中国组织工程研究 ›› 2012, Vol. 16 ›› Issue (10): 1786-1790.doi: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.017
• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇 下一篇
卢 海1,张 志2,赵毅超1,饶小惠1,江金群2,孟 镔3,艾 民4,潘明新1,高 毅1
Lu Hai1, Zhang Zhi1, Zhao Yi-chao1, Rao Xiao-hui1,Jiang Jin-qun2, Meng Bin3, Ai Min4, Pan Ming-xin1, Gao Yi1
摘要:
背景:小鼠胚胎成纤维细胞作为干细胞生长用饲养层,优于无饲养层,它能够分泌一些既促进干细胞生长又能抑制干细胞分化的因子。 目的:建立CF-1小鼠胚胎成纤维细胞饲养层最佳的分离培养方法,分析丝裂霉素C抑制成纤维细胞增殖的最佳浓度与时间,用于培养诱导多能性干细胞。 方法:取孕10~15 d CF-1小鼠,分离胎鼠原代成纤维细胞,经不同质量浓度(5,10,15,20 mg/L)丝裂霉素C处理不同时间(1,1.5,2,2.5,3 h)制备饲养层,并观察其增殖情况。将人诱导多潜能干细胞或胚胎干细胞在丝裂霉素C处理过的饲养层上培养,观察细胞集落生长情况。 结果与结论:制备CF-1小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的最佳胎龄为13.0~14.0 d。丝裂霉素C抑制CF-1小鼠胚胎成纤维细胞增殖的最佳浓度及作用时间为10 mg/L,2.5 h,成纤维细胞饲养层可以维持5~7 d。诱导多能性干细胞与胚胎干细胞在经10 mg/L丝裂霉素C处理2.5 h后饲养层上能发育成典型的“鸟巢”状干细胞集落。 关键词:胚胎成纤维细胞;诱导多潜能分化干细胞;饲养层;丝裂霉素C;细胞集落 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.017
中图分类号: