IITC(新疆医科大学第一附属医院动物研究中心配备)。

实验方法：

动脉瘤模型的制备：15 d组和30 d组共20只采用选择性血管结扎法建立大鼠动脉瘤模型，模型制作方法：腹部和颈部备皮，术区消毒并铺无菌治疗巾后，先在显微镜下取经左侧下颌角下横切口，依次切开皮肤、皮下组织及颈前筋膜。沿着左侧胸锁乳突肌内侧缘进行钝性分离，将胸锁乳突肌向右侧外方牵引，暴露左侧颈总动脉，仔细分离颈总动脉与迷走神经，避免损伤迷走神经。沿着颈总动脉逆行分离，暴露颈总动脉分叉部，游离出颈内动脉和颈外动脉的起始部，用丝线结扎左侧颈总动脉，“8”字形结扎左侧颈内、外动脉。取右侧背肋缘下横切口，依次切开皮肤、皮下组织、肌肉及其筋膜，暴露右侧肾脏并剔去肾周脂肪组织，分离出肾动脉及其分支，严格保护并避免损伤下腔静脉，用丝线结扎肾动脉后支。经左侧背肋缘下横切口，同样方法结扎左侧肾动脉后支。假手术组采取同样手术切口，暴露左侧颈动脉分叉和双侧肾动脉，不进行结扎。假手术组通过尾套法测量其收缩压后，当天处死。15 d组和30 d组分别于造模后第1天开始用含0.9%盐和0.12% β-氨基丙腈的饲料饲养，饲养至15，30 d后处死。在显微镜下取出大脑。在体积分数4%甲醛中浸泡12-24 h后，再在20%蔗糖中浸泡二三天，当漂浮的大脑下沉至瓶底后即可取出观察。在手术显微镜下，剪下包含双侧颈内动脉床突上段、大脑后动脉、大脑中动脉、大脑前动脉、嗅动脉和前交通动脉在内的脑底动脉环。高倍光镜下观察并确认其他部位无动脉瘤后，取出右侧大脑前动脉和嗅动脉的分叉部。将样本直接保存于-80 ℃冰柜内冰冻12-24 h后，采用莱卡CM1850冰冻切片机，切成2 μm厚的切片，固定在载玻片上。

Elastica van Gieson染色方染色：将所有标本由统计学教研室专人编码后分别送到新疆医科大学第一附属医院病理科和北京三博脑科医院病理科。先进行Elastica van Gieson染色切片，由对本实验标本编号盲的两名病理科专科医生在高倍光镜下观察动脉壁的结构变化，并确定是否形成动脉瘤和动脉瘤期别。

动脉瘤的形成标准：动脉瘤定义为在光学显微镜下可见的动脉壁的膨出。动脉壁的病理改变可分为早期动脉瘤样改变和进展期动脉瘤。早期动脉瘤样改变指内弹性层不连续，没有明显的动脉壁的膨出；进展期动脉瘤指内弹力层完全消失并有动脉壁的膨出。

血管生成因子的免疫组织化学染色：对所有大鼠右侧大脑前动脉和嗅动脉分叉处部分进行血管因子(血管内皮生长因子和转化生长因子α)免疫组织化学染色。将大鼠脑动脉标本取材，体积分数10%甲醛固定24 h。将标本置入Leica ASP-200S自动组织脱水机脱水，浸蜡，包埋，石蜡60 ℃。将蜡块进行连续切片(8-10张)，每个标本切片进行血管内皮生长因子和转化生长因子α染色。将2 μm的切片固定到防脱载玻片上，在37 ℃脱蜡12 h。蒸馏水冲洗，PBS浸泡5 min。抗原修复(胃酸消化，15 min，37 ℃)。体积分数3%过氧化氢室温孵育5-10 min，以消除内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗，每次2 min，总3次。每个切片都再水化并进行适当的预处理。

免疫染色切片观察和免疫染色强度的评价：切片一式两份，分别在新疆医科大学第一附属医院病理科和北京三博脑科医院病理科由2位与本实验无关的病理科医师在光镜下观察切片，对照有相应的苏木精-伊红染色病理切片，评价血管全壁免疫染色分布和强度。以棕褐色为阳性，无染色为阴性。由专人对每张切片随机取5个高倍视野，综合染色强度及阳性细胞面积两方面进行半定量分析。染色强度：0分，阴性；1分，染色弱，但明显高于阴性对照；2分，染色清晰；3分，染色强。阳性细胞数：0分，阳性面积占总面积的10%以下；1分，阳性面积占总面积的11%-25%；2分，阳性面积占总面积26%-50%；3分，阳性面积占总面积51%以上。根据 2项指标相加分数，划分为 4级：0或1分，-；2分，+；3或4分，+ +；5或6分，+ + + 。

