氯化锂促进骨髓间充质干细胞增殖分化的作用途径

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.1766

中国组织工程研究 ›› 2019, Vol. 23 ›› Issue (25): 3956-3960.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1766

• 骨髓干细胞 bone marrow stem cells • 上一篇下一篇

氯化锂促进骨髓间充质干细胞增殖分化的作用途径

付殷¹，孙贵才²，涂远青²，凌小鹏²

¹黑龙江中医药大学，黑龙江省哈尔滨市 150036；²南昌大学第四附属医院骨科，江西省南昌市 330003

修回日期:2019-02-16 出版日期:2019-09-08 发布日期:2019-09-08
通讯作者: 孙贵才，博士，主任中医师，南昌大学第四附属医院骨科，江西省南昌市 330003
作者简介:付殷，1985年生，辽宁省凌源市人，汉族，博士，中级研究员，主要从事方剂配伍规律相关研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目(81473503)，项目负责人：孙贵才

Lithium chloride promotes proliferation and differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells via Wnt/beta-catenin signaling pathway

Fu Yin¹, Sun Guicai², Tu Yuanqing², Ling Xiaopeng²

¹Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine, Harbin 150036, Heilongjiang Province, China; ²Department of Orthopedics, Fourth Affiliated Hospital of Nanchang University, Nanchang 330003, Jiangxi Province, China

Revised:2019-02-16 Online:2019-09-08 Published:2019-09-08
Contact: Sun Guicai, MD, Chief physician, Department of Orthopedics, Fourth Affiliated Hospital of Nanchang University, Nanchang 330003, Jiangxi Province, China
About author:Fu Yin, MD, Intermediate researcher, Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine, Harbin 150036, Heilongjiang Province, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 81473503 (to SGC)

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
氯化锂：是糖原合成酶激酶3β的高度选择性抑制剂，通过抑制GSK-3β的活性，使Wnt/β-catenin的降解减少，激活Wnt/β-catenin信号途径。
Wnt信号通路：Wnts是由高度保守的分泌信号糖蛋白组成的家族，控制细胞增殖、分化、凋亡、存活和迁移。Wnt信号刺激可以促进骨髓间充质干细胞增殖及向成骨细胞分化，同时抑制其向成脂细胞分化。

摘要
背景：寻找促进骨髓间充质干细胞增殖及向成骨细胞分化的方法，可以为治疗骨质疏松类疾病提供治疗思路。
目的：探讨氯化锂调控大鼠骨髓间充质干细胞增殖分化的机制。
方法：实验采用全骨髓细胞接种法和贴壁纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞，分别给予0，2，5 nmol/L氯化锂进行干预；采用CCK-8法检测大鼠骨髓间充质干细胞的增殖情况，茜素红染色法检测钙化结节形成情况，PNPP法测定碱性磷酸酶活性，Western blot法检测大鼠骨髓间充质干细胞中GSK3β，p-GSK3β，β-catenin蛋白含量变化。
结果与结论：①2，5 nmol/L氯化锂均能促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖，5 nmol/L氯化锂促增殖能力最强；②2，5 nmol/L氯化锂组矿化结节与碱性磷酸酶活性均比0 nmol/L氯化锂组明显，且5 nmol/L氯化锂促成骨分化更为显著；③2，5 nmol/L氯化锂能够显著增加p-GSK3β、β-catenin蛋白表达，而各组GSK3β蛋白表达差异无显著性意义；④结果表明，氯化锂能够促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及向成骨细胞分化，其可能机制是通过调控Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达实现的。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
ORCID: 0000-0002-1515-9378(孙贵才)

关键词: 氯化锂, 骨髓间充质干细胞, 细胞增殖, 成骨分化, 钙化结节, 碱性磷酸酶活性, Wnt/β-catenin信号通路, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Seeking proper methods to promote the proliferation and osteogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells can provide therapeutic ideas for the treatment of osteoporosis.
OBJECTIVE: To study the mechanism of lithium chloride on the proliferation and differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells.
METHODS: Rat bone marrow mesenchymal stem cells were cultured with the whole bone marrow cell inoculation and adherent purification, followed by intervention with 0, 2, 5 nmol/L lithium chloride. Cell counting kit-8 was used to detect the effect of lithium chloride on the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells. Alizarin red staining was used to determine calcified nodules. PNPP method was applied to measure alkaline phosphatase activity. The contents of glycogen synthase kinase 3β, phosphorylated glycogen synthase kinase 3β and β-catenin in rat bone marrow mesenchymal stem cells were determined by western blot.
RESULTS AND CONCLUSION: Lithium chloride, 2 and 5 nmol/L, promoted the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and
5 nmol/L lithium chloride had the strongest proliferative effect. Compared with 0 nmol/L group, more calcified nodules and higher alkaline phosphatase activity were observed in the 2 and 5 nmol/L groups, especially in the 5 nmol/L group. Both 2 and 5 nmol/L lithium chloride upregulated the expression of phosphorylated glycogen synthase kinase 3β and β-catenin proteins, but showed no difference in the expression of glycogen synthase kinase 3β. In conclusion, lithium chloride can promote the proliferation and osteogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells, and the possible mechanism is through the regulation of Wnt/β-catenin signaling pathway-related protein expression.

Key words: lithium chloride, bone marrow mesenchymal stem cells, cell proliferation, osteogenic differentiation, calcified nodules, alkaline phosphatase activity, Wnt/β-catenin signaling pathway, National Natural Science Foundation of China

中图分类号:

付殷，孙贵才，涂远青，凌小鹏. 氯化锂促进骨髓间充质干细胞增殖分化的作用途径[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(25): 3956-3960.

Fu Yin, Sun Guicai, Tu Yuanqing, Ling Xiaopeng.

Lithium chloride promotes proliferation and differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells via Wnt/beta-catenin signaling pathway

[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2019, 23(25): 3956-3960.

图/表（结果） 2

参考文献

[1]Phinney DG, Kopen G, Isaacson RL, et al. Plastic adherent stromal cells from the bone marrow of commonly used strains of inbred mice: variations in yield, growth, and differentiation. J Cell Biochem. 1999;72(4):570-585.

[2]Cohen MA, Markoulaki S, Jaenisch R. Matched Developmental Timing of Donor Cells with the Host Is Crucial for Chimera Formation. Stem Cell Reports. 2018;10(5): 1445-1452.

[3]Ali EHA, Ahmed-Farid OA, sman AAE.Bone marrow-derived mesenchymal stem cells ameliorate sodium nitrite-induced hypoxic brain injury in a rat model.Neural Regen Res. 2017; 12(12):1990-1999.

[4]Atashi F, Modarressi A, Pepper MS. The role of reactive oxygen species in mesenchymal stem cell adipogenic and osteogenic differentiation: a review. Stem Cells Dev. 2015; 24(10):1150-1163.

[5]王皓沿,海鑫.白藜芦醇对小鼠骨髓间充质干细胞成骨/成脂分化的影响[J].哈尔滨医科大学学报,2018,52(2):99-104.

[6]Yamaguchi M, Zhu S, Weitzmann MN, et al. Curcumin analog UBS109 prevents bone marrow osteoblastogenesis and osteoclastogenesis disordered by coculture with breast cancer MDA-MB-231 bone metastatic cells in vitro. Mol Cell Biochem. 2015;401(1-2):1-10.

[7]Azuma K, Zhou Q, Kubo KY. Morphological and molecular characterization of the senile osteoporosis in senescence- accelerated mouse prone 6 (SAMP6). Med Mol Morphol. 2018;51(3):139-146.

[8]Abuna RP, Stringhetta-Garcia CT, Fiori LP, et al. Aging impairs osteoblast differentiation of mesenchymal stem cells grown on titanium by favoring adipogenesis. J Appl Oral Sci. 2016; 24(4):376-382.

[9]Ghali O, Broux O, Falgayrac G, et al. Dexamethasone in osteogenic medium strongly induces adipocyte differentiation of mouse bone marrow stromal cells and increases osteoblast differentiation. BMC Cell Biol. 2015;16:9.

[10]Patel R, Rodriguez A, Yasmeen T, et al. Impact of Obesity on Osteoporosis: Limitations of the Current Modalities of Assessing Osteoporosis in Obese Subjects. Clinical Reviews in Bone and Mineral Metabolism. 2015;13(1):36-42.

[11]Li J, Liu X, Zuo B, et al. The Role of Bone Marrow Microenvironment in Governing the Balance between Osteoblastogenesis and Adipogenesis. Aging Dis. 2015;7(4): 514-525.

[12]谢小伟,裴福兴,康鹏德,等.锶盐联合淫羊藿苷对大鼠骨髓基质干细胞成骨及成脂分化影响的研究[J]. 中国矫形外科杂志, 2015, 23(5):450-457.

[13]Chen Y, Chen L, Yin Q, et al. Reciprocal interferences of TNF-α and Wnt1/β-catenin signaling axes shift bone marrow-derived stem cells towards osteoblast lineage after ethanol exposure. Cell Physiol Biochem. 2013;32(3):755-765.

[14]杨斌,向萌娟.氯化锂诱导毛囊干细胞定向分化中Wnt信号通路介导基因的调控[J].中国组织工程研究与临床康复, 2011,15(49): 9202-9206.

[15]Wils J, Favre J, Bellien J. Modulating putative endothelial progenitor cells for the treatment of endothelial dysfunction and cardiovascular complications in diabetes. Pharmacol Ther. 2017;170:98-115.

[16]Esfandiari F, Fathi A, Gourabi H, et al. Glycogen synthase kinase-3 inhibition promotes proliferation and neuronal differentiation of human-induced pluripotent stem cell-derived neural progenitors. Stem Cells Dev. 2012;21(17):3233-3243.

[17]Huang J, Guo X, Li W, et al. Activation of Wnt/β-catenin signalling via GSK3 inhibitors direct differentiation of human adipose stem cells into functional hepatocytes. Sci Rep. 2017; 7:40716.

[18]Zhang L, Chan C. Isolation and enrichment of rat mesenchymal stem cells (MSCs) and separation of single-colony derived MSCs. J Vis Exp. 2010;(37):1852.

[19]聂义珍,闫朝岐,付红梅,等.冷刺激对骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响[J]. 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志, 2018,11(6): 577-583.

[20]李忠海.不同浓度锶对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及成骨分化的影响[J].中国骨与关节杂志, 2016, 5(3): 221-225.

[21]董冰子,孙晓方.骨质疏松症治疗新进展: 从分子机制到药物靶点[J].中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志,2018,11(6):620-627.

[22]Varela A, Chouinard L, Lesage E, et al. One Year of Abaloparatide, a Selective Activator of the PTH1 Receptor, Increased Bone Formation and Bone Mass in Osteopenic Ovariectomized Rats Without Increasing Bone Resorption. J Bone Miner Res. 2017;32(1):24-33.

[23]Song L, Liu M, Ono N, et al. Loss of wnt/β-catenin signaling causes cell fate shift of preosteoblasts from osteoblasts to adipocytes. J Bone Miner Res. 2012;27(11):2344-2358.

[24]Neth P, Ciccarella M, Egea V, et al. Wnt signaling regulates the invasion capacity of human mesenchymal stem cells. Stem Cells. 2006;24(8):1892-903.

[25]李理. 新型氯化锂复合磷酸钙骨水泥对成骨细胞增殖及分化的影响[D].南宁:广西医科大学,2016.

[26]Sieber MH, Thomsen MB, Spradling AC. Electron Transport Chain Remodeling by GSK3 during Oogenesis Connects Nutrient State to Reproduction. Cell. 2016;164(3):420-432.

[27]Weng J, Wang YH, Li M, et al.GSK3β inhibitor promotes myelination and mitigates muscle atrophy after peripheral nerve injury.Neural Regen Res. 2018;13(2):324-330.

[28]Desiderio V, Tirino V, Papaccio G, et al. Bone defects: molecular and cellular therapeutic targets. Int J Biochem Cell Biol. 2014;51:75-78.

[29]Kim do Y, Park EY, Chang E, et al. A novel miR-34a target, protein kinase D1, stimulates cancer stemness and drug resistance through GSK3/β-catenin signaling in breast cancer. Oncotarget. 2016;7(12):14791-14802.

[30]Li VS, Ng SS, Boersema PJ, et al. Wnt signaling through inhibition of β-catenin degradation in an intact Axin1 complex. Cell. 2012;149(6):1245-1256.

引言

材料方法

1.1 设计 随机分组，对比观察体外细胞实验。

1.2 时间及地点 实验于2017年1月至2018年5月在黑龙江中医药大学方剂实验室完成。

1.3 材料

1.3.1 实验动物 4周龄SPF级健康雌性SD大鼠10只，体质量180-200 g，由黑龙江中医药大学提供，动物合格证编号SCXK黑2015004。

1.3.2 实验药物与试剂 氯化锂(Sigma，美国)；胎牛血清、α-MEM培养基、青霉素-链霉素混合液和胰酶(Hyclone，美国)；CCK-8(同仁，日本) ；GSK3β、p-GSK3β、β-catenin、GAPDH抗体(Abcm公司)；维生素C、β-甘油磷酸钠、地塞米松(Sigma，美国)；茜素红染液(索莱宝，中国)；对硝基苯磷酸二钠(PNPP)(大连美伦，中国)。