主要观察指标：各组血管内皮生长因子和转化生长因子α表达。

统计学分析：采用Start-view software package软件进行平均染色分级的计算^[5]。平均染色分级数据以x(_)±s表示。组间免疫染色平均分级的比较采用方差分析，所有统计数据均应用统计软件Pemps 3.1处理。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程

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讨论

动脉瘤性蛛网膜下腔出血的最主要原因是颅内囊性动脉瘤破裂，占全部病例的80%-90%^[8]。本实验对大鼠早期脑动脉瘤诱导形成过程中不同时间点的脑动脉标本进行两种血管因子的免疫组织化学染色，试图了解血管生长因子是否参与脑动脉瘤形成过程，发现在动脉瘤诱导形成过程中血管生长因子发生动态变化。

颅内动脉瘤动物模型的建立有多种方法，制作脑动脉瘤模型一般采用两步法：①血管壁的损害，通过手术制作静脉囊、激光毁损血管壁、注射弹力酶、喂药物β-氨基丙腈(乙基氰)和介入等方法制作。②诱导血流动力学剪力，促进脑动脉瘤的形成和生长^[9]。作者通过选择性血管结扎法制作动物模型，此方法是基于高血压是动脉瘤形成的独立因素为理论基础^[10]，高血压列为自发性蛛网膜下腔出血的危险因素之一，高血压参与颅内动脉瘤的形成关系已在国内外众多文献中被描述^[11-12]。Hashimoto等^[13]于1978年成功采用结扎单侧颈总动脉和双侧肾动脉后支的方法建立了肾性高血压大鼠颅内动脉瘤模型，随后在小鼠和猴子身上复制成功此模型。Zhang等^[14]对20个自发性高血压大鼠和10个Wistar.Kyoto大鼠进行对照研究，两组均未结扎对侧颈总动脉，未给高盐饮食和BAPN饲料喂养等情况下，1年后自发性高血压组2只大鼠在基底动脉分叉部出现动脉瘤，而对照组则未发现。后经光镜和电镜对动脉瘤标本观察，发现基底动脉分叉处内膜垫陡峭处首先有损伤，其次是内皮细胞的缺失、内膜退行性变、内弹力板断裂、淋巴细胞或红细胞局部浸润。作者最后指出长期的全身动脉性高血压是颅内动脉瘤形成的原因之一。Taylor等^[15]报道 20 767例未破裂颅内动脉瘤住院患者中有高血压的患者占43.2%，而随机对照组为34.4%，而且未破裂的老年颅内动脉瘤患者较一般住院患者更容易伴发高血压。1956至1978年Juvela等^[16]对142例共181个未破裂颅内动脉瘤患者进行跟踪研究，随后34例发生蛛网膜下腔出血，其中致死性蛛网膜下腔出血17例。蛛网膜下腔出血后致死和非致死两组患者，出血前血压分别为(148±11)/(92±8 )mm Hg和(135±15)/(83±11) mm Hg，平均动脉压分别是 (111±9) mm Hg和(101±12) mm Hg，两组结果差异有显著性意义。据此，作者认为动脉瘤破裂前收缩压升高和长期高血压，除动脉瘤大小、年龄及性别外，可以作为独立危险因。一项4 518例的回顾性研究提示，与未发现动脉瘤的患者相比，脑动脉瘤患者同时患高血压的概率显著增高^[17]。本实验中动脉瘤形成率的提高及动脉瘤形成所需时间的缩短可能跟短时间内血压升高有关。为了了解大鼠血压的变化特点，通过尾套测压法测量了所有大鼠术前、术后2周及处死前的血压，发现处死前30 d组的血压平均值明显高于假手术组和15 d组(P=0.05)。所以持久的高血压不但可造成血管壁的破坏，而且增加动脉瘤的形成率，增加破裂的危险。系统性或原发性高血压不是因局部血液动力学状态所导致的局部压力提高现象，这可能是这种疾病的原因或结果，除了对血管网有单纯的血液动力学影响以外，系统性高血压是一种内皮功能障碍。系统性高血压始终是脑动脉瘤形成的危险因素^[18]。本实验通过选择性血管结扎法建立大鼠动脉瘤模型，取得了良好效果。