1.4 实验方法

1.4.1 骨髓间充质干细胞的分离和培养^[1⁸^] SD大鼠采用颈椎脱臼法处死浸泡于体积分数为75%乙醇中10 min，无菌条件下取双侧股骨、胫骨以及肱骨，置于无血清培养液中，剪断双侧干骺端，暴露出骨髓腔，用1 mL注射器吸取培养基反复冲洗骨髓腔，收集细胞冲洗液于离心管中，800 r/min离心10 min，弃上清，用含有体积分数为10%胎牛血清的完全培养液重悬细胞，于体积分数为5%CO₂、37 ℃培养箱内培养，12 h后换液，去除未贴壁细胞，以后每3 d换液1次，当细胞长满后传代，应用倒置显微镜对细胞形态进行观察。

1.4.2 CCK-8法检测骨髓间充质干细胞的增殖能力 将第3代骨髓间充质干细胞浓度调整为1×10⁷ L^-1，接种于96孔培养板，每孔200 μL，置于体积分数为5%CO₂的37 ℃培养箱中进行培养，待细胞长满瓶底80%以上时，每孔分别加入0，2，5 nmol/L氯化锂继续培养24 h，每孔加入10 μL CCK-8继续培养4 h，用酶标仪在490 nm波长下测定吸光度值。

1.4.3 采用茜素红染色法检测成骨细胞钙化结节形成情况^[1⁹^] 将细胞传代3次后，在矿化诱导培养基(100 nmol/L抗坏血酸，10 mmol/L β-甘油磷酸，7 mol/L地塞米松)中对细胞进行成骨性诱导培养。待细胞贴合至80%后，按终浓度分别为0，2，5 nmol/L加入氯化锂培养21 d，弃培养液，PBS冲洗细胞3次，体积分数为95%乙醇固定15 min，加入0.1%茜素红染色，37 ℃孵育1 h，双蒸水冲洗3次，观察并照相。

1.4.4 采用PNPP法测定成骨细胞的碱性磷酸酶活性^[²⁰^] 细胞培养和处理方式同1.4.3。细胞培养21 d弃培养液，PBS漂洗2遍，1% Triton X-100反复冻融3次，细胞裂解物在37 ℃孵育于磷酸盐底物中30 min，然后加入1 mol/L NaOH终止反应，405 nm下测定吸光度值。

1.4.5 采用Western blot法检测骨髓间充质干细胞中wnt信号通路相关蛋白含量 取第3代对数期的大鼠骨髓间充质干细胞，以每孔2×10⁴个接种于6孔培养板，每孔2 mL，待细胞贴壁后弃上清液，按照实验分组给予0，2，5 nmol/L氯化锂干预，每孔2 mL。药物干预2 d后，提取各组细胞总蛋白进行蛋白定量，经12.5%SDS-PAGE电泳分离，转移至PVDF膜上，用含5%脱脂奶粉的Tris-HCl缓冲液室温孵育1 h后，加入GSK3β，p-GSK3β，β-catenin一抗4 ℃过夜，用含吐温-20的TBS洗膜3次，每次10 min，加山羊抗兔二抗室温孵育1 h，TBST洗膜3次，每次1 min，加入辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素，室温孵育1 h，TBST洗膜3次，每次10 min，采用ECL法显色。凝胶成像系统摄片并分析，结果以目的条带与内参条带(GAPDH)吸光度比值表示。

1.5 主要观察指标 ①不同浓度氯化锂对骨髓间充质干细胞增殖作用的影响；②不同浓度氯化锂对骨髓间充质干细胞成骨能力的影响；③不同浓度氯化锂对骨髓间充质干细胞中wnt信号通路相关蛋白含量的影响。

1.6 统计学分析 所有数据均采用SPSS 22.0统计软件进行方差分析及t 检验，结果以x(_)±s表示，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

讨论

在哺乳动物整个生命周期中骨骼的不断更新过程称为骨重塑，在这个过程中既包括破骨细胞骨吸收过程也包括成骨细胞骨再生过程^[2¹^]。生理条件下，骨的吸收和形成处于平衡状态。随着年龄的增长，骨吸收和骨形成的平衡被破坏使得骨量减少。骨量及机械强度下降导致骨脆性增加形成的症候群称之为骨质疏松症。临床上治疗骨质疏松主要通过促进成骨细胞增殖分化^[2²^]，在骨微环境中骨髓间充质干细胞可以分化成为成骨细胞^[2³^]。有报道指出，锂具有提高骨髓间充质干细胞增殖的能力^[2⁴^]。此研究也得到类似的结果，不同浓度的氯化锂均具有提高大鼠骨髓间充质干细胞增殖的能力，5 nmol/L氯化锂促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖能力最强。