血管内皮生长因子最初从肿瘤组织中分离提纯^[19]，对肿瘤血管的形成有促进作用^[20]，也可促进正常胚胎的发育，创伤愈合及慢性炎症时的血管增生^[21]。血管内皮生长因子还可以明显增加血管的通透性，进而促进血浆蛋白在细胞机制中的沉积，为成纤维细胞和血管内皮细胞长入提供临时基质。由于内皮细胞存在血管内皮生长因子受体，故对其他细胞增生的促进作用都是间接的，血管内皮生长因子初期被定为血管通透性因子，具有独特的内皮细胞靶点特异性。它促进血管床的通透性，被认为在血管生成、新生血管修复和许多病理过程包括瘤周水肿等中起主要作用^[22]。虽然许多种细胞包括纤维细胞、肌细胞和星形细胞在病理状态下可合成和分泌血管内皮生长因子，但血管内皮生长因子惟一的靶点是内皮细胞^[23-25]。Kilic等^[26]在配对的破裂/未破裂人来脑动脉瘤标本和正常脑血管中检测血管内皮生长因子表达，发现在正常脑血管壁和未破裂脑动脉瘤壁中血管内皮生长因子表达不明显，而在破裂动脉瘤中表达明显，认为血管内皮生长因子表达与动脉瘤形成有关。Kaneko等^[27]报道大动脉动脉瘤形成过程中血管内皮生长因子明显增高，说明在血管壁破坏过程中血管内皮生长因子表达与血管壁的破坏有明显关系^[28]，与Nishibe 等的研究有同样的结论。有研究在18例颅内囊性动脉瘤和3例正常脑血管标本中检测血管内皮生长因子和转化生长因子α的表达，发现正常血管中无血管内皮生长因子表达，而在脑动脉瘤标本中表达明显，认为血管内皮生长因子与动脉瘤的增长和结构维持有关。虽然血管内皮生长因子具有基因多形性，各亚型对动脉瘤形成过程的作用无显著区别^[29]，本实验发现在大鼠动脉瘤诱导过程中出现血管内皮生长因子的异常染色，即正常血管壁和诱导15 d时的动脉壁上无表达，平均染色分级为0，而在诱导动脉瘤形成1个月时染色弱，平均染色分级为0.5±0.1，因此认为在动脉瘤诱导晚期血管内皮生长因子表达明显是动脉瘤形成过程中修复再生机制启动的标志。

许多细胞都可分泌转化生长因子。转化生长因子α的氨基酸序列有33%-44%与表皮生长因子同源，可与表皮生长因子受体结合，故与表皮生长因子有相同作用，对上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞及平滑肌细胞都有促进增殖作用。Unemori等^[25]在配对的破裂/未破裂人脑动脉瘤标本和正常脑血管中检测转化生长因子α的表达，发现在正常脑血管壁和未破裂脑动脉瘤壁中转化生长因子α表达明显，而在破裂动脉瘤中表达不明显，认为在动脉瘤形成中转化生长因子α表达水平下降是预测动脉瘤破裂的因素。本实验中发现转化生长因子α在正常动脉壁和诱导早期动脉瘤形成15 d时的脑动脉标本中有表达，而在诱导早期动脉瘤形成1个月脑动脉标本中出现染色分级下降的趋势，提示动脉瘤形成过程中存在转化生长因子α受损或分泌减少的现象，从而阻碍成纤维细胞、上皮细胞和平滑肌细胞的增殖修复机制，促使动脉瘤形成。

国内外尚未见报道大鼠正常血管和早期脑动脉瘤形成过程中血管生成因子的动态变化。本实验对两种血管生成因子的免疫组织化学染色，发现血管内皮生长因子、转化生长因子α在动脉瘤形成过程中发生动态变化，其中血管内皮生长因子在诱导大鼠动脉瘤1个月时有表达，提示血管内皮生长因子可能参与动脉瘤形成过程；转化生长因子α则在正常血管中有表达，而在诱导大鼠动脉瘤1个月时可见染色明显减低，提示转化生长因子α在动脉瘤形成过程中受损或分泌减少，可能与动脉瘤形成有关。动脉瘤的形成、增大和破裂过程是一种多因素参与的复杂过程。血管壁结构的破坏或变弱和高血液动力学压力是脑动脉瘤形成的主要因素。可通过传递具有生物活性的物质(血管内皮生长因子，转化生长因子α)，促使血管壁修复，亦可通过采用抑制血管壁结构蛋白降解的药物来逆转或延缓动脉瘤的形成过程。

诱导早期动脉瘤形成模型大鼠血管生长因子的表达

Expression of vascular growth factors during the early phase of induced cerebral aneurysm formation in rats

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