研究发现锂钙复合盐具有促进大鼠骨髓间充质细胞向成骨细胞分化的作用^[2⁵^]。在此研究中，对成骨细胞的钙化结节和碱性磷酸酶活性的研究结果发现，5 nmol/L氯化锂能够明显增强大鼠骨髓间充质干细胞的矿化能力和碱性磷酸酶活性，说明氯化锂能够定向诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。该实验结果与王斌等^[1⁴^]研究氯化锂具有诱导毛囊干细胞定向分化结果相似，表明氯化锂具有诱导干细胞定向分化的能力。

GSK3β是一种调节代谢的激酶，也是wnt信号通路中关键的调节蛋白^[2^6-27^]。β-catenin是wnt信号通路中重要的下游功能性蛋白，进入细胞核后可以诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化，如果β-catenin受到抑制则会导致骨质疏松^[2⁸^]。GSK3β可以与β-catenin结合从而抑制wnt信号通路^[2⁹^]。有研究表明，锂可以直接或间接抑制GSK3β的活性，从而对wnt信号通路进行负调控^[³⁰^]。Western blot结果发现不同浓度的氯化锂处理大鼠骨髓间充质干细胞能够明显增加p-GSK3β和β-catenin蛋白表达，GSK3β蛋白表达没有变化，表明氯化锂能够调节骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化相关蛋白p-GSK3β和β-catenin的表达。综上所述，氯化锂具有促进骨髓间充质干细胞增殖及诱导其向成骨细胞分化的能力，其可能机制是通过调控Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达实现的。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

氯化锂促进骨髓间充质干细胞增殖分化的作用途径

Lithium chloride promotes proliferation and differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells via Wnt/beta-catenin signaling pathway

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

图/表（结果） 2

参考文献

相关文章 15

引言

材料方法

讨论

文章快阅

延伸阅读

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.
[2]	梁学奇, 郭黎姣, 陈贺捷, 武杰, 孙雅琪, 邢稚坤, 邹海亮, 陈雪玲, 吴向未. 泡状棘球绦虫原头蚴抑制骨髓间充质干细胞向成纤维细胞的分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 996-1001.
[3]	耿瑶, 尹志良, 李兴平, 肖东琴, 侯伟光. hsa-miRNA-223-3p调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1008-1013.
[4]	伦志刚, 金晶, 王添艳, 李爱民. 过氧化物还原酶6干预骨髓间充质干细胞增殖及体外向神经谱系诱导分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1014-1018.
[5]	朱雪芬, 黄成, 丁健, 戴永平, 刘元兵, 乐礼祥, 王亮亮, 杨建东. 胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1019-1025.
[6]	裴丽丽, 孙贵才, 王弟. 丹酚酸B抑制骨髓间充质干细胞氧化损伤及促进分化为心肌样细胞[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1032-1036.
[7]	李偲, 赵婷, 谭戈, 郑雨林, 张若男, 吴艳, 唐俊明. 血小板源生长因子BB可促进骨骼肌成肌细胞增殖、分化与迁移[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1050-1055.
[8]	刘聪, 刘肃. miR-17-5p调控低氧诱导因子1α介导脂肪细胞分化及血管生成的分子机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1069-1074.
[9]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
[10]	刘波, 陈祥和, 杨康, 余慧琳, 陆鹏程. DNA甲基化在运动干预骨质疏松中的作用机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 791-797.
[11]	马泽涛, 曾晖, 王德利, 翁鉴, 冯松. 微小RNA-138-5p与软骨细胞增殖和自噬的关系[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 674-678.
[12]	王玉姣, 刘丹, 孙嵩, 孙勇. 改良型富血小板纤维蛋白复合双相磷酸钙可促进兔骨髓间充质干细胞的活性[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 504-509.
[13]	陈俊毅, 王宁, 彭称飞, 朱伦井, 段江涛, 王烨, 贝朝涌. 脱钙骨基质与慢病毒介导沉默P75神经营养因子受体转染骨髓间充质干细胞构建组织工程骨[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 510-515.
[14]	周继辉, 姚猛, 王岩松, 李新志, 周游, 黄卫, 陈文瑶. 新型纳米支架对神经干细胞生物行为及相关基因表达的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 532-536.
[15]	叶海民, 丁凌华, 孔维豪, 黄祖泰, 熊龙. 多级微管结构骨支架载体促进成骨成血管作用及机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(4): 621-625.